LABORATORIO DE REFERENCIA EN ANDALUCÍA...
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LABORATORIO DE REFERENCIA EN ANDALUCÍA LABORATORIO DE REFERENCIA EN ANDALUCÍA PARA TIPADO MOLECULAR DE PATOGENOS PARA TIPADO MOLECULAR DE PATOGENOS
NOSOCOMIALES Y DETECCIÓN GENOTÍPICA DE NOSOCOMIALES Y DETECCIÓN GENOTÍPICA DE MECANISMOS DE RESISTENCIA A MECANISMOS DE RESISTENCIA A
ANTIMICROBIANOS DE INTERÉS SANITARIOANTIMICROBIANOS DE INTERÉS SANITARIO
Dr. Alvaro Pascual Servicio de Microbiología, Hospital Universitario V irgen MacarenaUnidad Intercentros de Enfermedades Infecciosas, Mi crobiología
Clínica y Medicina PreventivaSevilla
ObjetivosObjetivos1. Servir de apoyo al SVEA en la detección, investig ación y
control de alertas por bacterias multirresistentes.2. Determinar la relación clonal de los aislamientos de
patógenos nosocomiales multirresistentes mediante l a combinación de pruebas fenotípicas y genotípicas en tiempo suficiente para poder tomar medidas de control adecuadas.
3. Estudio fenotípico y genotípico de los mecanismos de resistencia de patógenos nosocomiales de interés y que resistencia de patógenos nosocomiales de interés y que puedan favorecer el desarrollo de medidas terapéuti cas y/o preventivas .
4. Identificación y seguimiento de clones de microor ganismos multirresistentes que circulen en centros hospitala rios de la Comunidad.
5. Creación de una base de datos con los genotipos d e interés.6. Servir de centro centinela para la detección de n uevos
mecanismos de resistencia en patógenos nosocomiales o de la comunidad.
Cartera de serviciosCartera de serviciosResistencia a antimicrobianos• Detección de resistencia a oxacilina (SARM) en Staphylococcus aureus.• Detección de resistencia a vancomicina en Enterococcus spp• Detección e identificación de genes de beta-lactama sas de espectro extendido
(BLEE) tipo TEM, SHV y CTX-M, más frecuentes en nue stro entorno, en enterobacterias .
• Detección e identificación de genes de AmpC plasmíd icas y cromosómicas.• Detección e identificación de genes de beta -lactamasas que hidrolizan
carbapenems (carbapenemasas).• Detección e identificación de genes de beta -lactamasas que hidrolizan
carbapenems (carbapenemasas).
Tipado molecular o Genotipado• Enterobacterias productoras de BLEE o carbapanemasa s• Otras enterobacterias multirresistentes• Acinetobacter baumannii• Pseudomonas aeruginosa• S. aureus resistente a meticilina.• Enterococcus resistente a vancomicina
MetodologíaMetodología
• Detección de mecanismos de resistencia:– Marcadores fenotípicos– Marcadores genotípicos: PCR +/ -– Marcadores genotípicos: PCR +/ -
secuenciación
• Identificación molecular:– REP-PCR, PFGE, MLST, Secuenciación– Base de datos históricas
Solicitud de serviciosSolicitud de servicios
• Contacto previo telefónico o por correo electrónico:– Autorización del envío de aislados– Numero y tipo de aislados a enviar– Numero y tipo de aislados a enviar
• Normas de envío en condiciones de bioseguridad.
• Información de brotes y aislados necesaria para el estudio.
Emisión de informesEmisión de informes
• La emisión de los informes dependerá de las características de cada brote o endemia. Como norma se emitirán 2 informes uno preliminar y otro definitivo. Los tiempos medios de emisión serán:– Informe preliminar: a los 10 días de la recepción d e la
muestra.muestra.– Informe definitivo: a los 21 días de la recepción d e la
muestra.
• Estos tiempos se verán sujetos a modificaciones en función de la complejidad del brote y el número de aislados a estudiar.
Ejemplos: búsqueda de reservoriosEjemplos: búsqueda de reservoriosDice (Opt:0.60%) (Tol 1.0%-1.0%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%]PFGE
100
9080
PFGE
Caso Muestra
A A. traqueal
B A. traqueal
S. aureus
B A. traqueal
Trabajador F. nasal
Dice (Opt:1.00%) (Tol 1.0%-1.0%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%]
PFGE2
100
9896
PFGE2
714
715
MR-151
22/06/11
15/06/11
03/06/11
183-3
184-08
FIBROBRONCOSCOPIO
A TRAQUEAL
BAL
73016
69980
N º
Aislado Fec ha Cama Tipo de muestra NHC
Dice (Opt:1.00%) (Tol 1.0%-1.0%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%]
PFGE2
100
9896
PFGE2
714
715
MR-151
22/06/11
15/06/11
03/06/11
183-3
184-08
FIBROBRONCOSCOPIO
A TRAQUEAL
BAL
73016
N º
Aislado Fec ha Cama Tipo de muestra
A. baumannii
D ic e ( O p t : 0 . 6 0 % ) ( T o l 1 . 0 % - 1 . 0 % ) ( H > 0 . 0 % S > 0 . 0 % ) [ 0 . 0 % - 1 0 0 .0 % ]P F G E
100
9080706050
P F G E
5 3 9
5 8 4
6 1 0
8 2 3
1 0 9 9
1 1 0 2
1 2 4 7
8 0 7
9 5 0
7 8 8
1 2 0 8
1 2 3 6
6 6 8
7 3 2
8 9 5
2 0 / 0 8 / 0 7
2 1 / 0 4 / 0 8
1 7 / 0 6 / 0 8
2 5 / 0 9 / 0 9
0 6 / 0 5 / 1 1
1 3 / 0 5 / 1 1
1 5 / 0 2 / 1 2
0 1 / 0 8 / 0 9
1 4 / 0 7 / 1 0
2 5 / 0 6 / 0 9
0 7 / 0 1 / 1 2
0 7 / 0 2 / 1 2
1 7 / 1 0 / 0 8
1 9 / 0 3 / 0 9
0 4 / 0 3 / 1 0
F N a s a l
F N a s a l
F N a s a l
F n a s a l
E x h e r i d a
S a n g r e
F N A S A L
A b s c e s o
E x h e r i d a
L a r t i c u l a r
E X H E R ID A
E X H E R ID A
F N a s a l
E x h e r i d a
E x h e r i d a
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
G
G
G
G
G
G
G
G
G
G
K
K
E 5
E 5
E 5
SARM. H.U. Virgen Macarena. Árbol filogenético hist óricoSARM. H.U. Virgen Macarena. Árbol filogenético hist órico
PFGEPFGE
8 9 5
9 8 4
8 0 1
1 0 8 5
6 3 3
7 4 5
8 5 0
8 7 4
6 8 2
9 5 6
9 5 7
6 5 1
7 6 8
7 2 4
H 3 3 0
6 7 0
8 7 9
1 2 6 4
1 2 7 0
5 6 0
9 0 2
9 6 2
9 0 3
8 2 8
0 4 / 0 3 / 1 0
2 0 / 0 9 / 1 0
0 5 / 0 8 / 0 9
1 5 / 0 4 / 1 1
1 4 / 0 8 / 0 8
0 4 / 0 4 / 0 9
1 9 / 1 1 / 0 9
2 5 / 0 1 / 1 0
0 4 / 1 2 / 0 8
2 3 / 0 7 / 1 0
2 7 / 0 7 / 1 0
0 9 / 0 9 / 0 8
1 9 / 0 5 / 0 9
0 5 / 0 3 / 0 9
2 5 / 0 5 / 0 9
2 1 / 1 0 / 0 8
2 6 / 0 8 / 0 9
0 1 / 0 3 / 1 2
1 1 / 0 3 / 1 2
1 2 / 0 2 / 0 8
1 5 / 0 3 / 1 0
0 3 / 0 8 / 1 0
1 7 / 0 3 / 1 0
0 5 / 1 0 / 0 9
E x h e r i d a
E x h e r i d a
F n a s a l
A b r o n q u ia l
B o s t e o a r t i c u la r
F N a s a l
B A L
E x h e r i d a
F n a s a l
A t r a q u e a l
A t r a q u e a l
O r i n a
E s p u t o
A b r o n q u ia l
S a n g r e
F N a s a l
F n a s a l
E X H E R ID A
B A L
F N a s a l
F n a s a l
E x h e r i d a
F n a s a l
B o e s t e o a r t i c u la r
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M S S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
M R S A
E 5
E 5
E 5
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E 5
E 5
E 5
E 5
E 5
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E 5
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A
A
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A
El microbiólogo en los equipos de El microbiólogo en los equipos de IRAS y PROAIRAS y PROA
ResponsableDirector del programa - Director Médico
Equipo de IRAS- Coordinador- Miembros fijos
- Preventivista- Microbiólogo, intensivista, enfermeras e
internista experto en enfermedades
- Miembros opcionales
internista experto en enfermedades infecciosas.
- Intensivistas, pediatras…
Equipo de PROA- Coordinador- Miembros fijos
- Miembros opcionales
- Clínico experto en antibióticos.- Farmacéutico, microbiólogo, preventivista e
internista experto en enfermedades infecciosas.
- Intensivista, pediatras…