Universidad de Carabobo.Facultad de Ciencias de la Salud.

Escuela de Medicina ¨Dr. Witremundo Torrealba¨

Departamento de Fisiología y Bioquímica.

Bachilleres: Goitia LuisangelaUtrera ThaimarToribio Jhonattan

Marzo, 2012

13.- Relacionar las fluctuaciones de pH y temperatura con cambios en la conformación nativa de una proteína, y consecuentemente en su actividad biológica.

14.- Explicar la participación de las proteínas plasmáticas en las diversas funciones biológicas.

15.- Interpretar el patrón electroforético de un suero normal.

Desnaturalización y renaturalización de las proteínas.Proteínas del plasma. Importancias de las proteínas plasmáticas: albúmina,

a1 quimiotripsina, haptoglobina, celuloplasmina, transferrina, inmunoglobulina

y proteínas de coagulación.Patrones electroforéticos de sueros normales.

Cambios en el entorno de la proteína pueden acarrear cambios estructurares y funcionales.

Condiciones diferentes a las de la célula pueden provocar cambios en la estructura tridimensional

Ejemplo

Elevamos suficiente la temperatura, o pH sea fuertemente acido o alcalino,o se añade al disolvente algunos tipos de moléculas orgánicas, como alcoholes

o urea, se despliega la estructura nativa de la proteína.

Desnaturalización

Desnaturalización

Perdida la estructura natural de la proteína, junto con la mayoría de sus propiedades especificas por factores externo.

La cadena desplegada es un ovillo aleatorio

Fluctúa continuamente entre un gran numero de conformaciones extendidas.

pH

Las variaciones de pH alteran los estados de ionización de las cadenaslaterales de los aminoácidos, lo que cambia la distribución de cargade la proteína y la destrucción de algunos enlaces de hidrógenos.

Los detergentesAlgunos de los cuales perturban de modo significativo las estructuras

de las proteínas a concentraciones tan bajas como 10-6M, asociándose hidrofobicamente con los restos no polares de una

proteína, interfiriendo con las interacciones hidrofobitas responsable de la estructura de la proteína nativa

Los disolventes orgánicos como la urea actúan

principalmente rompiendo las interacciones

hidrofobicas que forman el núcleo estable de las proteínas globulares.

TemperaturaSi se aumenta lentamente la temperatura la conformación de la proteína permanece generalmente intacta hasta que tiene lugar una perdida brusca de la estructura dentro de un estrecho margen de temperatura.

Proceso cooperativo: la perdida de la estructura en una parte desestabiliza la estructura restante

Temperatura de fusión (Tm )

Proteínas 100 ºC

El calor en las proteínas de la clara de huevo, la desnaturalización se acompaña en este caso de coagulación.

Cuando la desorganización molecular no es muy intensa, la proteína puede retomar su conformación original.

Renaturalización

Temperatura

La desnaturalización de algunas proteínas es reversible

Recupera su estructura nativa estable y su actividad biológica

Desnaturalización y renaturalización de la ribonucleasa

¿ PLASMA ?

Fracción líquida y acelular de la sangre, es decir, se obtiene al dejar a la sangre desprovista de células como los glóbulos rojos y los glóbulos blancos

¿ Función del Plasma ?

Los alimentos

Los desechos celulares

TransporteLas Hormonas

Importancia de las proteínas plasmáticas

Funciones en conjunto de las proteínas plasmáticas

Función oncótica

Función tampón o buffer

Participación en la viscosidad de la sangre

Función electroquímica

AlbúminaOvoalbúmina clara de huevo

Lactoalbúmina leche

Seroalbúmina

Es la proteína más abundante en el plasma; su contenido es de 4.5 g/dl, su PM es de 69,000 Daltons y comprende cerca de 60% de la proteína plasmática total.

40% está en el plasma y 60% en los espacios extracelulares

El hígado produce alrededor de 12 g de albúmina por día, lo cual representa alrededor de 25% de la síntesis proteica hepática total

Cadena polipeptídica de 585 a.a. y contiene 17 enlaces disulfuro que determina su organización.

Albúmina

La forma de la molécula completa es elipsoidal, lo que significa que no aumenta la viscosidad del plasma.

Se piensa que la albúmina es responsable del 75 a 80% de la presión osmótica del plasma humano

Capacidad para unirse a varios ligando. Estos incluyen ácidos grasos libres, calcio, bilirrubina

HaptoglobinaTres tipos de haptoglobinas

determinadas genéticamente: Hp1-1, Hp2-1 y Hp2-2 que difieren en la estructura de su cadena α.

Formadas por dos pares de cadenas diferentes unidas por puentes disulfuro; α2 β2.

Forman complejos específicos y estables con la hemoglobina (Hb-Hp)

La concentración de Hp en el plasma humano varía entre 40 a 180 mg/dl. El PM de la Hb es de aprox. 65,000 PM de la forma polimórfica mas simple de Hp es de aprox. 90,000 PM complejo Hb-Hp aprox. 155,000

Evita la excreción del hierro por la orina. Hp impedir la pérdida de Hb libre por el riñón.

Es una globulina con PM aprox. de 160,000 concentración plasmática de 30 mg/dl.

Tiene color azul debido a su contenido de cobre y transporta 90% del metal presente en el plasma

Es el vehículo de transporte del cobre por la sangre y participa en su homeostasis.

En la enfermedad de Wilson los niveles de esta proteína están drásticamente reducidos por lo que los niveles de

Cu aumentan en cerebro e hígado originando daños severos neurológicos y hepáticos.

Ceruloplasmina

Transferrina:

687 a.a. PM aprox. de 80,000 daltons. Posee 2 dominios homólogos

La concentración sérica normal de la transferrina: 200 a 400 mg/dl.

El hierro libre es toxico, pero su fijación a transferrina disminuye su toxicidad y lo transporta donde se requiere

Transporta iones férricos desde los lugares de almacenamiento de hierro hacia la médula ósea, donde los precursores de eritrocitos y linfocitos tienen receptores de transferrina en sus superficies.

Inmunoglobulina

Un par de cadenas ligeras con unos 220 aminoácidos cada una,  y un par de cadenas pesadas formadas por unos 440 aminoácidos cada una. 

Glicoproteínas que actúan como anticuerpos Respuesta a la detección de moléculas extrañas en nuestro cuerpo

Diversos tipos de inmunoglobulinas: IgG, IgM, IgA, IgD e IgE

Inmunoglobulina

Parte del sistema inmunitarioLos anticuerpos contribuyen a la inmunidad de tres formas distintas:

Impedir que los patógenos entren en las células o las dañen al unirse a ellas.

Pueden estimular la eliminación de un patógeno por los macrófagos.

Desencadenar la destrucción directa del patógeno estimulando otras respuestas inmune como la vía del complemento

Fibrinogeno

Glicoproteína forma parte de la cascada final de la coagulación, ya que por acción de la enzima trombina se transforma en un monómero de fibrina

El fibrinógeno es una proteína soluble del plasma sanguíneo precursor de la fibrina, su longitud es de 46 nm, su peso 340 kDa

Es una molécula fibrilar, que en sus extremos tiene cargas fuertemente negativas.

Compuesto por tres pares de cadenas de polipéptidos que son, 2 cadenas α, 2 β y γ unidas por enlaces disulfuro

La electroforesis es una técnica de laboratorio, en la cual el suero sanguíneo se coloca en un papel especialmente tratado y luego se expone a una corriente eléctrica, las proteínas se mueven o migran en el papel

Separación electroforetica del suero plasmático genera cinco fracciones principales: Albúmina que constituye el 54-58 % del total de proteína

1- globulina con 6-7 % 2- globulinas con 8-9%

-globulinas con 13-14 %

globulinas que son 11-12% del total de proteínas.

s

El aumento de las proteínas alpha-1 globulina puede deberse a:

• Enfermedad inflamatoria aguda• Cáncer• Enfermedad inflamatoria crónica (por ejemplo artritis reumatoidea, LES)

La disminución de las proteínas alfa-1 globulinas puede ser un signo de:

• Deficiencia de alfa-1 anti-tripsina

El aumento de las proteínas alfa-2 globulinas puede indicar:

• Inflamación aguda• Inflamación crónica

La disminución de las proteínas alfa-2 globulinas puede indicar:

• Hemólisis

El aumento de las proteínas beta globulinas puede indicar:

• Hiperlipoproteinemia• Terapia de estrógenos

La disminución de las proteínas beta globulinas puede indicar:

• Trastorno de coagulación congénito• Coagulopatía de consumo• Coagulación intravascular diseminada

El aumento de las proteínas gama globulinas puede indicar:

•Enfermedad inflamatoria crónica (por ejemplo, artritis reumatoidea, LES)• Hiperinmunización• Infección aguda• Enfermedad hepática crónica