7/25/2019 Rotavirus.antigeno.fecal.elisa

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Laboratorio de Investigacin deEnfermedades Gastrointestinales

Av. El Polo 740, Of. C-414C. C. El Polo, Surco, Lima, PERUTelef. 51 (1) 250-1884http://www.gastrolabperu.com

UTILIDAD CLINICA

Este examen es para ser utilizado como ayudadiagnstica en pacientes con gastroenteritis agu-da para detectar la presencia de rotavirus. Estambin til en la investigacin de brotes de dia-rrea en instituciones como guarderas, nidos, sa-

las de hospitalizacin y asilos. La deteccin delantgeno fecal de rotavirus mediante ELISA tienebastante mayor precisin diagnstica que con latcnica de ltex.

DESCRIPCION

Deteccin cualitativa de antgeno fecal de rotavirus (Grupo A) mediante enzimoinmunoensayo de microplacaen fase slida con anticuerpos policlonales (IDEIA Rotavirus, Oxoid Ltd, Ely, Cambridgeshire, UnitedKingdom) en muestra de heces

INFORMACION CLINICA

Rotavirus es la causa ms comn de diarreainfecciosa no bacteriana, especialmente en nioshasta los 2 - 3 aos de edad. Puede afectar tam-bin a nios mayores y adultos aunque en estegrupo los sntomas suelen ser ms leves y laenfermedad ms corta excepto si es un adultomayor o tiene alguna condicin de inmunosupre-sin. La infeccin por rotavirus ocurre todo el aoaunque tiende a aumentar durante los meses deinvierno. Es un virus altamente transmisible quepuede fcilmente ocasionar brotes con numerosos

casos en instituciones como hospitales, guarder-as, nidos y asilos. Las medidas sanitarias conven-cionales de higiene no son por lo general suficien-tes para evitar la transmisin del rotavirus. Laprevencin ms efectiva de esta infeccin se lo-gra con vacunas. La enfermedad tpica se iniciade manera brusca primero con vmitos y fiebreseguido horas despus por diarreas acuosas sinmoco o sangre; toda la enfermedad puede durarde 5 a 8 das.

MUESTRA

Heces frescas, refrigeradas o congeladas, en recipiente apropiado (frasco limpio, seco, de boca ancha ytapa hermtica). Mnimo 5 mL (5 g) Mayor cantidad si conjuntamente se solicitan otros exmenes.

INSTRUCCIONES PARA OBTENCION Y TRANSPORTE DE LA MUESTRA

Obtener la muestra en frasco limpio de bocaancha y tapa hermtica. No mezclar la muestracon orina, cremas o talco. Colectar la mayorcantidad posible. En nios pequeos colocar elpaal al revs (por la parte no absorbente),cubrir la salida de la uretra con un trozo dealgodn (para no contaminar la muestra conorina) y trasvasar la muestra al frasco. Muestrasen paal no son aceptables. Enviar la muestra allaboratorio inmediatamente despus de su

obtencin en caja trmica con refrigerantes.

Muestras de lugares fuera de Lima o que nopueden ser enviadas al laboratorio antes de 3horas desde su obtencin deben ser congeladas a-20C hasta su envo. Muestras en un medio depreservacin como Cary-Blair no son aceptablespara esta prueba. No colectar la muestra enrecipientes que contengan medios de transporte,formol o compuestos similares, sueros animales,iones metlicos, agentes oxidantes o detergentesdebido a posibles interferencias con la prueba.

METODO DE ANALISIS

Enzimoinmunoensayo (ELISA) de microplaca enfase slida con anticuerpos policlonales. Lospocillos de la microplaca de titulacin estnrecubiertos con anticuerpo policlonal contraantgeno especfico de rotavirus Grupo A. Elsobrenadante de una suspensin de la muestra,as como el anticuerpo policlonal marcado conperoxidasa se pipetean en los pocillos. Elantgeno de rotavirus presente en la suspensinde la muestra se une tanto al anticuerpo en la

microplaca, como al anticuerpo marcado conperoxidasa formando un complejo sndwich. El

conjugado de enzima que no se combina seelimina mediante el lavado de la microplaca.Despus de aadir el substrato, si la muestra espositiva, la enzima enlazada transforma el colorde la solucin en los pocillos de la microplaca deincolora hacia el azul. Mediante la adicin delreactivo de parada se lleva a cabo un cambio decolor del azul al amarillo. La absorbancia se leeen espectrofotmetro a 450/620 nm y se expresacomo positiva o negativa en relacin al valor

lmite pre-determinado (cut off).

ROTAVIRUS ANTIGENO FECAL ELISA (MB008)

Diarrea acuosa

y vmitos?

Considere

rotavirus en su

diagnstico

diferencial

Puede ocurrir

an en

pacientes

vacunados

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RANGO DE RESULTADOS

Positivo o negativo

RANGO NORMAL

Negativo, no hay antgeno de rotavirus

TIEMPO DE ENTREGA DE RESULTADOS

6 12 horas desde recibida la muestra

INTERPRETACION DE RESULTADOS

Comparado con microscopa electrnica y otraprueba ELISA de referencia, la prueba dedeteccin del antgeno fecal de rotavirus conanticuerpos policlonales tiene una especificidadde 99.2% por lo que un resultado POSITIVO conesta prueba confirma que hay una infeccinintestinal por rotavirus y que sta podra ser lacausa de los sntomas del paciente. Si elresultado se informa NEGATIVO es probable que

no haya realmente una infeccin por rotavirus. Lasensibilidad de esta prueba es de 100.0%. Unresultado falso NEGATIVO (la enfermedad existepero la prueba no lo detecta) puede deberse a

que la muestra se colect cuando la excrecinfecal del virus haba declinado a niveles pordebajo del nivel de deteccin del ELISA o a undeterioro del antgeno durante su trasporte allaboratorio. Esta prueba es especfica pararotavirus, un resultado POSITIVO o NEGATIVO conesta prueba no excluye la presencia de otrosagentes enteropatgenos. Esta informacin esslo para ser tomada en cuenta. El mdico es el

ms indicado para decidir lo que se deba haceren base a los sntomas, el cuadro clnico y elresultado de esta prueba.

LIMITACIONES Y RECOMENDACIONES

1. Mantener la muestra refrigerada desde su obtencin hasta la llegada al laboratorio; el antgeno delrotavirus puede deteriorarse en muestras expuestas a temperaturas elevadas durante el transporte allaboratorio;

2. El antgeno fecal de rotavirus es detectable desde el comienzo de la enfermedad, el pico de excrecinocurre 3 - 5 das despus del inicio de los sntomas y decae rpidamente; para un mejor resultado, lasmuestras fecales deben obtenerse tan pronto empiezan los primeros sntomas;

3. Si el resultado de la prueba es NEGATIVO y la sospecha de la infeccin es muy fuerte puede serconveniente repetir la prueba en una nueva muestra.

PORQUE DEBO HACER ESTA PRUEBA EN GASTROLAB?

1.

Utilizamos los reactivos de diagnstico de uno de los mejores fabricantes del mundo, como lohacen los mejores laboratorios;

2.

Hemos adquirido una enorme experiencia en la aplicacin del mtodo ELISA para detectarantgenos fecales; no es cosa fcil pero lo hacemos muy bien: ms de 700 exmenes por ao;

3.

Procesamos la muestra tan pronto llega al laboratorio y no en lote como es habitual en otroslaboratorioses ms costoso as, pero es mejor para el paciente porque tiene sus resultados mspronto;

4.

Ofrecemos abundante informacin para ayudar a elegir el mejor examen, para obtener unamuestra adecuada y para interpretar los resultados.

HORARIO DE RECEPCION DE MUESTRAS

Lunes a Viernes de 7:30 AM a 8:30 PMSbados de 7:30 AM a 6:30 PMAtencin fuera de horario, llamar al 990-371-374

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