UNIVERSIDAD PERUANA LOS ANDES

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MÉDICA

ESPECIALIDAD DE: LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA

UNIDAD DE EJECUCIONCURRICULAR: AUTOMATIZACIÓN EN LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA.

DOCENTE: Lic. Andrés CANDELA

ALUMNOS:

- GORA RAPRI, Cristhian Alin.- TORRES GARCIA, Scarlett Maziel.

HUANCAYO 2012-I

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BANCO DE SANGRE Y NAT

PRESENTACIÓN

En la presente monografía consta de tres fases bien definidas:

1. Exposición de la teoría clara y concreta manejada en un laboratorio clínico

en la unidad de banco de sangre

2. Factores predeterminados con la donación de sangre.

3. El sistema NAT.

Con el fin de lograr el aprendizaje y la comprensión de conceptos como: el banco

de sangre es cualquier organización dedicada a recolectar, almacenar, procesar

y/o suministrar sangre humana para analizar las muestras recolectadas y separar

a la sangre en sus componentes. Conocer aspectos referentes a la sangre que

indispensable para vivir. Su papel es tan esencial que la disminución de su

volumen o la alteración de alguna de sus funciones pueden poner en peligro la

supervivencia del organismo; es decir, la sangre es sinónimo de vida porque no

existe vida sin ella.

Es imprescindible aportar al accidentado o al enfermo los elementos que le falten y

recuperar la función alterada. Esta operación se denomina transfusión sanguínea.

La donación de sangre, gesto generoso y desinteresado, es hoy por hoy, la única

forma de salvar la vida o recuperar la salud para cualquier persona que sufra un

déficit de componentes sanguíneos. Regulado por un sistema llamado

PRONAHEBAS el cual establece “… su responsable, tanto en el ámbito

público como privado, debe ser un médico especialista en hematología…”

Hablaremos un capítulo sobre las técnicas de amplificación de ácidos nucleicos

(NAAT) son fundamentales para las pruebas de ADN molecular, incluyendo el

diagnostico clínico, pruebas ambientales, pruebas de alimentos y muchas otras

aplicaciones.

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BANCO DE SANGRE Y NAT

I. OBJETIVOS:

Determinar e identificar la automatización en el banco de sangre, donación

de sangre, sistema de aféresis (métodos tradicionales y NAT) y

almacenamiento de los derivados de la sangre.

II. MARCO TEÓRICO:

La Gerencia Ejecutiva de los Servicios de Banco de Sangre se reconoce

como la máxima autoridad institucional. La Gerencia Ejecutiva designará un

Comité de Calidad, que definirá y documentará la política para que los

Servicios de Banco de Sangre alcancen y mantengan calidad en la

selección del donante, en la recolección de sangre, en el procesamiento de

sangre, en el almacenamiento de sangre, en la distribución de sangre, en

las pruebas del receptor, en la transfusión de sangre y sus componentes y

en la entrega de servicios (los que en este documento serán referidos como

recolección, procesamiento y transfusión de sangre y componentes

sanguíneos, y servicios).La política de calidad describirá los objetivos de

calidad de los Servicios de Banco de Sangre y su compromiso con dicha

calidad. La Gerencia Ejecutiva de los Servicios de Banco de Sangre

asegurará que la política de calidad sea conocida, comprendida,

implementada y mantenida por todos los niveles de los Servicios.

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III. DEFINICION:

Es el establecimiento autorizado para obtener, recolectar, conservar, aplicar y proveer sangre humana, así como para analizar y conservar, aplicar y proveer componentes de la misma.

IV. FUNCION DEL BANCO DE SANGRE

La función del banco de sangre es determinar quién es el donador ideal y detectar las unidades infectantes. Tambien es el encargado de recibir a los donantes, procesar, almacenar y distribuir la sangre y sus componentes.

V. DISPOSICIONES GENERALES Los disponentes alogénicos de sangre y de sus componentes podrán corresponder a las categorías siguientes:

Altruista. familiar.

Los actos de disposición de sangre y sus componentes para fines de transfusión autóloga, podrán llevarse a cabo mediante losprocedimientos siguientes:

depósito previo hemodilución preoperatoria aguda escate celular transoperatorio y posoperatorio.

VI. ESQUEMATIZACIÓN EN BANCO DE SANGRE

1. Comprende :

donación de sangre sistema de aféresis almacenamiento de los derivados de la sangre

2. ETAPA PRE-ANALITICA:

Comprende de las pruebas preliminares donante-paciente

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PRONAHEBAS

(Programa Nacional de Hemoterapia y Banco de Sangre)

Donante voluntario Donante reposición Donante remunerado Donante autóloga Paciente hemodependiente

3. SELECCION DEL DONADOR

3.1. Es candidato ideal para donar sangre si:

• eres mayor de 18 años• pesas por lo menos 50 kg• cuentas con buen estado de salud.

3.2. No eres candidato ideal SI:

• hace tres días tuviste fiebre, infección, tomaste medicinas, alcohol o tuviste tu sangrado menstrual

• hace 45 días donaste sangre • hace 6 meses te operaron o estuviste embarazada • padeces ataques, moretes o sangrados espontáneos, alta o baja presión no

controlada, diabetes y recibes insulina, problemas del corazón, alergias graves o una infección actual

• has tenido enfermedades venéreas • usaste o usas drogas • tuviste hepatitis • has tenido los ojos amarillos, fiebre y orina oscura • si tu o tu pareja recibieron sangre, tuvieron contacto con homosexuales,

desconocidos o sexo servidoras • has recibido quimioterapia para el tratamiento del cáncer

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4. PRINCIPIOS UTILIZADOS EN BANCO DE SANGRE

Tradicionalmente se han utilizado para el fraccionamiento de la sangre, los métodos manuales, que tienen como base la centrifugación diferencial, la cual se sustenta en los diferentes pesos específicos de los componentes de la sangre.En los años resientes se han usado métodos semiautomatizados mediante los cuales se pueden obtener a partir de una sangre total, un concentrado eritrocitaria, un concentrado plaquetario y plasma rico en factores de la coagulación.Para la separación de las plaquetas se pueden utilizar el metodo de obtención de buffy-coat o bien, mediante la separación inicial de plasma rico en plaquetas. En la medida en que los métodos tienden a ser semiautomatizados o automatizados se ahorran recursos, pero tienen además la ventaja de lograr la estandarización de los procesos con mayor facilidad, esto se debe a que los equipos realizan algunas etapas en las cuales se limita la intervención de los operarios y como consecuencia se reduce la variación en el procedimiento.

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Otro avance importante en el enfoque de la seguridad transfusional es la implementación de los métodos de leucorreduccion para la hemocomponentes. Con ellos se reducen la posibilidad de sensibilizar.Por ejemplo:Para las plaquetas que se optiene a partir de una mezcla de concentrados plaquetario unitarios (pool) se pueden considerar leucorreducidas cuando se han sometido a leucorreduccion, ya sea durante su obtención (filtros en línea) o bien con el uso de filtros a pie de cama (filtros post-almacenamiento) con frecuencia las plaquetas obtenidas por una maquina de aféresis de última generación son leucorreducidas desde su obtención, durante la separación de los elementos celulares sanguíneos. La unidad sanguínea a transfundir deberá contener menos de 5 x 1000000 leucocitos por unidad de acuerdo a los estándares de asociación americana de sangre (AABB).

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5. PRUEBAS PRETRANSFUSIONALES

Son los procedimientos realizados por los servicios de transfusión o los bancos de sangre, previos a la transfusión con el fin de asegurar la selección adecuada de la unidad de sangre o los componentes a transfundirse.

5.1 AFÉRESIS PARA HEMOTERAPIA Y BANCO DE SANGRE

La palabra aféresis deriva del griego que significa remover o separar. Separar de manera selectiva el componente sanguíneo que se desea, y retornar al donador o paciente el resto de los componentes sanguíneos. La aféresis terapéutica se refiere a extracción de elementos patológicos.

5.1.1. VENTAJAS DE LA AFÉRESIS

Las dosis terapéuticas de plaquetas se obtiene de un solo donador (3x 1011), se disminuye el riesgo de aloinmunizacion y el riesgo de enfermedades infecciosas, es un producto leucorreducidas, (menos de 1x106), donadores de repetición, recuperación del donador alas 72 hrs., 5 días de vigencia de las plaquetas, se obtiene dobles concentrados eritrocitaria, tiempo, promedio de donación 90 minutos y son productos de alta calidad.

5.1.2. TIPOS DE AFÉRESIS

En función de los elementos sanguíneos extraídos:

plaquetoferesis plasmaferesis eritrocitaferesis leucaferesis (granulocitos y linfocitos) recolección de células tallo.

5.1.3. COMPONENTES DE LOS EQUIPOS DE AFÉRESIS Y SEPARADORES SANGUÍNEOS

centrifugas (flujo continuo y discontinuo) bombas peristálticas sistema óptico. Válvulas-sensores de presión y volumen. Panel monitor (operador) Cámaras/ campanas/ cinturón de recolección y separación.

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ANEXOS: equipo estéril desechable (bolsas, soluciones, etc.)

5.2. PRUEBA DE COOMBS

Es una prueba que busca anticuerpos que puedan fijarse a los glóbulos rojos y

causar su destrucción prematura (hemólisis).

5.2.1. FORMA EN QUE SE REALIZA EL EXAMEN

La sangre se extrae típicamente de una vena, por lo general de la parte interior del

codo o del dorso de la mano. El sitio se limpia con un desinfectante (antiséptico).

El médico envuelve una banda elástica alrededor de la parte superior del brazo

con el fin de aplicar presión en el área y hacer que la vena se llene de sangre.

Luego, el médico introduce suavemente una aguja en la vena y recoge la sangre

en un frasco hermético o en un tubo pegado a la aguja. La banda elástica se retira

del brazo. Una vez que se ha recogido la muestra de sangre, se retira la aguja y

se cubre el sitio de punción para detener cualquier sangrado.

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En bebés o en niños pequeños, se puede utilizar un instrumento puntiagudo

llamado lanceta para punzar la piel y hacerla sangrar. La sangre se recoge en un

tubo pequeño de vidrio llamado pipeta, en un portaobjetos o en una tira reactiva.

Finalmente, se puede colocar un vendaje sobre el área si hay algún sangrado.

5.2.2. PREPARACIÓN PARA EL EXAMEN

No se requiere preparación especial para este examen.

5.2.3. LO QUE SE SIENTE DURANTE EL EXAMEN

Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un

dolor moderado, mientras que otras sólo sienten un pinchazo o sensación

punzante. Posteriormente, puede haber una sensación pulsátil o se puede

presentar una contusión en el sitio donde se insertó la aguja.

5.2.4. RAZONES POR LAS QUE SE REALIZA EL EXAMEN

Hay dos formas de realizar la prueba de Coombs: directa e indirecta.

5.2.4.1. LA PRUEBA DE COOMBS DIRECTA

Se utiliza para detectar anticuerpos que ya se han fijado a la superficie de los

glóbulos rojos. Muchas enfermedades y fármacos (quinidina, metildopa y

procainamida) pueden llevar a la producción de estos anticuerpos. Estos

anticuerpos algunas veces destruyen los glóbulos rojos y causan anemia. Esta

prueba algunas veces se lleva a cabo para diagnosticar la causa de anemia o

ictericia.

5.2.4.2. LA PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA

Busca anticuerpos circulantes libres contra una serie de glóbulos rojos

estandarizados. Esta prueba indirecta sólo se usa rara vez para diagnosticar una

afección médica y, con más frecuencia, se utiliza para determinar si una persona

podría tener o no una reacción a una transfusión de sangre.

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5.2.5 VALORES NORMALES

La falta de agrupación de células (aglutinación), indicando que no hay anticuerpos

para los glóbulos rojos, es lo normal.

Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes

laboratorios. Hable con el médico acerca del significado de los resultados

específicos de su examen.

5.2.6. SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES

Una prueba de Coombs directa anormal (positiva) significa que usted tiene

anticuerpos que actúan contra sus glóbulos rojos, lo cual puede deberse a:

Anemia hemolítica autoinmunitaria sin otra causa

Anemia hemolítica inducida por fármacos (muchos fármacos han sido

asociados con esta complicación)

Eritroblastosis fetal (enfermedad hemolítica del recién nacido)

Sífilis

Reacción a transfusión como la ocasionada por unidades de sangre

cotejadas de manera impropia

Esta prueba también es anormal en algunas personas sin una causa clara,

especialmente entre los ancianos. Hasta el 3% de las personas que están

hospitalizadas sin un trastorno sanguíneo conocido tendrán un resultado anormal

en la prueba de Coombs directa.

Una prueba de Coombs indirecta anormal (positiva) significa que usted tiene

anticuerpos que actuarán contra los glóbulos rojos que el cuerpo asume como

extraños. Esto puede sugerir la presencia de:

Anemia hemolítica autoinmunitaria o inducida por fármacos

Eritroblastosis fetal (enfermedad hemolítica)

Incompatibilidad sanguínea (cuando se utiliza en bancos de sangre)

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5.2.7. CUÁLES SON LOS RIESGOS

Las venas y las arterias varían en tamaño de un paciente a otro y de un lado del

cuerpo a otro; por esta razón, puede ser más difícil obtener una muestra de sangre

de algunas personas que de otras.

Otros riesgos asociados con la extracción de sangre son leves, pero pueden ser:

Sangrado excesivo

Desmayo o sensación de mareo

Hematoma (acumulación de sangre debajo de la piel)

Infección (un riesgo leve cada vez que se presenta ruptura de la piel)

5.3. PRUEBAS CRUZADAS

Es una prueba inmunohematologica cuyo principio es la hemaglutinación y su objetivo es evitar la destrucción intravascular de los hematíes en un receptor.

Incluirán pruebas de aglutinación en medio salino, así como, en algún medio facilitador de la reacción, rutinariamente se empleará la prueba de antiglobulina humana (prueba de Coombs), pudiéndose omitir cuando se tenga certeza que el receptor y el disponente carezcan de antecedentes propiciadores de aloinmunizacion.

5.3.1. LAS CONTROLES EN LA PRUEBA:

Laspruebascruzadasdeberánincluiruncontrolquepermitadetectarlapresenciadeautoanticuerpos.

5.3.1.1. DONACIÓN:

Donantes “universales”:

Son los que tiene el grupo O negativo. Sus glóbulos rojos no tienen antígenos por lo que los anticuerpos del receptor no pueden reaccionar.

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Receptor “universal”: Son las personas que tienen el grupo AB. Estas personas no poseen anticuerpos por lo que no rechazan la sangre trasfundida.

5.4. DETERMINACION DEL GRUPO AOB

1. Colocar en la tarjeta una gota se suero anti-A, una de anti-B, una mezcla de anti-A y anti-B, y una gota de anti-D, cada una en su casilla correspondiente.

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2. Pinchar la yema del dedo, previa desinfección con alcohol o agua oxigenada. Depositar una gotita de sangre en cada casilla y mezclar con los sueros.

Observar el resultado e interpretar.

Tipificación ABO:

Si sus glóbulos sanguíneos se pegan o aglutinan al mezclarse con:

Suero ANTI-B, usted tiene sangre tipo A. SUERO ANTI-B, usted tiene sangre tipo B. SUERO ANTI-A y ANTI-B, entonces usted tiene sangre tipo AB. Si los glóbulos sanguíneos no se pegan o aglutinan cuando se agrega

suero ANTI-A Y ANTI-B, usted tiene sangre TIPO O.

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Los procesos son totalmente controlados, mecánicos y se pueden automatizar, para ello se desarrollo la siguiente técnica:

5.5. DETERMINACIÓN DEL GRUPO SANGUÍNEO CON TARJETAS DE GEL

El sistema utilizado en inmunohematologia para investigar e identificar antígenos y anticuerpos antieritrocitarios. Es de tecnología de microtipificacion en gel se basa en la separación por tamaño de los eritrocitos aglutinados, durante un proceso de centrifugación en un gel poroso.

Los eritrocitos van perdiendo elasticidad en sus membranas de forma que aglutinados grandes quedan atrapados en la zona superior y los pequeños quedan distribuidos a lo largo de la columna.

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Esta técnica nos permite que estandaricemos la lectura de la reacción antígeno-anticuerpo con facilidad y repetitividad. Así como la estandariza del uso de reactivos, tiempos y lecturas disminuyendo sustancialmente la influencia de la mano del operador.

5.5.1. DG Gel® ABO/Rh (2D)

Tarjeta de gel para la determinación de los antígenos del sistema ABO, Rh (D) y determinación de grupo sérico.

Cada tarjeta consta de 8 micropozos que contienen una solución de gel con:

- Anti-A monoclonal (clones 16243 G2 y 16247 E6) - Anti-B monoclonal (clon 9621 A8).- Anti-AB monoclonal (clones 16245 F11 D8, 16247 E6 y 7821 D9) - Anti-D monoclonal (clon P3x61)

El reactivo Anti-D, mezcla de monoclonales, detecta D débiles y variantes parciales del antígeno D, incluyendo la variante DVI.

- Con solución tamponada de gel para realizar el control (ctl) - Con solución tamponada de gel para realizar grupo inverso 

5.5.2. VENTAJAS SOBRE LA METODOLOGÍA TRADICIONAL.

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Los procesos son totalmente controlados y se pueden automatizar.

La metodología es simple y estandarizada para todas las reacciones.

La lectura de los resultados es fácil, por ser las reacciones microscópicas y

fijadas sobre el gel.

La documentación fotográfica de los resultados obtenidos puede ser

utilizada como instrumento legal o de consulta.

Se reduce el nùmero de manipulaciones aumentando la bioseguridad del

operador.

Es una microtécnica con una macrolectura.

Hay trazabilidad desde el inicio de la prueba hasta la obtención del

resultado.

5.5.3. QUE PRUEBAS SE PUEDEN REALIZAR EN TARJETAS DE GEL.

Grupo sanguíneo ABO directo e inverso y factor Rh

Pruebas de compatibilidad sanguínea.

Coombs directo.

Rastreo de anticuerpos irregulares.

Identificación de anticuerpos irregulares.

Fenotipo de Rh

Grupo sanguíneo neonatal.

5.6. OTRAS PRUEBAS:

• Pruebas antiparasitarias

• Prueba de determinación de anticuerpos

• Prueba de ELISA

5.7. HEMODERIVADOS

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Componentes de la sangre. Son las fracciones separadas de una unidad de sangre, como el plasma, albúmina, gammaglobulina, concentrado de eritrocitos, plaquetas y factor VIII.

5.7.1. SANGRE TOTAL

Unidad de sangre extraída con un anticoagulante y bolsa autorizados y no fraccionada.Contenido: Una unidad de sangre total (ST) contiene 450 mL de sangre más aproximadamente 63 mL de solución anticoagulante-conservadora, con lo que su volumen final está en torno a los 500 mL

5.7.2. Conservación:

La sangre total puede ser almacenada refrigerada entre 21 y 35 días dependiendo de la solución conservante anticoagulante-utilizada.

Durante la conservación a 4 ºC las plaquetas y leucocitos dejan de ser funcionantes al cabo de pocas horas después de la extracción, y se produce una reducción gradual de la viabilidad de los hematies.

Los hematies conservados durante 5 semanas en CPD-A presentan una recuperación media del 70%, la recuperación mínima aceptable.

Los niveles de factores V y VIII también descienden. La tasa de Factor VIII experimenta una disminución del 50% a las 24 horas de la extracción y el factor V queda reducido al 50% a lo 10-14 días.

5.7.3. CONCENTRADOS DE HEMATIES:

Componente obtenido tras la extracción de aproximadamente 200 mL de plasma de una unidad de sangre total después por centrifugación. Son el componente sanguíneo más frecuentemente usado para incrementar la masa de células rojas

5.7.3.1. Contenido:Contiene los hematies correspondientes a una unidad de sangre total, más unos 100 mL de plasma residual.

5.7.3.2. Conservación:

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Cuando la sangre se recoge en bolsa que contienen CPD-A, estos concentrados pueden conservarse durante 35 días a 4 ºC.

5.7.3.3 REFRIGERADORAS: Las refrigeradoras del banco de sangre presentan las siguientes características de diseño fundamentales:

Autonomía frigorífica: capacidad de mantener la temperatura entre +2 °C y +6 °C si hay corte de fluido.

Un ventilador de refrigeración Dispositivos de vigilancia de la temperatura. Revestimiento interior de la cámara resistente a los arañazos (acero

inoxidable y aluminio). Puerta delantera de cristal u otro material que permita al usuario ver el

contenido de la cámara sin que ello afecte a la temperatura y cajones o estantes con correderas para depositar la sangre.

5.7.3.4. REFRIGERADORES PORTÁTILES PARA EL TRANSPORTE DE SANGRE Y LÍQUIDOS REFRIGERANTES

Deben contener bloques refrigerantes El refrigerante es una solución eutéctica que tiene una gran capacidad

termo energético y una gran estabilidad a su temperatura de cambio de estado, que típicamente es de +16 °C a +20°C.

El refrigerante se aloja en una doble bolsa sellada La refrigeración más eficaz se produce cuando la bolsa de refrigerante se

halla en contacto directo con la unidad de sangre o de plaquetas.

5.7.3.4 AGITADOR DE EXTRACCIÓN AUTOMÁTICA CON BALANZE

Agitador de extracción y balanza digital con corte por volumen que permite la automatización de las donaciones en bancos de sangre con el control y seguridad en el proceso

Función: mezclar la sangre total extraída con el anticoagulante presente en la bolsa.

Posee una rotación continua y suave para evitar la lisis celular dentro de la bolsa de extracción.

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5.7.4. SANGRE DESLEUCOCITADA:

Los pacientes que experimentan fuertes y/o reiteradas reacciones no hemolíticas febriles a causa de las transfusiones suelen mejorar cuando se les transfunde hematies pobres en leucocitos.

La denominación "hematies pobres en leucocitos" se aplica a aquellos concentrados preparados según un método que reduce el contenido de leucocitos en el componente final a una cifra inferior a 5 x 108, reteniendo como mínimo el 80 % de los hematies originales.

El nombre correcto para este componente es " hematies libres de leucocitos separados por (método utilizado)". Entre los métodos para eliminar leucocitos se encuentra la filtración, la centrifugación, y el lavado.

La mayoría de las reacciones provocadas por anticuerpos anti leucocitos dependen de la cifra de éstos, por lo tanto, en muchos casos una reducción del 50 % del número de leucocitos en una unidad de hematies evitará la reacción. No obstante en algunos pacientes la eliminación de más del 95 % de los leucocitos puede no anular la respuesta febril.

5.7.5. HEMATIES CONGELADOS:

Hematies congelados preferentemente antes de los 7 días postextracción, utilizando crioprotector y conservados a temperatura inferior a - 80 ºC.Indicaciones:Los hematies pueden ser congelados utilizando técnicas especiales de criopreservación. Dichas técnicas permiten periodos de conservación de hasta 10 años. Se trata de procedimientos caros; por tanto el uso de hematies congelados se recomienda en circunstancias especiales, entre las cuales destacan:

Autotransfusión individuos pertenecientes a grupos sanguíneos raros individuos con anticuerpos múltiples

5.7.6. PLASMA FRESCO CONGELADO

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Se define como PFC el plasma separado de la sangre de un donante y congelado a una temperatura inferior a -18º C en las 8 horas siguientes a la extracción.Si se almacena a -30º C (mejor que a -18º C) el PFC tiene un periodo de caducidad de 12 meses. Pasado este tiempo, el nivel de Factor VIII puede haber disminuido en algunas unidades de tal manera que el plasma ya no sea óptimo para el tratamiento de pacientes con esta deficiencia. Si el PFC no se utiliza en el plazo de un año, debe considerarse a partir de entonces y etiquetarse como PLASMA. El plasma con esta nueva denominación tiene 4 años más de vida útil si se conserva a -18º C o menos.

5.7.6.1. CONCENTRADOS DE PLAQUETAS:

Un concentrado de plaquetas corresponde a las plaquetas obtenidas de una unidad de sangre total por doble centrifugación, o bien a partir de donantes por medio de procesos de aféresis (plaquetoferesis), procedimiento por el cual el donante sólo dona plaquetas.

5.7.6.2. CONTENIDO:Los concentrados de plaquetas contienen aproximadamente 6 x 109 plaquetas, lo que representa el 60-80 % de las contenidas en una unidad de sangre total, en un volumen reducido de plasma (50-70 mL).Conservación:Según la bolsa de plástico utilizada las plaquetas son viables durante 5 días o más si se mantienen a 22º C sometidas a una agitación horizontal constante

5.7.6.3. CONGELADORES DE PLASMA

Los congeladores de plasma no precisan estar conectados a un generador eléctrico de reserva, ya que los congeladores suelen mantener una temperatura inferior a la coagulación durante más de 24 horas siempre que no se abra con frecuencia.

Estos congeladores están especialmente diseñados para conservar el plasma, están equipados con un mecanismo interno de refrigeración por ventilador que distribuye el aire de forma homogénea en el interior del equipo y entorno a los dispositivos de vigilancia de la temperatura.

En un diseño ideal, tras abrir la puerta frontal, cada estantería se puede abrir de forma independiente, conservando así la temperatura.

El aislamiento de estos equipos es más espeso que el de los congeladores domésticos convencionales, lo cual ayuda a mantener la temperatura por debajo de -35°C

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5.7.6.4. AGITADORES DE PLAQUETAS Conservación de plaquetas a una temperatura de entre 20°C y 24°C Las plaquetas deben mantenerse en agitación continua para que conserve

su viabilidad y propiedad adhesión El agitador de plaquetas puede encajarse en el interior de una incubadora

que mantenga la temperatura deseada, o bien colocarse como unidad autónoma en una habitación climatizada a una temperatura de entre 20°C y 24°C.

Es indispensable para la vigilancia del agitador una alarma que alerte de los fallos de movimiento.

5.7.6.5. DESCONGELADORES DE PLASMA Un descongelador de plasma consiste fundamentalmente en un baño a

37°C o bien dirigiendo un chorro de agua caliente hacia la unidad de plasma.

Se tarda unos 15 minutos en realizar la descongelación, de -30°C a 0°C. El descongelador de plasma produce un plasma descongelado uniforme y

de calidad para transfusiones y otros usos.

VII.NAT

A. DEFINICION

Nucleic Acid Amplification Technology, permite la amplificación y detección directa de ácidos nucleicos virales, para la reducción del riesgo de transmisión. La tecnología NAT es utilizada como complemento a los ensayos de detección serológica, de gran valor en Bancos de Sangre.

B. CONCEPTOS:

 Este sistema, denominado “análisis de ácidos nucleicos” (NAT, por sus siglas en inglés) permite detectar incluso las infecciones más recientes por

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virus de sida o hepatitis B y C, entre otros, y de este modo se evita el contagio a través de transfusiones.

El riesgo de transmisión de los virus de mayor relevancia clínica VIH y VHC (hepatitis C) a través de la sangre es muy bajo con los análisis serológicos realizados habitualmente en los bancos de sangre, pero es la tecnología de detección de ácidos nucleicos (NAT) la que nos permite acercarnos al buscado “riesgo cero”, gracias a la detección directa de los virus en el período de ventana serológico.

C. TECNICAS CEQUIMAP :

Desarrollo un método cualitativo directo basado en la técnica de transcripción reversa acoplada a la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR en tiempo real) que permite identificar la presencia de los ARNs específicos correspondientes a los virus de VIH-1 y VHC. En muestras de donantes de sangre voluntarios. La aplicación de ambas metodologías contribuye a aumentar la seguridad transfusional.

COBAS AmpliScreen (Roche)

Diagnostics Metodología empleada: PCR (Reacción en cadena de la Polimerasa)

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D. MATERIALES Y MÉTODOS: El método NAT desarrollado consta de tres etapas, en la primera se purifica el ARN viral, en la segunda la enzima transcriptasa reversa sintetiza ADN complementario (cADN) utilizando como molde ARN. En la tercera y última etapa los procesos de amplificación y detección ocurren de manera simultánea (PCR en tiempo real). Los oligonucleótidos y sondas de VIH y VHC fueron diseñados para amplificar regiones conservadas del genoma viral que nos permiten detectar diferentes genotipos de los virus de interés. La realización de cada ensayo incluye controles que son analizados en paralelo con las muestras y que nos permiten establecer la validez de los resultados obtenidos y monitorear todo el proceso, detectando contaminaciones, inhibiciones y posibles errores. El material de partida es plasma, que se analiza en mini-pooles de 6 o de manera individual.

E. RESULTADOS OPTENIDOS E INTERPRETAR:

Se analizaron 1362 mini-pooles de muestras de donantes, de los cuales 6 fueron reactivos para VIH-1 y 4 para VHC. Luego se realizó el análisis individual de las 6 muestras que componían cada mini-pool, identificando cual era la muestra positiva. Todas las muestras reactivas fueron luego confirmadas serológicamente.

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CONCLUSIONES

El banco de sangre en un laboratorio clínico cumple un rol importante para prevenir,tratar,diagonosticar y mejorar la calidad de vida, usando herramientas que por el pasar del tiempo e lograron ser automatizadas sobre todo su papel desempeñara en la parte pre-analítica antes de cualquier hemoterapia o transfusión sanguínea, y para la detección de múltiples enfermedades se realizara un montón de métodos en caso de los virus que poseen ácidos nucleicos para su identificación se utilizara un metodo avanzado llamado NAT:

La seguridad transfusional constituye la principal preocupación de los Bancos de Sangre que colectan, procesan y distribuyen los componentes sanguíneos para el tratamiento de los pacientes que los necesiten. Es por ello que CEQUIMAP y el Banco de Sangre de la UNC decidieron emprender el desarrollo de un método NAT para la detección de los virus de VIH-1 y VHC, con el objeto de disminuir el período de ventana serológico. Consideramos que nuestro método ha tenido un desempeño adecuado tanto en sensibilidad, especificidad y robustez, como en obtención de los resultados en tiempo útil.

Hasta el momento tras analizar 8171 donaciones no hemos detectado ningún donante en período ventana. Este resultado no es sorprendente ya que en EEUU tras analizar 40 millones de donaciones empleando las pruebas NAT para VIH y VHC, el rendimiento de las mismas es de: 1 caso cada 3 millones de donaciones para VIH y 1 caso cada 270000 donaciones para VHC.

Seguridad Transfusional

•Mejoramiento en la selección de donantes.•Métodos de inactivación viral.•Aparición de métodos de tamizajemas sensibles.

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•Incorporación de sistemas de control de calidad de procesos.

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