Post on 29-Jun-2015
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
Facultad de Estudios Superiores Zaragoza
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA GENERAL II
Práctica número 4
HEMOPARÁSITOS
Práctica número 4HEMOPARÁSITOS
Objetivos
1.- El alumno aprenderá a realizar técnicas; hematológicas para determinar los parásitos presentes en la sangre.
2.- El alumno aprenderá a realizar técnicas; inmunológicas para determinar los parásitos presentes en la sangre.
HEMOPARÁSITOS
Hemoparasitos
• Después de las heces la sangre es el medio en el que con más frecuencia parásitos en diversos estadios de su desarrollo.
• De esta fuente se hace el diagnostico rutinario de paludismo, tripanosomiasis africana, la mayor parte de las filariasis, con menos frecuencia la enfermedad de Chagas y toxoplasmosis
Reino Grupo Clase Genero Especie Enfermedad
Protista protozoa flagelata Leishmania mexicana mexicana
LeishmaniasisCutánea
brasiliensis LeishmaniasisMuco-cutanea
donovani LeishmaniasisViseral
Tripanosoma cruzi Tripanosomiasis
gambiense
Reino Grupo Clase Genero Especie Enfermedad
protista
protozoa Ciliata Balantidium coli Balantidiasis
Sporozoa Plasmodium vivax Paludismo
ovale
malariae
falciparum
Toxoplasma gondi Toxoplasmosis
Diagnostico en sangre Genero
Bajo recuento eritrocitario y anemia.Visualización del parásito en biopsia (médula ósea y bazo)
Leishmania
Demostración de los parásitos en sangre (tripanosoma en “S”)
Tripanosoma
Trofozoito (compromiso extraintetinal Balantidium
Trofozoito joven, maduro, esquizonte, gametocito, tamaño o forma del eritrocito
Plasmodium
Merozoitos Toxoplasma
TÉCNICA INMUNOLÓGICA
Técnicas inmunológicas
• Técnica de ELISA
• Fundamento
• Ventajas
Técnica de ELISA
TÉCNICAS HEMATOLÓGICAS
FROTIS CAPA FINA
• Extendido donde se observan de 2 a 3 capa de células sanguíneas.• Práctico, fácil y rápido cuando hay gran cantidad de parásitos.
TÉCNICA DE GOTA GRUESA
• Observación 10 capas de células sanguíneas.• Observación de hemoparásitos cuando estos están presentes en pequeñas cantidades
COLORANTE DE GIEMSA• Mezcla de colorantes (ácido-básico)• Se utiliza para parásitos de sangre (paludismo,
tripanosomas, leishmanias)• Núcleo: rojo oscuro • Parásitos: azul/rojo • Células de sangre: rosado.
COLORANTE DE WRIGHT
• Colorante ácido-base (eosina/azul de metileno) con alcohol metílico.
• pH de 6.4-6.5
Microfilaria
METODOLOGÍA
1. Utilizar las laminillas de la práctica 3 y teñirlas con las técnicas de Giemsa y/o Wright.
2. Obtener una gota de sangre con una lanceta estéril, hacer una extensión en un portaobjetos y realizar la técnica de gota gruesa en otro portaobjetos con la misma sangre que se obtuvo de la punción del dedo
1-. Punción del dedo con una lanceta estéril
TINCIÓN DE WRIGHT
2. Colocar el portaobjetos completamente horizontal sobre una superficie adecuada
3. Despuésde tres minutos agregar solución buffer, se mezcla la solución y se le aplica una corriente de aire.
4. Después de cinco minutos enjuague con agua de la llave
5. Secar y leer al microscopio en seco débil 10X, seco fuerte 40 X e inmersión 100X
1. En un frotis delgado es necesaria la fijación con metanol
2. Cubrir el frotis con metanol durante tres minutos y dejar secar al aire
TINCIÓN DE GIEMSA
3. Colocar en una caja petri el colorante de Giemsa
4. Colocar el frotis dentro de la caja petri con el colorante durante treinta minutos en posición invertida
5. Sacar, dejar secar la preparación y lavar con solución buffer por tres minutos
6. Secar y leer al microscopio a seco débil 10X, seco fuerte 40X e inmersión 100X
RESULTADOS ESPERADOS
Trypanosoma rhodesiense
HEMOPARASITOS
Toxoplasma gondii
Leishmania donovani
Trypanosoma cruzi
Plasmodium malariae P. falciparum
P. vivax P. ovale
PARASITOS EN IMPRONTAS
REFERENCIAS• Prieto Menchero Santiago. Laboratorio clínico
principios generales. España: McGraw-Hill.1993.• Linch J. Matthew. Métodos de laboratorio. 2da
Ed. México: Interamericana. Vol I• Abul, K. Inmunologia celular y molecular .
Abbas. 4ª Ed. España: McGraw-Hill. 2002.• Romero Cabello Raúl. Microbiología y
parasitología humana. 3ª Ed. México: Editorial Médica Panamericana, 2007.