5. Condiciones para el crecimiento microbiano Nutrientes agua
fuente de energa fuentes de C, N, otros elementos micronutrientes,
factores de crecimiento Condicionesde cultivo temperatura pH luz
aireacin actividad de agua potencial redox Crecimiento Medios de
cultivo
6. Factores de crecimiento Microorganismos auto o heterotrfos
pueden requerir pequeas cantidades de ciertos compuestos orgnicos
que no pueden sintetizar y deben incorporarse en los medios *bases
pricas y pirimdicasADN, ARN *aminocidos esencialessntesis proteica
*vitaminascoenzimas
7. Aislar : Es separar un tipo de microorganismo a partir de
una poblacin mixta. En habitats naturales, raramente encontramos a
los microorganismos en cultivo puroAislamiento directo :se logra
directamente a partir de una muestra cuando el o los
microorganismos estn en una proporcin adecuada., se realiza por
estras (agotamiento) con o sin dilucin previa de la muestra (suelo,
alimentos),en medio slidoAislamiento por enriquecimiento :Cuando el
microorganismo que se desea aislar e identificar se encuentra en
baja proporcin en la muestra, se incluye una primera etapa que
consiste en sembrar la muestra en medio lquido. Luego de varios
pasajes se aisla por el mtodo de estras.Aislamiento
8. Clasificacin de los medios de cultivo Segn su naturaleza
fsica * lquidos *slidos- solidificante: agar-agar, silico-gel *
semi-slidos Segn su composicin*definidos o sintticos: composicin
qumica conocida *no definidos o complejos:composicin qumica
nodefinida, enriquecidos con peptonas, extracto decarne, de
levadura, de suelo, sangre
9. Segn su uso en el laboratorio *selectivos o
inhibitorios:mediosque contienen, adems de los nutrientes, ciertas
sustancias que inhiben el desarrollo de algunos microorganismos
permitiendo el crecimiento de otros o cuya composicin permite el
desarrollo de un grupo determinadoEj.agar-antibiticos; agua, sales,
luz, para algas, medios con NaClsuperior a la concentracin
fisiolgica*diferenciales:medios que contienenindicadores para
diferenciar los distintos tipos de microorganismos que puedan
crecer en l. Ej. azcar fermentecible: lactosa, indicador:rojo
neutro
10. Segn su uso en el laboratorio *selectivos o
inhibitorios:mediosque contienen, adems de los nutrientes, ciertas
sustancias que inhiben el desarrollo de algunos microorganismos
permitiendo el crecimiento de otros o cuya composicin permite el
desarrollo de un grupo determinadoEj.agar-antibiticos; agua, sales,
luz, para algas, medios con NaClsuperior a la concentracin
fisiolgica*diferenciales:medios que contienenindicadores para
diferenciar los distintos tipos de microorganismos que puedan
crecer en l. Ej. azcar fermentecible: lactosa, indicador:rojo
neutro
11.
Cultivo en medio lquido
Habitualmente se realiza en tubos o en matraces. El crecimiento
se puede manifestar por enturbiamiento, por formacin de velo o
pelcula, o por sedimento.
Cultivo en medio slido
Puede ser en tubos o placas
a) Tubos con agar inclinado. Para sembrarlos, se mueve el ansa
o la punta suavemente sobre la superficie del agar con un
movimiento en zigzag desde el fondo hasta la parte superior,
cuidando de no daar el agar.
b) Tubos sin inclinar. Se siembran introduciendo una punta en
el centro del agar. Tambin se llama siembra por picadura.
c) Siembra en placas. Puede ser en superficie (por estras o
baado) o incorporada (mezclando el inculo con el agar
semifundido)
12. Aislar : Es separar un tipo de microorganismo a partir de
una poblacin mixta. En habitats naturales, raramente encontramos a
los microorganismos en cultivo puroAislamiento directo :se logra
directamente a partir de una muestra cuando el o los
microorganismos estn en una proporcin adecuada., se realiza por
estras (agotamiento) con o sin dilucin previa de la muestra (suelo,
alimentos),en medio slidoAislamiento por enriquecimiento :Cuando el
microorganismo que se desea aislar e identificar se encuentra en
baja proporcin en la muestra, se incluye una primera etapa que
consiste en sembrar la muestra en medio lquido. Luego de varios
pasajes se aisla por el mtodo de estras.Aislamiento
13.
Las colonias se describen porexamen macroscpicoen funcin del
tamao, la forma, el borde, la elevacin, la transparencia y el
color. Esto resulta a veces muy til en la identificacin
A partir de colonias aisladas en medio de cultivo se realiza
unexamen microscpicoque debe mostrar clulas razonablemente
semejantes respecto al Gram y a la morfologa.
Las colonias aisladas deben aislarse nuevamente en medio no
selectivo por el mtodo de estras. Esto se conoce como
reaislamiento.
membrana contienealto % de cidos grasos insaturados
Sicrtrofos o Sicrfilos facultativos
- rango:0-35C, ptimo 20-30 o C
Pseudomonas- crecen en el refrigerador
Mesfilos- rango: 15-45 C, ptimo: 30-40C
la mayora de los microorganismos (del suelo, aguas,
patgenos)
Termfilos- rango: 40-70C, ptimo de 55-65 o C
membrana contiene alto % de cidos grasos saturados
enzimas estables al calor
Bacillus stearothermophilus , organismos de compostaje
Hipertermfilos- rango: 80-113C, ptimo > 90 o C
Pyrococcus, Pyrodictium(aguas termales)
19.
O xgeno
Clasificacin de los microorganismos segn
el efecto del oxgeno:
Aerobios
obligados : requieren oxgeno (21% o ms)
Ej.Bacillus , hongos, etc.
microaeroflicos : lo requieren pero a niveles menores que
elatmosfrico (5-10%)
Ej.Azospirillum
Anaerobios
facultativos : no requieren oxgeno, pero el desarrollo es mejor
conoxgeno.
Ej. Levaduras,E. coli
aerotolerantes : no son sensibles al oxgeno (crecen en ausencia
opresencia de oxgeno).
Ej.Enterococcus faecalis, Sreptococcus spp.
obligados:no toleran el oxgeno, muere en su presencia
Ej.Methanobacterium, Clostridium
.
20.
tubos con medio de cultivo llenos por completo.
medios con sustancias que reaccionan con el oxgeno y lo
excluyen.
dispositivo especial (cmara anaerbica)
cajas o tubos incubados en recipientes con granos germinados
(cebada, centeno)
Cultivos en anaerobiosis
21. Otros gases N 2 componente principal de de la atmsfera
(78%). Gas inerte: no es usado por la mayora de los organismos, los
que pueden reducir el triple enlace del N 2con la
enzimanitrogenasase denominandiazotrofos o fijadores de N 2y pueden
desarrollarse en ambientes sin N-combinado COtxico para la mayora
de los organismos (cadena respiratoria) puede ser oxidado a CO 2por
algunos microorganismos CH 4 liberado a la atmsfera por
microorganismos metanognicos, gas con efecto invernadero, puede ser
oxidado a CO 2por bacterias metanotrficas CO 2 importante gas,
fuente de carbono para los autotrofos, aerobios y anaerobios,
fotosintticos o quimiosintticos. Muchos hongos lo requieren a
niveles superiores a los atmsfericos, para ciertas sntesis H 2 poco
usado, txico para la mayora de los microorganismos, brinda energa a
bacteriasHydrogenomonas:H 2 +O 2= H 2 0 + ATP
22. pH El pH es la acidez o alcalinidad de una solucin, medida
por el log 1/(H + ) Clasificacin de los microorganismos segn su pH
ptimo Neutrfilo : pH ptimo 7 -Ej.: bacteriaspatgenashumanas.
Acidfilo : pH ptimo7 - Ej.: muchas delas archeobacterias y hongos.
Basfilo : pH ptimo7 - Suelos y aguasricas en carbonatos