diagnósticode procesos respiratorios en bovino
procesos no infecciosos
nutrición
causas predisponentes de manejotemperaturaventilacióndensidad de los animalesestrés por transporteencalostramiento deficiente
procesos infecciosos
bacteriasMycoplasma bovisHistophilus somniPasteurella multocidaMannheimia haemolyticaBibersteinia trehalosi
virusHerpesvirus bovino tipo 1 (IBR)Virus de la diarrea vírica bovina (BVD)Parainfluenza 3 (PI3)Virus sincitial respiratorio bovino (BRSV)Coronavirus bovino
parásitosDictyocaulus vivaparus
cuadro etiológico
Los procesos respiratorios en ganado bovino son patologías multifactoriales en las que están implicados diferentes factores.
Es muy importante realizar un diferencial mediante el análisis laboratorial para detectar los agentes implicados y de esta manera tomar medidas efectivas.
Además del panel diferencial de los agentes más importantes, hay que tener en cuenta otros agentes infecciosos que se han relacionado con procesos respiratorios: virus (adenovirus, influenza, calicivirus, reovirus, rinovirus…), bacterias que pueden actuar como agentes secundarios (Trueperella pyogenes, Escherichia coli, Streptococcus spp., Salmonella spp…) y otros agentes parasitarios (lesiones pulmonares por echinococcosis, ascaridiasis o incluso fasciolosis).
pulmonesse requiere material y conocimientos de necropsia
permite un diagnóstico completo: cultivo microbiológico, real time PCR e histopatología
requiere animales muertos recientemente o sacrificados
el envío de muestras de un único animal puede no ser representativo del grupo
hisopos nasales profundosmuestreo sencillo
diagnóstico: cultivo microbiológico y real time PCR
puede dar un diagnóstico erróneo por aislamiento cepas no patógenas en vías altas
es posible no detectar agentes presentes en pulmón
lavados broncoalveolaresse requiere material específico y personal entrenado
diagnóstico: cultivo microbiológico y real time PCR
aporta información de los agentes presentes en pulmón en animal vivo
permite un estudio más representativo de la explotación a muestrear
sueros sanguíneosse requiere material para extracción de sangre
es un buen sistema de monitorización por seroperfiles (serología)
indica la presencia de anticuerpos, no del agente infeccioso
no se diferencia la respuesta vacunal de la infección natural (excepto en vacunas tipo DIVA)
toma de muestras
técnicas de diagnóstico
cultivo microbiológico
permite la obtención de la cepa para realizar estudios de sensibilidad antibiótica, tipado, autovacunas, etc.
concentración mínima inhibitoria (CMI)
muestra la concentración más pequeña de antibiótico que impide la multiplicación de la bacteria. Nos permite conocer cuál es el antibiótico más efectivo en la dosis adecuada, evitando subdosificar o sobredosificar
antibiograma
realizados mediante la técnica de Kirby Bauer (antibiograma en disco) dónde se indica si una bacteria es sensible, resistente o tiene sensibilidad intermedia frente a un antibiótico
real time PCR
permite confirmar la presencia de virus y bacterias implicadas
histopatología
de interés para valorar la importancia de cada uno de los agentes implicados en el complejo respiratorio bovino
tipado de cepas
se puede realizar el tipado por qPCR tanto de las cepas aisladas como directamente de la muestra obtenida del pulmón. El tipado es de gran interés a la hora de realizar estudios epidemiológicos en la explotación, elección de vacunas o diseños de autovacunas
serología
permite valorar la presencia de anticuerpos como respuesta a la exposición a los agentes infecciosos o vacunaciones preventivas
oferta de diagnóstico
casos clínicos
panel respiratorio bovino
tipado capsular de Pasteurella multocida
identificación de serotipos de Mannheimia haemolytica
panel serología respiratorio
cultivo microbiológico
qPCR: Pasteurella multocida tipos A, B, D, E, F
qPCR: Mannheimia haemolytica serotipos 1, 2 y 6
ELISA: BVD p80, IBR gE, PI3, BRSV, Mycoplasma bovis
qPCR: Pestivirus, IBR, BRSV, Parainfluenza 3, Coronavirus bovino , Mycoplasma bovis, Histophilus somni, Pasteurella multocida, Mannheimia haemolytica, Bibersteinia trehalosiantibiograma de bacterias de interés
caso 1: procesos respiratorios por Pasteurella multocida en bovino de leche
caso 3: proceso mixto vírico y bacteriano en terneras de recría
caso 5: problemas por Histophilus somni en terneros de aptitud cárnica
caso 2: complejo respiratorio en terneros de cebo por Mycoplasma bovis, Pasteurella multocida y BVD
caso 4: procesos respiratorios en novillas
muestras recibidas
un pulmón de un ternero de cuatro días de edad
procesos respiratorios por Pasteurella multocida en bovino de leche
cinco lavados transtraqueales de novillas de leche
caso1cultivo microbiológico
crotal
pulmón
lavado 1
lavado 2
lavado 3
lavado 4
lavado 5
identificación
Pasteurella multocida*
Sin crecimiento
Sin crecimiento
Pasteurella multocida*
Enterobacterias*
Sin crecimiento
diagnóstico solicitado: panel respiratorio bovino
antibiograma: Bacteria y crotal: Pasteurella multocida aislada en Pulmón
Antibiótico Resultado Diámetro (mm) Referencia (mm)
D-Amoxicilina Sensible 34,6 14 21
D-Ampilicina Sensible 27,5 16 17
D-Cloxacilina Sensible 15,7 10 13
D-Penicilina Sensible 29,1 29 29
D-Bacitracina Intermedia 12 8 13
D- Trimetoprim/sulfametoxazol Sensible 23,7 10 16
D-Tetraciclina Resistente 8,3 18 23
C-Apramicina Resistente 11,5 19 23
C-Gentamicina Sensible 18,6 12 16
C-Neomicina Sensible 17,5 12 17
C-Espectinomicina Sensible 17,2 10 14
C-Estreptomicina Resistente 0 11 15
C-Amoxicilina + ácido clavulánico Sensible 31,3 13 18
C-Florfenicol Sensible 27,1 14 19
C-Tianfenicol Resistente 0 12 18
C-Cefalotina Sensible 30,6 14 18
C-Clindamicina Resistente 0 14 21
C-Eritromicina Resistente 0 13 23
C-Gamitromicina Resistente 0 11 15
C-Tilmicosina Resistente 0 10 14
C-Tilosina Resistente 11,7 22 26
B-Ceftiofur Sensible 37,7 17 21
B-Colistina-sulfato Sensible 17,5 8 11
B-Enrofloxacina Intermedia 19,6 16 21
B-Marbofloxacina Sensible 20,5 14 20
histopatología
diagnóstico emitido por Micros Veterinaria
A nivel histológico se comprueba la existencia de una neumonía exudativa aguda, de carácter fibrinoso que se caracteriza por una intensa congestión, con hemorragias, edema y exudado hacia los alveolos de fibrina y abundantes células inflamatorias (linfocitos, neutrófilos y macrófagos, los cuales aparecen en elevada densidad, lo que provoca la distorsión de su morfología, apareciendo como células en “grano de avena”. Mediante la tinción de gram se observan algunas colonias de cocobacilos gram negativos de pequeño tamaño en las áreas lesionadas.
real time PCR
determinaciones
Pestivirus
IBR
BRSV
PI3
Mycoplasma bovis
Histophilus somni
Pasteurella multocida
Mannheimia haemolytica
muestras
P
Neg.
Neg.
Neg.
Neg.
Neg.
Neg.
Positivo (37,05)
Neg.
Lav 1-5
Neg.
Neg.
Neg.
Neg.
Neg.
Neg.
Positivo (23,64)
Neg.
Como ambas muestras fueron
positivas a Pasteurella
multocida se decidió hacer
el tipado capsular
tipado capsular de Pasteurella multocida
comentario del caso
muestras
P
Lav 1-5
cepa P
cepa Lav 3
resultado
Pasteurella multocida capsular tipo B (34,96)
Pasteurella multocida capsular tipo A (23,06)
Pasteurella multocida capsular tipo B
Pasteurella multocida capsular tipo A
ternero: proceso causado por P. multocida serotipo capsular B
aislado en el cultivo e identificado por MALDI-TOF
identificado por qPCR el serotipo capsular en cepa y muestra
implicación de P. multocida en las lesiones confirmada por histopatología
novillas: proceso causado por P. multocida serotipo capsular A
aislado en el cultivo e identificado por MALDI-TOF
identificado por qPCR el serotipo capsular en cepa y muestra
Dentro de las medidas
de tratamiento y control, se recomendó el uso de una autovacuna combinada con ambas cepas de Pasteurella multocida aisladas en esta explotación.
muestras recibidas observaciones macroscópicas
dos fragmentos de pulmón de terneros de 2,5 - 3 meses de edad
fragmento 1: congestión, enfisema y engrosamiento de la pleura
fragmento 2: consolidación rojiza, enfisema, engrosamiento de la pleura y presencia de fibrina cubriendo la superficie
complejo respiratorio en terneros de cebo por Mycoplasma bovis, Pasteurella multocida y BVDcaso2
cultivo microbiológico
crotal
pulmón 1
pulmón 2
identificación
Mycoplasma sp.
Trueperella pyogenes***
Escherichia coli*
Streptococcus sp*
Mycoplasma sp.
Bacillus sp.*
diagnóstico solicitado: panel respiratorio bovino
real time PCR
determinaciones
Pestivirus
IBR
BRSV
PI3
Mycoplasma bovis
Histophilus somni
Pasteurella multocida
Mannheimia haemolytica
muestras
P 1+2
Positivo (27,98)
Neg.
Neg.
Neg.
Positivo (17,57)
Neg.
Positivo (30,88)
Neg.
comentario del caso
agente principal:
Mycoplasma sp. la detección de Mycoplasma bovis en concentración muy alta y el aislamiento en ambos pulmones sugieren que es el principal agente causante del proceso.
otros agentes causales:
BVD (pestivirus) indica una base vírica, por lo que se debe revisar el plan de vacunación y valorar la posible presencia de animales permanentemente infectados (PI).
Trueperella pyogenes se ha aislado en cultivo masivo en uno de los pulmones. Es una bacteria piogénica que actúa de manera secundaria u oportunista. Su presencia en los pulmones es indicativa de la cronicidad del proceso.
Pasteurella multocida se detecta en concentración media-baja, siendo negativo el cultivo. Si bien no es el agente mayoritario, no se puede descartar su participación en el proceso.
Proceso respiratorio causado por varios agentes etiológicos, tanto víricos como bacterianos, de los cuales Mycoplasma bovis es el principal implicado.
muestras recibidas
3 lavados broncoalveolares de terneras de 2 - 4 meses que presentan signos respiratorios
proceso mixto vírico y bacteriano en ternera de recríacaso3
cultivo microbiológico
crotal
lavado 1
lavado 2
lavado 3
identificación
Mycoplasma sp.
Bacillus sp*
Pasteurella multocida*
Staphylococcus coagulasa negativo
Mycoplasma sp.
Pasteurella multocida*
Bacillus sp.*
Enterobacterias*
diagnóstico solicitado: panel respiratorio bovino
antibiograma: Bacteria y crotal: Pasteurella multocida aislada en Lavado 2
Antibiótico Resultado Diámetro (mm) Referencia (mm)
D-Amoxicilina Sensible 31,5 14 21
D-Ampilicina Sensible 32,5 16 17
D-Cloxacilina Sensible 14,3 10 13
D-Penicilina Sensible 34,5 29 29
D-Bacitracina Resistente 0 8 13
D- Trimetoprim/sulfametoxazol Sensible 35,6 10 16
D-Tetraciclina Sensible 34,6 18 23
C-Apramicina Resistente 13,6 19 23
C-Gentamicina Sensible 17,5 12 16
C-Neomicina Sensible 18,7 12 17
C-Espectinomicina Sensible 20,3 10 14
C-Estreptomicina Intermedia 14,8 11 15
C-Amoxicilina + ácido clavulánico Sensible 32,2 13 18
C-Florfenicol Sensible 34,1 14 19
C-Tianfenicol Sensible 37,5 12 18
C-Cefalotina Sensible 33 14 18
C-Clindamicina Resistente 0 14 21
C-Eritromicina Intermedia 20,3 13 23
C-Gamitromicina Sensible 22,7 11 15
C-Tilmicosina Sensible 14,1 10 14
C-Tilosina Resistente 18,1 22 26
B-Ceftiofur Sensible 36,5 17 21
B-Colistina-sulfato Sensible 16,9 8 11
B-Enrofloxacina Sensible 37,7 16 21
B-Marbofloxacina Sensible 35,3 14 20
real time PCR
determinaciones
Pestivirus
IBR
BRSV
PI3
Mycoplasma bovis
Histophilus somni
Pasteurella multocida
Mannheimia haemolytica
muestras
Lav 1-3
Neg.
Neg.
Positivo (22,31)
Neg.
Positivo (23,02)
Neg.
Positivo (27,67)
Positivo (35,12)
comentario del caso
En el caso actual se detectaron los siguientes agentes implicados en el complejo respiratorio bovino:
Virus: BRSV en concentración alta
Bacterias: Mycoplasma bovis en concentración alta Pasteurella multocida en concentración media Mannheimia haemolytica en concentración baja
En conclusión se trata de un proceso mixto con base vírica (BRSV) e implicación bacteriana (principalmente por Mycoplasma bovis).
Se recomendó revisar el protocolo de vacunación frente a agentes víricos e instaurar medidas de control y tratamiento frente a Mycoplasma bovis, Pasteurella multocida y Mannheimia haemolytica.
muestras recibidas
situación de la explotación
5 sueros para estudio serológico completo de novillas con problemas respiratorios
Los problemas se detectan tras el parto, pues no se produce la cantidad de leche esperada.
No responden al tratamiento antibiótico con eritromicina, penicilina y enrofloxacina.
No se detectan problemas en vacas de 2º parto.
Los terneros tienen problemas pero responden bien al tratamiento.
La explotación vacuna frente a IBR con vacuna marcada y frente a enterotoxemia.
procesos respiratorios en novillascaso4
diagnóstico solicitado: panel serológico respiratorio
S1
S2
S3
S4
S5
70% Positivo
41% Positivo
29% Positivo
91% Positivo
23% Neg.
100% Neg.
100% Neg.
100% Neg.
100% Neg.
100% Neg.
81% Neg.
82% Neg.
87% Neg.
100% Neg.
87% Neg.
10% Neg.
18% Neg.
12% Neg.
10% Neg.
16% Neg.
Positivo +++
Positivo +++
Positivo +++
Positivo +
Positivo ++
sueros BRSV BVD p80 IBR gE M. bovis PI3
serología
comentario del caso
En esta ocasión el veterinario responsable sospechaba de un proceso vírico al no haber obtenido respuesta con el tratamiento antibiótico. Puesto que los animales solo estaban vacunados con IBR marcada se realizó el envío de sueros de animales afectados para su valoración.
Los resultados son contundentes mostrando la respuesta serológica de todos los animales frente al virus respiratorio sincitial bovino (BRSV) y Parainfluenza 3 (PI3), indicando la infección de los animales por estos virus. Se descartó la presencia de anticuerpos frente a los siguientes agentes respiratorios: BVD, IBR (anticuerpos frente a virus campo) y Mycoplasma bovis.
Se recomendó la vacunación frente a BRSV y PI3. Se solicitó el envío de muestras de lavados broncoalveolares para valorar la posible participación de otros agentes respiratorios para los que no está disponible el estudio serológico como Histophilus somni, Pasteurella multocida y Mannheimia haemolytica.
Es importante remarcar que la utilidad del estudio serológico está muy limitada por el protocolo vacunal que hayan recibido los animales. En caso de animales vacunados con vacunas no marcadas, no es posible diferenciar entre anticuerpos frente a virus campo o anticuerpos vacunales, siendo el estudio serológico de poco valor diagnóstico.
muestras recibidas
5 hisopos nasales profundos de terneros de 2-3 meses de vida que presentan fiebre, mocos y tos
han sido tratados con tilmicosina vía intramuscular y antiinflamatorios no esteroideos y vacunados frente a BRSV
problemas por Histophilus somni en terneros de aptitud cárnicacaso5
cultivo microbiológico
crotal
hisopo 1
hisopo 2
hisopo 3
hisopo 4
hisopo 5
identificación
Histophilus somni*
Histophilus somni*
Staphylococcus coagulasa negativo*
Bacillus sp.*
Sin crecimiento
Staphylococcus coagulasa negativo*
diagnóstico solicitado: panel respiratorio bovino
antibiograma: Bacteria y crotal: Histophilus somni aislado en Hisopo 2
Antibiótico Resultado Diámetro (mm) Referencia (mm)
D-Amoxicilina Sensible 31,7 14 21
D-Ampilicina Sensible 32,4 16 17
D-Cloxacilina Sensible 27,5 10 13
D-Penicilina Sensible 37,6 29 29
D-Bacitracina Intermedia 9,5 8 13
D- Trimetoprim/sulfametoxazol Sensible 30 10 16
D-Tetraciclina Sensible 25,6 18 23
C-Apramicina Resistente 16,2 19 23
C-Gentamicina Resistente 0 12 16
C-Neomicina Intermedia 12,2 12 17
C-Espectinomicina Resistente 0 10 14
C-Estreptomicina Sensible 17,1 11 15
C-Amoxicilina + ácido clavulánico Sensible 35,5 13 18
C-Florfenicol Sensible 24 14 19
C-Tianfenicol Resistente 0 12 18
C-Cefalotina Sensible 34,3 14 18
C-Clindamicina Resistente 12,5 14 21
C-Eritromicina Intermedia 14 13 23
C-Gamitromicina Intermedia 13,4 11 15
C-Tilmicosina Sensible 20,2 10 14
C-Tilosina Resistente 21,4 22 26
B-Ceftiofur Sensible 36,4 17 21
B-Colistina-sulfato Sensible 19,5 8 11
B-Enrofloxacina Sensible 38 16 21
B-Marbofloxacina Sensible 30,5 14 20
real time PCR
determinaciones
Pestivirus
IBR
BRSV
Parainfluenza 3
Mycoplasma bovis
Histophilus somni
Pasteurella multocida
Mannheimia haemolytica
muestras
His 1-5
Neg.
Neg.
Neg.
Neg.
Neg.
Positivo (30,16)
Neg.
Neg.
comentario del caso
Histophilus somni fue el único agente del complejo respiratorio bovino detectado mediante PCR.
Se consiguió su aislamiento en 2 de las 5 muestras, pudiendo realizar el estudio de sensibilidad antibiótica y conservando la cepa para futuros estudios y/o producción de autovacuna.
Polígono Río Gállego D/850840, San Mateo de Gállego
Zaragoza, España
+34 976 69 45 25
+34 650 16 03 08
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