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2017
TRABAJO PRACTICO 1. Introducción al laboratorio de microbiología. Bioseguridad
Objetivos:
Que el alumno sea capaz de incorporar las nociones de bioseguridad, lavado de manos,
preparación de solución de hipoclorito de sodio, decontaminación de mesadas y desechar
correctamente los residuos producidos.
Introducción
Se entiende por Bioseguridad al conjunto de principios, normas, técnicas y prácticas que
deben aplicarse para la protección del individuo, la comunidad y el medio ambiente, frente
al contacto con agentes que son potencialmente nocivos.
La Bioseguridad se debe pensar como una doctrina de comportamiento destinada a lograr
actitudes y conductas.
Es importante para tal fin, conocer los aspectos fundamentales que estén relacionados con
el cumplimiento de las normas de calidad que tiendan a la protección del personal, del
paciente (si los hubiera), las muestras de los pacientes (que debe tomarse como Única e
irrepetible), de la comunidad y el medio ambiente. Esto implica la adopción sistemática de
una serie de medidas orientadas a reducir o eliminar los riesgos que puedan producir las
actividades que se desarrollan en la institución.
La mayoría de los accidentes se dan por que existen: errores humanos, desconocimiento de
las normas, excesos de confianza, malos hábitos del personal, uso inadecuado de los
equipos de protección.
Las infecciones pueden entrar por:
- Tracto digestivo por ingestión o transferencia de microorganismos desde dedos
contaminados, lapiceras que se apoyadan en superficies contaminadas y se llevan a la boca.
- Mucosas: nasal, conjuntiva, aerosoles y manos contaminadas.
-Piel – vía percutánea: inyección, cortes o escoriaciones.
-Respiratoria: es la más importante. El 80% de las infecciones contraídas en el laboratorio
son de origen aéreo por inhalación de aerosoles que transportan microorganismos (ej:
virus).
Siempre hay que tener en cuenta que la infectividad de un microorganismo depende del
tamaño del inóculo, la susceptibilidad individual, la virulencia del agente y el sitio de
invasión.
Los Equipos de Seguridad- Barrera Primaria: son los elementos de protección personal:
guantes, delantales, botas, respiradores, mascaras faciales, anteojos o antiparras
de seguridad.
Niveles de seguridad. Requerimientos recomendados para los distintos niveles de
bioseguridad en Microbiología. Ver tabla abajo.
NIVEL 1 Agentes para los que no se ha comprobado que produzcan
enfermedad en adultos sanos = Laboratorio de enseñanzas.
NIVEL 2 Agentes asociados a enfermedades humanas de riesgo moderado
para el operador y medio ambiente (transmisión por ingestión,
daño percutáneo, contacto con mucosas)
NIVEL 3 Agentes indígenas o exógenos con potencial de transmisión por
aerosol, causantes de enfermedades graves o letales para
operador y riesgo moderado para el medio ambiente
NIVEL 4 Agentes exóticos que producen enfermedades mortales, que
pueden producir epidermias o de vías de transmisión
desconocidas. Elevado riesgo para el personal y el medio
ambiente
SOLUCIONES DECONTAMINANTES, PREPARACIÓN Y USO. Los desinfectantes químicos se utilizan para decontaminar (=desinfectar) superficies,
ambientes y material de laboratorio que no resista la esterilización en autoclave o por calor
seco.
HIPOCLORITO DE SODIO
El decontaminante más usado en procesos de higiene y desinfección biomédicos es la
lavandina, nombre común del hipoclorito de sodio, un agente químico que es capaz de
eliminar a la mayoría de los microorganismos.
Al diluir la lavandina en agua, se genera el principio activo, el ácido
hipocloroso, en un equilibrio que depende del pH:
NaClO + H2O = NaOH + HClO
Mecanismo de acción: oxida en forma irreversible grupos –S-S- de ciertas enzimas vitales
para los microorganismos inactivándolas. El HClO reacciona con casi cualquier molécula,
consumiéndose, es decir, la solución se agota en su principio activo a medida que actúa, por
esto hay que adecuar la relación entre agente decontaminante y material contaminado. Para
un buen proceso de decontaminación también es necesario utilizar el producto químico con
una concentración y tiempo de contacto adecuados.
USO CORRECTO de la LAVANDINA CONCENTRACIÓN. 1%y al 10%
USO
-Para limpieza de superficies poco contaminadas:
Mesadas
Pisos
Paredes, etc.
-Para decontaminar material delaboratorio muy contaminado:
Jeringas, tubos, etc.
Superficies muy contaminadas.
Cultivos.
PREPARACIÓN 1% = 1/100 = 1 + 99 Partiendo de la solución comercial, tomar 1 ml y llevar a 100 con agua corriente fría. 10% = 1/10 = 1+ 9 Partiendo de la solución comercial (55 g/l de cloro activo), tomar 10 ml y llevar a 100 con
agua corriente fría. Mediante el empleo de elementos no volumétricos, como por ejemplo
un vaso plástico, se agregará una parte de lavandina concentrada más 9 partes de agua.
El volumen a preparar dependerá de la cantidad de material o la superficie a decontaminar.
TIEMPO 30 min. 30 min. (se acostumbra dejar 24 Hs.)
PRECAUCIONES:
Lavandina Diluida -Lavandina Concentrada:
NO usar agua caliente para las diluciones. Las soluciones deben prepararse en el día y no
usarse más allá de las 24 Hs de su preparación.
NUNCA mezclar con detergentes ni con compuestos ácidos, pues al combinarse se
descompone el HClO, perdiendo la acción germicida.
NO usar para decontaminar equipos metálicos, las soluciones de
lavandina son corrosivas.
NO agotar el principio activo porexceso de material.
ASEGURAR el contacto íntimo entre el material y la solución, por ejemplo en el caso de
jeringas y tubos.
Mantener en su envase original bien tapado.
Conservar en lugar fresco y oscuro, pues el paso del tiempo, la luz y las altas temperaturas
inactivan al hipoclorito.
Antes de comenzar el trabajo de laboratorio en microbiología, se prepararán las soluciones
decontaminantes necesarias. La superficie de trabajo debe estar limpia para ser
decontaminada con Solución de lavandina al 1%. Además la mesada debe estar libre de
elementos innecesarios, por esto, la ropa de abrigo, bolsos, carpetas, etc, deben
permanecer SIEMPRE fuera del ambiente de trabajo, evitando también el “transporte” de
agentes biológicos del laboratorio al exterior del mismo.
COMO ACTUAR FRENTE ACCIDENTES :
1. Rotura de recipientes y derrames de material potencialmente
infeccioso (tareas de descontaminación).
-Colocarse las barreras primarias adecuadas (guardapolvos, guantes gruesos resistentes,
calzado protector de goma y, si hiciera falta, protección respiratoria apropiada.
- Cubrir el material derramado y los recipientes rotos, con papel absorbente.
- Cubrirlos con desinfectante y dejar actuar durante el tiempo necesario [solución de
hipoclorito de sodio 10% durante 30 minutos].
- Transcurrido dicho tiempo retirar todo. Manipular los fragmentos de vidrio con pinzas.
- Restregar la zona contaminada, con el desinfectante.
- Descartar los paños o el papel absorbente utilizados para la limpieza como residuo
patológico.
- En caso de contaminación de papeles manuscritos o impresos, en lo posible copiar la
información y descartar los originales como material contaminado.
2. Derrames sobre la mesada de trabajo.
- Avisar de inmediato a todos los presentes y evitar el ingreso de
cualquier persona a la zona afectada.
- Colocarse la protección adecuada (bata y delantal de plástico, máscara respiratoria,
guantes de látex).
- Contener el derrame mediante papel absorbente, polvos (absorbentes sanitarios del tipo de
diatomeas u otros).
-Aplicar el desinfectante desde el borde hacia el centro del derrame [para superficies
metálicas utilizar etanol 70%, para pisos, emplear hipoclorito de sodio 10-20 g/L (1-2%) de
cloro activo] y dejar actuar durante 30 minutos.
-Limpiar con agua y detergente.
-Desinfectar nuevamente.
Si bien la mayoría de los trabajadores de la salud reconoce la importancia del lavado de
manos, la MAYORÍA NO LO PRACTICA!!!
El lavados de manos consiste en un procedimiento que implica unos segundos -minuto
necesarios para una buena antisepsia de manos por frotación que debe realizarse en todos
los ámbitos, y en especial en los lugares de atención primaria (guardias, consultorios) y
centros de internación para prevenir infecciones ( nosocomiales)
Debe ser llevada a cabo con una técnica adecuada y efectiva para ANTES y DESPUES
de las jornadas laborales en particular en determinadas actividades vinculadas a la ámbito
salud y así eliminar algunos microorganismos que pueden ocasionar algún perjuic
ACTIVIDADES DEL TRABAJO PRACTICO N° 1:
OBJETIVOS:
- Evidenciar la importancia del lavado de manos
- Preparación y uso correcto de la solución de
lavandina
MATERIALES:
- Placa de petri
- Agar Nutritivo
- Lavandina comercial
- Jabón (líquido y en pan)
- Alcohol en gel
- Solución iodada
PROCEDIMIENTO:
A) PREPARACIÓN DE LA SOLUCION DE HIPOCLORITO DE SODIO AL 1% Y AL 10%
1% = 1 parte lavadina + 99 partes de agua corriente
10% = 1 parte lavandina + 9 partes de agua corriente
B) LAVADO DE MANOS
1) Dividir la placa de Agar nutritivo a la mitad, y rotulando ANTES Y DESPUES
2) Tocar suavemente el agar con las yemas de los dedos (sin lavado previo) el sector
rotulado “ANTES”
3) A continuación cada grupo procederá al Lavado de manos con una de las siguientes
opciones:
- Jabón líquido
- Jabón en pan
- Alcohol en gel
- Solución iodada
4) Tocar nuevamente la placa de agar nutritivo en la sección rotulada “DESPUES”
con las yemas de los dedos limpios
5) Observación a las 24 hs de las placas y concluir los resultados obtenidos
C) EVALUAR CONTAMINACION AMBIENTAL 1) Colocar una placa de agar nutritivo abierta sobre la mesada durante todo el
desarrollo del trabajo práctico
2) Se cierra la misma al finalizar el TP y se incubará con el resto de las placas
utilizadas por 24 hs
3) Evaluación de los resultados