TRABAJO DE INVESTIGACIÓN II BIOQUIMICA

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

TRABAJO DE INVESTIGACIÓN II

CUANTIFICACIÓN DE METANOL POR CROMATOGRAFÍA DE GASES

EN VINOS TINTOS EXPENDIDOS EN LA CIUDAD DE TRUJILLO

PARA OPTAR EL GRADO ACADÉMICO DE:

BACHILLER

EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA

AUTORAS:

CIEZA VALLEJOS, Joselyne Aurora.

ZAVALETA ARAUJO, Liz Romeli.

ASESOR:

Mg. SEGUNDO MANUEL MIRANDA LEYVA

CO-ASESOR:

Mg. ROGER ANTONIO RENGIFO PENADILLO

Trujillo – Perú

2010

Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación

Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/

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DEDICATORIA



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Joselyne

A nuestro señor Dios por darnos la vida,

guiarnos e iluminarnos a lo largo de nuestra

vida, porque todo lo que tengo y todo lo que

poseo es tuyo.

A mi madre y a mi hermano por creer en mí y

por su incondicional apoyo e invalorable

sacrificio por hacer que se cumplan todas mis

metas y sueños.

A mi padre quien siempre confió en mí y que

desde el cielo guía mis pasos y que es la

fuerza que me empuja a salir a delante cada

día

A mis amigos que me apoyaron en todo el

transcurso de la carrera de los cuales siempre

llevare los mejores recuerdos

Y en especial

A Fredy por su amor, paciencia y apoyo



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Liz

Con infinito respeto y gratitud a mis amados

padres: GUADALUPE y JUSTO, por su amor

incondicional y apoyo constante.

A mi hermano WILDER, mi abuelita NAZARIA y

mi tía EPIFANIA, por estar siempre conmigo en

los momentos más importantes de mi vida.

A mis amigos y profesores, con los que

compartí bellos momentos y de quienes

guardo gratos recuerdos.



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AGRADECIMIENTO



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A NUESTRO ASESOR:

Mg. SEGUNDO MANUEL MIRANDA LEYVA

Quien nos brindó su valiosa orientación e incondicional apoyo para el

desarrollo y culminación del presente trabajo.

Y A NUESTRO CO-ASESOR:

Mg. ROGER ANTONIO RENGIFO PENADILLO

Por su apoyo, conocimiento y experiencia hizo posible la culminación de

este trabajo.

Para Uds. nuestro más sincero agradecimiento.

Joselyne y Liz



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PRESENTACIÓN

SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO:

De conformidad con las disposiciones del reglamento interno referente a grados y títulos de

la facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, nos es grato

someter a vuestra consideración y elevado criterio el presente Informe de Investigación tipo

II.

“Cuantificación de Metanol por Cromatografía de Gases en vinos tintos expendidos

en la Ciudad de Trujillo”

Es propia la oportunidad para manifestar nuestro más sincero reconocimiento y gratitud a

nuestra Alma Mater y toda su plana docente y administrativa que con su capacidad y

buena voluntad han contribuido decididamente a nuestra formación profesional.

Dejamos a vuestra consideración Señores Miembros del Jurado la calificación del Presente

trabajo.

Trujillo, 25 de Agosto del 2010.

Cieza Vallejos, Joselyne Aurora Zavaleta Araujo, Liz Romeli



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JURADO DICTAMINADOR

PRESIDENTE : Dr. EDUARDO IVAÑEZ.

MIEMBRO : Mg. SEGUNDO MANUEL MIRANDA LEYVA

MIEMBRO : Mg. ROGER ANTONIO RENGIFO PENADILLOS.



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ÍNDICE

Página

RESUMEN.................................................................................................................. i

ABSTRACT………………………………………………………………………… ii

INTRODUCCIÓN..................................................................................................... 1

MATERIAL Y MÉTODO………………………………..…………………………. 5

RESULTADOS………………………………………………..……………..………. 8

DISCUSIÓN………………………………………………………….......................... 12

CONCLUSIONES…………………………………………………...………….......... 15

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………………………………………. 16

ANEXOS…………………………………………………………………………......... 20



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RESUMEN

El vino tinto ha sido reconocido como un alimento funcional con beneficios

fisiológicos para la salud humana. Las propiedades medicinales atribuidas a los

vinos son: actúa como antioxidante, reduce el riesgo de cáncer, previene la

formación de aterosclerosis, tiene acción antiséptica y antiviral. Entre los alcoholes

presentes en el vino son: etanol, metanol e isopropanol. La presencia de metanol en

el vino ha llamado la atención y controversia. Esta es la resultante de la degradación

de las sustancias pécticas presentes en la uva por las enzimas. El metanol no es

perceptible cuando se analizan las características organolépticas, sin embargo,

cuando se ingiere en grandes cantidades puede causar graves daños a la salud de los

consumidores, que van desde náuseas, vómitos y dolor de cabeza a la ceguera y la

muerte. El límite máximo de metanol en vinos tintos establecido es 400 mg/L

(40,00% P/V) mediante resolución enológica 19/2004 de la Organización

Internacional de la Viña y el Vino (OIV). El objetivo fue cuantificar el contenido de

metanol en los vinos tintos expendidos en la ciudad de Trujillo, por medio de

cromatografía de gases, se analizaron 20 muestras, por triplicado. La técnica

utilizada fue la cromatografía de gases con columna capilar HP-FFAP

(Polietilenglicol) de 50 m x 0,20 mm x 0,33 µm y detector de ionización de llama

con He como gas portador. En cuanto a los resultados, se encontró metanol en las

muestras 5, 11 y 16, cuyos porcentajes son: 4.95%, 9.18% y 8.11% respectivamente.

Palabras Claves: Vinos, metanol, cromatografía de gases.



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ABSTRACT

Red wine has been recognized as a functional food with physiological benefits for

human health. The medicinal properties attributed to wines are: acts as an

antioxidant, reduces the risk of cancer, prevents the formation of atherosclerosis,

has antiseptic and antiviral. Among the alcohols present in wine are: ethanol,

methanol and isopropanol. The presence of methanol in wine has drawn attention

and controversy. This is the result of the degradation of pectic substances present in

grapes by enzymes. Methanol is not perceptible organoleptic characteristics are,

however, when ingested in large amounts can cause serious damage to the health of

consumers, ranging from nausea, vomiting and headache to blindness and death.

The ceiling established methanol in red wines is 400 mg / L (40,00% P/V) by order

oenological 19/2004 of the International Organization of Vine and Wine (OIV). The

objective was to quantify the methanol content in red wines sold at the city of

Trujillo, through gas chromatography, 20 samples were analyzed in triplicate. The

technique used was gas chromatography with capillary column HP-FFAP

(polyethylene glycol) of 50 m x 0.20 mm x 0.33 μm and a flame ionization detector

with helium as carrier gas. In terms of results, methanol was found in samples 5, 11

and 16, whose shares are 4.95%, 9.18% and 8.11% respectively.

Key words: Wine, methanol, gas chromatography.



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INTRODUCCIÓN

El vino es la bebida que resulta de la fermentación alcohólica del zumo de

uvas y por extensión la obtenida a partir de otros frutos o materiales vegetales. Su

elaboración consta de 3 fases principales: obtención del mosto, su fermentación y

por último su conservación y envejecimiento. Para producir vino tinto la uva sufre

una fermentación previa, antes de ser procesada, lo que diferencia al proceso de

fabricación del vino blanco, para lo cual se lo procesa directamente. Modificando la

fermentación se puede hacer variar la composición del vino, obteniéndose otros

tipos además del tinto y blanco (vinos secos) como los vinos dulces o los vinos

espumosos (Champaña). El vino se compone principalmente de agua (85%), y de

otros elementos como azúcares, polifenoles, fenoles, proteínas y vitaminas. La

principal fuente de calorías del vino es, sobre todo, su grado alcohólico. Como regla

general, una copa de vino contendría entre 80 y 100 calorías. En cuanto a las

vitaminas, a menudo olvidamos que el vino, al provenir de las uvas, conserva las

características de esta fruta 1, 2, 3, 4.

El vino tinto es reconocido como un alimento funcional por tener beneficio

fisiológico para la salud humana. Son muchos los estudios que se han llevado a cabo

para demostrar que el consumo moderado de vino tiene un efecto beneficioso para

nuestra salud, desde la antigüedad se relacionaban vino con salud y longevidad. Es

importante recordar, sin embargo, que estos beneficios surgen sólo si esta bebida se

consume con moderación, el vino puede actuar como equilibrante nervioso, ya que

tiene propiedades euforizantes muy útiles a la hora de combatir la depresión

nerviosa; además cuenta con propiedades digestivas, es rico en vitamina B2, lo que

permite eliminar las toxinas y la regeneración del hígado; efectos laxantes, por los

taninos, que actúan directamente sobre la fibra intestinal y evitan el estreñimiento;

actúan como antioxidante, disminuye el riesgo de cáncer, impide la formación de

arteriosclerosis, tiene acción antiséptica y antivírica. Estos efectos profilácticos y

protectores se deben a la presencia de componentes fenólicos, oligoelementos y

alcohol 2, 3, 5, 6.



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El proceso para convertir el mosto o zumo de uva en vino es la fermentación.

Este es un proceso químico que consiste básicamente en que las levaduras

transforman el azúcar del mosto en alcohol y otros compuestos. Los vinos pueden

tener también otros componentes como consecuencia de la maduración en madera

de roble y de su envejecimiento en botellas de vidrio, donde el vino sigue

transformándose. Entre los alcoholes presentes en los vinos tenemos: etanol,

metanol e isopropanol. La presencia del metanol en el vino ha despertado interés y

polémica. Este es resultado de la hidrólisis y desmetilación de la pectina por la

enzima pectina metilesterasa. Su presencia y cantidad están relacionadas con tiempo

de reposo, es decir, el momento en que la pectina de la película entra en contacto

con pectina metilesterasa, liberando metanol. Debido a este factor, los vinos tintos

tienen una mayor concentración de metanol que los vinos blancos, producto de la

degradación de sustancias pécticas presentes en la uva por la acción de la enzima,

siendo la cantidad liberada relacionada con la variedad, la cantidad de sustancias

pécticas en la uva y el tiempo de maceración 5, 7, 8.

La vía más frecuente de absorción de metanol en una intoxicación aguda es

la digestiva. La dosis letal varía entre 20 y 100 mL aunque algunos autores informan

dosis letales de 240 mL. La muerte por metanol va siempre precedida de ceguera.

Se sabe que incluso 15 mL de metanol han causado ceguera y el responsable de ello

es el formaldehido. El metanol no presenta características organolépticas

perceptibles cuando está presente, pero cuando es ingerido en grandes cantidades

podrá ocasionar serios daños a la salud. De acuerdo a la dosis absorbida, los

síntomas que se presentan son los siguientes: en forma leve, sensación de nauseas,

molestias epigástricas y cefaleas; si el tiempo de absorción es de algunas horas se

presenta visión borrosa; en forma moderada, se producen vómitos, taquicardia y

depresión del sistema nervioso central, si se produce el cuadro de embriaguez, es

poco intenso y corto en su duración, la piel está fría y sudorosa, la visión es borrosa

y hay taquipnea; en forma grave, el paciente está en coma y presenta acidosis

metabólica, la respiración es superficial y rápida, el color de la piel y las mucosas

es cianótico. Las dificultades para respirar pueden llegar al edema agudo de pulmón,



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la orina y el aliento tienen olor a formaldehido, se presenta edema cerebral; coma y

a veces convulsiones, las intoxicaciones graves presentan insuficiencia renal aguda

5, 7, 9.

En los vinos, la determinación de metanol rara vez es necesaria, porque está

presente en pequeñas cantidades. El límite máximo de metanol en vinos tintos era

de 300 mg/L y actualmente es de 400 mg/L mediante resolución enológica 19/2004

de la Organización Internacional de la Viña y el Vino (OIV). Este incremento se

justificó porque la autorización del uso del dimetilbicarbonato (DMDC) puede

conllevar un aumento del nivel de metanol en los vinos. Sin embargo en los países

tradicionales en la viticultura y enología, los niveles de metanol tienen entre 0.036 y

0.35 g/L 7, 10.

Las intoxicaciones por bebidas alcohólicas adulteradas con metanol, son

graves debido a que produce alta mortalidad y secuelas invalidantes. Las secuelas

suelen ocurrir como brotes de tipo epidémico en “forma masiva”; algunos casos

reportados fueron Atlanta (1951) con whisky mezclado con metanol se presentaron

323 casos de los cuales 41 murieron¸ Bombay (1998): 97 casos, Estonia (2001): 147

pacientes, San Salvador (2000-2001) más de 100 muertos, Nicaragua (2009) se

registró un muerto y uno los casos más sonados fue el escándalo del vino adulterado

con metanol en Italia que provocó una auténtica psicosis en todo el país, cuando por

su causa se contabilizaron once muertes y varias decenas de personas gravemente

intoxicadas en Roma en 1986. En el Perú se presentaron 3 casos de intoxicación en

Huaral registrándose dos muertos en el 2009, también en el Callao murieron ocho

personas, luego de ingerir bebidas preparadas a base de alcohol industrial en

diversas cantinas en Marzo del 201011, 12, 13.

Las bebidas alcohólicas son las de mayor demanda y consumo a nivel

mundial, ya que cada día aumentan los consumidores de estas bebidas de todo tipo,

donde el contenido alcohólico es elevado. El intenso consumo y generación de

ingresos que este tipo de industria genera, ha provocado que en muchos lugares del



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mundo, se manejen de forma casera para producir bebidas con alto grado alcohólico

a bajo precio. Esto como toda obra fuera de las normas establecidas, crea una serie

de complicaciones que van desde financieras y legales, hasta las de salud, ya que al

no producirse dentro de compañías confiables que cuentan con estándares de

calidad, se elaboran productos que atentan contra la salud y la vida de las personas

que las consumen, por la presencia de metanol, como producto de la fermentación o

como producto adulterante.

En este trabajo se dio respuesta a la siguiente interrogante: ¿Cuál es la

concentración de Metanol determinada por Cromatografía de Gases en Vinos Tintos

expendidos en la ciudad de Trujillo?

En el presente trabajo de investigación se cuantificó metanol en los vinos tintos

expendidos en la ciudad de Trujillo, por medio de cromatografía de gases. Se

encontró que el 15% del producto expendido en el Mercado Zonal Palermo de la

ciudad de Trujillo tiene metanol, a la concentración promedio de 7.27% P/V

(mg/100 mL).



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MATERIAL Y MÉTODO

1. MATERIAL

1.1. Muestra:

Constituida por 20 botellas de vinos tintos adquiridas en el Mercado Zonal Palermo:

1. Vino Vencendores (Vino Oporto).

2. Vino Bailetti (Vino Borgoña).

3. Vino San Eusebio (Vino Oporto).

4. Vino Cataluña (Vino Borgoña Especial semi seco).

5. Vino Don Pancho (Vino Dulce).

6. Vino Bailetti (Vino Borgoña Cartavio).

7. Vino Bailetti (Vino Borgoña).

8. Vino Di Barolo (Vino Borgoña Semi seco).

9. Vino Don Salvattore (Vino Tinto Semi seco).

10. Vino Bernina ( Vino oporto generoso).

11. Vino Malbec (Viñas Lindero).

12. Vino Sol de Oro (Vino Borgoña).

13. Vino Venecia (Vino Borgoña semi-seco).

14. Vino Continental (Vino Tinto).

15. Vino San Alfredo (Vino Borgoña).

16. Vino Uvita (Vino tinto).

17. Vino Sol de Oro (Vino Borgoña de Cascas).

18. Vino Cataluña (Vino Borgoña Afrutado).

19. Vino Don Francisco de Carbajal (Vino tinto semi seco).

20. Vino San Alfredo (Vino Borgoña).



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1.2. Material de laboratorio:

Material de vidrio de uso común en el laboratorio.

1.3. Equipos:

Cromatógrafo de gases “Agilent Technologies 7890A” equipado con horno de

temperatura programable, con columna capilar HP-FFAP (Polietilenglicol) de

50m x 0,20 mm x 0,33 µm y detector FID.

Equipo de Micro destilación simple “Marca Pyrex”.

1.4. Reactivos:

Metanol grado HPLC.

2. MÉTODO 8

Destilación Simple.

Fundamento:

La destilación simple es una operación en la cual se produce la vaporización de un

material por la aplicación de calor; el método es empleado en la industria para llevar a

cabo separaciones parciales de los componentes más volátiles de mezclas de líquidos

miscibles.

Determinación de Metanol por Cromatografía de Gases

Fundamento: Es un proceso mediante el cual una mezcla es separada en sus

componentes por medio de una fase gaseosa móvil que pasa a través de material

adsorbente sólido fijo. El movimiento cinético molecular continuamente intercambia

las moléculas del soluto entre las dos fases. Si para un soluto en particular, la

distribución favorece a la fase móvil, las moléculas gastarían la mayor parte de su

tiempo migrando con el fluido, y podrían ser transportadas lejos de las otras moléculas

que son mas retenidas por la fase estacionaria.



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2.1. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Se destiló 1 mL de muestra a 90°C y el destilado obtenido se llevó a volumen de

1 mL con agua destilada, luego se filtró a través de filtros de nylon de 0.45µm de

diámetro de poro y se colocó el filtrado en viales y se procedió al análisis

cromatográfico. Cada una de las muestras se analizó por triplicado.

2.2. PREPARACIÓN DEL ESTANDÁR

Se midió 1 mL de metanol grado HPLC depositándolo en una fiola de 25 mL y se

llevó a volumen con agua destilada, de esta solución se midió 3 mL y se aforó a 25

mL con agua destilada, luego se filtró a través de filtros de nylon de 0.45 µm de

diámetro de poro y se colocó el filtrado en viales para su análisis.

2.3. CONDICIONES CROMATOGRAFICAS

Gas de arrastre nitrógeno 25 mL/min, temperatura inicial 50ºC, rampa de

temperatura 10ºC/min hasta 80ºC, temperatura del inyector y del detector 300ºC.

2.4. CALCULO

%100)/(% xFdMxmLmgxCcSTDándarÁreadelEst

estraÁreadelaMuMETANOL

Donde:

Cc STD: Concentración del estándar.

FdM: Factor de dilución de la muestra.

3. ANÁLISIS ESTADISTICO 14

Se aplicó la estadística descriptiva, para reportar valores promedios.



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RESULTADOS

Tabla 1: Área del Estándar de Metanol grado HPLC

Estándar

Tiempo

de

retención

Área

Metanol grado HPLC

6,361 117,98612

6,369 118,93008

6,370 116,87705

Promedio 6,3667 117,93108



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Tabla 2: Tiempos de retención, Áreas y % de Metanol obtenido en las muestras

Muestras

Tiempo

de

Retención

Área

Tiempo

de

Retención

Área

Tiempo

de

Retención

Área

% de

Metanol en

la muestra

M01 6,241 3,44455 - - 6,909 1622,29980

M02 6,240 3,01877 - - 6,918 2590,08162

M03 6,241 0,96930 - - 6,923 3204,59155

M04 6,240 2,34891 - - 6,914 2198,92797

M05 6,240 7,12683 6,386 1,54073 6,920 2780,29183 4,95

M06 6,240 2,25608 - - 6,910 1589,95150

M07 6,240 0,95562 - - 6,918 2362,72400

M08 6,240 2,33318 - - 6,914 2021,65332

M09 6,240 7,35832 - - 6,926 3311,83325

M10 6,240 1,52700 - - 6,911 1647,39897

M11 6,243 2,57250 6,396 2,85625 6,922 3028,38261 9,18

M12 - - - - 6,916 2566,14608

M13 6,240 1,52886 - - 6,926 3427,31454

M14 6,239 1,28541 - - 6,913 1947,82210

M15 6,240 1,00705 - - 6,908 1319,10417

M16 6,241 2,24422 6,390 2,62705 6,924 3071,42570 8,44

M17 - - - - 6,903 757,40890

M18 6,241 1,63339 - - 6,906 1148,40731

M19 6,241 1,87006 - - 6,906 1098,22795

M20 6,241 2,26110 - - 6,907 1220,32092



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Gráfico 1: Porcentaje de Muestras que presentan Metanol.

Con Metanol

15%

Sin Metanol

85%

Porcentaje de Muestras que presentan

Metanol



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Gráfico 2: Porcentaje (%) de Metanol obtenido en las muestras.

0

5

10

15

20

25

30

35

40

Límite Máximo

permitido de

Metanol

M05 M11 M16

40,00 %

4,95 %

9,17 %7,68 %

Po

rcen

taje

( %

)

Muestras

Porcentaje de Metanol presente en las

Muestras



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DISCUSIÓN

El consumo de vino ha formado parte de la cultura humana desde sus

albores. A lo largo de sus diversas etapas evolutivas, el hombre lo ha considerado

un placer para su paladar, una ayuda para la convivencia y también un elemento con

propiedades que benefician su salud. El vino por ser producto de la fermentación

presenta una gran cantidad de componentes entre ellos, metanol 1, 3, 8.

El metanol se debe a la degradación de la pectina, un polisacárido presente en la

película de la uva. La pectina es una macromolécula formada por la asociación de

cientos de moléculas de ácido galacturónico, durante el proceso de fermentación la

enzima pectina metilesterasa actúa sobre la pectina liberando metanol 5, 7, 15, 16.

En este trabajo la determinación de metanol en las muestras se realizó

mediante análisis cromatográfico que nos permitió obtener una amplia información

cualitativa y cuantitativa con detector de ionización a la llama (FID), adecuado para

determinar los analitos, la única información cualitativa que nos puede ofrecer este

sistema es el tiempo de retención del analito, el cual, sólo puede ser estable

controlando bien las condiciones cromatográficas como: flujo, temperatura, tipo de

fase estacionaria en el caso de gases o composición química de la fase móvil; y esto

hace más sencillos los cálculos, ya que se puede realizar relaciones directas de peso

de muestra, lo cual contribuye a que este sea el detector ideal para el análisis

cuantitativo 17, 18.

Se determinó la concentración de metanol de las muestras utilizando una

solución estándar de Metanol grado HPLC, se obtuvieron el tiempo de retención (tR)

y área que se muestran en la Tabla 1, lo cual nos permitió identificar la presencia de

metanol y su cuantificación. En la Tabla 2 presenta los resultados obtenidos de las

20 muestras analizadas, de las cuales la muestra 05, presenta un tR de 6,386 y un

Área de 1,54073; la muestra 11, presenta un tR de 6,396 y un Área de 2,85821 y la

muestra 16, presenta un tR de 6,390 y un Área de 2,62702; los que se corresponde

con el tR del estándar de metanol: 6,367 (Tabla 1), lo que nos indica que dichas

muestras contienen metanol. El límite máximo de metanol en vinos tintos



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establecido mediante resolución enológica 19/2004 de la Organización Internacional

de la Viña y el Vino (OIV) es de 400 mg/L que equivale al 40,00% (mg/100 mL).

En el grafico 1 se muestra el porcentaje de las muestras en las que se encontró

presencia de metanol, mientras que el gráfico 2 se muestra una comparación entre

el límite máximo permitido y el porcentaje de metanol que se obtuvo en las

muestras 5, 11 y 16, cuyos porcentajes son: 4.95%, 9.18% y 8.11% respectivamente.

Las intoxicaciones producidas por metanol son consecuencia de la

adulteración de bebidas alcohólicas o por deficiencias en el proceso de destilación,

lo que ha dado lugar a intoxicaciones masivas. A su vez, la intoxicación se puede

dar con fines suicidas y en los alcohólicos crónicos que se ven obligados a consumir

esta sustancia por falta de dinero. Su amplio uso en la industria aumenta el riesgo de

exposición ocupacional por inhalación de sus vapores o la absorción por piel. La

principal causa de intoxicación aguda en la población general adulta ocurre

principalmente por el consumo de licor adulterado; no obstante, su venta libre, fácil

acceso, bajo costo (es tres veces más económico que el alcohol etílico) y capacidad

de producir similares efectos embriagantes al etanol, hacen de él una sustancia ideal

para la adulteración de las bebidas alcohólicas 12, 19, 20, 21.

Debido a la alta solubilidad en agua y afinidad a los lípidos, el metanol se

absorbe rápidamente por el tracto gastrointestinal y también puede hacerlo por piel

y vía respiratoria. Una vez absorbido se distribuye rápidamente por los tejidos. Se

pueden encontrar niveles de metanol en sangre 30 a 90 minutos después de ser

ingerido y su vida media se ha calculado en promedio de 2 a 24 horas, pero en

presencia de etanol puede prolongarse hasta 30 o 52 horas. El metanol es eliminado

en un 3 a 10% sin modificación por orina y en menor proporción por el aire

espirado. Las reacciones metabólicas de metanol son catalizadas por la enzima

alcohol deshidrogenasa del hígado 19, 22.

La mayor parte del metanol que ingresa al organismo es metabolizado en el hígado

en un 90 a 95%, es oxidado por la enzima alcohol deshidrogenasa para ser

transformado en formaldehido, el cual es rápidamente convertido en ácido fórmico



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por la enzima aldehído deshidrogenasa. Éste último se convertirá en anhídrido

carbónico (C02) y agua mediante una oxidación. El formaldehído y el ácido fórmico

son los metabolitos causantes del cuadro clínico presente en la intoxicación. La

administración de folatos durante el tratamiento ejerce una acción protectora,

estimulando la transformación del ácido fórmico en C02. Se ha identificado al ácido

fórmico como el metabolito responsable de los efectos tóxicos del metanol, el cual

inhibe la citocromo oxidasa, interfiriendo así directamente con el transporte de

electrones en la cadena respiratoria. Existe evidencia de que este ácido inhibe la

función mitocondrial en la retina y aumenta el estrés oxidativo 19, 21, 23.

En el proceso metabólico del metanol se produce formaldehido y ácido

fórmico. Estos compuestos pueden producir acidosis metabólica, lesiones oculares,

la degeneración del parénquima del hígado, los riñones y el corazón, cambios en la

piel, el enfisema y la disfunción cerebral progresiva, y necrosis pancreática. Los

síntomas de la intoxicación por metanol en el ser humano dependen de la cantidad

ingerida y oscila entre el dolor de cabeza, náuseas y vómitos e incluso la ceguera y

la muerte 19, 21, 22, 23.

La susceptibilidad a los efectos tóxicos del metanol es variable, pero la ingesta de

una pequeña cantidad (15 a 30 mL al 100%), puede dar lugar a una intoxicación

grave. La dosis tóxica de metanol presenta variaciones individuales; para un adulto

es de 60-250 mL de metanol al 40%, aunque se ha reportado sobrevida con 500-600

mL y muerte con tan sólo 15 mL. El etanol, cuando se consume al mismo tiempo

con metanol, reduce los efectos tóxicos de éste. El mecanismo de esta protección se

explica por la capacidad del etanol para inhibir la oxidación metabólica de metanol.

Además del daño a la salud causado por el consumo de alcohol, también hay que

considerar la posibilidad de adulteración y/o contaminación de estas bebidas 19, 20, 23.



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CONCLUSIÓN

Se encontró que el 15% de muestras de vino tinto expendidas en la Ciudad de

Trujillo (Mercado Zonal Palermo); contienen metanol en concentraciones menores

al límite máximo permitido, que es 400 mg/L (40,00% P/V).



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ANEXOS



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ANEXO 1. CÁLCULOS

Concentración del estándar

𝐶𝑐 𝑆𝑇𝐷 = 𝜌𝐶𝐻3𝑂𝐻𝑥 𝑉𝑆𝑇𝐷 𝑥 𝐷𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑆𝑇𝐷 𝑥 % 𝑃𝑢𝑟𝑒𝑧𝑎

𝐶𝑐 𝑆𝑇𝐷 = 790 𝑥1

25𝑥

3

25𝑥 0.999 = 3.788208 𝑚𝑔/𝑚𝐿

Donde:


ρCH3OH: Densidad de Metanol (790mg/mL).

VSTD: Volumen tomado del estándar.

% Pureza: 99.9%

Concentración de la Muestra

%100)/(% xFdMxmLmgxCcSTDándarÁreadelEst

estraÁreadelaMuMETANOL

Donde:


FdM: Factor de dilución de la muestra.



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Promedio ( X ):

𝑿 =𝒙𝟏 + 𝒙𝟐 + ⋯ + 𝒙𝒏

𝒏

Donde:

n = número de muestras



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Anexo 2: Tablas de Tiempos de retención (tR) y áreas

obtenidas en cada una de las muestras.

Muestra 01 tR Área tR Área

Vino

Vencedores

M1a 6,241 3,04686 6,909 1602,91455

M1b 6,241 3,04570 6,909 1605,14990

M1c 6,240 4,24108 6,909 1658,83496

M promedio 6,241 3,44455 6,909 1622,29980


Vino

Borgoña

Bailetti

M2a 6,240 2,80034 6,917 2493,45264

M2b 6,241 3,06542 6,918 2615,90234

M2c 6,240 3,19056 6,919 2660,88989

M promedio 6,240 3,01877 6,918 2590,08162


Vino

Oporto

San

Eusebio

M3a 6,242 0,87174 6,923 3156,02124

M3b 6,240 1,08339 6,925 3428,21973

M3c 6,240 0,95276 6,922 3029,53369

M promedio 6,241 0,96930 6,923 3204,59155


Vino

Borgoña

Especial

Cataluña

M4a 6,240 1,91473 6,913 2058,03856

M4b 6,240 2,55185 6,915 2244,02319

M4c 6,240 2,58015 6,915 2294,72217

M promedio 6,240 2,34891 6,914 2198,92797



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ICA

Muestra 05 tR Área tR Área tR Área

Vino

Tinto

dulce Don

Pancho

M5a 6,240 7,47101 6,386 1,47619 6,921 2949,73730

M5b 6,240 6,94993 6,386 1,62056 6,920 2780,13062

M5c 6,240 6,95954 6,385 1,52543 6,918 2611,00757

M promedio 6,240 7,12683 6,386 1,54073 6,920 2780,29183


Vino

Borgoña

Cartavio

Bailetti

M6a 6,241 2,44327 6,913 1791,55664

M6b 6,240 2,03964 6,908 1414,62427

M6c 6,240 2,28532 6,910 1563.67358

M promedio 6.240 2.25608 6.910 1589.95150


Vino

Borgoña

Bailetti

M7a 6,239 0,84622 6,914 1988,84875

M7b 6,240 1,07999 6,921 2724,40186

M7c 6,240 0,94066 6,918 2374,92139

M promedio 6,240 0,95562 6,918 2362,72400



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E FARMACIA

Y B

IOQUIM

ICA


Vino

Borgoña

Di Barolo

M8a 4,689 1,14913 6,241 2,38612 6,915 2069,30835

M8b 4,691 1,04033 6,241 2,30815 6,915 2062,55615

M8c 4,687 1,05426 6,239 2,30527 6,913 1933,09546

M promedio 4,689 1,08124 6,240 2,33318 6,914 2021,65332


Vino Semi

seco

Don

Salvattore

M9a 6,240 7,53252 6,925 3267,08618

M9b 6,240 7,34684 6,927 3401,32739

M9c 6,240 7,19560 6,927 3267,08618

M promedio 6,240 7,35832 6,926 3311,83325


Vino

Oporto

Bernina

M10a 6,240 1,91106 6,911 1678,50208

M10b 6,240 1,34222 6,909 1474,96350

M10c 6,240 1,32771 6,912 1788,73132

M promedio 6,240 1,52700 6,911 1647,39897



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E FARMACIA

Y B

IOQUIM

ICA


Vino

Malbec

M11a 6,243 2,57022 6,396 2,85804 6,922 3028,38257

M11b 6,243 2,57288 6,396 2,85273 6,922 3028,38380

M11c 6,243 2,57439 6,396 2,85799 6,922 3028,38145

M promedio 6,243 2,57250 6,396 2,85625 6,922 3028,38261

Muestra 12 tR Área

Vino Borgoña

semi seco Sol de

Oro

M12a 6,911 1702,63013

M12b 6,924 3125,10254

M12c 6,922 2870,70557

M promedio 6,919 2566,14608


Vino

Borgoña

Venecia

M13a 6,240 1,51807 6,926 3405,28345

M13b 6,240 1,49856 6,928 3604,41431

M13c 6,240 1,56994 6,925 3272,24585

M promedio 6,240 1,52886 6,926 3427,31454



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E FARMACIA

Y B

IOQUIM

ICA


Vino semi

seco

Continental

M14a 6,239 1,25078 6,914 2085,88892

M14b 6,240 1,30382 6,913 1897,64526

M14c 6,239 1,30164 6,912 1859,93213

M promedio 6,239 1,28541 6,913 1947,82210


Vino

Borgoña

San

Alfredo

M15a 6,240 0,98001 6,907 1214,78796

M15b 6,240 0,97564 6,909 1340,27478

M15c 6,240 1,06550 6,909 1402,24976

M promedio 6,240 1,00705 6,908 1319,10417


Vino

Uvita

M16a 6,240 1,98146 6,391 2,15288 6,926 2591,60783

M16b 6,241 2,37213 6,391 2,86549 6,926 3311,33423

M16c 6,240 1,98841 6,389 2,15017 6,919 2591,60864

M promedio 6,240 2,11400 6,390 2,38951 6,924 2831,51690



BIBLIO

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E FARMACIA

Y B

IOQUIM

ICA

Muestra 17 tR Área

Vino

Borgoña

dulce Sol

de Oro

M17a 6,902 664,51703

M17b 6,903 793,31049

M17c 6,903 814,39917

M promedio 6,903 757,40890


Vino

Cataluña

Borgoña

Afrutado

M18a 6,242 1,44018 6,905 1072,56860

M18b 6,240 1,71441 6,905 1106,65637

M18c 6,241 1,74559 6,907 1265,99695

M promedio 6,241 1,63339 6,906 1148,40731


Vino Don

Francisco

de

Carbajal

M19a 6,240 1,99667 6,906 1175,08936

M19b 6,242 1,81917 6,906 1038,82874

M19c 6,241 1,79433 6,906 1080,76575

M promedio 6,241 1,87006 6,906 1098,22795


Vino

Borgoña

San

Alfredo

M20a 6,242 1,95643 6,907 1124,80139

M20b 6,240 2,31583 6,906 1195,65942

M20c 6,240 2,51103 6,908 1340,50195

M promedio 6,241 2,26110 6,907 1220,32092



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ICA

Anexo 3: CROMATOGRAMAS DELAS

MUESTRAS



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Y B

IOQUIM

ICA

Anexo 4

Equipo de Microdestilación Simple.



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ICA

Cromatógrafo de Gases.



TRABAJO DE INVESTIGACIÓN II BIOQUIMICA

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