En 2008, se estimaba que haba 9,4 millones de nuevos casos de la tuberculosis (TB) a nivel mundial, con la mayora de los casos ocurren en pases con recursos limitados o escasos recursos en Asia (55%) y frica (30%). Uno de los factores ms importantes que influyen en la corriente Epidemia de tuberculosis en entornos con recursos limitados es la pobreza. que es estrechamente relacionado con la desnutricin, el hacinamiento, la falta de acceso a los servicios de salud gratuitos . Las tasas de mortalidad son ms altas para el VIH-TB pacientes coinfectados que estn en tratamiento contra la tuberculosis, pero no la terapia antirretroviral. Adems, el control de la tuberculosis en todo el mundo sufre de la falta de una la vacuna totalmente efectiva, la vacuna actual, Mycobacterium bovis BCG, no impide que la tuberculosis pulmonar en adultos, pero sigue siendo til, ya que protege a los bebs a partir de formas graves de la enfermedad. terapia de 9 meses con rifampicina (RIF), isoniacida (INH), pirazinamida (PZA), y etambutol (EMB) o estreptomicina (SM)

Retos en el diagnstico de laboratorio de la tuberculosis Programas de garanta de calidad, incluyendo el control de

calidad y las evaluaciones externas de calidad (PEEC). En ms pases bien desarrollados, la tuberculosis diagnstico

por frotis microscopio se confirma generalmente por la cultura, seguido por el identificacin de la cepa MTBC y pruebas de sensibilidad a los medicamentos (DST). Sin embargo, estos ensayos requieren incubacin prolongada veces y son significativamente ms caros que los frotis, requiriendo equipo especializado, personal altamente capacitado, y un suministro confiable de agua y electricidad.

Desafos de diagnsticos de laboratorio precisos de la tuberculosis en Pacientes VIH-positivos el examen microscpico de esputo para bacilos cido

alcohol resistentes (BAAR) es altamente sensible en los individuos VIH-positivos, ya que la tuberculosis se presenta de manera diferente en los pacientes coinfectado. En la actualidad, directrices de la OMS exigen la cultura

como realizado sobre el VIH-infectados con frotis de esputo negativo pacientes con una sospecha clnica de tuberculosis, sin embargo, estas pruebas son ms costosa de realizar y requieren una infraestructura mejorada y personal de laboratorio experto.

La deteccin de multirresistente y la extensamenteLa tuberculosis farmacorresistente La tuberculosis multirresistente (MDR-TB) se define como

resistencia tanto a INH y RIF, y extensivamente resistente a los medicamentos la tuberculosis (XDR-TB) se define como la MDR-TB, con ms resistencia a cualquier fluoroquinolona y por lo menos a una de tres medicamentos inyectables utilizados para el tratamiento de la tuberculosis: capreomicina, kanamicina, o amikacina . Basado

en encuestas realizadas en ms de 110 ajustes en la ltima dcada, la OMS estima que en 2007, casi medio milln de casos de tuberculosis fueron MDR, dando lugar a 130.000 muertes. Adems, las estimaciones de la XDR-TB fueron alrededor de 50.000, la mayora de los cuales fueron mortales.

HIBRIDACIN DE CIDOS NUCLECOS En funcin de la morfologa de la colonia, en caso de

aislamiento en medio slido, o de la morfologa microscpica en medio lquido, se escoge una de las sondas Accuprobe (GenProbe). La tcnica de hibridacin de cidos nuclecos en medio lquido es sencilla y rpida y se adapta a cualquier laboratorio. La experiencia demuestra que son reacciones especficas y sensibles, por lo que sustituyen a las dems tcnicas de identificacin convencional en aquellas especies para las que se dispone de sondas. Actualmente, estn comercializadas sondas especficas para los complejos M. tuberculosis y M. avium, y para Mycobacterium intracellulare, M. avium, Mycobacterium gordonae y M. kansasii. Si bien estas sondas cubren la mayora de aislamientos con importancia clnica son necesarias otras tcnicas alternativas de identificacin para el resto de especies.

ENSAYOS DE FLUJO LATERAL Se han desarrollado pruebas rpidas de

inmunocromatografia de flujo lateral, tres son los productos que se venden en el mercado: la tuberculosis capilia de diagnostico de ensayo rpido, la SD bioline TB AG MPT64 y el BD MGIT TBC. Estas pruebas se basan en la deteccin de la protena MPT64 MTB

ENSAYO DE SONDAS DE LNEA Recientemente se han salido al mercado PCR kits para

identificacin de Micobacterium previamente cultivas en medio liquido o solido. Una ventaja de este mtodo es la posibilidad de identificar micobacterias de muestras mixtas o contaminadas. Este mtodo se basa en la hibridacin de cidos nuclecos amplificados por PCR a sondas de oligonucletidos. Por ejemplo: El ensayo de Inno-Lipa Micobacterias (Innogenetics NV, Gante, Blgica) se dirige a la regin de ADN 16S-23S espaciador para la identificacin de las micobacterias.

SECUENCIACIN DE ADN Permite una identificacin rpida y exacta

de micobacterias, este mtodo todava no es prctico para su uso en los centros de salud.

INMUNODIAGNSTICO DE TUBERCULOSISSerologa Se

basa en una reaccin antgenoanticuerpo que es con un cromgeno o una reaccin fluorescente. La sensibilidad de estas pruebas varia 10 a 90 % y de especificidad 50 a 95%.

ENSAYO DE LIBERACIN DE INTERFERN GAMMA Los ensayos de liberacin de interfern gamma (en ocasiones

denominadas pruebas ELISPOT) son pruebas sanguneas que pueden determinar si una persona ha estado expuesta a tuberculosis (TB). La prueba implica la incubacin de muestras sanguneas con protenas especficas de tuberculosis y despus medir si las clulas-T de la sangre segregan el interfern gamma para combatir los microbios, algo que debera ocurrir si alguien ha estado expuesto previamente a la tuberculosis. Hace ya varios aos que en Europa y Amrica del Norte estn disponibles dos formas comerciales de la prueba, TB SPOT.TB y Quantiferon-TB Gold.

Programas Nacionales Externos de Evaluacin de Calidad de la baciloscopia AFB (bacilo cido alcohol resistente)

Para garantizar la calidad baciloscopia realizada en cada sitio, es esencial para cada pas para ofrecer y apoyar un funcionamiento de calidad externo de evaluacin (EQA). Los programas EQA idealmente incluir tres componentes: verificacin de los frotis, vigilancia de obras, y la prueba de panel de competencia externa (6); sin embargo, el establecimiento y administracin de estos programas en pases de escasos recursos a menudo son un reto.

La Sociedad Americana de Microbiologa (ASM) ha trabajado en Botswana, en colaboracin con el CDC / BOTUSA y el Ministerio de Salud de Botswana para proporcionar asistencia tcnica para la elaboracin y presentacin de un programa de capacitacin para la microscopia de la baciloscopia y fortalecer su actual plan nacional de EQA (NEQAS).

En Botswana, la red de laboratorios de TB se compone de aproximadamente 45 laboratorios de microscopa de frotis ubicados en privado, el gobierno, mina, y hospitales misioneros. La ASM ha trabajado con la referencia nacional de laboratorios de tuberculosis de la unidad (NTRL) EQA para finalizar todas las tcnicas y procedimientos de los sistemas de formularios, presentacin de informes y opiniones, y las plantillas de anlisis para las pruebas de pruebas de competencia, las visitas de supervisin, y volver a verificar.

Los miembros de la unidad de personal Botswana NTRL EQA fueron entrenados en los procedimientos antes descritos y ha desarrollado un Plan de NEQAS Anual para 2008 y 2009. Los objetivos del plan eran para distribuir una ronda de pruebas de panel para todos los laboratorios, reanudar las visitas anuales de supervisin a todos los laboratorios, y establecer un programa de verificacin de las laminas de bacilo alcohol resistente. En 2008 y 2009, ms del 95% de los laboratorios recibieron los resultados de las prueba de panel de competencia externa, y el porcentaje de laboratorios que recibieron una calificacin aprobatoria (_80%) se increment del 73% al 100% durante el perodo de 2 aos para que todos los laboratorios logr un puntaje de aprobacin en el ao 2009.

A pesar de las visitas de supervisin no se produjeron en todos los laboratorios, la unidad de EQA visit ms del doble de laboratorios en el ao 2009 respecto a 2008. El nuevo programa de verificacin tambin fue probado con xito en cinco instalaciones durante el ao 2009. El aumento de los puntajes de las pruebas de aptitud indica que estos componentes EQA, complementados con cursos de actualizacin del laboratorio de personal tcnico y supervisores, han impactado positivamente en la calidad del desempeo de la baciloscopia en Botswana. . Desafos tales como la escasez de personal para la unidad de NTRL EQA, problemas de suministro de adquisicin, y la necesidad de una mejor coordinacin con el PNCT Botswana resaltan la importancia de la colaboracin entre los actores clave y socios.

Hay pocas oportunidades para el cultivo de la TB y la sensibilidad a los medicamentos EQA prueba en los pases de escasos recursos, aunque la red de la OMS tiene un programa de eficiencia de los antibiograma para los laboratorios miembros. Las

dificultades para ampliar este servicio a nivel mundial implica mucha mano de obra los trabajos preparatorios y el alto costo y los requisitos estrictos de embalaje para el envo de drogas cepas resistentes de la tuberculosis.

Fecha de recogida y la fecha de recepcin en el laboratorio. La presentacin oportuna de muestras tendr un impacto positivo integridad de la muestra. Determinar el porcentaje de la bacilos alcohol resistentes-positivos frotis reportados y el porcentaje de baciloscopia positiva y cultivo-positive, as como muestras con baciloscopia negativa y cultivo positivo. Las tasas de positividad de la baciloscopia, entre los sospechosos de padecer tuberculosis por lo general oscilan entre el 5 y el 20%.

Determinar

el porcentaje de especmenes reportados como contaminados. Las tasas de contaminacin de 3 a 5% para medios slidos y menos del 10% para medios lquidos se consideran generalmente aceptable. Las mayores tasas de contaminacin puede indicar el procesamiento incompleto, mientras que las tasas de menos del 3% puede indicar procedimientos de procesamiento excesivamente duras .Otro indicador importante es si la contaminacin se ve en medios slidos o lquidos o ambos.

Determinar

el tiempo de entrega de frotis, cultivo y antibiograma. La informacin oportuna de los resultados es esencial para asegurar la pronta iniciacin de la terapia para el beneficio del paciente y para reducir la transmisin de la enfermedad.

Indicadores

estndar de tiempo de entrega debe basarse en los mtodos de uso en cada laboratorio.