4.- RECONOCIMIENTO DEL COLESTEROL

INTRODUCCIÓN AL COLESTEROLEl colesterol es una sustancia cerosa, de tipo grasosa, que existe naturalmente en todas las partes del cuerpo. El cuerpo necesita determinada cantidad de colesterol para funcionar adecuadamente. Pero el exceso de colesterol en la sangre, combinado con otras sustancias, puede adherirse a las paredes de las arterias.

4.- RECONOCIMIENTO DEL COLESTEROL

a) Reacción de SALKOVSKY. b) Reacción de LIEBERMAN – BURKHARDT.A continuación explicaremos cada reacción.

FUNDAMENTO: El colesterol por acción de agentes deshidratantes como el ácido sulfúrico y anhídrido acético se transforma en colesterileno, compuesto de dobles enlaces conjugados que presenta color.

Como sabemos el colesterol es una sustancia no coloreada, por lo que resulta difícil poder realizar su caracterización. Para este experimento usamos técnicas colorimétricas, con la finalidad de poder agregar grupos cromóforos y poder adquirir una coloración específica para su análisis.

a) REACCIÓN DE SALKOVSKY. A unos de los tubos agregue:• Agregamos 1 mg de muestra de colesterol disolverlo en 1 ml de CHCl3

(cloroformo) y H2SO4 concentrado, mezcle suavemente y deje separar las capas, en la capa superior que contienen cloroformo (previamente agregado).

2 13 Resultados: aparecerá color rojo y en la inferior un color rojo amarillento con fluorescencia verde.

B) REACCIÓN DE LIEBERMAN – BURKHARDT Añadir 10 gotas de anhídrido acético y 2 gotas de H2SO4 concentrado, mezclar cuidadosamente. Observe los cambios de coloración que se suceden.

LIEBERMAN-BURCHARD :Es un reactivo utilizado en un ensayo colorimétrico para detectar el colesterol, lo que da un color verde intenso. Este color comienza como un color rosa violáceo y progresa a través de un verde claro y luego de color verde muy oscuro. El color es debido al grupo hidroxilo (-OH) de colesterol reaccionar con los reactivos y el aumento de la conjugación de la instauración en el anillo fusionado adyacente. Puesto que este ensayo utiliza anhídrido acético y acido sulfúrico como reactivos , se debe tener precaución para no recibir quemaduras graves.

Resultados:• En los dos tubos da positiva la reacción ya

que en ambos se da la presencia de colesterol.

• La oxidación del ion carbonio por el SO2 produce un acido colesta-hexano-sulfonico, produciendo la tonalidad verdosa oscura.

PROCEDIMIENTO:En un tubo de ensayo colocar 1ml de anhídrido acético , 1 ml de CHCl3 (cloroformo) y 2 gotas de H2SO4 concentrado, mezcle suavemente .Luego agregamos la solución de la muestra ( colesterol) .*En este experimento haremos la comparación con la muestra biológica de un paciente.

MUESTRA BIOLÓGICA 1 2