NOVEDADES EN LA DETECCIÓN DEMUTACIONES DE BRCA 1 y 2

DRA. CARMEN PINGARRÓNSANTOFÍMIA

Jornadas de Gabinete Médico Velazquez 2016

DRA. CARMEN PINGARRÓNSANTOFÍMIA

Jornadas de Gabinete Médico Velazquez 2016

Medicina Predictiva .Definición

Medicina Predictiva : es la medicina que se haespecializado en el análisis genético dediferentes patologías , a través de los testgenómicos,con la finalidad de saber quéindividuos estaran predispuestos a padecerdeterminadas patologías, y asi , poderadelantarnos, a su aparición

Frecuencia del cáncer de Mamay del cáncer de Ovario

El cáncer de mama es el cáncer más frecuente,sobre todo por debajo de los 40 años. Afectaal 12% de la población general.•1 de cada 8 mujeres tendrá un cáncer demama.•De ellas, sabemos que el 70-80% sonespontáneos, y el 20-25% son heredados.

El cáncer de ovario, es el 5º cáncer enfrecuencia en mujeres. Supone el 1,4% decánceres de la población general.•Afecta a 1 de cada 70-80 mujeres.•De ellas el 85-95% son espontáneos y el 5-15% son heredados.

Mutaciones de BRCA 1 y 2

• Son los factores de riesgomás significativos parapadecer cáncer de mamay cáncer de ovario.

• BRCA 1 Y 2 fuerondescubiertos en los años94 y 95, en 17q y 13 q

• Herencia autosómicadominante

• Función reparadora delDNA

Incremento del riesgo de cáncer demama y ovario debido a mutaciones

de BRCA

Prevalencia deBRCA 1 ó 2 :1/400Graficas del Royal College ofObstetricians & GynecologistScientific impact paper Nº48February 2015

Incremento del riesgo de cáncer demama y ovarios en mutaciones de

BRCA 1 y 2 según la edad

¿ A qué cánceres predisponen BRCA1 y 2 ?

• Cáncer de mama• Cáncer de ovarios• Cáncer de trompas• Cáncer de peritoneo• Cáncer de páncreas• Cáncer de próstata

Mary-claire King

2014

Mutaciones BRCA heredadas

King et Al. Population based screening for BRCA-1 and BRCA-2,2014 Lasker Award, JAMA; 2014

Mutaciones de BRCA 1 y 2

• Se conocen cientos (BREASTCANCER INFORMATION CORE)

• Inserciones y Delecciones• Variación del número de copias• SPLICING ( Alteraciones en la

eliminación de INTRONES)• Duplicaciones• Alteraciones en el

reordenamiento de grandeszonas

• Variantes de significado incierto

Según la Sociedad Española de Oncología Médica, los criterios de selección serían pacientes para el estudio de losgenes BRCA 1 y BRCA 2:

Independientemente de la historia familiar:

Pacientes con cáncer de mama y cáncer de ovarios,SINCRÓNICO o METACRÓNICO

Pacientes de 30 años o menos con cáncer de mama.

Pacientes con menos de 40 años con cáncer de mamabilateral

Criterios de Selección según la SEOM

Familias con dos miembros afectos con cáncer de mama y/o cáncer de ovarios y almenos una de las siguientes características:

Varón con cáncer de mama

Uno de ellos es un cáncer de ovario, cáncer tubárico ocáncer primario peritoneal

Ambos casos diagnosticados en menores de 50 años

Familias con tres o más individuos con cáncer de mama y/o cáncer de ovario en lamisma rama de la familia

Criterios de Selección según la SEOM

NGS : Next Generation Sequencing

Tecnica másavanzadaactualmente queutiliza lasecuenciaciónmasiva enparalelo depróximageneración

VENTAJAS DE NGS

• NGS. Realiza secuenciación completa deambos genes independientemente de lapredisposicion familiar y del área geográfica.

• Rápido. Resultados en 2 semanas• Fiable : acreditado por la CE y por estandares

suizos• Barato ( 1 / 4-5 NGS)• Sensibilidad y especificidad del 99%

Serenity• Secuenciación de los genes

BRCA1 y BRCA2 completos• Detecta todas las variantes

patogénicas Interpretaciónprecisa de los resultados

• La bioinformática másavanzada

• Toma de muestra de ADN porfrotis bucal

• Procesos certificados• La más alta precisión• Resultados en 2 semanas• Calidad suiza

Modo de empleo

Tubo con HISOPO

Formulario de solicitud deprueba (TRF)

SERENITY

Preparación para NGS

• Los fragmentos generados se transforman enfragmentos con capacidad para ser Secuenciados:“librería” de secuenciación.

Ej. Fragmentos más cortos con extremoscomplentarios al soporte de secuenciación (IonChips).

• A estos fragmentos se unen adaptadores específicosque permiten reconocer la secuencia

• Amplificación por PCR

Procedimiento

Método SerenitySecuenciación de las regiones BRCA1/2 con IonTorrent PGM11

11 Tarabeux J et al., Eur J Hum Genet. 2014 Apr;22(4):535-4112 Ratajska M et al., J Appl Genet. 2014 Nov 113 Feliubadaló L et al., Eur J Hum Genet. 2013 Aug;21(8):864-70

14 Michils G et al., J Mol Diagn. 2012 Nov;14(6):623-30

Análisis bioinformático y detección de variantes: Sophia Genetics

Procedimiento

Resultados de SERENITY

• Variante patogénicadetectada

• No se detecta variantepatogénica

• Variante de significadoincierto

SerenityBRCA1 and BRCA2 Genes Sequencing Report

™

No Pathogenic Variant(s) Detected

Patient information Sample Information

Name: Curnia MariaDate of Birth: Not specifiedPatient ID: AC0002141Doctor's name: Oliver JuriedReason for performing Serenity: Patient familyclinical history of cancer

Order ID: OR00215Sample ID: 1502TKMOL200000Type of sample: Buccal swabDNA Sample Collection Date: Not specifiedLaboratory Reception Date: Not specified

Results and interpretation

Report Date: Not specified

Results

Gene Variant* Exon Protein Variation type Interpretation

BRCA1 - - - - -

BRCA2 - - - - -

*only pathogenic, likely pathogenic and of unknown significance variants are reported

Interpretation

The analysis did not reveal any variation classified as pathogenous, likely pathogenous or of unknown significancebased on the current scientific knowledge.

These results should be interpreted according to the patient’s clinical context and family history during a geneticcounselling.

Geneticist signature

Geneticist: Patrick Perrin, MD, FAMH, GLN: 7601000861252

Genoma Laboratory: Genoma S.A., Chemin des Aulx, 12, 1228 Plan-les-Ouates, Geneva, Switzerland, +41 58 1000 100Laboratory Registered in Switzerland under the number: 7601002154628Director: Thomas Rio Frio, Ph.D

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TARGET DE SERENITYElaborando protocolos con la SEGO

1. Todas las mujeres con Ca. mama y/o Ca. de ovario.(con independencia de su historia familiar). Las Brca+ soncandidatas a mastectomia, no a cirugía conservadora.2.A pacientes con antecedentes familiares , cualesquieraque sean, de los cánceres Brca dependientes.3.Pacientes en tratamiento por Ca. de ovario epitelial dealto grado. A las Brca + que son respondedoras atratamientos con cisplatino, se benefician de mayorintervalo de respuesta si se tratan con Olapariv.4.Pacientes Braca 1y 2 con cáncer de mama respondenmejor a quimioterapia con inhibidores de la PARP5.Seleccionar portadoras para DGP (diagnóstico genéticopreimplantacional)

Consejo genético

• Actualmente existen 3alternativas:

1. La vigilancia2. La quimioprevención3. La cirugía

Vigilancia en el cáncer de mama

En el cáncer de mama , lavigilancia se realizaalternando lamamografía y la RMNcada 6 meses y con laautoexploración mensual

Vigilancia en el cáncer de ovarios

• En el caso del cáncer deovarios , la vigilancia serealiza con ecografíavaginal con dopplercolor y con detección delmarcador Ca.125

• Combinar con EH 4 yalgoritmo ROMA (Edad,estatus menopausico, Ca125 , EH 4 )

Tasa de supervivencia al cáncer de mama a 5años

Aunque la vigilancia nose contempla como unabuena opción, ayuda atener un diagnósticomás temprano ,consiguiendo asímayores tasas desupervivencia.

Quimioprevención en cáncer demama

Para el cáncer demama, se usan losserms, tamoxifeno yraloxifeno

Quimioprevención en cáncer deovarios

En cuanto al cáncerde ovario laprevención conanticonceptivosutilizados durantemás de 6 años pordebajo de los 30 añosreducen hasta el 50%

Cirugia profiláctica

Se contemplan 2 tipos de cirugíapreventiva:• Salpingooforectomía

bilateral: Reduce el riesgo decáncer de mama en un 50% y decáncer de ovario en un 90%

• Mastectomía bilateralseguida de reconstruccióninmediata: Reduce el riesgo decáncer de mama en un 85-100%

Si combinamos ambas ténicas lasupervivencia es mayor quecualquiera de las dos de formaaislada

HT

Importante

• Explicar implicaciones delresultado positivo

• Firma de consentimientoinformado

• Recepción de resultados con apoyodel equipo de genetistas y asesoresde genoma

• Ampliacion de indicaciones• +mujeres con ca de mama y/o de

ovarios• +mujeres con antecedentes

familiares de ca. Mama y/o ovarios• Diagnostico preimplantacional

Conclusión

Los avances tecnológicos enMedicina Predictiva yRegenerativa nos permitendisponer de los test decribado más avanzados, conunos resultados rápidos,precisos, y fiables, que nospermiten ya ir entrando en lamedicina del Siglo XXI