Micobacterias No Tuberculosas

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Universidad Nacional Experimental “Francisco de Miranda” Área: Ciencias de la Salud Programa de Medicina Unidad Curricular: Microbiología II Micobacterias No Tuberculosas. Enfermedad de Hansen. Leptospirosis Prof. Rosaura Hernández. Bachilleres: Reyes Idalys Rosario Rosángel Santa Ana de Coro, 2013.

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Características microbiologicas y epidemiologicas de las principales micobacterias no tuberculosas. Diagnostico microbiologico.

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Universidad Nacional Experimental“Francisco de Miranda”

Área: Ciencias de la SaludPrograma de Medicina

Unidad Curricular: Microbiología II

Micobacterias No Tuberculosas. Enfermedad de Hansen.

Leptospirosis

Prof. Rosaura Hernández. Bachilleres:

Reyes IdalysRosario Rosángel

Santa Ana de Coro, 2013.

Page 2: Micobacterias No Tuberculosas

MICOBACTERIAS NO TUBERCULOSAS

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Micobacterias

Myces- hongo y Backterium- pequeña varilla

Bacilos aeróbicos de 0.2 a 06 x1 um, inmóviles y no esporulado, rectos o ligeramente curvos, a veces ramificados, que pueden presentar crecimiento filamentosos, no posen flagelos ni capsula.

Micrografía de M. tuberculosis.es.wikipedia.org

Grisel Rodríguez Cuns. Género Mycobacterium. www.educa2.madrid.org/cms_tools/.../23.-%20Micobacterias.pdf

Page 4: Micobacterias No Tuberculosas

TaxonomíaDominio Bacteria

Filum Actinobacteria

Orden Actynomicetales

Suborden Corynebacterineae

Familia Mycobacteriaceae

Genero Mycobacterium

Especies MNT, M. tuberculosis, M. leprae

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Micobacterias NO Tuberculosas (MNT)

Especies de micobacterias diferentes de los integrantes del complejo M.

tuberculosis y M. leprae.

Sinonimias:Micobacterias Atípicas Micobacterias anormalesMicobacterias anônimasMicobacterias diferentes a tuberculosis (MOTT)Micobacterias oportunistas

Anthony S. Fauci, Eugene Braunwald, Dennis L. Kasper, Stephen L. Hauser, Dan L. Longo, J. Larry Jameson, and Joseph Loscalzo, Eds..(2009). Harrison

Principios de medicina interna. Mexico. McGraw –Hill Interamericana.

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Micobacterias NO Tuberculosas (MNT)

Propiedades Biológicas:

• Alto contenido G+C en su ADN

• MNT de interés clínico generalmente tienen crecimiento lento

• Requerimientos: carbono (glicerol), nitrógeno (amonio o aminoácidos) y sales minerales.

• Temperatura optima de crecimiento: suele ser de 35-37º C.

http://www.seime.org/ documentos/ protocolos /microbiología/cap9a.htm

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Micobacterias NO Tuberculosas (MNT)

Propiedades Biológicas:• Aerobios estrictos.

• Inmóviles, sin flagelo ni capsula

• Grampositivas

• Resistencia a: ácidos, álcalis, determinados desinfectantes químicos.

• Acido alcohol resistentes

• Pared celular rica en lípidos

http://www.seime.org/ documentos/ protocolos /microbiología/cap9a.htm

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Micobacterias NO Tuberculosas (MNT)

Pared celular:

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Micobacterias NO Tuberculosas (MNT)Factores inherentes al hospedador que

favorecen infecciones por MNT:

Ambientales

• Edad• Alcoholismo, tabaquismo y

drogadicción• Profesión u ocupaciónPacientes

con alteraciones

inmunológicas

• Posterior a EPOC (FQ, asma)• Inmunosuprimidos (VIH-SIDA)• Enfermedades autoinmunes (LES)Sobrevivient

es con enfermedade

s debilitantes

• Cáncer, diabetes, trasplantes, leucemia

Tratamientos con cortico esteroides

Pacientes sin alteraciones

inmunológicas

• Traumas, inyecciones con soluciones contaminadas, tratamientos estéticos

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Micobacterias NO Tuberculosas (MNT)Clasificación

Se han descrito mas de 125 especies que pueden clasificarse de múltiples maneras desde hace años:

Según la velocidad de crecimiento• Lento >7 días• Rápido <7 días

Morfología y pigmentación• No cromógenas• Escotocromógen

os• Fotocromógenos

MNT patógenas en Humanos• 1º grupo:

estrictos• 2º grupo:

potenciales• 3º grupo:

Saprofitas

repositorio.espe.edu.ec/bitstream/21000/687/1/T-ESPE-020344.pdf

Page 11: Micobacterias No Tuberculosas

Micobacterias NO Tuberculosas (MNT)

ClasificaciónClasificación de Runyon (1959):

http://www.seimc.org/documentos/protocolos/microbiologia/cap9a.htm

Page 12: Micobacterias No Tuberculosas

Patogenia

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Patogenia

Page 14: Micobacterias No Tuberculosas

Micobacterias No Tuberculosasde importancia clínica

Page 15: Micobacterias No Tuberculosas

Comunes Ocasionales Probables

Page 16: Micobacterias No Tuberculosas

Micobacterias No Tuberculosasde importancia clínica

Localizacion Agente etiológico Cuadro clínico

Broncopulmonar

M. KansasiiM. XenopiM. szulgaiMAC

Igual a tuberculosis

Ganglionar

M. ScrofulaceumMAC

Adenitis supura profunda y linfáticos

generalizados

CutáneaM. UlceransM. marinum

Ulceras tropicales, pequeñas lesiones

tórpidas

OsteoarticularMACM. scrofulaceum

Huesos largos planos

Generalizadas MACM. kansasii Sepsis

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Complejo M. avium-intracelulare

M. avium, se reconocen 4 subespecies: avium, paratuberculosis, silvaticum y hominissuis.

Mayormente en infecciones respiratorias por micobacteria en pacientes con inmunodeficiencias.

MICROBIOLOGÍA: Bacilos inmóviles, aerobios, no

formadores de esporas. Colonias pequeñas, lisas,

traslucidas u opacas, no cromógenas.

Crecimiento lento en medios solido (1-3 semanas)

Pueden cultivarse en medios líquidos

Acido alcohol resistentes no tuberculosos.http://www.seimc.org/documentos/protocolos/microbiologia/cap9a.htm

Castellanos Rizaldos, E. (2010). Caracterización Molecular de aislados de Mycobacterium avium subespecie paratuberculosis. Universidad Complutense de Madrid

Page 18: Micobacterias No Tuberculosas

Complejo M. avium-intracelulare

SÍNDROMES IMPORTANTES:- neuropatía, generalmente en

inmunocompetentes- Infección diseminada,

habitualmente en pacientes con VIH

- Linfadenitis cervical.- Con menos frecuencia, piel.

EPIDEMIOLOGIA: Distribución ubicua en la naturaleza Transmisión: aérea o digestiva Transmisión humano-humano o animal –humano, no demostrada. Posible predisposición genética para DMAC Prevalencia en pacientes con infección avanzada por VIH, 15-

25% Ocurre por infección primaria y no por reactivación

http://www.seimc.org/documentos/protocolos/microbiologia/cap9a.htmCastellanos Rizaldos, E. (2010). Caracterización Molecular de aislados de Mycobacterium avium subespecie

paratuberculosis. Universidad Complutense de Madrid

Page 19: Micobacterias No Tuberculosas

M. kansasii

MICROBIOLOGÍA:

Micobacteria de crecimiento lento

Generalmente fotocromogena

Temperatura optima de crecimiento: 37ºC

Bacilos largos y gruesos teñidos irregularmente

Colonias ásperas o suaves con bordes irregulares

Hábitat: se presume en agua de los acueductos, el

suelo y los alimentos

Bioquímica: catalasa, ureasa, nitrato reductasa e

hidrolisis de Tween 80 positivos.

http://www.seimc.org/documentos/protocolos/microbiologia/cap9a.htm

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M. kansasii

MANIFESTACIONES CLÍNICAS:

Curso clínico similar al la infección por M.

tuberculosis.

Síntomas mas frecuentes: disnea y fiebre

Otros síntomas: sudores nocturnos, fatiga,

escalofríos, dolores abdominales, perdida de masa

muscular y diarrea.

Hallazgos anatomopatologicos: lesiones cavitarias

de paredes finas.

http://www.seimc.org/documentos/protocolos/microbiologia/cap9a.htm

Page 21: Micobacterias No Tuberculosas

M. kansasii

EPIDEMIOLOGIA: Aislado en: suelo, agua, productos animales y alimentos

diversos Transmisión interhumana no demostrada, y reservorio

desconocido. Incidencia variable en función de la región geográfica y el

paciente Sureste de España:

- 2,7 casos por millón de habitantes al año- incrementa 571,4 casos en pacientes VIH positivos

Paris:- 5 casos /1.000.000 de habs.

California:- 24 casos por 1.000.000 habs- 1.500 casos por 1.000.000 en pacientes VIH positivo

Sudáfrica (mineros): incidencia de 0.10/100 casos/año que se elevan a 0.32/100 casos/año en pacientes VIH positivo

Republica checa: 343 casos/1.000.000 habs al año.http://www.micromadrid.org/pdf/tomo1_tema30-31.pdf

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M. MarinumMICROBIOLOGÍA: Bacteria de vida libre que causa infecciones oportunistas en

humanos Móviles en macrófagos y con capacidad para esporular Es un fotocromógeno de crecimiento lento Crecimiento optimo a 25 – 32º C Sus colonias son lisas y planas Características bioquímicas:

- Reducción De Nitratos (-)- Catalasa (-)- Hidrolisis de tween 80 (+)- Arylsulphatasa (+)- Ureasa (+)

repositorio.espe.edu.ec/bitstream/21000/687/1/T-ESPE-020344.pdf

Page 23: Micobacterias No Tuberculosas

M. xenopi

MICROBIOLOGÍA: Escotocromógenos de crecimiento lento. Crecimiento optimo a 42-45ºC Aislamiento primario: requiere 3 a 4 semanas o mas Colonias muy pequeñas y granulares, al MO

presentan una red periférica de hifas Son bacilos mas largos y delgados que lo habitual Se disponen en formas arqueadas típicas en nidos de

pájaro

repositorio.espe.edu.ec/bitstream/21000/687/1/T-ESPE-020344.pdf

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M. xenopi

MANIFESTACIONES CLÍNICAS:

Localizacion pulmonar, formas extra pulmonares y diseminadas

Clínicamente indistinguible de la TBC Radiografía de tórax: cavitaciones multiloculares Síntomas: tos productiva, disnea, debilidad, malestar

general, perdida de peso, hemoptisis, sudoración nocturna y fiebre.

repositorio.espe.edu.ec/bitstream/21000/687/1/T-ESPE-020344.pdf

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M. xenopi

EPIDEMIOLOGIA:

Vía de contagio: inhalación de aerosoles de agua potable contaminada Distribución geográfica irregular en todo el mundo Ampliamente distribuido en la naturaleza El SIDA es un factor de riesgo para infecciones por M.

Xenopi En América latina es informado raramente Factores de riesgo: patología pulmonar crónica,

neoplasias extra pulmonares, malnutrición, diabetes mellitus, corticoides, alcoholismo. Infección por VIH.

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M. UlceransMICROBIOLOGÍA: Micobacteria de crecimiento

extremadamente lento Optimo crecimiento a 30º c Se desarrolla en medio de cultivo

(Lowenstein-jansen) y en condiciones de baja concentración de oxigeno

http://antoniorondonlugo.com/blog/wp-content /uploads/ 2010/03/ Micobacterias -atipicas-On-line-Rondon-rev.pdf,

http://www.elsevier.es/es/revistas/medicina-clinica-2/significado-clinico-aislamiento-mycobacterium-xenopi-2897-cartas-al-director-1999

CLÍNICA: Enfermedad humana llamada

Ulcera de Buruli Enfermedad necrotizante de la piel. Es la 3era micobacteriosis mas

habitual ulcera no dolorosa de bordes

irregulares y fondo necrótico. Puede curar espontáneamente

Page 27: Micobacterias No Tuberculosas

M. Ulcerans

http://antoniorondonlugo.com/blog/wp-content /uploads/ 2010/03/ Micobacterias -atipicas-On-line-Rondon-rev.pdf

EPIDEMIOLOGIA: Casos en cuatro de los cinco continentes: Africa, Asia,

Oceanía y América. Área endémica: África, en Latinoamérica, países como

México, Brasil, Surinam, Guyana francesa y Perú. Predominante en zonas fluviales con clima cálido y

húmedo. Se alberga en caracoles e insectos acuáticos.

Page 28: Micobacterias No Tuberculosas

Complejo m. chelonae/fortuitum

Pueden distinguirse hasta 5 especies dentro de este complejo:

- M. fortuitum- M. chelonae- M. absesus- M. peregrinum- M. fortuitum biovariedad 3

http://www.seimc.org/documentos/protocolos/microbiologia/cap9a.htm

Page 29: Micobacterias No Tuberculosas

Complejo m. chelonae/fortuitum

EPIDEMIOLOGIA: Ampliamente distribuidas en la naturaleza Presencia en diferentes ambientes hospitalarios Epidemias de infecciones nosocomiales Infecciones por procedimientos cosméticos y quirúrgicos Chelonae/abscessus predominan en pacientes de mayor

edad, inmunosuprimidos.

CLÍNICA: Periodo de incubación de 7-30 días enfermedad pulmonar, linfáticas, ósea, oticas, corneal y

cutánea infecciones por M. Chelonae, M. Abscessus, particularmente

importantes en inmunosuprimidos

http://www.seimc.org/documentos/protocolos/microbiologia/cap9a.htm

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M. ChelonaeMicrobiología: Micobacteria no cromógena de crecimiento rápido Colonias mucosas, con apariencia de donas Crecimiento optimo a 37º C Bioquímicamente:

- Arylsulfatasa (+)- Crecimiento en Mcconkey (+)- Absorción de hierro (-)- Reducción de nitratos (-)

http://www.seimc.org/documentos/protocolos/microbiologia/cap9a.htm

Page 31: Micobacterias No Tuberculosas

M. Chelonae

MANIFESTACIONES CLÍNICAS:

Infección localizada: piel y tejidos blandos mas

frecuentemente. Queratitis, otitis media, artritis,

tensinovitis, etc.

Infección pulmonar: infección pulmonar similar a

tuberculosis, e infección pulmonar en enfermos con fibrosis

quística.

Infección diseminada: abscesos cutáneos e infección

visceral. Fiebre de origen desconocido.

http://www.seimc.org/documentos/protocolos/microbiologia/cap9a.htm

Page 32: Micobacterias No Tuberculosas

M. Fortuitum

Micobacteria ambiental, no cromógena de crecimiento rápido

Características bioquímicas:- Arylsulfatasa (+)- Crecimiento en Mcconkey (+)- 5% de NaCl +- Reducción de nitratos (+)

Crecimiento a 37ºC Aislada en agua potable, sistema de distribución de agua y suelo en todo el mundo

Asociada con enfermedades cutáneas.

repositorio.espe.edu.ec/bitstream/21000/687/1/T-ESPE-020344.pdf

Page 33: Micobacterias No Tuberculosas

M. abscessus

Micobacteria no cromógena de crecimiento rápido Ubicuo en la naturaleza puede aislarse en diversos

hábitats Capacidad para sobrevivir en ausencia de nutrientes Incapaz de crecer a 42ºC Bioquímicamente:

- Crecimiento en Mcconkey (+)- 5% de NaCl +- Reducción de nitratos (-)- Citrato (-)

Morfológicamente similar a M. Chelonae

repositorio.espe.edu.ec/bitstream/21000/687/1/T-ESPE-020344.pdf

Page 34: Micobacterias No Tuberculosas

M. abscessusSIGNIFICACIÓN CLÍNICA: Enfermedad pulmonar:

- Patologías subyacentes: bronquiectasias, reflujo gastroesofágico, sarcoidosis o TBC.

- Agravamiento de la enfermedad Enfermedad diseminada: en trasplantados e

inmunocomprometidos Enfermedad extra pulmonar localizada: infecciones de piel

diseminadas, endocarditis y queratitis.

EPIDEMIOLOGIA: Distribución ambiental Es la segunda MNT aislada El Venezuela y Colombia: mala manipulación de

instrumentos quirúrgicos Brotes por productos clandestinitos de mesoterapia

repositorio.espe.edu.ec/bitstream/21000/687/1/T-ESPE-020344.pdf

Page 35: Micobacterias No Tuberculosas

M. smegmatisMICROBIOLOGÍA: Micobacteria de rápido crecimiento y no pigmentada Crecimiento optimo a 45ºC Características bioquímicas:

- Arylsulfatasa (-)- 5% de NaCl +- Reducción de nitratos (+)

CLÍNICA: Produce infecciones pulmonares, cutáneas y abscesos en tejidos

blandos Lesiones cutáneas caracterizadas por necrosis extensa bajo la piel

integra Bacteriemia, poco frecuente asociada a foco infeccioso en

catéteres IV

http://www.seimc.org/documentos/protocolos/microbiologia/cap9a.htm

Page 36: Micobacterias No Tuberculosas

M. scrofulaceum

Micobacteria escotocromógena de crecimiento lento Crecimiento optimo a 37ºc Características bioquímicas:

- Hidrolisis de Tween 80 (-) - Ureasa (+)

- Catalasa (+)- Reducción de nitratos (-)

Colonias lisas de color amarillo a naranja

http://www.seimc.org/documentos/protocolos/microbiologia/cap9a.htm

Page 37: Micobacterias No Tuberculosas

Diagnostico

Debe hacerse con base en un cuadro clínico compatible,

conjuntamente con el aislamiento y la identificación en el

laboratorio.

sigue el mismo procedimiento que para el de otras bacterias

influido por : la lentitud de su crecimiento y el alto contenido

lipídico en su pared.

Page 38: Micobacterias No Tuberculosas

Diagnostico

Forbes, Betty. (2009). Diagnostico Microbiológico. Madrid. Editorial Panamericana.

Muestra

Pulmonares: muestra de elección es la del esputo

espontanea

Lavado gástrico

Heces

Tejidos y líquidos corporales

Sangre

Heridas, lesiones cutáneas y muestras obtenidas por

aspiración.

Page 39: Micobacterias No Tuberculosas

DiagnosticoCultivo

Muestra:

• M. kansasi y m. avium-intracelulare esputo

• M. marinum biopsias de la lesión

• m. fortuitum y M. Chelonae. secreciones de

abscesos y pústulas

• infección diseminada sangre

Reporte de laboratorio:Genero y especie del microorganismo

Forbes, Betty. (2009). Diagnostico Microbiológico. Madrid. Editorial Panamericana.

MAC

M. kansasii

Page 40: Micobacterias No Tuberculosas

Diagnostico

Estudios Directos: Esputo y Biopsias de lesión

Forbes, Betty. (2009). Diagnostico Microbiológico. Madrid. Editorial Panamericana.

TINCIÓN DE FLUOROCROMO CON AURAMINA-RODAMINA

TINCIÓN DE ZIHEL-NEELSEN

Page 41: Micobacterias No Tuberculosas

Diagnostico

Microscópico:Examen, interpretación e informe de los frotis

Tipo de tinción, aumento óptico y nº de BAAR observados

Informe Fucsina (x 1.000)

Fluorocromo (x 250)

Fluorocromo (x 450)

No BAAR 0 0 0

Dudoso (repetir)

1-2 / 300 campos (3 barridos)

1-2 / 30 campos (1 barrido)

1-2 / 70 campos (1,5 barridos)

Positivo 1 + 1-9 / 100 campos (1 barrido)

1-9 / 10 campos 2-18 / 50 campos (1 barrido)

Positivo 2 + 1-9 / 10 campos 1-9 / campo 4-36 / 10 campos

Positivo 3 + 1-9 / campo 10-90 / campo 4-36 / campo

Positivo 4 + >9 / campo >90 / campo >36 / campo

Page 42: Micobacterias No Tuberculosas

DiagnosticoIdentificación

Pruebas fenotípicas convencionales características del

crecimiento Velocidad de crecimiento Producción de pigmento Pruebas bioquímicas

Identificación genotípica

Identificación molecular

SENASA. (2007).Clasificación Fenotípica de las Micobacterias. (1º ed.). Buenos Aires.

Tiempo de crecimiento

Lento

Fotocromógena

Escotocromógena

No cromógena

Rápido

No cromógena

Fotocromógena escotocromógena

Ref.: Practical handbook for phenotypic and genotypic identification of mycobacteria INCO-DEV-CA-2004.

Page 43: Micobacterias No Tuberculosas

DiagnosticoIdentificación Genotípica

SONDAS DE ÁCIDOS NUCLEICOS

Inte

rpre

taci

ón Cuando se libera el ácido nucleico de un

microorganismo y después se desnaturaliza el ADN liberado, la sonda es capaz z de fijarse (hibridarse con su fragmento homologo, si existe.

TECNICAS MOLECULARES

Análisis postamplificacion:PCR-RFLP (hsp65)

Hibridación de fase solida

Cortes Sierra, E. (2009). Descripción de Técnicas Fenotípicas y Moleculares para la Identificación de Mycobacterium tuberculosis y Micobacterias Atípicas en el Laboratorio Clínico. Pontificia Universidad Javeriana. Colombia..

Amplificación y corte con enzimas de restricción

Page 44: Micobacterias No Tuberculosas

Control y Prevencion

http://www.seimc.org/documentos/protocolos/microbiologia/cap9a.htm

Usos de guantes y medidas de protección por parte

de individuos con exposición laboral, como en el caso

de M. marinum.

Adecuado mantenimiento de piscinas con la

colocación de cloro, lo que reduce sustancialmente la

colonización.

vigilancia y el seguimiento epidemiológico