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EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE MERCURIO, MIENTRAS LA ESTRUCTURA QUE LO CONTIENE MANTIENE LA BIOSEGURIDAD.

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(Sandoval, 2011)

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RESUMEN Diferentes comunidades aledañas a los sectores de extracción minera, in-cluyendo comunidades de mineros artesanales auríferos se encuentran afectados por la presencia de metales tóxicos como el mercurio en aguas de consumo humano. Frecuentemente, estas comunidades consumen aguas contaminadas sin conocer las consecuencias que esto puede causar en la salud humana, aunque ven re�ejados en su salud los síntomas característi-cos de la presencia del mercurio, éstos no son tomados en cuenta la may-oría de las veces. Buscando hacer uso de nuevas tecnologías que nacen de la biología sintética, se propone un diseño teórico de un biosensor de mer-curio que permitiría la detección rápida de este metal. Sin embargo, para poder hacer seguro el uso del biosensor en la comunidad se ha creado un contenedor capaz de mantener al microorganismo biosensor parcialmente aislado del medio ambiente. Esto permitiría la entrada del contaminante para ser determinado sin permitir la salida del microorganismo al ambiente.

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1. Introducción.Objetivos.Descripción del proyecto.

2. El mercurio.

3. Diseño del biosensor. Referentes Visuales de biosensores.Biosensor de mercurio.

81214

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202330

3537475460

4. Diseño de la estructura.Referentes de Funcionabilidad.Materiales de interés.Prototipos. Estructura.

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5. La comunidad.Actores.Análisis.Conceptos. Interacciones.

6. Cronograma.

7. Bibliografía.

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INTRODUCCION.La contaminación de fuentes hídricas por e�uentes industriales es una gran problemática ambiental generada por diferentes actividades entre las cuales se encuentran la minería tanto industrial como artesanal. Las comunidades que subsisten gracias a los ingresos obte-nidos por labores mineras están generalmente expuestos a la presencia del mercurio, un metal considerado contaminante ambiental persistente el cual es distribuido por vía atmos-férica.(Miller et al, 2011; De Andrade et al, 2008)

La minería ilegal se ha considerado un problema complejo para diferentes regiones de Colombia por cuestiones ambientales. Especí�camente, en la región del Cauca se ha en-contrado, en los municipios de Suárez y Buenos Aires, una gran problemática en las cuencas del Patía y sus e�uentes, Guachicono y Mazamorras. La razón de esto es el uso del mercurio y retroexcavadoras según Francisco Vidal, Subdirector de Gestión Ambiental CRC (Diario Occidente,2013). Por otro lado, la minería artesanal abarca problemáticas adicionales a las ambientales. En términos de salud pública, las familias y grupos mineros tradicionales se ven afectados por los riesgos que supone el proceso de extracción durante el cual, se puede presentar la inhalación e ingestión de mercurio cuando se encuentra depositado en aguas,

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o tambien cuando el mercurio se encuentra bio-acumulado en animales utilizados para el consumo humano. Además de esto, existen tam-bién componentes de índole cultural, social y eco-nómico.

La tradición de las comunidades juega un papel importante a la hora de entender el proble-ma. Los mineros continúan realizando prácticas poco seguras en aras de conseguir sustento para sus familias y continuar con su legado, Comuni-

cación personal, Navarro, 2013. Es común para estas comunidades ignorar las buenas prácticas de se-guridad o desecharlas por completo al creer que las consecuencias de los riesgos tienen causas dis-tintas a la contaminación del agua. Esto está arrai-gado �rmemente en las creencias, y por ende, en las costumbres. Por otro lado, lo mineros artesa-nales se ven amenazados económicamente por

9(Sandoval, 2011)

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las compañías multinacionales que obtienen títulos mine-ros para explotar territorios que hacían parte del sustento de estas comunidades, haciendo que éstas se vean obliga-das al desplazamiento en busca de nuevas zonas de ex-tracción y sustento.

Finalmente, la contaminación de aguas por la mine-ría afecta social y económicamente a estas comunidades, que se ven obligadas a consumir aguas contaminadas con mercurio debido a la actividad antropogénica y a la bús-queda y al desplazamiento a nuevos espacios de extrac-ción, que a su ves puede generar más contaminación.

El uso de nuevas herramientas obtenidas desde la biología sintética hace posible que la contaminación con mercurio en fuentes hídricas ya sea debido a minería industrial, minería artesanal, entre otras, pueda ser medida gracias a la creación de partes biológicas modulares que pueden ser ensambladas en dispositivos fáciles de usar. La implementación de los mismos ayudaría a hacer evidente lectiva 10

(Ayala, 2012)

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la realidad sobre la contaminación de las aguas ante las comunidades que las consumen, generando una alerta colectiva, a�anzando las relaciones que existen entre las comunidades afectadas por la actividad minera.

Un tema de gran importancia al considerar la im-plementación exitosa de dispositivos biológicos es el riesgo potencial que suponen la liberación de un organis-mo al medio ambiente y la manipulación del mismo, ha-ciendo imprescindible el uso de buenas prácticas de bio-seguridad. Es importante, para el propósito del proyecto, garantizar que no se generen más riesgos biológicos a los que se pretende remediar.

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(Vargas, 2012)

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OBJETIVOS.

Proponer un proyecto de diseño que aporte a la problemática de la detección de aguas contaminadas con metales tóxicos en fuentes de agua contaminadas por la acción de laminería aurifera, mediante el uso de la microbiología (Diseño de sistemas de detección biológicos ).

General

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OBJETIVOS.

Realizar el diseño molecular teorico del bio-sensor de mercurio.

Articular el proyecto con la investigación en curso (Rio Mío) (Navarro, 2013) sobre

las comunidades.

Diseñar una estructura para contener un bio-sensor que pueda detectar

mercurio manteniendo la bioseguridad, teniendo en cuenta que será usado

por una comunidad de mineros artesanales.

Especí�cos

Realizar el manual de uso del biosensor.

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DESCRIPCION.El proyecto busca generar una forma alternativa para alertar a una comunidad de mineros artesanales sobre los niveles de contaminación por mercurio en las aguas de consumo, teniendo en cuenta que el mercurio es un metal tóxico importante en la minería artesanal de oro. El producto se basa en el constructo de un bio-sensor (microorganismo que detecta concentraciones de una molécula) generado gracias a la biología sintética, junto con el diseño de una estructura y una condición de uso que permite mantener al microorganismo parcialmente aislado del medio ambiente.

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TOXICIDAD. “La toxicidad del mercurio, radica principalmente en la avidez por grupos sulfhídrilos en tanto se une a las

proteínas modi�cándolas estructuralmente, sin embargo hay otros factores de riesgo para la célula, entre

ellos que es altamente lipofílico, por lo que se adhiere a las membranas celulares”.

(Comunicación personal, Dussán, 2010)

Todas las especies Hg son tóxicas

Elemental, vapor poco soluble en agua (0.08mg/l a 25°C) no precipita con la lluvia.

Mercurioso, CalomelSoluble

Mercúrico

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MINERIA E INDUSTRIA.

Consumo global de mercurio por minería artesanal y de pequeña escala. Modi�cado de la �gura 6.2 de Pirrone & Manson 2009.

“1. Medidas directas – usando una balanza para pesar las cantidades de mercurio utilizadas.2. Aplicar una relación de mercurio/oro, basado en el estilo de operación (concentrado por gravedad o toda la amalga-ma del oro) para estimar la producción de oro.3. Para obtener el número 2, se estima ela cantidad de mine-ros activos en minas y su promedio de producción.4. Entrevistar a los mineros y a los mercaderes de oro que comercian con mercurio.5.Datos o�ciales de comercio” (Pirrone & Manson 2009).

Cantidades de mercurio consumidas en ASGM Minería de Oro Artesanal y Pequeña Escala (Artisanal and Small Scale Gold Mining) puede ser determinado principalmente en cinco aspectos:

Consumo de mercurio por ASMG en el mundo

(Sandoval, 2011)

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o tambien cuando el mercurio se encuentra bio-acumulado en animales utilizados para el consumo humano. Además de esto, existen tam-bién componentes de índole cultural, social y eco-nómico.

La tradición de las comunidades juega un papel importante a la hora de entender el proble-ma. Los mineros continúan realizando prácticas poco seguras en aras de conseguir sustento para sus familias y continuar con su legado, Comuni-

cación personal, Navarro, 2013. Es común para estas comunidades ignorar las buenas prácticas de se-guridad o desecharlas por completo al creer que las consecuencias de los riesgos tienen causas dis-tintas a la contaminación del agua. Esto está arrai-gado �rmemente en las creencias, y por ende, en las costumbres. Por otro lado, lo mineros artesa-nales se ven amenazados económicamente por

(Kocman et al. 2013)

Distribución global de sitios contaminados: minería

de oro artesanal y a pequeña escala. (ASGM) (adopted

from Telmer and Veiga(2009))(e).

Minería de oro artesanal y pequeña escala

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las compañías multinacionales que obtienen títulos mine-ros para explotar territorios que hacían parte del sustento de estas comunidades, haciendo que éstas se vean obliga-das al desplazamiento en busca de nuevas zonas de ex-tracción y sustento.

Finalmente, la contaminación de aguas por la mine-ría afecta social y económicamente a estas comunidades, que se ven obligadas a consumir aguas contaminadas con mercurio debido a la actividad antropogénica y a la bús-queda y al desplazamiento a nuevos espacios de extrac-ción, que a su ves puede generar más contaminación.

El uso de nuevas herramientas obtenidas desde la biología sintética hace posible que la contaminación con mercurio en fuentes hídricas ya sea debido a minería industrial, minería artesanal, entre otras, pueda ser medida gracias a la creación de partes biológicas modulares que pueden ser ensambladas en dispositivos fáciles de usar. La implementación de los mismos ayudaría a hacer evidente lectiva

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MINERIA ARTESANAL.

El mercurio en el aire tiene principalmente dos formas

químicas, la forma elemental y la forma divalente, las

cuales están en forma gaseosa y se unen a partículas en la

atmosfera. El mercurio es depositado en diferentes ambi-

entes como fuentes de agua por humedad o por

deposición seca. Química y disposición húmeda del mercu-

rio (reproducido de Lindqvist et al., 1991 tomado de

pirrone & Manson 2009)

La extracción aurífera artesanal de pequeña

escala contamina con mercurio ríos en alrede-

dor de 70 países en el mundo. Un resumen de

esta actividad es proporcionado por Telmer y

Veiga (2009) en donde se puede observar que

las actividades de extracción de oro artesanal,

en las que se utiliza mercurio en el proceso de

fusión, se encuentra en su mayoría en países en

desarrollo y países con economías en transición

(Sur América, especialmente en Amazonas,

China, sureste de Asia y algunos países de

África). También se hace alusión a que los min-

eros no son consientes de los riesgos sanitarios

conectado a estas actividades.

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DEFINICION.

Biosensores.Un bio sensor es un Microorganismo/molécula manipulado por sus

características especí�cas para producir una señal cuanti�cable como respuesta

al contacto con un agente físico o químico especí�co existente en el medio

Ventajas:Usos:

Desventajas:

BiotecnologíaMonitoreo ambientes Monitoreo de suelosBiomédicaFarmacología

Alta sensibilidadAlta SelectivosRespuesta rápidaBajo costo

Riesgos:En la creación, no tener en cuenta partes o dispositivos que puedan ser nocivos para el medio ambiente.

Vida corta de las célulasDi�cultad de transporte

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Resistencia a antibióticos

ori

P/O

arsR

vioA

colE1 ori

Sensor de arsénico

AmpR

CmR

ESTRUCTURA de un Biosensor.

Región promotoraoperadora, Sitio de unión al ribosoma, Gen regulador, Gen Reportero,Terminador.

Ejemplo sensor de arsénico

(Vargas, 2012)

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BIOSENSOR Salicilato y Naftaleno.

La �gura muestra el mapa físico del plásmido MCS: región múltiple

de clonaje TI: secuencias terminadoras de transcripción. gfp:

proteína verde �uorescente kmr: determinante de resistencia a

Kanamicina. B: Mapa detallano de la región MCS. Se muestran los

sitios de restricción y la orientación del mismo. Adaptado de(Miller

et al. 2000) tomado de Caicedo. 2007.

Diseño de un biosensor bacteriano por fusión génica para la detección de salicilato y naftaleno (Caicedo. 2007).

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IGEM.

iGEM (International Genetically Engineered Machine competition) es una competencia internacional de biología sintética, en la que estudiantes universitarios de

todo el mundo diseñan, construyen y operan un sistema biológico en un microorganismo genéticamente modi�cado. Con esto, pueden lograr funciones que no

se encuentran en la naturaleza como detectar contaminación o preparar alimentos más nutritivos. Con esto, se promueve el avance de la ciencia y la educación.

Competencia Internacional de Biología Sintética

(IGEM, 2012)

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IGEM de la universidad de Cambridge 2009

El grupo de IGEM de Cambridge 2009 ha creado un kit de partes que buscan facilitar el

diseño y construcción de biosensores para el futuro. Ellos caracterizaron exitosamente un

set de sistemas transcripcionales para calibrar el output de sintonizadores de sensibilidad .

Ellos también expresaron exitosamente un espectro de pigmentos en E. coli, diseñando un

set de generadores de color (IGEM Cambridge, 2009).

IGEM Cambridge, 2009)

IGEM Cambridge, 2009)

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IGEM COLOMBIA 2012.

Un grupo interdisciplinario de estudiantes

universitarios que juntos conformamos el único

equipo que representa a Colombia en iGEM 2012.

Desde el 2011 iGEM Colombia ha demostrado el nivel

cientí�co colombiano y ha dejado en alto el nombre

de nuestro país internacionalmente. El año pasado

fuimos los ganadores de Latinoamérica!!!.

(IGEM Colombia, 2012) (IGEM Colombia, 2012)

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IGEM BUENOS AIRES 2013.

El proyecto se enfocó en desarrollar un biosensor

especí�co para aguas, pero con un acercamiento

escalable y modular. Este enfoque quería facilitar la

adaptación de la respuesta para la detección de

diversas sustancias. El proyecto se centra en la

detección de un contaminante primario: arsénico.

Sin embargo por su diseño modular y escalable

podría proporcionar un manera fácil de medir

otros contaminantes como el plomo, hidrocarbu-

ros entre otros. Consientes que la mayor parte de la

población afectada no tiene formación cientí�ca

buscan que su diseño sea aplicable siendo barato

y de fácil distribución (IGEM Buenos Aires, 2013). (IGEM Buenos Aires, 2013)

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IGEM COLOMBIA 2013.

Chimi es una levadura especial con el con la

capacidad de saber si un animal está

estresado o no. Cuando el animal está

tranquilo, Chimi toma su forma amarilla y

calmada, pero si siente que un animal está

estresado, ¡cambia su color a un rojo intenso

para alertar a las personas!

El objetivo de este proyecto fue crear un sensor de

estrés que pueda detectar si una mascota está

estresada. Para esto, se utilizó una levadura, un

microorganismo inocuo comúnmente usado para

hacer pan y cerveza, al cual se le brindó carac-

terísticas de otros organismos que en conjunto

podrán detectar hormonas relacionadas con el

estrés en animales.

Los animales estresados se comportan muy diferente a

los animales que llevan una vida tranquila, pues pueden

ser más propensos a ser agresivos, desarrollar una enfer-

medad, ser infértiles y perder el cabello o el apetito.

Asimismo, en los animales de granja puede disminuir la

calidad de la carne y la cantidad de leche debido al estrés.

Es importante saber si algo está estresando a una masco-

ta o un animal de granja para asegurarse que viva una

vida plena y sana. (IGEM colombia, 2013)

(IGEM Colombia, 2013)

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PLASMIDO.Material genético extracromosomal con o sin regulación independiente de hos-pedero. Puede tener una o varias copias con sitio de replicación propio.

Mapa genético de el plásmido pUM505 de P. aeruginosa. Tomado de Ramirez Diaz, et al. 2011.

(Ramírez-Diaz et al 2011)

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OPERON.Sistema de regulación molecular de la expresión génica, el cual esta formado por un grupo de genes que pueden regular su propia expresión por una dosis génica, gracias a la interacción entre las proteínas codi�cadas por sus genes y un sustrato del medio.

Genes reguladores

Genes inductores posi-tivos y negativos

Secuencias de reconoci-miento

Genes estructurales Elementos de control del operón lactosa y su expresión dependiendo de la disponibilidad del sustrato (wikimedia, 2004).

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Genes operon de mercurio.

GEN.Unidad mínima codi�cante para una macromolécula (proteína, ARNm, SRN y ARNt) con una función.

Regulación

Transporte merA: CitoplasmaCodica, reductasa del ion Mercurio

merB:Citoplasma.Codi�ca, organomercurial liasa

merG: Priplasma.Proteína de resistencia a fenil mercurio

merE:Proteína internaproteina de transporte de metil mercurio

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merR: Citoplasma Regulador positivo y negativo de los genes estructurales.Regulador negativo de si misma. Codi�ca, proteína reguladora

merD (gram(-)):Citoplasma Codi�ca, proteína reguladora

merT: Integral de membrana (interna). Esencial para la resisten-cia.Codi�ca, proteína de transporte del ion mercurio

merP:Periplasma. Esencial para la resistencia. Codi�ca, proteína de unión al ion mercurio

merC: Membrana internaCodi�ca, proteína tranasportadorea del ion mercurio

merF:PeriplasmaCodi�ca, proteína de transporte del ion mercurio

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Genes operon de mercurio.

Resistencia a antibióticos

oripUC

P/OmerRmerP

merT

merE

merC

merG

vioA

colE1 ori

Sensor de Mercurio

KanR

CmR

Biosensor de mercurio.

Gen de proteína reguladora

Región promotora/operadora

Gen de proteína de unión de iones mercurio periplásmatico

Gen de proteína transpor-tadora de iones mercurio

Gen de proteína transportadora de iones mercurio

Gen de proteína transportadora de Metilmercurio

Gen de proteína de resistencia a Fenilmercurio

Marcador de selección; Gen de resis-tencia a kanamicina

Marcador de selección; Gen deresistenciaa Cloranfenicol

Gen reportero violaceina (color visible al ojo humano violeta) Origen de replicación (pUC)

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MerC

MerT

MerE

MerP

MerG

merRO/P

merTmerP merC merE merG vioA

Mercurioen el agua

Mecanismo de acción.

MerR

Activación

Color violeta

Periplasma

Citoplasma

Célula(bacteria)

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Función de la estructura.

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Bacteria bio-sensor

Estructura/contenedor

Mercurio

Medio ambiente

El mercurio puede entrar

Genera

La bacteria no puede salir

Color violeta

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Funcionabilidad

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Public Lab.

Es una comunidad donde se puede aprender a

investigar los problemas ambientales. Utilizando

técnicas de Do It Yourself (DIY) de bajo costo, se

busca cambiar la forma de ver el mundo en

términos ambientales, sociales y políticos.

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¡Para la investigación del ambiente

con bajos costos!

(Public lab, s.f.)

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¡Con objetos de uso

sencillo y fáciles de

entender!

39(Public lab, s.f.)

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¡Con instrucciones sencillas con explicaciones gra�cas !

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(Public lab, s.f.) (Public lab, s.f.)

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Encapsulación e inmovilización de la proteína capa-S de Lysinibacillus sphaericus CBAM5 en una matriz de alginato para la adsorción de cromo.

Se ha encontrado que tanto la proteína de capa S como la biomasa de

Lysiniacillus sp. tienen la capacidad de acumular diferentes metales pesados.

Uno de los metales pesados, cromo(VI), es reconocido como una especie

altamente tóxica. En este estudio, se determinó la adsorción de Cr en la

proteína capa-S de Lysinibacillus sphaericus CBAM5. Para mejorar la estabili-

dad y la e�ciencia, la proteína capa-S se inmovilizó por atrapamiento en una

matriz de alginato, con la intención de comparar la e�ciencia de la proteína

inmovilizada contra la biomasa viva. La proteína capa-S inmovilizada mostró

un porcentaje de adsorción del 44.33% del total de cromo (200ppm) en la

muestra, mientras que los demás tratamientos sin inmovilizar tuvieron una

adsorción menor al 30%. En conclusión la proteína capa-S puede consider-

arse como uno de los mecanismos mas importantes en la acumulación de

metales pesados y su actividad biológica puede ser mejorada mediante la

inmovilización en matrices de alginato (vargas & Dussán, 2012).

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Cromo removido

Alginato CBAM5 CBAM5IMMO

S-layerCBAM5

S-layerCBAM5IMMO

S-layerCBAM5

Recristalizada

Lysinibacillus sin

S-layer

% A

dsor

ción

cro

mo

Tratamientos

La �gura muestra el porcentaje de adsorción

(remoción de cromo) en los diferentes

tratamientos representados por colores, rojo:

proteína capa-S con tratamientos de proteí-

na capa-S libre (S-layer CBAM5), inmovi-

lización de proteína capa-S (S-layer CBAM5

IMMO), y proteína capa-S recristalizada libre

(S-layer CBAM5 Recrystallized); en azul:

Lysinibacillus con tratamientos de células

libre de Lysinibacillus sphaericus CBAM5

(CBAM5), células inmovilizadas de Lysinibacil-

lus sphaericus CBAM5 (CBAM5 IMMO) y

células libres de Lysinibacillus que no tienen

capa-S (Lysinibacillus without S-layer); en

negro: solo alginato (Vargas & Dussán, 2012).

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Lattice Ball

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¡Permite la fácil entrada del con-

taminante o sustrato a analizar!

Núcleo

Fibra de vidrioPLA

PLA

Membrana Membrana

Lattice Ball es un producto descontaminante creado para funcionar como una novedosa

matriz de inmovilización de microorganismos que puedan descontaminar aguas con

diferentes metales pesados, fenol entre otros. Su nombre se debe a su forma y estructura la

cual consiste en una rejilla cuadrada que emula a la forma de la proteína capa S, la cual es una

estructura a la que se le ha encontrado propiedades adsorbentes en el proceso de

bioremediación.

Vista Frente

Vista superior

vista lateral IZQ

4 cm

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¡Que la comunidad adapte

el contenedor a su diario

vivir!

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Oro Verde.

“Oro Verde es una iniciativa creada por

y para las familias mineras de Chocó,

Colombia que heredaron las técnicas

artesanales de minería artesanal que

aseguran el uso sostenible de los recur-

sos naturales de su casa, la selva

tropical de Chocó, uno de los ecosiste-

mas más exuberantes y biodiversos del

planeta”. (OroVerde, s.f.)

10

(OroVerde, s.f.)

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11

(Lineros, s.f.)

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Alginato de calcio.

A B

DC

Fotografías de SEM. a) & b)

cápsula de inmovilización con

Lysinibacillus sphaericus CBAM5,

c) & d) cápsula de inmovilización

con proteína capa-S. (Vargas &

Dussán 2012)

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Partícula de madera.

Inmovilización de un consorcio de

bacterias nitri�cadoras en partícu-

las de madera para bio aumentar la

nitri�cación en sistemas de cultivo

de camarón. La imagen muestra

una Micrografía electrónica de

barrido de partículas de madera

desligni�cadas.(Manju , et al. 2009)

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Caldo, agar bacteriano.

Sustratos nutritivos en los que

pueden crecer algunas bacteri-

as. El caldo es un medio líquido

con una carga nutritiva que

permite el apropiado

crecimiento bacteriano. Así

mismo, el Agar es una gelatina

vegetal o una matriz sólida que

puede ser usada para el

crecimiento bacteriano.

50

(Anónimo2, s.f.)(Anónimo1, s.f.)

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Es una membrana con un tamaño de poro

especial que selecciona por tamaño

moléculas relativamente grandes respecto

a moléculas pequeñas. Dependiendo del

tamaño de poro podemos hablar de

micro-poros, aquellos que seleccionan las

moléculas por su tamaño en micras y nano

poros que seleccionan la molécula por

nanómetros como lo hace la membrana

celular.

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Bolsa de diálisis.

(Anónimo3, s.f.)

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PETG (polietilentereftalato glicol) es un

copoliéster, que se usa para diversos fnes,

como aplicaciones publicitarias, envases

para utensilios médicos, pantallas protec-

toras, entre muchos otros. Una de las

características importantes es la capacidad

de ser termo-formado respecto a un molde

inicial.

PETG.

52

(Anónimo4, s.f.)

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Materiales seleccionados -

Medio: caldo nutritivo, con la bacteria E. coli con el plásmido

Biosensor electroporado.

Membrana de diálisis, por su porosidad permite seleccionar diferentes moléculas

por tamaño, en este caso el Mercurio es un metal, molécula muy pequeña que puede

atravesar la membrana mientas que las bacterias tienen un tamaño superior

que no le permite salir del contenedor.

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PETG co poliéster resistente, termo-formable y económico.

Materiales del contenedor copoliéster de polie-tilentereftalato glicol

Medio Caldo nutritivo, con la bacte-ria E. coli con el plásmido Biosensor

de mercurio electroporado.

Membrana de diálisis, por su porosidad permite seleccionar diferentes moléculas

por tamaño, en este caso el Mercurio es un metal; molécula muy pequeña que puede

atravesar la membrana mientas que las bacterias tienen un tamaño muy superior

que no le permite salir del contenedor.

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Caucho-tapón

para inyectar el

agua contaminada

Plástico

transparente

Bolsa de diálisis

55

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Pozos en donde va la bacte-

ria con le biosensor en

medio de cultivo

Membrana de diálisis

para sellar los pozos y

aislar las bacterias.

Pozos

6

5

4

3

2

1

Brazo para poder sostener la placa y

sumergir los pozos en el agua para

realizar la medición

57

Cada pozo tendrá una concentraciones de

bacteria diferentes que va en gradiente. La

diferencia en color se encontraría por el

gradiente de concentración bacteriana

disminuyendo en concentración del pozo

1 al 6 en donde el pozo 1 podrá detectar

cantidades ín�mas de mercurio por la

gran cantidad de bacterias biosensoras

mientras el pozo 6 al tener menor

cantidad de bacterias necesitara una gran

concentración de mercurio para reaccio-

nar. El número de pozos puede variar

dependiendo de la curva de calibración

que se debe realizar en el laboratorio

Page 60: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

58

Page 61: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

59

Page 62: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

60

Page 63: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

Contenedor del biosensor

Vista lateral derechaVista frontal

Vista superior

220 mm

120 mm

65 mm

15 mm

Biosensor

Contenedor del biosensor Contenedor del biosensor

Vista lateral derechaVista frontal

Vista superior

220 mm

120 mm

65 mm

10 mm

Biosensor

61

20 mm

Page 64: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

Medio: caldo nutritivo, con la bacteria E. coli con el plásmido

Biosensor electroporado.

Materiales del contenedor copoliéster de polie-

-

tilentereftalato glico

-

Membrana de diálisis, por su porosidad permite seleccionar diferentes

moléculas por tamaño

Materiales del contenedor copoliéster de polie-tilentereftalato glicol

Medio Caldo nutritivo, con la bacte-ria E. coli con el plásmido Biosensor

de mercurio electroporado.

Membrana de diálisis, por su porosidad permite seleccionar diferentes moléculas

por tamaño, en este caso el Mercurio es un metal; molécula muy pequeña que puede

atravesar la membrana mientas que las bacterias tienen un tamaño muy superior

que no le permite salir del contenedor.

62

Page 65: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

MANUAL: Modo de uso

Observe atentamente las instrucciones

Deje esperando aproximada-mente por 10 minutos.

Los pozos cambian a color violeta. Entre mas intenso sea el color mayor concentración de mercurio habrá en el agua. Vea la tabla de calibración al respaldo.

Llene un vaso de agua que sospecha esta contaminada con mercurio

Coloque el detector de mercurio dentro del agua

1 2 3

4 5

63

Page 66: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

Mayor concentración de

mercurio

Entre mayor sea el número de pozos que

se tornen a color morado mayor será la concentración de

mercurio.

MANUAL: Modo de uso

La escala de medición se realiza haciendo una

curva de calibración, con la cual se puede

conocer cuanto mercurio hay a cierta

intensidad de color violeta respecto a una

concentración bacteriana. Siguiendo esta idea,

es posible colocar diferentes concentraciones de

bacteria para estimar concentraciones bajas y

altas de mercurio. Para la disposición, recicle y

devuelva al proveedor. Por la forma en que se ha

construido la estructura para el biosensor, si por

alguna razón el biosensor con su estructura es

desechado de forma no eco amigable, al tener

una cantidad de sustrato limitada la bacteria

biosensora no podría sobrevivir.

64

Page 67: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

Instrucciones

1 2 3Coloque el detector

en Agua.Espere 10 minutos Si hay cambio a color violeta, el color le indi-

cara que hay mercurio en el agua.

Instrucciones

65

Page 68: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

La

66

Page 69: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

67

(Sandoval, 2011) (Sandoval, 2011)

(Sandoval, 2011)(Sandoval, 2011)

Page 70: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

68

ActoresLos actores no tienen una relación directa

entre ellos ni tampoco una organización

formal o estructura para comunicarse. La

mayoría de esos actores se comportan como

entes independientes y tienen sus propias

jerarquías de trabajo. Uno de los puntos de

interés de todos los actores es la búsqueda o

generación de una mejor calidad de vida y

obtener mayores oportunidades de progreso

(Del Corral, 2003). Sin embargo los grandes

mineros y el gobierno generan relaciones

intimas para obtener terrenos de extracción

(comunicación personal Cárdenas, 2013).

ACTORES /ANALISIS.

Academia

Fuerzas armadas

Federaciones o agremiaciones de mineros

Iglesia

Grupos políticos

Corporaciones autónomas

ONGs

Fundaciones mineras

Comunidad

Estado Sector privado

Page 71: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

PROBLEMAS:

OPORTUNIDADES:

Los mineros artesanales tienen poco reconocimiento, visibilidad y participación social.

Las industrias multinacionales son una gran competencia que hacen uso de terrenos que antes eran usados para minería artesanal.

Los mineros artesanales desconocen la contaminación de mercurio en las aguas que tienen para consumo humano.

El estado no promueve las prácticas de minería artesanal.

La información de la contaminación real, generada por diferentes industrias en las aguas de con-sumo para la comunidad minera, es inasequible.

La información que se reporta se obtiene gracias a las investigaciones del Corral. 2003

Aprovechar el conocimiento tradicional que tienen los mineros para generar nuevas formas de extracción aurífera.

Evidenciar cómo la minería artesanal puede convertirse en una oportunidad de desarrollo sos-tenible para una comunidad.

Generar visibilidad a la comunidad para el estado, la sociedad y los extranjeros.

Aprovechar que la comunidad tiene un tamaño relativamente pequeño para poder fomentar los componentes culturales y sociales.

Dar a conocer si la comunidad consume o no aguas contaminadas con mercurio, para generar un llamado de atención al estado, organizaciones interesadas y a la comunidad misma.

69

Page 72: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

Principal referencia: del Corral. 2003

IDEAS (INSIGHTS):

NECESIDADES:

TEMAS :

Comunidad excluida socialmente, incluso marginada por su labor y el imaginario de generar gran cantidad de contaminación

Conocimiento tradicional a divulgar

Minería informal sin políticas claras

Estado interesado en la contaminación por mercurio

Contaminación ambiental

Biosensores

Minería artesanal

Educación

Mostrar que la contaminación con mercurio no es un mito.

Reconocimiento a las prácticas tradicionales de minería

Desarrollo y apoyo local

Acceso a sistemas modernos de comunicación

70

Page 73: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

71

Page 74: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

AGUA METALIZADA

72

"Agua Metalizada" se re�ere a la belleza y

riqueza encontrada en los ríos colombianos,

sin dejar de lado la cruda realidad, donde el a

agua, un recurso natural fundamental se

convierte en un recurso no consumible,

opacado por la extracción aurífera que tiene

como consecuencia la liberación de mercurio

el cual es un metal tóxico en el agua.

(Sandoval, 2011)

Page 75: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

BIOSEGURIDAD POPULAR

73

Por agua "Bioseguridad Popular" se entiende

la interacción de los mineros artesanales y las

comunidades aledañas con los diferentes

contaminantes consecuencia de las labores

de extracción minera. Teniendo en cuenta

que los problemas y los contaminantes no

están solo en la fuente próxima mas obvia,

sino, también, en la búsqueda de soluciones

a los problemas de contaminación, ya que

muchas veces intentos de descontaminación

dejan residuos secundarios aun mas

peligrosos o como se dice coloquialmente “la

cura es peor que la enfermedad”

Page 76: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

ARTETRADICIONAL

74

La minería artesanal es un o�cio que se lleva

generación tras generación, en donde la

forma de trabajo y las técnicas de extracción

se heredan en un legado familiar que se ha

mantenido vivo a través de los años. El

concepto de "Arte Tradicional", tiene en

cuenta este proceso ancestral como una de

las riquezas culturales existentes en la

comunidad de mineros, una forma de

trabajo que debe ser conservada y

protegida sin dejar de lado que también

tiene que ser aliada a las nuevas tecnologías

para lograr una minería más eco-amigable.

(Sandoval, 2011)

Page 77: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

75

con la

Page 78: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

COMUNIDAD DE MINEROS ARTESANALES

Academia

Mineros

Empresas estatales

Iglesia

Grupos políticos

Corporaciones autónomas

ONGs

Fundaciones mineras Comunidad

Estado Sector

privado

Dar a conocer si la comunidad consume o no aguas contamina-das con mercurio, para generar un llamado de atención al estado, organizaciones interesadas y a la comunidad misma.

Mostrar que la contaminación con mercurio no es un mito.

Los mineros artesanales desconocen la contaminación de mercurio en las aguas que tienen para consumo humano.

con la

76

Page 79: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

Comunidad

Fundación: Entidad

imparcial

Estructura/Contenedor

EntidadTransporte

Bio-sensor

Recuperar el residuo solido plástico de los

empaques para pastillas de diferen-

tes industrias farma-céuticas, para fabri-

car el contenedor del bio sensor.

Entrega y concienti-za a la comunidad, para el uso del biosensor.

Rio Mío

77

Disposición del biosensor

Se busca generar lugares en donde

sea posible desechar la estructura para poder reciclarla.

Page 80: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

30 6 13 20 27

4 11 18 25

8 15 22 29

1

CRONOGRAMA. AGOSTOSEPTIEMBRE

OCTUBRE

NOVIEMBRE

Presentación del documento inicial: Idea-Objetivos-

Desarrollo de la investigación (cronograma - Presupuesto)

Estado del avance – recomendaciones:

De�nir bioseguridad del Biosensor usos Comunidad.

Desarrollo:Modo de uso seguro de un

biosensor en una comunidad.

Septiembre18Entrega – De�nición de

entregables:

Modo de uso, producto de manipulación para la

comunidad.

Proyecto �nal: Desarrollo – Materiales de construcción. .

Estado del Avance: Manual de uso del producto.

Entrega del Documento:Entrega de jurados al comité

académico Octubre 22

Prueba piloto de un biosensor en una comunidad similar, si

posible realizarla.

Sustentación: Entrega de materiales para

exhibición

Noviembre 18 al 30, sustentaciones revisión �nal

Desarrollo:Modo de uso seguro de un

biosensor en una comunidad.

Finalización del proyecto.Noviembre 5 avance del

proyecto

Entrega �nal.Noviembre 12 entrega material

volaran

78

Page 81: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

BIBLIOGRAFÍA. 1. Anónimo1, s.f. Las gambas tambien cocinan http://lasgambastambiencocinan.blogspot.com/2013/09/tarta-de-limon-fresquita.html

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Page 82: EL BIOSENSOR MUESTRA SI HAY PRESENCIA DE CONTIENE …

Agradecimientos especiales: Andrés Burbano

Miguel Navarro

David de los Reyes

Juan Cárdenas

Fernando Sandoval

Agradecimientos:Agradezco a mi familia, a los que me acompañaron en este proceso, a mis amigos y compañeros que siempre fueron una fuerza de apoyo.

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Bogota - 21 de Noviembre del 2013

Diseño por Javier Vargas (VARG)