DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO DE LAS

ENEFERMEDADES VÍRICAS

MÉTODOS DE LABORATORIO

Los métodos de laboratorio permiten realizar: 1. Examen citológico. 2. Microscopía electrónica. 3. Aislamiento y cultivo del virus. 4. Detección de proteínas víricas (antígenos y

enzimas) 5. Detección de material genético vírico.5. Serología.

MUESTRAS PARA DIAGNÓSTICO VÍRICO

MUESTRAS PARA DIAGNÓSTICO VÍRICO

EXAMEN CITOLÓGICO En las muestras tisulares o los cultivos celulares figuran modificaciones de la morfología celular, lisis celular, formación de vacuolas, sincitios y cuerpos de inclusión.

a. Los sincitios son células gigantes multinucleadas formadas como consecuencia de la fusión vírica de células individuales. Los paramixovirus y los virus VHS, VVZ y VIH estimulan la formación de sincitios.

EXAMEN CITOLÓGICO

b. Los cuerpos de inclusión constituyen cambios histológicos de las células provocados por componentes víricos o bien alteraciones de las estructuras celulares inducidas por los virus. Las inclusiones de Cowdry de tipo A en las células o en los grandes sincitios (múltiples células fundidas) son un hallazgo característico en las células infectadas por VHS o VVZ .

EXAMEN CITOLÓGICO La rabia se puede diagnosticar cuando se encuentran cuerpos de Negri (inclusiones del virus de la rabia) en los tejidos cerebrales .

Las muestras citológicas se analizan para comprobar la presencia de antígenos víricos mediante técnicas de inmunofluorescencia o bien se detecta la presencia de genomas víricos por PCR con el fin de llevar a cabo una identificación rápida y definitiva. Estas pruebas son específicas para cada virus y se deben seleccionar conforme al diagnóstico diferencial.

MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA

La microscopía electrónica no es una técnica de laboratorio estándar clínico. Se utiliza para detectar e identificar algunos virus cuando existe un número suficiente de partículas víricas. La adición de un anticuerpo específico del virus a una muestra puede hacer que las partículas víricas se agrupen, facilitando así la detección e identificación simultáneas del virus (inmunomicroscopia electrónica).

Este método es útil para la detección de los virus entéricos, como los rotavirus, que se producen en abundancia y que tienen una morfología característica.

CULTIVO DEL VIRUSLos virus pueden crecer en cultivos tisulares, huevos embrionados o animales de experimentación Los cultivos de células primarias se obtienen por tratamiento de algún órgano animal específico con tripsina o colagenasa. Las células obtenidas con este método se cultivan en monocapa (fibroblastos o células epiteliales) o en suspensión (linfocitos) en medios artificiales complementados con suero bovino u otra fuente de factores de crecimiento. Las células primarias de riñon de mono son muy adecuadas para llevar a cabo el aislamiento del virus de la gripe. paramixovirus, muchos enterovirus y algunos adenovirus.

CULTIVO DEL VIRUS

Las células primarias se pueden separar con tripsina, se diluyen y crecen en nuevas monocapas (subcultivos) para convertirse en cultivos celulares secundarios.

Las células diploides fetales humanas, que generalmente son fibroblastos, permiten el crecimiento (p. ej., VHS, VVZ, CMV, adenovirus, picornavirus). Las células HEp-2, una línea continua de células epiteliales derivada de un cáncer humano, son excelentes para aislar el virus respiratorio sincitial, los adenovirus y los VHS.

CULTIVO DEL VIRUS

DETECCIÓN DE PROTEÍNAS VÍRICAS

DETECCIÓN DE MATERIAL GENÉTICO VÍRICO

SEROLOGÍA VÍRICA

Análisis Transferencia de Western. Seroconversión (Infección por VIH)

VACUNAS E INMUNOTERAPIAS

Vaccines have been the greatest achievement of biomedical sciences. Their impact in public health is only exceeded by the availability of potable water

VACUNAS

VACUNAS

VACUNAS DE VIRUS “VIVOS” ATENUADOS

VACUNAS DE VIRUS ATENUADOS

VACUNAS DE VIRUS ATENUADOS

VACUNAS DE VIRUS ATENUADOS

VACUNAS DE VIRUS INACTIVADOS“KILLED” VIRUS VACCINE

VACUNAS DE SUBUNIDADES DE VIRUS

TECNOLOGÍA DEL ADN RECOMBINANTE

UTILIZACIÓN DE VIRUS COMO VECTORES DE CLONACIÓN

VACUNAS DE ADN