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56-7790/R2

B8D153 8D15

ESCortisol

Cortisol

Clave de los símbolos utilizados

Número de referencia

Producto sanitariopara diagnóstico in vitro

Almacénese entre 2 °C y 8 °C

Consulte las instrucciones de uso

Número de serie

Lote de reactivos

Fecha de caducidad

Fabricante

Número de lote

Calibrador (A a F)

Número de control

CD-ROM del ensayo

Cubetas de reacción

Copas de muestra

Septos (tapones de protección)

Tapones para los reactivos

Representante autorizado

Si desea una explicación más detallada sobre los símbolos utilizados para cada componente, consulte el apartado "Reactivos".

Lea atentamente este prospecto antes de utilizar este producto. No se puede garantizar la fiabilidad de los resultados de este ensayo si no se siguen exactamente las instrucciones indicadas en este prospecto.

system

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NOMBREARCHITECT Cortisol

FINALIDAD DE USOARCHITECT Cortisol es un inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartículas (CMIA) para la determinación cuantitativa de cortisol en suero, plasma u orina humanos con el ARCHITECT i System. El ensayo ARCHITECT Cortisol se utiliza como ayuda en el diagnóstico y el tratamiento de trastornos suprarrenales.

RESUMEN Y EXPLICACIÓN DEL ENSAYOEl cortisol es la principal hormona glucocorticoide segregada por la corteza suprarrenal. Entre sus funciones fisiológicas se incluyen la regulación del metabolismo de los carbohidratos y la distribución de los electrolitos y del agua. El cortisol tiene además actividad inmunosupresora y antiinflamatoria. En los individuos sanos, los niveles de cortisol se regulan mediante un mecanismo cerrado de retroacción negativa en el que la corteza suprarrenal responde a concentraciones elevadas de la hormona adrenocorticotropina (ACTH) mediante un incremento en la secreción de cortisol, y la hipófisis responde a las concentraciones elevadas de cortisol mediante la reducción de la producción de ACTH. Las concentraciones de cortisol en plasma son más elevadas por la mañana y disminuyen aproximadamente a la mitad por la tarde.1 El embarazo o el tratamiento con estrógenos elevan significativamente las concentraciones de cortisol. Asimismo, otros estímulos tales como el estrés pueden contribuir a incrementar la producción de cortisol. Las determinaciones de cortisol se utilizan como control directo del estado suprarrenal y como medición indirecta de la hiperfunción o la hipofunción hipofisiaria. Las concentraciones elevadas de cortisol se asocian con tumores suprarrenales, tumores hipofisiarios o tumores ectópicos productores de ACTH.2 Las concentraciones disminuidas de cortisol pueden reflejar una hipofunción suprarrenal generalizada o un defecto en el camino metabólico para la biosíntesis del cortisol.3 La mayor parte del cortisol presente en el plasma se encuentra unido a proteínas y aproximadamente el 1% se excreta sin modificar en la orina.4 Se considera comúnmente que el cortisol presente en la orina refleja la concentración del cortisol en plasma no unido (es decir, libre), que es biológicamente activo. En casos de sobreproducción de cortisol, el cortisol unido a la globulina se satura, de forma que el cortisol plasmático no unido se incrementa desproporcionadamente, así como la excreción urinaria. La medición de cortisol en orina es un método sensible para determinar la hiperfunción corticosuprarrenal, como el síndrome de Cushing.5,6 El cortisol en orina procedente de tomas de 24 horas representa la integración de un día completo, por lo que la concentración no se ve afectada por la variación diurna presente en las concentraciones de cortisol en plasma.Las mediciones de cortisol se realizan con frecuencia junto con determinados ensayos “de provocación”, diseñados para determinar si la regulación del eje hipotálamo-hipófiso-suprarrenal está intacta. Entre estos ensayos se incluyen la prueba de supresión de dexametasona, la prueba de estimulación de ACTH y la prueba de tolerancia a la insulina.7-11 Estos ensayos de provocación facilitan el diagnóstico diferencial del síndrome de Cushing (sobreproducción de cortisol) y la valoración de la enfermedad de Addison (producción insuficiente de cortisol).

PRINCIPIOS BIOLÓGICOS DEL PROCEDIMIENTOARCHITECT Cortisol es un inmunoanálisis retardado de un paso que utiliza la tecnología de inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartículas (CMIA) con protocolos de ensayos flexibles, denominados Chemiflex, para la determinación cuantitativa de cortisol en suero, plasma u orina humanos.La muestra y las micropartículas paramagnéticas recubiertas de anticuerpo anticortisol se combinan para formar la mezcla de reacción. El cortisol presente en la muestra se une a las micropartículas recubiertas de anticuerpo anticortisol. Después de la incubación, se añade el conjugado de cortisol marcado con acridinio a la mezcla de reacción. El conjugado de cortisol marcado con acridinio compite por los sitios de unión disponibles en las micropartículas recubiertas de anticuerpo anticortisol. Después de una segunda incubación, se lavan las micropartículas y se añaden las soluciones preactivadora y activadora a la mezcla de reacción, produciéndose una reacción quimioluminiscente, que se mide en unidades relativas de luz (URL). Existe una relación inversamente proporcional entre la cantidad de cortisol presente en la muestra y las URL detectadas por el sistema óptico del ARCHITECT i.Si desea información sobre el sistema y la tecnología del ensayo, consulte el capítulo 3 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

REACTIVOSEquipo de reactivos, 100 tests/500 testsNOTA: algunas presentaciones del equipo de reactivos no se encuentran disponibles en todos los países. Si desea más información, póngase en contacto con su distribuidor local de Abbott.Equipo de reactivos ARCHITECT Cortisol (8D15)

1 frasco (6,6 ml/27,0 ml) de micropartículas recubiertas de anticuerpo (monoclonal, de ratón) anticortisol en tampón TRIS/BIS-TRIS con estabilizante proteínico (bovino). Concentración mínima: 0,09% de partículas sólidas. Conservantes: azida sódica y ProClin 300.

1 frasco (5,9 ml/26,3 ml) de conjugado de cortisol marcado con acridinio en tampón citrato con estabilizante tensioactivo. Concentración mínima: 0,7 ng/ml. Conservante: ProClin 300.

Otros reactivosSolución preactivadora ARCHITECT i

Solución preactivadora que contiene 1,32% (p/v) de peróxido de hidrógeno.

Solución activadora ARCHITECT i Solución activadora que contiene 0,35 N

de hidróxido sódico.Tampón de lavado ARCHITECT i

Tampón de lavado que contiene solución salina en tampón fosfato. Conservante: agente antimicrobiano.

ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONESPara uso en diagnóstico in vitro.

Precauciones de seguridadATENCIÓN: este producto requiere el manejo de muestras de origen humano. Maneje todos los reactivos y las muestras de origen humano de acuerdo con las instrucciones específicadas en la publicación "OSHA Standard on Bloodborne Pathogens".12 En el caso de materiales que contengan o pudieran contener agentes infecciosos, se deben seguir las prácticas de seguridad biológica "Biosafety Level 2"13 u otras normativas equivalentes14,15.Las micropartículas y el conjugado contienen metilisotiazolonas, que es un componente de ProClin, y han sido clasificadas según las directivas de la Comunidad Europea (CE) como: irritante (Xi). A continuación se indican las frases relativas a los riesgos (R) y medidas de seguridad (S).

R43 Posibilidad de sensibilización en contacto con la piel.

S24 Evítese el contacto con la piel.

S35 Elimínense los residuos del producto y sus recipientes con todas las precauciones posibles.

S37 Úsense guantes adecuados.

S46 En caso de ingestión, acuda inmediatamente al médico y muéstrele la etiqueta o el envase.

Para aquellos productos que no hayan sido clasificados como peligrosos según la Directiva Europea 1999/45/EC, versión corregida, la ficha de datos de seguridad está a disposición del usuario profesional.Si desea más información sobre las precauciones de seguridad durante el funcionamiento del sistema, consulte el capítulo 8 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

Precauciones de manipulaciónNo utilice los equipos de reactivos una vez transcurrida la fecha de caducidad.No mezcle entre sí reactivos de equipos diferentes.

Antes de cargar el equipo de reactivos ARCHITECT Cortisol en el sistema por primera vez, mezcle el frasco de micropartículas para resuspender las micropartículas que se hayan asentado durante el envío. Si desea más información sobre cómo mezclar las micropartículas, consulte el apartado "Procedimiento", subtítulo "Procedimiento del ensayo", de este prospecto.

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Se DEBEN utilizar septos (tapones de protección) para evitar la evaporación y la contaminación de los reactivos y para asegurar su buen estado. No se puede garantizar la fiabilidad de los resultados de este ensayo si los septos no se manejan según las instrucciones indicadas en este prospecto.

Para evitar la contaminación, utilice guantes limpios cuando coloque un septo en un frasco de reactivo destapado.

Una vez que haya colocado un septo en un frasco de reactivo abierto, no invierta el frasco, ya que el reactivo se puede derramar y esto podría afectar a los resultados del análisis.Con el tiempo, los residuos líquidos se pueden secar en la superficie del septo (tapón de protección). Generalmente se trata de sales secas que no afectan al funcionamiento del ensayo.

Si desea más información sobre las precauciones de manipulación durante el funcionamiento del sistema, consulte el capítulo 7 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

ALMACENAMIENTO

El equipo de reactivos ARCHITECT Cortisol se debe almacenar a una temperatura entre 2 °C y 8 °C en posición vertical y puede utilizarse inmediatamente después de sacarlo del refrigerador. Si se almacenan y se manejan según las instrucciones, los reactivos se mantienen estables hasta la fecha de caducidad.El equipo de reactivos ARCHITECT Cortisol se puede almacenar en el ARCHITECT i System durante un máximo de 30 días. Transcurrido este período de tiempo, deséchelo. Si desea más información sobre el control del tiempo de almacenamiento transcurrido en el sistema, consulte el capítulo 5 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.Los reactivos se pueden almacenar dentro y fuera del ARCHITECT i System. Si retira los reactivos del sistema, almacénelos a una temperatura entre 2 °C y 8 °C (con los septos y los tapones para los reactivos) en posición vertical. Si almacena los reactivos fuera del sistema, se recomienda que los guarde en sus bandejas y cajas originales para asegurarse de que se almacenan en posición vertical. Si el frasco de micropartículas no se almacena en posición vertical (con un septo instalado) durante el almacenamiento refrigerado fuera del sistema, el equipo de reactivos se debe desechar. Después de retirar los reactivos del sistema, debe realizar una lectura para actualizar el tiempo de estabilidad de los reactivos en el sistema.

Indicaciones de descomposición de los reactivosSi el valor de un control se encuentra fuera del intervalo especificado, puede ser indicio de una descomposición de los reactivos o de errores técnicos. Los resultados de estos análisis no son válidos y se deben repetir. A veces es necesario calibrar de nuevo. Si desea más información sobre los procedimientos de solución de problemas, consulte el capítulo 10 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

FUNCIONAMIENTO DEL INSTRUMENTOAntes de realizar el ensayo ARCHITECT Cortisol, se debe instalar el fichero del ensayo en el ARCHITECT i System. Esta instalación se efectúa mediante el CD-ROM del ensayo ARCHITECT i "Addition D". Si desea más información sobre la instalación del fichero del ensayo y sobre la visualización y la modificación de los parámetros del ensayo, consulte el capítulo 2 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.Si desea más información sobre la impresión de los parámetros del ensayo, consulte el capítulo 5 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.Si desea más información sobre el funcionamiento del sistema, consulte el Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

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Las unidades de resultados programadas de fábrica para el ensayo ARCHITECT Cortisol son μg/dl. Cuando se seleccionan las unidades de resultados alternativas nmol/l, el factor de conversión utilizado por el sistema es 27,59.16 Cuando se seleccionan las unidades de resultados alternativas μmol/l, el factor de conversión utilizado por el sistema es 0,02759.

Fórmula de conversión: (concentración en μg/dl) x(27,59) = nmol/lFórmula de conversión: (concentración en μg/dl) x(0,02759) = μmol/l

RECOGIDA Y PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS PARA EL ANÁLISISTipos de muestrasEl ARCHITECT i System no puede comprobar el tipo de espécimen utilizado. Por lo tanto, el usuario tiene la responsabilidad de comprobar que se haya utilizado el tipo de espécimen adecuado con el ensayo ARCHITECT Cortisol.Suero y plasma

Con el ensayo ARCHITECT Cortisol se pueden utilizar muestras de suero (incluyendo el suero recogido en tubos con separador) o plasma (recogido con heparina de litio, en tubos con separador de plasma con heparina de litio, heparina de sodio o EDTA potásico) humanos. No se ha verificado el uso de otros anticoagulantes con el ensayo ARCHITECT Cortisol. Siga las instrucciones del fabricante de los tubos de recogida para el procesamiento y el manejo de especímenes.

OrinaCon el ensayo ARCHITECT Cortisol se puede utilizar orina humana. La muestra de orina se debe recoger en un recipiente limpio y sin usar. No es necesario el uso de conservantes. No obstante, se pueden utilizar 10 gramos de ácido bórico por litro de orina.

Condiciones de las muestrasNo utilice muestras en las siguientes condiciones:

inactivadas con calorde cadáveres o de otros fluidos corporales que no sean suero, plasma u orina humanoscon contaminación microbiana evidente

Maneje con cuidado las muestras de pacientes para evitar la contaminación cruzada. Se recomienda el uso de pipetas o puntas de pipetas desechables.Compruebe que no haya burbujas en las muestras. Si las hubiese, retírelas con un bastoncillo antes del análisis. Para evitar la contaminación cruzada, utilice un bastoncillo nuevo para cada muestra.Las muestras de suero y plasma no deben presentar fibrina, eritrocitos ni partículas en suspensión.Antes de centrifugar, compruebe que la formación del coágulo en las muestras de suero se haya completado. Algunas muestras, especialmente las de pacientes sometidos a terapia con anticoagulantes o terapia trombolítica, pueden presentar tiempos de coagulación prolongados. Si la muestra se centrifuga antes de que se complete la formación del coágulo, la presencia de fibrina puede causar resultados erróneos.

Preparación para el análisisAntes del análisis, las muestras de suero, plasma u orina turbias o que contengan partículas en suspensión se deben centrifugar.Después de la centrifugación, evite la capa de lípidos (si existe) cuando pipetee la muestra en una copa de muestra o en un tubo secundario.Las muestras se deben mezclar BIEN, después de descongelarlas, en un agitador de tubos tipo Vortex a BAJA velocidad o invirtiéndolas suavemente, y centrifugar antes del uso para eliminar los eritrocitos o las partículas en suspensión y asegurar la reproducibilidad de los resultados. Se recomienda no someter las muestras a múltiples ciclos de congelación y descongelación.

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AlmacenamientoSi el análisis se retrasa más de 8 horas, retire el coágulo, el separador de suero o plasma o los eritrocitos de las muestras de suero o plasma. Las muestras sin separador de gel y sin coágulo ni eritrocitos se pueden almacenar un máximo de 14 días a una temperatura entre 2 °C y 8 °C.Las muestras de orina se pueden almacenar durante un máximo de 14 días a una temperatura entre 2 °C y 8 °C.Almacenadas a una temperatura igual o inferior a -10 °C, las muestras de suero, plasma u orina se pueden almacenar hasta 30 días.

TransporteAntes del envío, se recomienda retirar el coágulo, el separador de suero o plasma o los eritrocitos de las muestras. En caso de transporte, las muestras se deben preparar y etiquetar de acuerdo con las normativas vigentes que rigen el transporte de muestras y sustancias infecciosas. Las muestras se pueden enviar a temperatura ambiente o con hielo o nieve carbónica. No sobrepase el tiempo de almacenamiento de las muestras mencionado anteriormente.

PROCEDIMIENTOMateriales suministrados

8D15 Equipo de reactivos ARCHITECT Cortisol

Materiales necesarios pero no suministradosARCHITECT i System7K33 ARCHITECT i - EE.UU. "Addition D"7K32 ARCHITECT i - Internacional (excepto EE.UU.) "Addition D"8D15-01 Calibradores ARCHITECT Cortisol6E20-10 Abbott Immunoassay Multi-Constituent Controls (Controles multiconstituyentes para inmunoanálisis de Abbott) u otros controles comercializadosARCHITECT i ARCHITECT i ARCHITECT i ARCHITECT i ARCHITECT i ARCHITECT i ARCHITECT i Pipetas o puntas de pipetas (opcional)

Si desea más información sobre los materiales necesarios para los procedimientos de mantenimiento, consulte el capítulo 9 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

Procedimiento del ensayoAntes de cargar el equipo de reactivos ARCHITECT Cortisol en el sistema por primera vez, mezcle el frasco de micropartículas para resuspender las micropartículas que se hayan asentado durante el envío. Una vez cargadas las micropartículas, no es necesario volver a mezclarlas.

Invierta el frasco de micropartículas 30 veces.Compruebe visualmente que las micropartículas del frasco se hayan resuspendido. Si las micropartículas continúan adheridas al frasco, siga invirtiendo el frasco hasta que éstas estén completamente resuspendidas.Si las micropartículas no se resuspenden, NO UTILICE ESTE REACTIVO y póngase en contacto con su representante local de Abbott.

Una vez que las micropartículas se hayan resuspendido, coloque un septo (tapón de protección) en el frasco. Si desea más información sobre cómo colocar los septos, consulte el apartado "Precauciones de manipulación" de este prospecto.

Cargue el equipo de reactivos ARCHITECT Cortisol en el ARCHITECT i System.

Compruebe que se encuentren todos los reactivos del ensayo necesarios. Asegúrese de que todos los frascos de reactivos tengan septos (tapones de protección).

Si lo considera necesario, solicite una calibración.Si desea más información sobre la petición de calibraciones, consulte el capítulo 6 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

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Solicite los ensayos en el sistema.Si desea información sobre la petición de muestras de pacientes y controles, consulte el capítulo 5 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

El sistema calcula el volumen mínimo de muestra y lo imprime en el informe de la lista de peticiones. No se pueden analizar más de 10 replicados de la misma copa de muestra. Antes de procesar el ensayo, compruebe que el volumen presente en la copa de muestra sea adecuado.

Prioridad: 70 μl para el primer análisis con el ensayo ARCHITECT Cortisol más 20 μl para cada análisis adicional con el ensayo ARCHITECT Cortisol de la misma copa de muestra.≤ 3 horas en el sistema: 150 μl para el primer análisis con el ensayo ARCHITECT Cortisol más 20 μl para cada análisis adicional con el ensayo ARCHITECT Cortisol de la misma copa de muestra.> 3 horas en el sistema: se necesita volumen de muestra adicional. Si desea más información sobre la evaporación de las muestras y los volúmenes de muestra necesarios, consulte el capítulo 5 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.Si utiliza tubos primarios o con alícuotas, use las marcas de nivel de muestra para asegurarse de que haya suficiente muestra de paciente.

Prepare los calibradores y los controles.Los calibradores ARCHITECT Cortisol y Abbott Immunoassay Multi-Constituent Controls se deben preparar según las instrucciones indicadas en sus respectivos prospectos.El volumen requerido para los calibradores ARCHITECT Cortisol se obtiene dispensando verticalmente 5 gotas de cada calibrador en la copa de muestra correspondiente. Dispense 150 μl de cada control en la copa de muestra correspondiente.

Cargue las muestras.Si desea más información sobre cómo cargar las muestras, consulte el capítulo 5 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

Pulse la tecla PROCESAR. Si desea más información sobre los principios del funcionamiento, consulte el capítulo 3 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.Para garantizar un funcionamiento óptimo, es importante realizar los procedimientos habituales de mantenimiento descritos en el capítulo 9 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. Los procedimientos de mantenimiento podrán ser más frecuentes si los procedimientos de su laboratorio así lo requieren.

Procedimientos para la dilución de las muestrasLas muestras con concentraciones de cortisol superiores a 59,8 μg/dl se señalizan con el código “>59.8” y se pueden diluir con el protocolo de dilución automática o con el procedimiento de dilución manual.Protocolo de dilución automática

Si se utiliza el protocolo de dilución automática, el sistema realiza una dilución al 1:2 de las muestras, calcula automáticamente la concentración de las muestras antes de diluirlas y comunica los resultados.Las muestras con concentraciones de cortisol superiores a119,6 μg/dl se señalizan con el código “>119.6” cuando se procesan con el protocolo de dilución automática. Estas muestras se pueden diluir con el procedimiento de dilución manual.

Procedimiento de dilución manualLas diluciones manuales se deben realizar de la siguiente manera:

La dilución recomendada para un ensayo de cortisol es al 1:4.Antes de diluir la muestra, dispense aproximadamente 7 gotas de calibrador A ARCHITECT Cortisol en un tubo de ensayo limpio para su uso en el paso siguiente.Transfiera 150 μl de calibrador A ARCHITECT Cortisol del tubo de ensayo preparado en el paso anterior en otro tubo de ensayo limpio y añada 50 μl de muestra de paciente.

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5

El usuario debe introducir el factor de dilución en la pantalla de peticiones de muestras de pacientes o controles. El sistema utiliza este factor de dilución para calcular automáticamente la concentración de la muestra antes de la dilución y comunica el resultado. La dilución debe realizarse de forma que el resultado diluido (antes de aplicar el factor de dilución) sea superior a 3,0 μg/dl.Si desea más información sobre la petición de diluciones, consulte el capítulo 5 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

CalibraciónPara realizar una calibración del ensayo ARCHITECT Cortisol, analice por duplicado los calibradores A, B, C, D, E y F. Se debe analizar una única muestra de cada control para evaluar la calibración del ensayo. Asegúrese de que los valores de los controles se encuentren dentro de los intervalos establecidos. Los calibradores se deben cargar con prioridad.Intervalo de la calibración: 0,0 μg/dl - 59,8 μg/dl.Una vez que la calibración del ensayo ARCHITECT Cortisol haya sido aceptada y almacenada, no hace falta volver a calibrar cada vez que se analicen las muestras, excepto cuando:

Se utilice un equipo de reactivos con distinto número de loteLos controles se encuentren fuera del intervalo de valores especificado

Si desea más información sobre cómo realizar una calibración del ensayo, consulte el capítulo 6 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

PROCEDIMIENTOS DE CONTROL DE CALIDADEl requisito de control de calidad recomendado para el ensayo ARCHITECT Cortisol es el análisis de una muestra única de cada una de las concentraciones de los controles cada 24 horas, cada día de su uso. Los controles comercializados tales como los Abbott Immunoassay Multi-Constituent Controls son adecuados para este fin. Si los procedimientos de control de calidad de su laboratorio así lo requieren, se pueden utilizar los controles más frecuentemente para verificar los resultados del análisis. Cada laboratorio debe establecer sus propios intervalos de control para el seguimiento del funcionamiento adecuado de este ensayo. Si un control se encuentra fuera del intervalo especificado, los resultados del análisis no son válidos y se debe repetir. La recalibración puede ser necesaria.

Verificación de las especificaciones analíticas del ensayoSi desea más información sobre los protocolos de verificación de las especificaciones analíticas del ensayo, consulte el apéndice B del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT. El ensayo ARCHITECT Cortisol pertenece al grupo 1 de métodos. Utilice los calibradores ARCHITECT Cortisol en lugar de los calibradores MasterCheck indicados en el apéndice B del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

RESULTADOSCálculoEl ensayo ARCHITECT Cortisol utiliza un método de cálculo de datos de ajuste a una curva logística de 4 parámetros (4PLC, Y ponderado) para calcular la curva de calibración.

Resultados señalizadosPara algunos resultados puede aparecer información en la columna de señalizaciones. Si desea una descripción de las señalizaciones que pueden aparecer en esta columna, consulte el capítulo 5 del Manual de Operaciones del sistema ARCHITECT.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTODebido a la variación diurna de las concentraciones de cortisol en los individuos sanos, todas las determinaciones de cortisol en suero y plasma deben indicar la hora del día de la recogida de la muestra.

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Los pacientes que reciben terapia con fludrocortisona, prednisolona o prednisona (que se convierte en prednisolona in vivo) pueden presentar concentraciones de cortisol artificialmente elevadas debido a la reactividad cruzada. La reactividad cruzada de esteroides endógenos y sintéticos se describe en el apartado "Características específicas del funcionamiento", subtítulo "Especificidad" de este prospecto.Si los resultados del ensayo Cortisol no se corresponden con los datos clínicos, se recomienda realizar otro análisis para confirmar los resultados.Los resultados con fines diagnósticos se deben utilizar junto a otros datos, como síntomas, resultados de otros análisis, impresiones clínicas, etc.Las muestras de pacientes que hayan recibido preparados a base de anticuerpos monoclonales de ratón con fines diagnósticos o terapéuticos pueden contener anticuerpos humanos antirratón (HAMA).17 Estas muestras pueden dar valores falsamente elevados o disminuidos al analizarlas con equipos de ensayo que empleen anticuerpos monoclonales de ratón.17,18 En el caso de resultados del ensayo que no se correspondan con otras observaciones clínicas, puede ser necesaria información adicional para determinar el diagnóstico.Los anticuerpos heterófilos presentes en el suero humano pueden reaccionar con las inmunoglobulinas del reactivo e interferir en los inmunoanálisis in vitro.19 La presencia de anticuerpos heterófilos en una muestra de paciente puede causar valores anómalos.19 Para fines diagnósticos puede ser necesaria información adicional.La concentración de cortisol en una muestra dada, determinada con ensayos de fabricantes diferentes puede variar debido a las diferencias en los métodos de ensayo, la calibración y la especificidad de los reactivos.

VALORES ESPERADOS

Intervalo de valores de referencia: sueroLas concentraciones de cortisol en suero se determinaron procesando muestras extraídas de individuos aparentemente sanos, recogidas antes de las 10 de la mañana y después de las 5 de la tarde. Se determinó el intervalo de referencia del 95% de las poblaciones de la mañana y la tarde. En la tabla siguiente se resumen los datos obtenidos en este estudio.*

Tipo de muestra

Recogida de la muestra

nIntervalo de referencia del 95%

μg/dl nmol/l

SueroAntes de las

10 de la mañana150 3,7 - 19,4 101,2 - 535,7

SueroDespués de las5 de la tarde

150 2,9 - 17,3 79,0 - 477,8

* Datos orientativos. Los resultados obtenidos en otros laboratorios podrían ser diferentes. Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio intervalo de valores de referencia.

Intervalo de valores de referencia: orinaLas concentraciones de cortisol en orina se determinaron procesando muestras de orina de 24 horas procedentes de individuos aparentemente sanos. Se determinó el intervalo de referencia del 95%. En la tabla siguiente se resumen los datos obtenidos en este estudio.*

Tipo de muestra nIntervalo de referencia del 95%

μg/24 horasa nmol/24 horasb

Orina 128 4,3 - 176,0 11,8 - 485,6a μg/24 horas = (concentración en μg/dl) x (10) x (volumen de orina

excretada en litros en 24 horas)

b nmol/24 horas = (concentración en nmol/l) x (volumen de orina excretada en litros en 24 horas)

* Datos orientativos. Los resultados obtenidos en otros laboratorios podrían ser diferentes. Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio intervalo de valores de referencia.

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CARACTERÍSTICAS ESPECÍFICAS DEL FUNCIONAMIENTOImprecisiónEl ensayo ARCHITECT Cortisol se ha diseñado para tener una imprecisión tal que el CV total sea ≤ 10% para muestras de suero con concentraciones entre ≥ 3 μg/dl y ≤ 35 μg/dl y que el CV total sea ≤ 20% para muestras de orina con concentraciones entre ≥ 3 μg/dl y ≤ 35 μg/dl.Se realizó un estudio basado en el protocolo EP5-A220 del CLSI, anteriormente NCCLS. Se analizaron por duplicado los Abbott Immunoassay Multi-Constituent Controls (1, 2 y 3) y 7 muestras con dos lotes de reactivos, dos veces al día durante un período de 20 días en dos analizadores. Cada lote de reactivos utilizó una curva de calibración única durante todo el estudio. En la tabla siguiente se resumen los datos obtenidos en este estudio.*

Muestra Analiz.Lote delreactivo

nConc. media(μg/dl)

Intraserial Total

DE CV% DE CV%

Conc. 11 A 80 3,8 0,14 3,6 0,19 5,0

2 B 80 4,0 0,19 4,8 0,23 5,8

Conc. 21 A 80 16,6 0,43 2,6 0,62 3,7

2 B 80 17,3 0,40 2,3 1,32 7,7

Conc. 31 A 80 30,3 0,87 2,9 1,17 3,9

2 B 80 31,0 0,63 2,1 1,32 4,3

SueroMuestra 1

1 A 80 2,9 0,08 2,9 0,11 4,0

2 B 80 2,9 0,16 5,5 0,18 6,2

SueroMuestra 2

1 A 80 39,8 0,95 2,4 1,01 2,5

2 B 80 41,0 1,08 2,6 1,29 3,2

SueroMuestra 3

1 A 80 53,3 1,71 3,2 1,73 3,3

2 B 80 55,8 1,50 2,7 1,87 3,4

OrinaMuestra 1

1 A 80 2,4 0,13 5,3 0,15 6,2

2 B 80 2,7 0,16 6,1 0,17 6,4

OrinaMuestra 2

1 A 80 14,5 0,39 2,7 0,59 4,1

2 B 80 15,9 0,60 3,8 0,72 4,5

OrinaMuestra 3

1 A 80 36,8 1,05 2,9 1,39 3,8

2 B 80 40,6 1,56 3,9 1,59 3,9

OrinaMuestra 4

1 A 80 49,0 2,84 5,8 2,84 5,8

2 B 80 53,7 3,18 5,9 3,18 5,9

* Datos orientativos. Los resultados obtenidos en otros laboratorios podrían ser diferentes.

SensibilidadSensibilidad funcional (Límite de cuantificación)El ensayo ARCHITECT Cortisol se ha diseñado para tener un límite de cuantificación ≤ 1 μg/dl. En un estudio realizado se analizaron por duplicado muestras de suero y orina con concentraciones entre 0,1 μg/dl y 2,1 μg/dl durante 10 días con dos lotes de reactivos y dos calibraciones con un total de 40 replicados por muestra en dos analizadores. Los porcentajes del coeficiente de variación (CV%) totales se calcularon y se representaron gráficamente con respecto a la concentración media. Se generó una curva recíproca a través de los datos y el límite de cuantificación se calculó como la concentración correspondiente al CV del 20% de la curva generada. En un límite de confianza superior del 95%, la concentración más baja del ensayo ARCHITECT Cortisol con un CV del 20% fue de 0,8 μg/dl para muestras de suero y de 1 μg/dl para muestras de orina.** Datos orientativos. Los resultados obtenidos en otros laboratorios

podrían ser diferentes.

Límite de detecciónEl ensayo ARCHITECT Cortisol se ha diseñado para tener un límite de detección (Ld) ≤ 0,8 μg/dl. El límite de blanco (Lb) y el Ld del ensayo ARCHITECT Cortisol se determinaron con el protocolo EP17-A21 del CLSI utilizando proporciones de resultados falsos positivos (α) y falsos negativos (β) inferiores al 5%. Estas determinaciones se realizaron utilizando 60 blancos y 120 muestras con concentraciones bajas: Lb = 0,23 μg/dl y Ld = 0,40 μg/dl.** Datos orientativos. Los resultados obtenidos en otros laboratorios

podrían ser diferentes.

Linealidad

El ensayo ARCHITECT Cortisol es lineal entre 1 μg/dl y 59,8 μg/dl según un estudio realizado basado en el protocolo EP6-A22 del CLSI.

EspecificidadLa especificidad del ensayo ARCHITECT Cortisol se determinó estudiando la reactividad cruzada de compuestos cuya estructura química o uso simultáneo podría interferir en el ensayo ARCHITECT Cortisol. La especificidad del ensayo se determinó añadiendo cada compuesto a muestras de suero humano a las que se le habían añadido concentraciones de cortisol entre 11,4 μg/dl y 12,0 μg/dl.*

CompuestoConcentración

(μg/dl)

Reactividad cruzada

(%)

Aldosterona 1 000 0,0

Beclometasona 1 000 0,0

Budesonida 1 000 0,0

Canrenona 1 000 0,1

Corticosterona 1 000 0,9

Cortisol 21-glucurónido 1 000 0,2

Cortisona 1 000 2,7

β-cortol 1 000 0,0

β-cortolona 1 000 0,0

11-desoxicorticosterona 100 0,0

11-desoxicortisol 100 1,9

Dexametasona 1 000 0,0

DHEA 1 000 0,0

DHEA-S 1 000 0,0

β-estradiol 1 000 0,0

Estriol 1 000 0,0

Estrona 1 000 0,0

Fludrocortisona 100 36,6

Propionato de fluticasona 1 000 0,0

6β-hidroxicortisol 1 000 0,2

17α-hidroxipregnenolona 1 000 0,1

11β-hidroxiprogesterona 1 000 0,2

17-hidroxiprogesterona 1 000 0,6

Acetato de medroxiprogesterona

1 000 0,0

6-metilprednisolona 1 000 0,1

Mometasona 1 000 0,0

Prednisolona 100 12,3

Prednisona 1 000 0,6

Pregnanediol 1 000 0,0

Pregnanetriol 1 000 0,0

Pregnenolona 1 000 0,0

Progesterona 1 000 0,0

β-sitosterol 1 000 0,0

Espironolactona 1 000 0,0

Testosterona 1 000 0,0

Tetraciclina 1 000 0,0

Tetrahidrocortisol 1 000 0,5

Triamcinolona 1 000 0,5

* Datos orientativos. Los resultados obtenidos en otros laboratorios podrían ser diferentes.

7

Interferencias La posible interferencia en el ensayo ARCHITECT Cortisol de los compuestos siguientes es ≤ 15% en las concentraciones indicadas.Se realizó un estudio basado en el protocolo EP7-A223 del CLSI con el ensayo ARCHITECT Cortisol. A muestras de suero con concentraciones de cortisol entre 5,1 μg/dl y 34,2 μg/dl, y a muestras de orina con concentraciones de cortisol entre 4,6 μg/dl y 37,9 μg/dl se les añadieron los siguientes compuestos con capacidad de interferir. La interferencia media observada durante el estudio estuvo entre el -7,8% y el 13,2%.*

Tipo de muestraSustancia con capacidad de interferir

Concentración

Suero Bilirrubina 20 mg/dl

Hemoglobina 500 mg/dl

Proteínas totales (conc. baja)

3 g/dl

Proteínas totales (conc. alta)

10 g/dl

Triglicéridos 2 000 mg/dl

Orina Creatinina 5 mmol/l

Urea 350 mmol/l

Glucosa 5 mmol/l

Cloruro sódico 1 000 mmol/l

Proteínas totales (conc. alta)

1 000 mg/dl

* Datos orientativos. Los resultados obtenidos en otros laboratorios podrían ser diferentes.

Evaluación de otras sustancias con capacidad de interferirEl ensayo ARCHITECT Cortisol ha sido diseñado para tener una interferencia potencial ≤ 15% por parte de los anticuerpos humanos antirratón (HAMA) y del factor reumatoide (FR). En un estudio realizado se evaluó el ensayo ARCHITECT Cortisol analizando muestras con HAMA y FR para comprobar la especificidad clínica. Se evaluaron muestras positivas para HAMA y FR con el fin comprobar la interferencia (%) con concentraciones de cortisol añadidas entre 9,0 μg/dl y 44,1 μg/dl. La interferencia media absoluta (%) se resume en la tabla siguiente.*

Otras sustancias con capacidad de interferir

nInterferencia media

absoluta (%)

Positiva para HAMA 10 1,0

Positiva para FR 10 5,9

* Datos orientativos. Los resultados obtenidos en otros laboratorios podrían ser diferentes.

CorrelaciónEl ensayo ARCHITECT Cortisol se ha diseñado para tener una pendiente de 1,0 ± 0,1 y un coeficiente de correlación (r) ≥ 0,95 para muestras de suero en comparación con la técnica de cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas (LC-MS/MS). El ensayo ARCHITECT Cortisol se ha diseñado para tener una pendiente de 1,0 ± 0,2 y un coeficiente de correlación (r) ≥ 0,85 para muestras de orina en comparación conLC-MS/MS. En un estudio se comparó el ensayo ARCHITECT Cortisol con el método LC-MS/MS. Los datos obtenidos en este estudio se analizaron utilizando el método de regresión Passing-Babloka y los resultados obtenidos se resumen en la tabla siguiente.*

ARCHITECT Cortisol respecto a LC-MS/MS

Tipo de muestra n PendienteOrdenada en

el origenCoeficiente de correlación (r)

Suero 125 1,08 -0,02 0,996

Orina 81 1,06 0,84 0,997

Intervalo de muestras de suero (ARCHITECT): 1,5 μg/dl – 52,5 μg/dl

Intervalo de muestras de suero (LC-MS/MS): 1,4 μg/dl – 49,4 μg/dl

Intervalo de muestras de orina (ARCHITECT): 0,8 μg/dl – 51,1 μg/dl

Intervalo de muestras de orina (LC-MS/MS): 0,1 μg/dl – 49,5 μg/dl

El ensayo ARCHITECT Cortisol se ha diseñado para tener un coeficiente de correlación (r) ≥ 0,90 para muestras de suero y ≥ 0,80 para muestras de orina en comparación con el ensayo AxSYM Cortisol. En un estudio se comparó el ensayo ARCHITECT Cortisol con el ensayo AxSYM Cortisol. Los datos obtenidos en este estudio se analizaron utilizando el método de regresión Passing-Babloka y los resultados obtenidos se resumen en la tabla siguiente.*

ARCHITECT Cortisol respecto a AxSYM Cortisol

Tipo de muestra n PendienteOrdenada en

el origenCoeficiente de correlación (r)

Suero 121 0,91 0,92 0,983

Orina 74 0,54 -1,14 0,980

Intervalo de muestras de suero (ARCHITECT): 1,5 μg/dl – 52,5 μg/dl

Intervalo de muestras de suero (AxSYM): 1,3 μg/dl – 59,1 μg/dl

Intervalo de muestras de orina (ARCHITECT): 0,8 μg/dl – 46,8 μg/dl

Intervalo de muestras de orina (AxSYM): 2,1 μg/dl – 60,0 μg/dla Método de regresión lineal sin suposiciones especiales sobre la

distribución de las muestras y los errores de medida.24

* Datos orientativos. Los resultados obtenidos en otros laboratorios podrían ser diferentes.

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