Cocos gram positivos
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TALLER 2
Cocos Gram PositivoStaphylococcus y Streptococcus
Maracaibo, 4 de mayo de 2011
Victor Urdaneta
Maite Trompiz Stefany
Troconis
Isabel Urdaneta María
Urdaneta
tipo morfológico de bacteria esférica(del griego kókkos, grano)
Cocos
Diplococo Estafilococo EstreptococoTetracoco
EstafilococosStaphylococcus
esféricas anaerobio facultativas de casi 1mm de diámetro dispuestas en grupos
irregulares y son Gram positivas
Son
Por ello se observan de color púrpura
Características de los Staphylococcus* Son inmóviles. * No presentan endosporas.
* Presentes en la piel y en la mucosa del ser humano (Staphylococcus epidermidis).
* Existen Staphylococccus capsulados que son algunas cepas del S. aureus.
* Fermentan carbohidratos y producen pigmentos que van
y
* Producen coagulasa que los protege de la fagocitosis.
* Causan hemolisis por acción de la toxina α y β.
* Producen toxinas exfoliativas que provocan la descamación generalizada del síndrome de la piel escaldada.
Amarillo intenso
peróxido de hidrógeno (antígeno)* Producen catalasa que convierte el
Blanco
* El Staphylococcus aureus es resistente a la penicilina por la producción de β-lactamasa.
Especies de StaphylococcusNombre Características Hábitat Enfermedades
Staphylococcus epidermidis
-Gram positivos-Catalasa Positivos
- Desoxirribonucleasa Negativo- Coagulasa Negativo
- Sensibles a la novobiocina -No Hemolítico
-No fermenta manitol. -No es pigmentado.
-Capsulado
Flora normal de piel aparatos respiratorios
y gastrointestinal humano
Infecciones de catéter
Infección de implante
Infección de herida
Cistitis
Endocarditis
Staphylococcus saprophyticus
- Gram positivos- Catalasa Positivos
- Coagulasa Negativo - No posee capsula
- No pigmentado- Resistente a la novobiocina,
penicilina y meticilina - Sensible a la vancomicina
- Desoxirribonucleasa Negativo - Sensible al óxido nítrico
- No hemolítico
No se conoce con exactitud
Causa infecciones en el aparato urinario femenino,
uretritis en varones
Staphylococcus aureus
- Gram positivos- Coagulasa Positivos- Catalasa positivos
- Resistente a la Penicilina- Algunas cepas son capsuladas
- Fermentan el manitol- Desoxirribonucleasa Positivo
- Resistente al óxido nítrico (lactato-deshidrogenasa,)
- Sensibles a la Vancomicina
Flora normal de la piel humana
Síndrome de piel escaldada
Síndrome del shock tóxico
Gastroenteritis
Neumonía
Pruebas diagnósticas de laboratorio
Pus
Frotis Pus
Esputo
-No se pueden determinar si son patógenos o saprófitos
-Solo se observa la forma, agrupación, comportamiento al Gram de los Staphylococcus
Cultivo
Agar sangre
Sangre
Líquido cefalorraquídeo
Esputo
A las 18 hrs. de incubación Se observan las colonias típicas
Se observan hemólisis y producción de pigmentos
Agar sal y manitol
Para detectar el Staphylococcus aureus
A los días
mixtaNo tienen
requerimientos nutricionales altos
Muestras
Prueba de la catalasa
Método 2:
Método 1:Portaobjeto
oGota de peróxido
de hidrógeno tubo de ensayo
Solución de peróxido de hidrógeno
Prueba de coagulasa
Plasma citratado 1:5- Caldo de cultivo
- Colonias en crecimiento en Agar
Agar inclinado
37° C Formación de coágulo
4 hrs.
Prueba de la presencia de desoxirribunocleasa
Se siembra Staphylococcus en
una placa que contiene ADN y verde de metilo
Se incuba por 18 hrs.
Si se forma un halo transparente alrededor
de la siembra
EstreptococosStreptococcus, griego streptos significa que se dobla o retuerce con facilidad
Son cocos Gram positivos agrupados en cadena
Son mas complejos que los Staphylococcus y se clasifican según el
grado de hemólisis
Se clasifican en:
Streptococcus pyogenes representan a la gran mayoría de los patógenos humanos son sensibles a la bacitracina
Streptococcus agalactiae forma parte de la flora natural de las vías urinarias femeninas en ocasiones son sensibles a la bacitracina
Se pueden encontrar en la faringe y causar sinusitis, bacteriemia y endocarditis y se pueden confundir con los estreptococos del grupo A
Streptococcus bovis y Streptococcus equinus
Es difícil encontrarlos en enfermedades humanas
Enterococos
No enterococos
Streptococcus faecalis y Streptococcus faeciumSon inhibidos pero no destruidos por la penicilina
Son destruidos por la penicilina
Grupo
Grupo
Grupo y
Grupo
Grupo
y
,,
-
β-hemolíticosProducen hemólisis total de los glóbulos rojos
observándose como un halo transparente alrededor de las colonias
Se libera hemoglobina
α-hemolíticos Producen hemólisis parcial de los glóbulos rojos (α hemolíticos)
Grupo
Grupo
Streptococcus viridans: constituyen la flora normal de las vías respiratorias y son importantes en el estado de salud de las mucosas pueden llegar a la sangre por lesiones traumáticas
Streptococcus salivarius
Streptococcus mitis
Streptococcus mutans
Streptococcus sanguis
En caso de llegar a la cavidad bucal
Por la producción de polisacáridos
Son α-hemolíticos pero se comportan como enterococos
*Poseen diferente capacidad para producir hemólisis
*Es raro encontrarlos en enfermedades humanas
*Se conocen como Estreptococos lácticos porque cortan la leche
*Se desarrollan bajo condiciones anaerobias
*Hemólisis variable
*Se encuentran en la flora normal de intestino y vías urinarias femeninas
No produce constituyendo los δ hemolíticosLiberando pigmento
verde
Peptoestreptococo
Enfermedades causadas por StreptococcusStreptococcus β-hemolíticos
Infecciones de heridas traumáticas o quirúrgicas
Enfermedades por invasión del Streptococcus
Enfermedades por infección local del Streptococcus
Faringitis estreptocócica, es la infección mas común causada por el Streptococcus β-hemolíticos.
Puede causar Pioderma estreptocócica
Streptococcus pyogenes
Erisipela
Fiebre peuperal
Infecciones generalizadas
Útero
Piel
Produce:
Erupciones cubiertas de costras
Impétigo
Endocarditis infecciosa
Afectan las válvulas cardiacas normales o con deformaciones
Afectan las válvulas cardiacas anormales
que llega a la sangre por lesiones traumáticas
causada por flora normal de
Endocarditis bacteriana aguda
Endocarditis bacteriana subaguda
β-hemolíticos α-hemolíticos
Sensibilidad a la bacitracina
Hidrólisis del PYR
Prueba de CAMP
Bilis esculina
Prueba de tolerancia a la sal (Caldo salado)
PYR
Sensibilidad a la optoquina
Pruebas diagnósticas de laboratorio
β-hemolíticos
Sensibilidad a la bacitracina Se usa para separar a los Streptococcus pyoneges de los demás β-hemolíticos
Sembrar un gran inóculo en una placa de Agar sangre se coloca el disco de bacitracina
Se forma un halo de inhibición de crecimiento de cualquier diámetro
Hidrólisis del PYR
Se usa para separar a los Streptococcus pyoneges y Enterococos de los demás β-hemolíticos
Porque tienen la capacidad de hidrolizar el sustrato PYR gracias a la enzima L-piroglutamil
(Pirridonil β-naftilamida)
Si hay un cambio de color
Se incuba de 18-24hrs a 37° C
Se usa para separar a los Streptococcus agalactiae de los demás β-hemolíticos
CAMP ( Factor de monofosfato de adenina cíclica)
Consiste en sembrar una estría de Staphylococcus productor de betalicina en Agar sangre
Si hay una zona de potenciación de hemólisis en forma de punta de flecha
Se incuba de 18-24hrs a 37° C
Perpendicular a esta de 3-4mm de distancia una estría de Streptococcus β-hemolíticos del grupo B
Prueba de CAMP
α y δ hemolíticos
Bilis esculina Separa los Streptococcus del grupo D de los demás grupos de Streptococcus
Si se torna negro el medio
Sensibilidad a la optoquinaSe usa para diferenciar el Streptococcus neumoniae de los demás α hemolíticos
Estriar una placa de Agar sangre con una suspension de Mc Farland 0.5
Sembrar el inoculo en tubos de Agar bilis esculina inclinado pero la concentración de la bilis el al 40%
Colocar un disco de optoquina
Se incuba de 18-24hrs a 37° C
Si hay un halo de inhibición mayores de 15mm es característicos del Streptococcus neumoniae
Prueba de tolerancia a la sal (Caldo salado)
Separar los Enterococos capaces de crecer en caldo salado de otros Streptococcus del grupo D
Si aparece turbidez con o sin acidificación del medio
Se le agrega un indicador de pH Púrpura de bromocresol
Se incuba de 18-24hrs a 35° C
Se inocula el caldo salado con la cepa del Streptoccocus del grupo D a estudiar
Staphylococcus Streptococcus
*Su agrupación es en forma de racimos
*Su agrupación es en forma de cadenas
*No presentan grupos de clasificación *Se clasifican en grupos tomando en cuenta su grado de hemólisis
*Sus requerimientos nutricionales son bajos por lo que pueden cultivarse en
medios simples
*Tienen requerimientos nutricionales exigentes por lo que se necesitan medios de cultivo enriquecidos para su desarrollo
*Producen catalasa, enzima que cataliza la descomposiocion del peroxido de
hidrogeno en H2O
*No producen catalasa por lo que son catalasa negativos
*Producen la coagulasa, rodeándose de un coagulo de fibrina y protegerse de la
fagocitosis*No producen coagulasa
Diferencias
Semejanzas
Son bacterias Gram positivas Son anaerobias facultativas
Son de forma esférica por eso reciben el nombre de cocos
Obtienen energía mediante la fermentación de los carbohidratos
Pueden ser diagnosticados mediante frotis y cultivos
* Diplococos encapsulados
Permite tipificarlos con antisueros específicos
* Son habitantes normales de las vías respiratorias superiores de los humanos
Pueden causar:
* Gram positivos
Cápsula de
polisacáridos
* Se observan en cadenas cortas
Impide su reconocimiento por parte del hospedador, eludiendo su fagocitosis
Neumonía, sinusitis, otitis, bronquitis, meningitis y otros procesos infecciosos
Streptococcus pneumoniae (Neumococo)
Se observan con frecuencia en muestras
De cultivo joven
Esputo Pus
Lisis de los neumococos en minutos al añadir bilis de Buey (10%) o desoxicolato sódico (2%) a un caldo de cultivo o suspensión de
microorganismos con pH neutro
Sobre medio solido el crecimiento de ellos se inhibe alrededor de un disco de optoquina
Identificación de laboratorio
Virulencia casi uniforme en ratones cuando se inyectan vía intraperitoneal
Factores que disminuyen la resistencia al Neumococo
40-70% de los humanos son portadores del neumococo virulento en algún momento
Dinámica circulatoria
anormal
Congestión pulmonar
Insuficiencia cardiaca
Intoxicación alcohólica o con drogas
Deprime actividad fagocitaria
Disminuye el reflejo de la tos
Facilita la aspiración de materiales extraños
acumulación anormal de moco
Anormalidades del aparato respiratorio e
infecciones virales
Neumococos alcanzan el torrente sanguíneo por la vía de drenaje linfático de los pulmones.
Células mononucleares fagocitan activamente los residuos y gradualmente se reabsorbe esta fase liquida
Los fagocitos captan y digieren en su interior los neumococos.
Exudación de líquido fibrinoso edematoso a los alveolos seguidos por eritrocitos y leucocitos que producen
consolidación en el pulmón
Bacteriemia
Patología
Se extrae sangre para cultivo y se recolecta esputo para demostrar la presencia de neumococos mediante frotis y cultivos.
Pruebas diagnosticas de laboratorio:
- Meningitis neumónica: examen y cultivo del LCR
- Prueba de tumefacción de cápsula: esputo fresco que se mezcla con antisuero
Se observa tumefacción de la capsula o el exudado peritoneal también se usa (opcional)
- Cultivos: esputo sobre agar sangre e incubado en CO2 con la técnica de la vela. Hemocultivo.
- Frotis con tinción de Gram
Examen de esputo :
Colonización y migración
- Adhesinas Protéicas- Neumolisina
Destrucción Tisular
- Ácido Teicoico- Neumolisina - Peróxido de Hidrógeno
Supervivencia frente a fagocitosis
- Cápsula- Neumolisina
Factor virulencia
Patogenia
Ausencia de anticuerpos anticapsulares
Envejecimiento del sistema inmune
Disminución en la producción de anticuerpos