INTRODUCCION

Toxicologa y Qumica Legal Anlisis qumico toxicolgico

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Per, Decana de Amrica)

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA

Escuela Acadmico Profesional: Farmacia y Bioqumica

TOXICOLOGA Y QUMICA LEGAL

Prctica N 2

Tema:

Anlisis Qumico Toxicolgico (EQT)Grupo:

Jueves de 10- 2 pm

Integrantes:

Cayllahua Arana, Christian Max 04040069

Hernndez Bobadilla, Elida Estefana 04040070

Ninamanco Sarmiento, Renzo

Raraz Palpan, Edwin

Profesor:

Q. F. Alfonso Apesteguia

Ao:

5(Semestre:

IIFecha:

10/04/08Lima-Per

2 0 0 8 II

INTRODUCCIN TERICAEl anlisis toxicolgico

Se define como el conjunto de medios tcnicos y humanos donde se identifican, cuantifican y controlan los efectos de los txicos, teniendo en cuenta las propiedades qumicas, fsicas y biolgicas de la sustancia estudiada. La atencin tiene como prioridad la identificacin del txico durante los primeros minutos de la demanda del servicio, para realizar el manejo clnico adecuado del paciente, buscando disminuir el riesgo de morir y evitar las secuelas que puedan generar las sustancias qumicas (1).

Importancia del anlisis toxicolgico

El anlisis toxicolgico es de gran importancia en clnica no slo como ayuda al mdico en el diagnstico y pronstico de una intoxicacin sino en la evolucin del tratamiento, ya que con anlisis de control subsiguientes dar idea al mdico si el txico permanece en el organismo o ha desaparecido. En medicina legal igualmente es de suma importancia para la comprobacin de un envenenamiento el identificar y cuantificar el txico en vsceras u otras muestras biolgicas, ya que una intoxicacin por accidental que parezca puede tener implicaciones mdico-legales u obrero-patronales cuyo resultado depende de un anlisis realizado o de una autopsia.Los laboratorios de toxicologa se han especializado al igual que las reas que cubre la Toxicologa, por lo tanto existen varias clases de laboratorio toxicolgico como son:

El laboratorio de toxicologa ambiental desarrolla sus anlisis en la identificacin y cuantificacin de sustancias txicas presentes en un ecosistema que puedan directa o indirectamente ocasionar riesgo a las personas, involucra anlisis de aguas, alimentos, suelos y aire (2).

El laboratorio de toxicologa industrial u ocupacional que investiga las sustancias potencialmente txicas involucradas en los procesos de produccin de empresas formales o informales, que de forma directa o indirecta puedan producir lesiones al individuo o afectar a la comunidad. En salud ocupacional es igualmente importante, ya que en esta poca de gran desarrollo industrial cabe destacar la gran responsabilidad del laboratorio para detectar y cuantificar numerosos txicos de trabajadores expuestos por medio de examen de orina o sangre en su fase preclnica, y en general en todo lo referente a las enfermedades profesionales.

Laboratorio de toxicologa forense que investiga las sustancias txicas que causan la muerte, o investiga los hechos legales donde se involucran sustancias Txicas (2).

El laboratorio de toxicologa clnica realiza los anlisis bsicos para l diagnostico de sustancias qumicas que causan intoxicacin aguda y las cuales debe procesar el laboratorio clnico de Toxicologa a travs de anlisis que permitan hacer un pronto diagnostico y logren detectar el mayor numero de intoxicaciones. Las intoxicaciones y procedimientos ms comunes en nuestro medio son:

Etanol, Metanol, Formaldehdo. Deteccin de sustancias utilizadas con fines delictivos (Escopolamina, Benzodiacepinas, Fenotiacinas). Anlisis de Colinesterasa en casos de intoxicacin por plaguicidas Organofosforados, como prueba indirecta. Drogas de abuso (Cocana Cannabinoides, Opiceos, Anfetaminas) Anlisis de medicamentos como Barbitricos, Fenobarbital, Carbamazepina, Fenitoina, Acido Valproico. Deteccin de monxido de carbono, (Carboxihemoglobima) Anlisis de antidepresivos Triciclicos. Anlisis de otras sustancias como Cianuro, Metales Pesados Plomo, Mercurio, Talio, Arsnico. Identificacin de txicos o del Animal venenoso Sustancias corrosivas: cidos y lcalis (blanqueadores y detergentes)

Datos que el analista debe tener en cuenta para el anlisisAntes de efectuar los anlisis conviene recoger la mayor informacin posible que ayudar a individualizar el txico en cuestin, relativos a la persona intoxicada, a sus relaciones familiares y sociales, el ambiente de trabajo y muy especialmente de las circunstancias que precedieron a la intoxicacin o a la muerte, es muy interesante lo referente a los sntomas txicos si aparecieron despus de haber tomado alimento o bebida y cunto tiempo despus de la ingestin.

Si se trata de intoxicaciones colectivas, debe comprobarse si todos los afectados tomaron de los alimentos o bebidas o solo algunos de ellos.

Es importante saber la forma en que se suministr el txico, conocer el tiempo aproximado entre la ingestin y la aparicin de sntomas, y cul fue la sintomatologa y si fuere el caso, el tiempo transcurrido entre los primeros sntomas y la muerte (2).

Tambin conviene precisar si el paciente estaba en perfecto estado de salud con anterioridad a la intoxicacin o si se presento sta en el curso de una embriaguez enfermedad, embarazo etc.

Es de inters indicar al analista si se trata de un caso en que se sospeche suicidio, o error de frmula o accidente, o probable mvil de un delito (robo, etc.) En todo caso debe hacerse una relacin sencilla de los hechos, lo que puede ser de gran utilidad y ahorrar mucho tiempo en la investigacin toxicolgica.

Para muchos de los txicos comunes puede resultar intil el examen de los fluidos orgnicos si han transcurrido mas de 24 horas despus de su ingestin, pues muchos de ellos son detoxicados o eliminados en menos de ese tiempo, especialmente si estaban en pequeas cantidades. Las excepciones son los venenos acumulativos como los metales pesados, los compuestos radioactivos etc.

OBJETIVOS: Aprender y relacionar los pasos sucesivos, relacionados a un anlisis qumico toxicolgico frente a una muestra problema. Interpretar los ensayos con papel sensible, observado las distintas coloraciones que ocurren en cada uno de ellos.

REACTIVOS

cido Tartarico

CuSO4 2%

Resina de guayaco

Reactivo de Yodo- Iodurado

Almidn 1%

NaCO3 NaOH 10%

AgNO3 10%

PdCl2 10%

Reactivo de Trtaro Emtico 10%

Acetato de Plomo 10%

FeSO4 10%

HCl conc.

Agua destilada

MATERIALES

Muestra problema

Palpel Watman

Pipetas de 5 mL

Frasco de Vidrio

Probeta

Placa de vidrio

Laminas de Cobre

EQUIPOS

Bao Maria

REACCIONES: 1.-Reaccin con el Reactivo de Schombein

Fundamento: Aumento del potencial de oxidacin de las sales cpricas al pasar a sales cuprosas poco solubles o poco disociadas.

Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1 (10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de sulfato cprico (CuSO4 2%) adicionar 1 gota de resina de guayaco 10% en medio alcalino. En el otro extremo colocar el nmero 1.

Obtenida la tira reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco boca ancha, que contenga la muestra problema en solucin de agua destilada, procurando que el extremo reactivo se encuentre a la luz del frasco. Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de cido tartrico. Terminado el bao de Mara, observar los resultados en un vidrio limpio.

Mecanismo de reaccin: Segn Guatell.

16CN- + 16H+ ---> 16HCN

16HCN + 8Cu++ ---> 8Cu(CN)2 + 16H+8(CN)2Cu ---> 4Cu2(CN)2 + 4C2N24C2N2 + C22H26O6 + 7H2O ---> 4HONC + 4HCN + C22H24O9 + 8H+4Cu2(CN)2 + 4HCN ---> 4[Cu2(CN)3]- + 4H+16CN- + 8Cu++ + 7H2O + C22H26O6 ---> 4HONC + [Cu2(CN)3]- +12H+ + C22H24O9

Otro mecanismo propuesto es:

8HCN + 8SO4Cu + 4H2O --> 2(CNCu)2(CNCu)2 + 8SO4H2 + 2O2 Reaccin qumica balanceada.

16CN- + 8Cu++ + 7H2O + C22H26O6 ---> 4HONC + [Cu2(CN)3]- +12H+ + C22H24O9

Resultados: La reaccin de Schnbein result positiva.

Sensibilidad de la reaccin: Es un ensayo sensible pero inespecfico. Algunos autores indican que puede reconocerse hasta 0.25 g de cido cianhdrico.

2.-Reaccin con el Reactivo de Yodo-almidonado

Fundamento: Decoloracin de la solucin azulada (yodo almidn) por compuestos reductores como el cido cianhdrico.

Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1 (10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de solucin de yodo - ioduro adicionar el reactivo de almidn 1%. En el otro extremo colocar el nmero 2.

Obtenida la tira reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco boca ancha, que contenga la muestra problema en solucin de agua destilada, procurando que el extremo reactivo se encuentre a la luz del frasco. Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de cido tartrico. Terminado el bao de Mara, observar los resultados en un vidrio limpio.

Mecanismo de reaccin:

KI + I2 + 2 almidn ---> 2 almidn-I + KI

HCN + 2 almidn-I ---> 2I- + 2 almidn + CN- + H+

Reaccin qumica balanceada:

HCN + I2 ---> I- + INC + H+

Resultados: La reaccin con el reactivo de Yodo-almidonado result positiva.

Sensibilidad de la reaccin: Es un ensayo muy sensible pero inespecfico (1:106)

3.-Reaccin con el Reactivo de Grignard

Fundamento: El ensayo se fundamenta en que el cido pcrico en presencia del HCN, liberado de la muestra cida, forma isopurpurato alcalino, de color rojo al rojo naranja en el transcurso de cinco minutos.

Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1 (10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de solucin de Na2CO3 10% y adicionar 2 gotas del reactivo de cido pcrico 1%. En el otro extremo colocar el nmero 3.

Obtenida la tira reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco boca ancha, que contenga la muestra problema en solucin de agua destilada, procurando que el extremo reactivo se encuentre a la luz del frasco. Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de cido tartrico. Terminado el bao de Mara, observar los resultados en un vidrio limpio.

Mecanismo de reaccin:

Reaccin qumica balanceada:

Resultados: La reaccin con el reactivo de Grignard result positiva.

Sensibilidad de la reaccin:

4.-Reaccin con el reactivo de Nitrato de plata (AgNO3)

Fundamento: El nitrato de plata al entrar en contacto con el cido sulfhdrico (H2S) precipitar en forma de sulfuro argntico. Este mismo fundamento se aplica para la fosfamina (PH3). En el caso de la arsina y el fsforo blanco provocarn la precipitacin de plata metlica.

Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1 (10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de solucin de nitrato de plata 10%. En el otro extremo colocar el nmero 4.

Obtenida la tira reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco boca ancha, que contenga la muestra problema en solucin de agua destilada, procurando que el extremo reactivo se encuentre a la luz del frasco. Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de cido tartrico. Terminado el bao de Mara, observar los resultados en un vidrio limpio.

Mecanismo de reaccin:

H2S + 2Ag+ ---> Ag2S + 2H+ASH3 + 6Ag+ + 2H2O ---> AsO2H + 6H+ + 6 Ag

Reaccin qumica balanceada:

H2S + 2Ag+ ---> Ag2S + 2H+

Otras reacciones:

a) Formol: separacin de plata metlica

b) Fosmamina: formacin de fosfuro de plata

c) Arsina: separacin de plata metlica:

d) Estibamina: formacin de antimoniuro de plata.

e) Fsforo blanco:

Resultados: La reaccin con el reactivo de nitrato de plata result negativa.

5.-Reaccin con el reactivo de Cloruro de paladio (PdCl2)

Fundamento: El CO produce una mancha oscura sobre el papel de filtro debido a la reaccin del paladio que se reduce a Pd.

Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1 (10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de solucin de cloruro de paladio 5%. En el otro extremo colocar el nmero 5.

Obtenida la tira reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco boca ancha, que contenga la muestra problema en solucin de agua destilada, procurando que el extremo reactivo se encuentre a la luz del frasco. Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de cido tartrico. Terminado el bao de Mara, observar los resultados en un vidrio limpio.

Mecanismo de reaccin:

Reaccin qumica balanceada:

Pd+2 + CO + H2O ---> Pd + CO2 + 2H+

Resultados: La reaccin con el reactivo de cloruro de paladio result negativa.

6.-Reaccin con el reactivo de Trtaro emtico

Fundamento: El trtaro emtico (trtrato de antimonio y potasio) al entrar en contacto con el cido sulfhdrico precipitar en forma de sulfuro de antimonio.

Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1 (10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de solucin de trtaro emtico 10%. En el otro extremo colocar el nmero 6.

Obtenida la tira reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco boca ancha, que contenga la muestra problema en solucin de agua destilada, procurando que el extremo reactivo se encuentre a la luz del frasco. Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de cido tartrico. Terminado el bao de Mara, observar los resultados en un vidrio limpio.

Mecanismo de reaccin:

Reaccin qumica balanceada: 2K(SbO)C4H4O6 + 3H2S Sb2S3 + 2KH(C4H4O6) + 2H2O

- Resultados: La reaccin con el reactivo de trtaro emtico result negativa.

7.-Reaccin con el reactivo de Acetato de plomo

Fundamento: El acetato de plomo al entrar en contacto con el cido sulfhdrico precipitar en forma de sulfuro de plomo.

Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1 (10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de solucin de acetato de plomo 10%. En el otro extremo colocar el nmero 7.

Obtenida la tira reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco boca ancha, que contenga la muestra problema en solucin de agua destilada, procurando que el extremo reactivo se encuentre a la luz del frasco. Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de cido tartrico. Terminado el bao de Mara, observar los resultados en un vidrio limpio.

Reaccin qumica balanceada:

H2S + Pb(C3H2O3) ---> PbS + 2HC3H2O3 Resultados: La reaccin con el reactivo de acetato de plomo result negativa.

Sensibilidad de la reaccin: La sensibilidad de la reaccin es de 10 mg/L.

8.-Reaccin con el reactivo alcalino

Fundamento: El acetato de plomo al entrar en contacto con el cido sulfhdrico precipitar en forma de sulfuro de plomo.

Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1 (10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de solucin de acetato de plomo 10%. En el otro extremo colocar el nmero 7.

Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de cido tartrico. Terminado el bao de Mara, colocar el papel sensible alcalino agregando adems sulfato ferroso 10% y 1-2 gotas de cido clorhdrico, observar los resultados en un vidrio limpio.

Mecanismo de reaccin:

6HCN + 6OH- ---> 6CN- + 6H2O

6CN- + Fe++ ---> [Fe(CN)6]

4Fe++ + 8OH- ---> 4 Fe(OH)33[Fe(CN)6]-4 + 4Fe(OH)3 + 12H+ ---> 12H2O + [Fe(CN)6]3Fe4

Resultados: La reaccin con el reactivo alcalino result positiva.

Sensibilidad de la reaccin: La sensibilidad de la reaccin es de 10 mg/L.

TCNICA OPERATORIA

Ensayo con papel sensible

AislamientoCuando se sospecha la presencia de cido cianhdrico mediante los ensayos antes especificados, se procede al aislamiento y posterior identificacin. Para la realizacin de los ensayos mediatos, se requiere de una separacin previa del CNH de la muestra. Son adecuadas una destilacin simple o una microdifusin.

En la destilacin simple se agrega al material cido tartrico. El destilado se recoge en hidrxido de sodio para evitar prdidas del cido cianhdrico liberado. En el caso de muestras en estado de putrefaccin se debe agregar al material a destilar acetato bsico de plomo para retener el cido sulfhdrico.

TcnicaReactivosAcido tartrico al 10%Hidrxido de sodio al 10%

EquiposAparato de destilacin

ProcedimientoColocar 10 g. del material biolgico en un matraz de destilacin y cubrir con agua (aproximadamente 60 ml). Agregar 10 ml de cido tartrico al 10% y destilar recogiendo sobre 5ml de NaOH 10%. Se calienta al principio suavemente para evitar la formacin de espuma y una vez alcanzado el punto de ebullicin se eleva lentamente la temperatura. Es importante que la extremidad del tubo de desprendimiento conectado al extremo del refrigerante tome contacto con la solucin alcalina. Suspender la destilacin cuando hayan pasado alrededor de 1/3 del volumen inicial. Medir el volumen destilado.

Ensayo de Papeles sensibles

Ensayos de Laminas metlicas

Lamina de Cu

+

1 mL HCl conc.

BMH x 5

Gris brillante-------Hg

Gris opaco------ As

RESULTADOSProsiguiendo con la metodologa expuesta obtuvimos los siguientes resultados:

Para evaluar la presencia de alguna sustancia txica en la muestra otorgada, se consider Proseguir con la metodologa expuesta obtuvimos los siguientes resultados a continuacin:

La tira N1 (Papel Sensible de Schombein), sufri una ligera coloracin azulada.

La tira N2 (Papel sensible de Yodo Amidonado) sifri una decoloracin del color inicial.

La tira N3 (papel de solucin de guinard), sufri una variacin en su color inicial, dando asi una coloracin rojo ladrillo

La tira N8 (papel de solucin alcalina, sufrio una variacin en su color inicial, luego de aadirle 1gota del reactivo de FeSO4 (10%) y una gota de HCl concentrado, dando asi una coloracin de Azul de Prusia.

TIRA N1 Cambi a un color ligero a azul.

TIRA N2 Hubo una decoloracin parcial

TIRA N3 Coloracin Rojo ladrillo

FORMACIN DEL AZUL DE PRUSIA AL AADIR GOTAS DE HCl

ENSAYO DE LMINA METLICA

1. Fraccin de cobre antes de someterlo a ensayo.

2. Fraccin de cobre luego de someterlo a ensayo. Evidenciamos una perdida de su brillo (GRIS OPACO)Conclusiones:

Concluimos que la muestra analizada, presenta en su composicin el HCN- , esto se evidenci por la formacin de la coloracin azul de Prusia en la tira de papel sensible N (papel sensible alcalino), acompaada adems de la tira N, la cual se presenci una coloracin rojo ladrillo propio del HCN-

Tambin se concluye que la muestra analizada existe presencia de Arsnico (As), el cual se pudo determinar por medio el ensayo de lmina metlica, al opacar la varilla de cobre.

BIBLIOGRAFIA:

Lunn, G. & Sansone, E. B., J. Chem. Ed. 1989 , Vol 66, 5, 4.

Frejaville, J. R.; Baurder, R. Toxicologa Clnica y Analtica. Editorial JIMS 1978. Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioqumica. GUATELLI, Manuel. Manual Prctico de Qumyca Toxicolgica. Biblioteca de F y B- UNMSM. Editorial Universitaria. Argentina.1958. http://www.biol.unlp.edu.ar/toxicologia/seminarios/parte_1/toxicos_metalicos/acidos.html http://cienciaforense.com/Pages/Toxicologia/HCN.htm http://www.revmed.unal.edu.co/revistafm/v51n1/v51n1a6.html

8

7

6

5

4

3

2

1

BMH x 5I

1/3

2/3

H2O c.s.p. cubrir la muestra problema

Se agrega ac. Tartrico (100mg) o ac. acetico

Muestra: si es liquida, pesar toda la muestra

Aumentar la superficie de contacto

1

2

3

4

5

6

7

8

1

2

EMBED ACD.ChemSketch.20

EMBED ACD.ChemSketch.20

CH2=O + 2Ag+ + H2O HCOOH + 2H+ + 2AgO

H3P + 3Ag+ 3H+ + Ag3P

H3As + 6Ag+ + 2 H2O HAsO2 + 6H+ + 6AgO

H3Sb + 3AgO Ag3Sb + 3H+

P4 + 6 H2O H3P + 3H3PO2

H3P + 3 Ag+ Ag3P + 36H+

12Ag+ + 3 H3PO2 + 6H2O 3 H3PO4- + 15H+ + 12AgO