Post on 28-Jan-2018
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Métodos analíticos adecuados a su propósito
Validación de métodos analíticos:
Conceptos y elementos
Prof. Dr. Bertram Nagel
Consultor PTB
Leipzig, Alemania
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Desarrollo de un método de prueba en el laboratorio analítico
❧ Selección de un método analítico
❧ Elaboración y validación del método
❧ Implantación del método
❧ Monitoreo/seguimiento del método
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Selección de un método analítico
❧Características de aplicación
❧Características de metodología
❧Características de desempeño
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Características de aplicación
❧ Costos/prueba
❧ Tipo, número y volumen de muestras
❧ Equipo de preparación de muestras y equipo
de medición
❧ Personal
❧ Espacio y ambiente
❧ Seguridad ocupacional
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Selección de un método analítico
❧Características de aplicación
❧Características de metodología
❧Características de desempeño
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Características de metodología
❧ Sensitividad y especificidad analítica
❧ Selección de la reacción química
❧ Optimización de las condiciones de
reacciones químicas
❧ Principios de calibración y estandarización
❧ Robustez del procedimiento analítico
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Selección de un método analítico
❧Características de aplicación
❧Características de metodología
❧Características de desempeño
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Características de desempeño
❧ Rango de trabajo
❧ Precisión
❧ Tasa de recuperación
❧ Interferencias
❧ Exactitud
❧ Límites de detección y cuantificación
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Definiciones (I)
Verificación
Confirmación del cumplimiento de los
requisitos especificados por medio del
examen y aporte de evidencia objetiva.
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Definiciones (II)
Validación
La validación es la confirmación por examen
y suministro de evidencia objetiva del
cumplimiento de los requisitos particulares
para un uso propuesto específico.
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¿Validación de problemas o de métodos? (I)
Validación de problemas
¿Qué método de prueba es necesario y suficiente para elaborar la tarea?
¿Estoy aplicando el método de prueba correcto?
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¿Validación de problemas o de métodos? (II)
Validación del método
¿El método es suficiente y confiable, y adecuado a los propósitos?
¿Estoy aplicando correctamente el método de prueba?
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DIS ISO 17025: 5.2.5 Validación de métodos (I)
El laboratorio debe validar:
❧ Métodos no estandarizados
❧ Métodos elaborados/desarrollados en el laboratorio
❧ Métodos estandarizados si se los usa fuera de su
rango de concentración intentado y validado
❧ Extensiones de métodos a otros análitos.
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DIS ISO 17025: 5.2.5 Validación de métodos (II)
El laboratorio debe registrar:
❧ Los resultados obtenidos
❧ El procedimiento usado para la validación, y
❧ Si el método validado cumple con los requerimientos
de la aplicación intencionada.
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Validación: procedimiento
La validación incluye:
❧ La especificación de los requisitos
❧ La determinación de los datos (valores) característicos del método
❧ La comparación de los requerimientos/requisitos con los datos/valores característicos del método
❧ La confirmación de la validez (statement on the validity).
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Diagrama de flujo de la validaciónRequerimientos del
cliente
Averiguar losrequerimientos
¿Requerimientosconocidos?
Selección delmétodo
¿Valores c. necesarios conocidos?
Averiguar los valores caracteristicos necesarios
Validación
Termina la validación
¿Método adecuado?
Seleccionar algún otro método
Sí
No
No
Sí
No
Sí
¿Cuál método es el adecuado para resolver el problema del cliente?
¿Qué desea el cliente, qué problemas tiene?
Ejemplo: exactitud, especificidad,
límites de cuantificación
Averiguar los valores característicos necesarios
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Método, equipo, sistemaMuestra
Resultado
Preparación de la muestra
Sistema de análisis
Equipoincluye
hardware software
Método analítico
Prueba del equipocalificación del equipo
Validación del método
Prueba de aptitud del sistemasistema de calidad
MethodenvalidierungCalibración
Validación del software
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Validación: parámetros a determinar
❧ Incertidumbre de los resultados❧ Precisión y exactitud❧ Repetibilidad y reproducibilidad❧ Linearidad (rango de trabajo)❧ Límite de detección ❧ Límite de cuantificación❧ Selectividad y/o especificidad del método❧ Sensitividad (sensibilidad) cruzada❧ Robustez
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“Técnicas“ de validación (I)
El laboratorio debe usar las técnicas siguientes o una combinación de ellas:
❧ Calibración usando materiales estándares o
de referencia
❧ Comparación de resultados logrados usando
otros métodos
❧ Pruebas interlaboratorios
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“Técnicas“ de validación (II)
❧ Evaluación sistemática de los factores que podrían
afectar los resultados de pruebas y/o calibraciones
❧ Evaluación de la incertidumbre de los resultados
obtenidos con base en la comprensión científica, los
principios teóricos del método y la experiencia
práctica.
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Métodos físico-químicos y la necesidad de validación (I)
Métodos no validados (ejemplos)
❧ Medición de masa
❧ Medición de densidad
❧ Análisis elemental orgánico
❧ Espectroscopía cualitativa
❧ Medición de la turbiedad
❧ Determinación del punto de fusión
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Métodos físico-químicos y la necesidad de validación (II)
Métodos con poca demanda de validación
(ejemplos)
❧ Indice de refracción
❧ Determinación de la humedad
❧ Gravimetría
❧ Viscosimetría❧ Termogravimetría
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Métodos físico-químicos y la necesidad de validación (III)
Métodos a validar (ejemplos)
❧ Cromatografía
❧ Análisis elemental inorgánico
❧ Electroforesis
❧ Polarografía/❧ Voltametría❧ Titulaciones
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La pirámide de validación
Matriz de la muestra
Control de métodos
Aptitud del método
Desarrollo y aplicación del método
Ejemplos:
A Método interno (In-house) HPLC para control de la producción en Química/Farmacia: 1 + 2 (+3)
B Adaptación de un método de análisis elemental descrito en la literatura: 2 + 3 (+4)
C Cuantificación de PAK en muestras de suelos por DIN o por EPA: 3 + 4
4
3
2
1
Averiguación excepcional de características
del método
Verificación de caracte-rísticas del método
Interna: Control de calidadExterna:Prueba interlab.
Elementos de validación específicos para cada análisis:
especificidad, precisión (método de adición)
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Recomendaciones (I)
Método por prioridad:
1. Métodos de prueba internos y modificados
2. Métodos de prueba con alto potencial de riesgo
3. Métodos de prueba o productos con alto nivel de utilización
4. Validar primero los puntos críticos en los procedimientos.
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Recomendaciones (II)
Controlar diariamente el sistema analítico general
(por ejemplo, con la carta de control) proporciona
mayor seguridad que una prueba semestral de todos
los componentes individuales.
En caso de dudas, se aplica la evaluación costo-
beneficio por parte del cliente como un criterio de
decisión.
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Calificación del equipo (I)
1. Calificación del diseño (C.D., D.Q.)
❧ Define las especificaciones funcionales y operacio-
nales del instrumento, y detalla las condiciones y
decisiones en la selección y desempeño del
proveedor.
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Calificación del equipo (II)
2. Calificación de la construcción (C.C., C.Q.)
❧ Asegurar por parte del fabricante que el producto ha
sido diseñado y fabricado según un sistema de calidad
reconocido mundialmente, y que cumple con las
condiciones de conformidad y seguridad .
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Calificación del equipo (III)
2. Calificación de instalación (C.I., I.Q.)
❧ Establece que el instrumento es recibido de acuerdo
a como se diseñó y especificó, que está
adecuadamente instalado en el ambiente que se
seleccionó, y que es apropiado para la operación del
instrumento.
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Calificación del equipo (IV)
4. Calificación de la aplicación (C.A., A.Q.)
❧ El proceso en donde se demuestra que un instru-
mento funcionará de acuerdo a la especificación
operacional en el ambiente seleccionado.
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Calificación del equipo (V)
5. Calificación del funcionamiento (C.F., P.Q.)
❧ El proceso en donde se demuestra que un instrumento
funciona de acuerdo a la especificación adecuada para
su uso rutinario.