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PUNCIÓN FOLICULAR (OVUM PICK-UP, OPU)
Introducción:
La técnica de OPU guiada por ultrasonografía, fue desarrollada en un principio para la
reproducción asistida en humanos, usada por primera vez en ganado bovino en
Holanda a finales de la década de los 8, pero el empleo oficial fue en !""# $%uiz
Lopez, &'()
* través de la manipulación transrectal del ovario en la donante resulta m+s trabaoso
por visualización indirecta -a sea por ultrasonografía o laparoscopia, siendo mucho
m+s f+cil en ovarios de matadero, debido a .ue el operador puede e/aminarlos -
puncionarlos directamente $Palma, &!()
0sta técnica nos permite trabaar en vacas adultas en varios estados fisiológicos1
cíclicas, acíclicas, primer tercio de la gestación, vacas .ue no responden a estímulos
hormonales - en animales vieos con problemas reproductivos) 2ambién nos permite
trabaar en lo .ue son novillas - terneras desde el 'to38vo mes de vida $%uiz Lopez,
&'()
0l é/ito de la punción folicular transvaginal se puede dividir en & categorías1
• *spectos técnicos1 aspiración, tipo - di+metro de agua, presión de aspirado -
bisel de la agua)
• *spectos biológicos1 momento del ciclo estral, raza, estimulación hormonal,
edad - estado fisiológico de la donante $Palma, &!( .
Punción foliculr trn!"#inl $ r%cu&%rción d% o"ocito!
La técnica de OPU en bovinos fue desarrollada para obtener ovocitos de va.uillonas
vivas de alto potencial genético, - así lograr un ma-or n4mero de terneras - terneros
a5o)
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A!&%cto! t'cnico!
Para realizar la técnica de OPU se necesitan 6 re.uisitos principales1 ecógrafo con
transductor sectorial, bomba de aspiración - un sistema de guía de agua, .ue se
encuentra conectado a un recipiente recolector de ovocitos)
M'todo
Para realizar el proceso de punción folicular las vacas pueden ser sedadas -a sea con
uso de 7ilacina o etomidina, posteriormente se procede a la remoción de heces del
recto mientras se realiza la palpación se procede a realizar anestesia epidural con
lidocaína al &9) *dem+s se debe realizar una correcta desinfección de la vulva -
periné para ma-or asepsia del sistema de OPU: espués se procede a la introducción
del sistema guía en vagina hasta .ue la cabeza del transductor se fie cr+neo
dorsalmente, -a sea a la iz.uierda o derecha de la abertura e/terior del cérvi/, esto
depender+ del ovario .ue ser+ puncionado $Palma, &!()
%ealizado esto se posiciona a los ovarios por vía rectal delante de la sonda, pero para
proceder a la punción primero drenamos el sistema con la aspiración de una cantidad
pe.ue5a de medio, después de aspirar de 63# folículos se recomienda lavar la agua de
aspiración - el sistema de medio con P;< suplementado con heparina sódica $&=&
U>?ml( - suero fetal bovino $!9() 0l fluido .ue se obtendr+ de cada animal recogido en
tubo de @ ml ser+ filtrado inmediatamente, la sangre ser+ eliminada por lavados
continuos .ue se realizan en medio fresco P;<, luego se los pasa a una placa de Petri
para continuar con su evaluación luego de ser estos localizados por medio del
estereomicroscopio $%uiz Lopez, &'()
V%nt! d% l &unción foliculr
Aos permite optimizar la utilización del semen, en un día podemos fecundar ovocitos
recogidos de donantes diferentes con una sola dosis de semen) Ovocitos de una
donante pueden ser fecundados por diferentes toros en una sola sesión de aspiración,
permitiéndonos así una variabilidad en cuanto a genética) Permite incrementar tasas de
fecundación mediante el uso de semen <e/ado debido a .ue se reduce el n4mero de
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espermatozoides .ue ser+ necesario para fecundar ovocitos) *dem+s permite trabaar
en hembras con problemas reproductivos como infertilidad, repetidoras, afecciones del
tracto reproductivo o con respuesta negativa a tratamientos hormonales)
*dem+s se puede utilizar donantes a intervalos m+s cortos comparando con lo .ue es
la técnica de superovulacion - ovarios de matadero) <e pueden realizar hasta &
punciones por semana lo .ue nos permitir+ obtener en promedio de #,!
ovocitos?vaca?sesión, pudiendo alcanzar un promedio de !,# ovocitos?vaca?sesión en
caso de previa utilización de B<H - b<2, lo .ue nos permitir+ obtener entre @ $sin
estimulación hormonal( - ! $con estimulación hormonal( crías al a5o por vaca
donante) Lo .ue representa 6 a # veces m+s los valores logrados mediante
transferencia de embriones)
0s de alta importancia recalcar .ue la técnica de OPU no solamente est+ restringida a
bovinos -a .ue ha sido aplicada en otras especies como lo son1 e.uinos, rumiantes
silvestres - b4falos, permitiendo recuperar especies en peligro de e/tinción $Aava
2ruillo C Hernandez Bonseca, &"()
O"ocito! ot%nido! &or OPU &r FIV
Dediante la técnica de OPU se recogen los ovocitos, posterior a esto deben ser
identificados, aislados - clasificados para la B>E)
Para la clasificación se toma en cuenta el aspecto del citoplasma - el n4mero de capas
.ue constitu-en el cumulus) Un citoplasma homogéneo - oscuro es un indicativo de un
desarrollo óptimo - un cumulus formado por varias capas de células compactas nos
presenta un ma-or porcentae de vialidad en cuanto a maduración, fecundación -
desarrollo hasta blastocistos, siendo de otra manera en a.uellos .ue carecen de
cumulus)
Dorfológicamente se clasifican1 *, ;, F - )
*i&o A: cumulus intacto, capas m4ltiples G# - compactas)
*i&o +: capas m4ltiples de células de cumulus $!36()
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*i&o C: ovocitos desnudados)
*i&o : capas celulares del cumulus e/pandidas)
Bigura &) Ovocitos tipo *, ;, F - )
Los ovocitos tipo * - ; .ue llegan a ser fertilizados mediante B>E consiguen dividirse
$89 los * - 9 los ;(, llegando a blastocistos $#9 de los * - &9 de los ;() 0n
cuanto a los tipos F - consiguen dividirse $#9 los F - 6#9 los (, no pudiendo
alcanzar su desarrollo hasta blastocisto $Ionzalez Ionzalez, &!6()
;ibliografía
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