7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
1/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
!
NIVERSIDAD NACIONAL DEL
SANTA
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
2/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
FACULTAD DE INGENIERIA
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONALDE INGENIERIA AGROINDUSTRIALTITULO:
DESARROLLO DEL INOCULO Y CULTIVO CELULAR
POR LOTES
PROFESOR:
AUGUSTO CASTILLO CALDERON
GRUPO:
B - 3
CURSO:
LABORATORIO DE BIOPROCESOS
ALUMNOS:
ESCOBEDO FLORES ALEX JESUS GUTIERREZ DIANA LPEZ ZAMORA MARILEYLA MORALES CHORRES CYNTHIA VALVERDE LPEZ EDISON
NVO CHIMBOTE, MAYO2016
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
3/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
CONTENIDO
1
I. OBJETIVOS:...........................................................................................................3
1.1. Ob!"#$%& G!'!()*!&: "
1.2. Ob!"#$%& E&+!-#%&: "
II. METODOLOGIA EXPERIMENTAL:.................................................................4
2.1) SOLIDO DE MANTENCION #
2.2) M!"# A$%"&'$"(* $
2.3) M!"# +',' ,%'$"(* %
III. MATERIALES, INSTRUMENTOS Y REACTIVOS:.......................................12
1. Preparacin medio solido del de mantencin !
3. Medio de activacin !"
4. Medio de fermentacin !&
IV. CRONOGRAMA...................................................................................................15
V. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:...............................................................16
VI. ANEXOS:...............................................................................................................1
!' (eferencias de composici)n de medio de mantenci)n* activaci)n + cultivo para
Pichia StipitisN((L ,-!& para la producci)n de etanol. !
' /lculo de la velocidad de aireaci)n espec1fica2 3vvm4 !
"' /lculo del flu5o de aireaci)n recomendado !6
&' 7ormato del plan de muestreo + registro de datos 0
"
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
4/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
DESARROLLO DEL INOCULO Y CULTIVO CELULAR
POR LOTES
I. OB/ETIVOS:
I.1. Ob!"#$%& G!'!()*!&:
D"/0', ,'"', 4' 5+,"$"' ! ,%'$"( $4%"
$4', +#, #% ! Pichia stipitis NRRL Y-6127 4 !"#
/"4'!# ! 8"!,#"'!# ! $'/$',"' ! ',,#9 ' " ! +,#!4$",
%'# $#!"$"#/ ! "$,# '",'$"(9 "!"!# $#"$"%:%,"$# ! %,'/,$"' ! #5;
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
5/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
II. METODOLOGIA EPERIMENTAL:
T)b*) 1: R!!(!'#) ! %+%#3' ! !#%& ! )'"!'#3',
)"#$)#3' 4 5*"#$% +)() Pichia stipitisY 7128TABLA N1
MEDIO NUTRIENTE CONCENTRACION 9;*
> *;L
F!(!'")#3' G4$#/'
X"#/'
E5%,'$%# ! &'!4,'
H2PO7
NH7)2SO7
M
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
6/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
S ""$"',' %"!# $4%' ' ,,$"' ! $#+#/"$"( !
!"#/ ! $4%" ! '%$"( +',' Pichia stipitisY 7128.
L4
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
7/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
L4
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
8/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
DIAAGRAMA N@1 +(!+)()#3' ! !#% ! )"#$)#3'
DIAGRAMA N@ 02 RESIEMBRA SOLIDO LIUIDO
2.3) M!"# +',' ,%'$"(* TABLA 0=: C#$%,'$"( ! N4%,"%/ +',' !"# ! ,%'$"(
3 )
'5"(#!'"! C%'!'"()#3' 1L C%'!'"()#3' =LG4$#/' 10 3
%
Matraz Erlenmeyer de125 ml
MEDIR=odos los
PESAR
En cada tubo yadicionar agua para
!"!AR
ES#ERE"I$AR
E" p% &'(MEDIR
A"E)#AR
En un mec*ero de +unsenla mezcla para evitar
onstantemente conuna varilla por unminuto -aparici,n de laprimera burbu.a/
A0I#AR
I)!"AM!S
En el matraz de 5((mlA0RE0AM!S
#omamos una azada einoculamos en el matrazcon el medio de activaci,n
!"!AM!SEn el S*aer a #3 4( 6
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
9/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
X"#/' = E5%,'$%# ! &'!4,' =
H2PO7 2 KNH7)2SO7 =
M
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
10/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
I'&"(5!'"%& ! E5#+%&
B''' '';%"$'.
B"#/%'%#
R!)"#$%&
E5%,'$%# ! &'!4,'
G4$#/'-5"#/'
NH7)2SO7
H2PO7
M
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
11/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
DIAGRAMA N: 08 P(%!##!'"% +)() !* !(!'")%( !' !* !#% !
!(!'")#3'
!!
En una *o.a de E8cel paralas gr>?cas de regresi,n ycorrelaci,n
0RA:IAR
"ecturas de []de o8@genodisuelto a cada intervalo-ase gasi?cada y ase de
#!MAR
En las primeras 1( *orassu crecimiento -
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
12/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
III. MATERIALES, INSTRUMENTOS Y REACTIVOS:
1. Preparacin medio solido del de mantencinM'%,"'/
P"+%'/ ! 1 . T4=#/ ! /'#
$# %'+'/ V',"' ! &"!,"# M'%,' E,,
P,#=%'
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
13/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
I/%,4%#/ E4"+#/
B''' '';%"$' O' ' +,/"(
R'$%"/
E5%,'$%# ! &'!4,'. P+%#'. E5%,'$%# ! '%'. A
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
14/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
I/%,4%#/ E4"+#
S8', B''' '';%"$'
+H %,# O' ' +,/"(
R'$%"/
o G4$#/'
o E5%,'$%# ! &'!4,'
o E5%,'5%# ! '%'
o M
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
15/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
B"#/%'%# B''' '';%"$'.
!#
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
16/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial
Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
IV. CRONOGRAMA
!$
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
17/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
V. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
http://www.microbiologia.com.ar/bacteriologia/fisiologia.php?Mostrar=!imicos
http://www.laboratoriosmicro"it.com/docs/..#$%man!al#$%&its'
%.pdf. http://www.monografias.com/traba(os1$/lactobacilos/lactobacilos.sht
ml
)*+,-0 2M+ odolfo +ngenier5a 6io!5mica.
!
http://www.laboratoriosmicrokit.com/manual/Kits-C.pdfhttp://www.laboratoriosmicrokit.com/manual/Kits-C.pdfhttp://www.monografias.com/trabajos15/lactobacilos/lactobacilos.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos15/lactobacilos/lactobacilos.shtmlhttp://www.laboratoriosmicrokit.com/manual/Kits-C.pdfhttp://www.laboratoriosmicrokit.com/manual/Kits-C.pdfhttp://www.monografias.com/trabajos15/lactobacilos/lactobacilos.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos15/lactobacilos/lactobacilos.shtml7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
18/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
VI. ANEOS:
!' (eferencias de composici)n de medio de mantenci)n* activaci)n + cultivo
paraPichia StipitisN((L ,-!& para la producci)n de etanol.
!%
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
19/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
!6
M!"# N4%,"% C#$%,'$"(
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
20/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
Fuente: A. Castillo. 1994. Tesis Magster PUCV
' /lculo de la velocidad de aireaci)n espec1fica2 3vvm4
vvm=2,035x 104NA x T
Donde:
NA* V#$"!'! ! C#/4# ! O5"
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
21/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
P)() !"!(#')( *) b#%)&) +(%5#)X:
x=Yxs
( s )
Rendimiento:
Yx
s
=x
s=
c. enla glucosa
c.enlaclula (F)
= 7.>$: actor de aireacin para condiciones
microarebias.
Calculamos el rendimiento:
Yx
s
=c .enla glucosa
c .enla clula (F)= 40
46.57(0.25 )
Yx
s
=0.21473g /g
!strato en el hidroli@ado de cascarilla de arro@
S 1
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
22/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
ntonces reempla/amos datos para calcular la demanda de
o,i(eno +1-:
NA=!xY o
2
alores:
o m;< = .77 h'1
o
Y o2=1
gr
gr
o
"=2.791497 g /
ntonces:
NA=
(0.4984 )(2.791497 )1
NA=1.39128g O2/. #
elocidad de aeraci3n especiica + vvm -:
T=30$=303K
rm!la* vvm=2%035x104NA x T
vvm=2,035x 104(1.39128)(303)
0.1 vvm=0.85787 #1
"' /lculo del flu5o de aireaci)n recomendado
vvm=
&'&=vvm'
Dnde:
Vvm> 0.%#% min-!
Volumen de fermentacin ?L> L
7/25/2019 Pre Informe 2 Unidad
23/24
Universidad Nacional del Santa E.A.P. Ing. Agroindustrial Laboratorio de Bioprocesos Pre Informe N 0
&=(0.857872 )=1.71574 O2/#
En minutos:
&=0.028596 O2/min
7ormato del plan de muestreo + registro de datos
CULTIVO CELULAR POR LOTESY MEDICIN DEL LA
Plan de Muestreos Re(istro de Datos
G(5+%: D-): ; ;
M#(%%()'#&%&:
F5!'"! C)(b%'%:
H
T
I
E
M
P
O
A
b
&
.
9
6
8
0
'