AllplexTM
Panel Respiratorio 2
(Adv / MPV / HEV/ PIV)
(Cat. No. RP9802X)
Sistema de PCR en tiempo real múltiplex con RT (Transcripción Inversa) en un solo
paso para la detección de Adenovirus humano, Metapneumovirus humano, enterovirus
humano, virus de parainfluenza humano 1, virus de parainfluenza humana 2, virus de
parainfluenza humana 3, virus de parainfluenza humana 4 en aspirados
nasofaríngeos, hisopados nasofaríngeos y lavados broncoalveolares.
Para uso exclusivo con el MICROLAB NIMBUS IVD y MICROLAB STARlet
Para su uso con el
1. Sistema de PCR en Tiempo Real CFX96TM (Bio-Rad)
(Uso para Diagnóstico In Vitro)
Éste producto puede ser usado con propósitos IVD en países autorizados.
(Únicamente para uso en investigación)
Este producto debe usarse para propósitos RUO en otros países.
No disponible en los Estados Unidos
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Panel respiratorio AllplexTM 2
TABLA DE CONTENIDOS
NOTIFICACIONES------------------------------------------------------------------------------------------------------ 3
USO PREVISTO --------------------------------------------------------------------------------------------------------- 4
PRINCIPIOS Y DESCRIPCIÓN GENERAL DEL PROCEDIMIENTO --------------------------------------------- 5
ANTECEDENTES ------------------------------------------------------------------------------------------------------- 6
REACTIVOS ------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 8
MANEJO Y ALMACENAMIENTO ----------------------------------------------------------------------------------- 9
MATERIAL REQUERIDO NO INCLUIDO --------------------------------------------------------------------------- 9
PROTOCOLO --------------------------------------------------------------------------------------------------------- 10
CONFIGURACIÓN DEL EQUIPO PARA PCR EN TIEMPO REAL Y ANÁLISIS DE RESULTADOS ------- 15
RESULTADOS --------------------------------------------------------------------------------------------------------- 24
SOLUCIÓN DE PROBLEMAS -------------------------------------------------------------------------------------- 27
RENDIMIENTO ------------------------------------------------------------------------------------------------------- 29
REFERENCIAS -------------------------------------------------------------------------------------------------------- 33
SIMBOLOGÍA --------------------------------------------------------------------------------------------------------- 34
INFORMACIÓN DE PEDIDO --------------------------------------------------------------------------------------- 35
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Panel Respiratorio AllplexTM 2
NOTIFICACIONES
Este producto se puede utilizar con propósitos IVD (Diagnóstico In Vitro) en la UE dado que
la Marca IVD CE está aprobada por la Directiva de la UE (98/79/EC) y países autorizados,
pero debe utilizarse para propósitos RUO (Uso Exclusivo en Investigación) en otros países.
La confiabilidad de los resultados depende de la toma adecuada de la muestra, el
almacenamiento, el transporte y la ejecución de procesamiento.
Es posible usar el mismo ácido nucleico aislado para los Paneles Respiratorios
AllplexTM 1, 2, y 3.
Si la misma muestra será evaluada también con el kit del Panel Respiratorio AllplexTM
4 adicionar ambos RP-V IC y RP-B IC al ácido nucleico aislado (Véase página 12).
Este producto es para uso exclusivo con el MICROLAB NIMBUS IVD y MICROLAB
STARlet, máximo 5 ensayos separados.
Ésta prueba ha sido validada para los siguientes tipos de muestras: aspirados
nasofaríngeos, hisopados nasofaríngeos y lavados broncoalveolares. Ésta prueba no
ha sido validada para otros tipos de muestras.
Almacene las muestras de ADN/ARN a ≤ -20℃ hasta su uso y manténgalas en hielo
durante su uso.
La sensibilidad del ensayo puede disminuir en las muestras que son congeladas y
descongeladas repetidamente o almacenadas por largos periodos de tiempo.
El flujo de trabajo en el laboratorio debe proceder de manera unidireccional.
Use siempre guantes desechables en cada área y cámbielos antes de ingresar a áreas
diferentes. Cambie los guantes inmediatamente si se contaminan o trátelos con un reactivo
descontaminante de ADN.
Asigne suministros y equipos a las áreas de trabajo separadas y no los mueva de un área
a la otra.
No pipetee con la boca.
No coma, beba o fume en las áreas de trabajo del laboratorio. Use guantes desechables
libres de talco, batas de laboratorio y gafas protectoras cuando manipule muestras y
reactivos. Lávese bien las manos después de manipular muestras y los reactivos de la
prueba.
Evite contaminar los reactivos al extraer las alícuotas de los tubos de reactivos. Se
recomienda el uso de puntas para pipetas estériles, desechables y con filtro resistente a
aerosoles
No mezcle los reactivos de diferentes lotes o de tubos diferentes del mismo lote.
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Panel respiratorio AllplexTM 2
No use este producto después de la fecha de vencimiento.
Todos los elementos desechables se pueden usar una sola vez. No los reutilice.
Use tubos de tapa rosca y evite las posibles salpicaduras o contaminación cruzada de
muestras durante la preparación.
Sea cuidadoso de no contaminar los reactivos con ácidos nucleicos aislados, productos de
la PCR, y control positivo. Para prevenir la contaminación de los reactivos, se recomienda
usar puntas con filtro.
Use áreas separadas para cada experimento.
Prepare y use un set diferente de pipetas para cada una de las siguientes áreas:
aislamiento de ácido nucleico, mezcla de reactivos, la adición del ácido nucleico molde y la
adición de productos de PCR.
Solo en un espacio designado, abra los tubos de reacción o tiras de PCR después de la
amplificación, para evitar la contaminación con amplicones.
Almacene el material positivo aparte de los reactivos del kit.
Los procedimientos de seguridad en el laboratorio (remitirse a Bioseguridad en laboratorios
microbiológicos y biomédicos y Documentos del CLSI) se deben tener en cuenta para
manipular las muestras. Limpie y desinfecte a fondo todas la superficies de trabajo con
hipoclorito de sodio al 0.5% (en agua desionizada o destilada). Los componentes del
producto (residuos del producto, empaque) se pueden considerar residuos de laboratorio.
Deseche los reactivos no usados y los residuos de conformidad con los reglamentos
federales, estatales y locales aplicables.
USO PREVISTO
El Panel Respiratorio AllplexTM 2 es un ensayo cualitativo in vitro para la detección simple o
múltiple de virus de Adenovirus humano (AdV) Metapneumovirus (MPV), Enterovirus humano
(HEV), virus de parainfluenza humana 1 (PIV1), virus de parainfluenza humana 2 (PIV2), virus
de parainfluenza humana 3 (PIV3), y virus de parainfluenza humana 4 (PIV4), en muestras de
aspirados nasofaríngeos, hisopados nasofaríngeos y lavados broncoalveolares.
AdV: Los primers están diseñados para detectar adenovirus humano. almenos de tipo B, C, y
los tipos E y algunos de los tipos A, D y F.
HEV: los promers estan diseñados para detectar enterovirus humano almenos de tipo A, B y
algunos de tipo C y D.
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Panel Respiratorio AllplexTM 2
PRINCIPIOS Y DESCRIPCIÓN GENERAL DEL PROCEDIMIENTO
1. Principios
El Panel Respiratorio AllplexTM 2 es representativo de la tecnología patentada de Seegene
MuDT™, la cual proporciona valores multi-Ct (ciclo umbral) en un solo canal de fluorescencia
sin análisis de curvas de melting en los instrumentos para PCR en tiempo real.
El Panel Respiratorio AllplexTM 2 es un ensayo de RT-PCR en tiempo real multiplex en un solo
paso que permite la amplificación simultánea y la detección de ácidos nucleicos objetivo de
AdV, MPV, HEV, PIV1, PIV2, PIV3, PIV4 y el Control Interno (IC).
En la PCR, la eficiencia de amplificación puede reducirse usualmente por inhibidores que se
pueden presentar en las muestras clínicas. Por ende, el control interno (IC) es incorporado
dentro del producto como un control exógeno de todo el proceso para monitorear el aislamiento
de ácidos nucleicos y verificar una posible inhibición de la RT-PCR. El IC es co-amplificado con
los ácidos nucleicos objetivos en las muestras clínicas.
2. Descripción General del Procedimiento
< Descripción general del procedimiento del Panel Respiratorio AllplexTM 2 >
Muestras
(Aspirados nasofaríngeos, hisopados
nasofaríngeos y lavados broncoalveolares)
Aislamiento de ácidos
nucleicos
ADN/ARN Viral
RT-PCR en tiempo real
en un solo paso
utilizando el sistema
AllplexTM
Análisis de resultados
6 10/2015 V1.02
Panel respiratorio AllplexTM 2
ANTECEDENTES
1. Adenovirus (AdV)
Adenovirus (familia Adenoviridae) es un virus sin envoltura, de doble cadena de ADN. Hay siete
especies divididas de la A a la G y 57 número de serotipos. Los síntomas más comunes de la
infección por adenovirus son la infección del tracto respiratorio superior que están relacionados
con las especies B y C. Junto con ADV, inflamación de los ojos, amigdalitis, tympanitis,
laringitis y la gastroenteritis aparecen juntos en los pacientes. Si los niños se infectan por ADV,
pueden desarrollar bronquiolitis o neumonía, que puede llegar a ser graves. La mayoría de las
personas tienen la capacidad de auto-curarse a sí mismos, pero AdV pueden causar la muerte
en pacientes con deficiencia inmune y rara vez algunos individuos sanos pueden morir de la
infección.
2. Metapneumovirus (MPV)
Metapneumovirus (familia Paramyxoviridae) es un virus con envoltura con un único genoma de
ARN de cadena negativa. MPV es un patógeno viral respiratoria que se extiende en todo el
mundo y tiene 5 ~ 10% de probabilidad de coinfección con otros virus respiratorios. Sus
síntomas son más similares a los síntomas de las infecciones por VRS. MPV puede producir
infecciones del tracto respiratorio superior de menor importancia, tales como la bronquiolitis,
crup, neumonía, infecciones graves del tracto respiratorio inferior, y se sabe que estar
relacionado con el deterioro de asma. Entre los niños que son hospitalizados por padecer
enfermedades de las vías respiratorias inferiores, los pacientes positivos MPV tienen fiebre
(86%), tos (90%) y disnea (80%) como síntomas comunes. Por otra parte, la dificulta para
respirar (56%) se muestra tanto en niños que estaban sanos antes de la infección y los niños
con antecedentes médicos de tener asma. 12% de los pacientes externos que han sido
tratados para la infección del tracto respiratorio inferior se detectaron MPV positivo. Este
porcentaje es más alto después de RSV. También MPV es una de las principales causas de las
convulsiones asma bronquial, tanto en niños como en adultos.
3. Enterovirus (HEV)
Enterovirus es un no envuelto con una solo genoma de ARN de cadena positiva. HEV tiene 70
tipos de serotipos que están divididos en grupos: poliovirus, Coxsackievirus A, los grupos B y
otros enterovirus. HEV suele entrar en huéspedes humanos a través de la vía oral-fecal, pero
también puede viajar a través de las vías respiratorias a través de las infecciones de las gotitas.
7 10/2015 V1.02
Panel Respiratorio AllplexTM 2
En su mayoría, los síntomas son similares a los del resfriado común, pero puede haber otros
síntomas como parálisis, meningitis aséptica, encefalitis, menor inflamación respiratoria,
erupción cutánea, enfermedad mano-pie-boca, miocarditis, pericarditis y dolor en el pecho
4. Virus de parainfluenza (PIV)
El virus de la parainfluenza (familia Paramyxoviridae) es un virus con envoltura con un único
genoma de ARN de cadena negativa. Tipo 1, tipo 2, tipo 3 y tipo 4 todo el resultado en los
seres humanos y se propaga a través de contactos directos con la infección del paciente y de
las gotas. Estos virus tienen 2 ~ 4 días de periodo de latencia. La mayoría de los síntomas son
similares a los síntomas de enfermedad respiratoria. Además, no hay fiebre y síntomas
generales raras. 80% da como resultado enfermedades de las vías respiratorias superiores.
50% de los pacientes hospitalizados con bronquitis, el 15% de los pacientes hospitalizados con
bronquiolitis y el 15% de los pacientes hospitalizados con neumonía son desarrollados a partir
de PIV. PIV de tipo 1 y tipo 2 son las principales causas para el desarrollo de
laringotraqueobronquitis en 2 ~ 4 niños en edad. PIV de tipo 3 puede causar laringitis
pseudomembranosa, pero es una de las principales causas de la bronquiolitis y la neumonía,
que son más graves en los niños menores de 1 año de edad. PIV de tipo 4 se ha categorizado
como el virus más fácil de transformar en formas más severas. La duración de los síntomas
son diversos. El promedio es de 4 a 5 días, pero la detección puede tomar de 2 ~ 3 semanas
después de la infección del virus debido a la baja potencia de los virus de la prevención de
descubrimiento rápido. Si la fiebre dura más de 5 días, se pueden producir infecciones de virus
secundarias como tympanitis y neumonía. Para los adultos, enfermedades del tracto
respiratorio superior son comunes, pero puede producirse la muerte por neumonía en los
pacientes con el sistema inmunológico disminuido como los que tuvieron un trasplante de
médula ósea.
8 10/2015 V1.02
Panel Respiratorio AllplexTM 2
REACTIVOS
Los reactivos contenidos en un kit son suficientes para 100 reacciones.
Información de pedido ( RP9802X)
Panel Respiratorio AllplexTM 2
Símbolo Contenido Volumen Descripción
5X RP2 MOM 500 μL
Mezcla de Oligos MuDT (MOM):
- Reactivo para la amplificación y detección
Enzima para tiempo real en un
solo paso 200 μL
Mezcla de enzimas para la RT-PCR en un solo paso.
Buffer 5X para tiempo real en un
solo paso 500 μL
Buffer para RT-PCR en un paso – Buffer que contiene dNTPs.
RP2 PC 80 μL Control Positivo (PC):
- Mezcla de patógenos y clones de IC
RP-V IC 1000 μL Control Interno Exógeno (IC) para el Panel Respiratorio Allplex 1, 2, y 3
Agua libre de RNasas
1.000 μL
Control Negativo (NC) grado PCR de
calidad ultrapura:
- Agua esterilizada como control negativo
Manual de usuario
AllplexTM es una marca registrada de Seegene Inc.
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Panel Respiratorio AllplexTM 2
MANEJO Y ALMACENAMIENTO
Todos los componentes del Panel Respiratorio 2 AllplexTM deben almacenarse a ≤
-20° C. Todos los componentes son estables hasta la fecha de caducidad marcada en la
etiqueta. El congelamiento y descongelamiento repetido debe evitarse ya que podría disminuir
la sensibilidad. Si los reactivos serán usados de manera intermitente, deberán almacenarse en
alícuotas.
MATERIAL REQUERIDO NO INCLUIDO
Guantes desechables libres de polvo (látex o nitrilo).
Pipetas (ajustables) y puntas estériles.
Microcentrífuga para tubos de 1.5 ml.
Kit para aislamiento de ácidos nucleicos.
Máquina de hielo.
Centrífuga de mesa.
Agitador vórtex.
Equipo para PCR en tiempo real CFX-96TM (Bio-Rad).
Tiras de 8 tubos de bajo perfil de 0.2 ml sin tapas (color blanco, No. Cat. TLS0851, Bio-
Rad)
Tiras de 8 tapas planas de grado óptico (No. Cat. TCS0803, Bio-Rad)
Plato de 96 pozos, pozo blanco. (cat. No. HSP-9655, Bio-Rad)
10 10/2015 V1.03
Panel Respiratorio AllplexTM 1
PROTOCOLO
1. Toma de muestra, almacenamiento y transporte
Nota: Todas las muestras tienen que ser tratadas como materiales potencialmente infecciosos.
Sólo las muestras que sean recogidas, transportadas y almacenadas y atiendan estrictamente
las siguientes normas e instrucciones, serán permitidas:
Nota: Para garantizar una alta calidad de las muestras, se deben transportarse lo más
rápidamente posible. Las muestras tienen que ser transportadas en las condiciones de
temperatura indicadas.
A. Toma de muestra
Aspirado nasofaríngeo, hisopado nasofaríngeo, lavado broncoalveolar
Las muestras de aspirado nasofaríngeo, hisopado nasofaríngeo, y el lavado
broncoalveolar son examinadas rutinariamente para patógenos respiratorios comunes.
La obtención de las muestras puede ser difícil en algunos pacientes. En tales casos, el
hisopado nasofaríngeo puede recolectarse simple y eficientemente con el hisopo de nylon
(COPAN, Italia) y en el medio universal de transporte (UTM).
Manufacturer Specimen collection device Cat. No.
COPAN ESwab 482CE
COPAN ENAT PM 2ML PERNASAL APPLICATOR 606CS01P
COPAN UTM con hisopos flocados 360C / 305C
DIAGNOSTIC HYBRIDS UTM con hisopo flocado de minipunta flexible
403C / 406C
Nota: Recomendaciones del kit de ácidos nucleicos para el MICROLAB NIMBUS IVD o MICROLAB STARlet. SE RECOMIENDA ESPECIALMENTE SEGUIR LAS SIGUIENTES INSTRUCCIONES DEL FABRICANTE. 1. Utilice el kit STARMag 96 para tejidos o para virus para muestras clínicas tomadas en
UTM. 2. Utilice el kit STARMag 96 para tejidos para muestras clínicas tomadas en ESwab. 3. Utilice el kit STARMag 96 para virus para muestras clínicas tomadas con ENAT.
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Panel Respiratorio AllplexTM 2
B. Almacenamiento y transporte de muestras
Muestra
Almacenamiento y Transporte
Nota Temperatura Duración*
Aspirado Nasofaríngeo
2~8°C. 3 días.
- El desempeño podrá afectarse
por el almacenamiento
prolongado de las muestras.
- Las muestras deben ceñirse a
las instrucciones locales y
nacionales para el transporte de
material patogénico.
Hisopado Nasofaríngeo
Lavado broncoalveolar
* Duración: Muestras tomadas de la prueba antes del periodo.
2. Aislamiento de ácidos nucleicos
Diversos fabricantes ofrecen kits para aislamiento de ácidos nucleicos. Use el protocolo
correcto de acuerdo al protocolo del fabricante. Los siguientes kits han sido validados para
uso con este kit.
A. Control Interno
Nota: IC está incluido en el kit para permitir a los usuarios confirmar no solamente el
procedimiento de extracción de ácidos nucleicos sino también identificar cualquier inhibición de
la RT-PCR.
Se deben añadir 10 μL de RP-V IC a cada muestra antes del aislamiento de ácidos
nucleicos.
Cuando use este producto con el kit del Panel Respiratorio AllplexTM 4, debe agregar 10
μL de RP-V IC y 10 μL de RP-B IC a cada muestra antes del aislamiento de ácidos
nucleicos.
B. Sistema automatizado para el aislamiento de ácidos nucleicos
B-1. MICROLAB NIMBUS IVD
Nota: Por favor use las muestras y los volúmenes de elución como se indica abajo. Para todos
los demás, refiérase al protocolo del fabricante.
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Panel respiratorio AllplexTM 2
Sistema automatizado para el aislamiento
Fabricante Cat. No. Vol. recomendado
MICROLAB NIMBUS IVD Hamilton 65415-02* -
STARMag96 Virus Seegene 744800.4.205875 Muestra: 600 µL
Elución: 100 µL
Cartucho para virus STARMag 48 X 8
Seegene 744800.4.VC384 Muestra: 600 µL
Elución: 100 µL
STARMag 96 Tejido Seegene 744300.4.205875 Muestra: 450 µL
Elución: 100 µL
Cartucho para tejidos STARMag 48 X 8
Seegene 744300.4.TC384 Muestra: 450 µL
Elución: 100 µL
* Si desea comprar este producto a Seegene Inc., por favor utilice este número de Cat.
B-1. MICROLAB STARlet
Nota: Por favor use las muestras y volúmenes de elución recomendados como se indica abajo.
Para todos los demás refiérase al protocolo del fabricante.
Sistema de aislamiento automatizado
Fabricante Cat No. Vol. recomendado
MICROLAB STARlet Hamilton 173000-075* -
STARMag 96 Virus Seegene 744800.4.205875 Muestra: 600 µL
Elución: 100 µL
STARMag 96 Tejido Seegene 744300.4.205875 Muestra: 450 µL
Elución: 100 µL
* Si desea comprar este producto a Seegene Inc., por favor utilice este número de Cat.
13 10/2015 V1.02
Panel Respiratorio AllplexTM 2
3. Preparación de la RT-PCR en tiempo real en un solo paso.
Nota: Se deben usar los tubos y tapas correctas (véase MATERIAL REQUERIDO NO
INCLUIDO).
Nota: Se deben usar puntas con filtro resistente a aerosoles y guantes ajustados durante la
preparación de las reacciones RT-PCR de un solo paso. Preste cuidado especial para prevenir la
contaminación cruzada.
Nota: Descongele completamente los reactivos sobre hielo.
Nota: Prepare todas las reacciones sobre hielo para minimizar el riesgo de degradación del ARN.
Nota: Centrifugue brevemente los tubos de reactivos para remover gotas del interior de la tapa.
Nota: Los pasos A – D se procesan se procesan automáticamente en el MICROLAB
NIMBUS IVD y MICROLAB STARlet. Remítase a cada manual de operación.
A. Prepare la Mastermix de la RT-PCR en un solo paso
5 µL 5X RP1 MOM
5 µL Agua libre de RNasa
5 µL Buffer 5X para tiempo real en un solo paso
2 µL Enzima para tiempo real en un solo paso
17 µL Volumen total de Mastermix de RT-PCR en un solo paso
Nota: Calcule la cantidad necesaria de cada reactivo requerida según el número de reacciones
(muestras + controles).
B. Mezcle por inversión el tubo 5 veces o haga un vórtex rápido, y centrifugue brevemente.
C. Alicuote 17μL de Mastermix de RT-PCR en un solo paso en los tubos de PCR.
D. Adicione 8μL de cada ácido nucleico en el tubo que contiene la alícuota de Mastermix de RT-
PCR en un solo paso.
17 μL Mastermix de RT-PCR en un solo paso
8 μL Ácido nucleico de la muestra.
25 μL Volumen total de la reacción.
E. Cierre la tapa y centrifugue brevemente los tubos de PCR.
14 10/2015 V1.02
Panel respiratorio AllplexTM 2
F. Verifique que el líquido que contiene todos los componentes de la PCR este en el fondo de
cada tubo de PCR. Si no es así, centrifugue nuevamente a un rpm más alto por un mayor
tiempo.
Nota: Los tubos de PCR deben ser centrifugados antes de iniciar la reacción de PCR. Esto
fuerza a que el líquido vaya al fondo y a eliminar burbujas de aire.
Correcto Incorrecto
Nota: Use una punta nueva estéril para cada muestra.
Nota: Para el Control Negativo (NC), use 8µL de agua libre de RNasa en lugar de ácido
nucleico de muestra.
Nota: Para el Control Positivo (PC), use 8μL de RP1 PC.
Nota: Por favor ser cuidadoso de no contaminar la Mastermix de RT-PCR en un solo paso ni las
muestras con el Control Positivo.
Nota: Los tubos de PCR deben mezclarse y centrifugarse antes de iniciar la reacción de PCR.
Asegúrese que el líquido que contiene todos los componentes de la reacción de la PCR este en
el fondo de cada tubo de PCR.
Nota: No marque la tapa de los tubos de reacción dado que la fluorescencia es detectada a
través de la tapa del tubo.
Burbuja
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Panel Respiratorio AllplexTM 2
CONFIGURACIÓN DEL EQUIPO PARA PCR EN TIEMPO REAL Y ANÁLISIS DE
RESULTADOS
1. Sistema para PCR en tiempo real CFX96TM (Bio-Rad)
1.1. Configuración del Equipo para PCR en tiempo real
Nota: La configuración del experimento en el Sistema para PCR en tiempo real CFX96TM (Bio-
Rad) puede dividirse en tres pasos: Configuración del Protocolo, Configuración de la Placa, Inicio
del Ensayo.
A. Configuración del Protocolo
1) En menú principal, seleccione File New Protocol para abrir la ventana de Protocol
Editor.
Fig. 1. Configuración del Protocolo. Cree un Nuevo protocolo o cargue un protocolo existente
para el experimento
2) En Protocol Editor, defina el perfil térmico como se menciona a continuación:
Nota*: Lectura de placa en el segmento 4 y 5. Fluorescencia detectada a 60°C y 72°C.
16 10/2015 V1.02
Panel respiratorio AllplexTM 2
Fig. 2. Editor del Protocolo
3) Haga clic sobre Sample Volume para modificar directamente el valor a 25 μL.
4) Haga clic en OK y guarde el protocolo para abrir la ventana de Experiment Setup.
Fig. 3. Configuración del Experimento: Protocolo
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Panel Respiratorio AllplexTM 2
B. Configuración de la Placa
1) En la pestaña Plate en Experiment Setup, haga clic en Create New para abrir la ventana de
Plate Editor para crear una nueva placa.
Fig. 4. Editor de Placa. Cree una nueva placa
2) Haga clic en Select Fluorophores para indicar los fluoróforos (FAM, HEX, Cal Red 610, y
Quasar 670) que serán utilizados en el experimento y haga clic en OK.
Fig. 5. Seleccionar Fluróforos (FAM, HEX, Cal Red 610 y Quasar 670)
3) Seleccione los pozos deseados y luego su tipo de muestra del menú desplegable Sample
Type.
- Unknown: Muestras clínicas
- Control Negativo
- Control Positivo
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Panel respiratorio AllplexTM 2
4) Haga clic en las casillas de verificación apropiadas (FAM, HEX, Cal Red 610 y Quasar 670)
para especificar los fluoróforos que se detectarán en los pozos seleccionados.
5) Digite el nombre de la muestra en Sample Name y presione la tecla enter.
6) En Settings del menú principal del Plate Editor, elija el tamaño de la placa en Plate Size (96
wells) y el tipo de placa en Plate Type (BR White).
Fig. 6. Plate Setup
7) Haga clic en OK para guardar la nueva placa.
8) Se devolverá a la ventana de Experiment Setup.
Fig. 7. Configuración del Experimento: Placa
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Panel Respiratorio AllplexTM 2
C. Inicio del ensayo
1) De la pestaña Start Run en Experiment Setup, haga clic en Close Lid para cerrar la tapa del
equipo.
Fig. 8. Cierre de Tapa
2) Haga clic en Start Run.
3) Guarde el archivo del ensayo en Mis Documentos o en la carpeta que usted designe. Ingrese
el nombre del archivo, haga clic en SAVE, y el ensayo iniciará.
1.2. Análisis de datos
A. Cree carpetas para la exportación de datos
1) Cree una carpeta para guardar los resultados de la curva de amplificación.
2) El nombre de la carpeta podrá ser designado por el usuario (Para la función ‘Seegene
Export’, las Carpetas “QuantStep4” y “QuantStep5” se crean automáticamente para guardar
los datos de cada curva de amplificación en la carpeta creada por el usuario).
20 10/2015 V1.02
Panel respiratorio AllplexTM 2
B. Pre-ajustes para el Análisis de Datos en el CFX96TM
1) Después de la prueba, haga clic en la pestaña de Cuantificación para confirmar los resultados
de curva de amplificación.
Fig. 9. Resultados de la curva de amplificación
2) Seleccione No Baseline Subtraction del Modo de Análisis del menú Settings.
Fig. 10. Sin sustracción de línea de referencia
21 10/2015 V1.02
Panel Respiratorio AllplexTM 2
3) Seleccione Seegene Export del menú Tools.
Fig. 11. Exportación Seegene
4) Elija una ubicación para guardar los datos y haga clic en OK.
Fig. 12. Exportación Seegene a la carpeta designada
22 10/2015 V1.02
Panel respiratorio AllplexTM 2
C. Ajustes para el análisis de datos en el Seegene Viewer
1) Abra el programa Seegene Viewer, y haga clic en Open para encontrar el archivo guardado en
la carpeta “QuantStep4”.
Fig. 13. Seegene Viewer
2) Después de abrir la carpeta de resultados, seleccione el kit de prueba del menú PRODUCT.
Fig. 14. Ajustes para el análisis de datos en Seegene Viewer
Nota: Por favor verifique el tipo de tubo al seleccionar el kit de prueba (banda de 8 o
placa de 96).
23 10/2015 V1.02
Panel Respiratorio AllplexTM 2
3) Verifique el resultado de cada pozo.
Fig. 15. Resultados de la prueba en el CFX96TM mediante el Seegene Viewer
24 10/2015 V1.02
Panel respiratorio AllplexTM 2
RESULTADOS
1. Interpretación de Resultados
Fluoróforo
Analito
Gráfica 1 Gráfica 2
FAM PIV4 MPV
HEX PIV2 PIV1
Cal Red 610 AdV HEV
Quasar 670 IC PIV3
Valor Ct Resultado
≤ 42 Detectado (+)
> 42 or N/A No detectado (-)
Resultado Objetivo* Resultado
IC Interpretación
Gráfica 1 Gráfica 2
+ -
+
Ácido nucleico objetivo, Detectado
- +
+ +
+ -
-
Ácido nucleico objetivo, Detectado *
- Virus respiratorios adicionales que no fueron detectados pueden estar presentes.
- +
+ +
- - + Ácido nucleico objetivo, No detectado
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Panel Respiratorio AllplexTM 2
- - -
Inválido**
- Señal débil o negativa del control interno es indicativa de
una toma de muestra inadecuada, o errores en el
procedimiento o presencia de inhibidores.
- Repita la prueba de aislamiento de ácido nucleico
utilizando otra alícuota de la muestra original.
- Si el mismo resultado se muestra en el ácido nucleico re-
aislado, por favor diluya la muestra (1/3~1/10) en solución
salina y repita el aislamiento (después de añadir RP-V IC)
y RTPCR.
*La detección del Control Interno en el canal de detección del Quasar 670 no es requerida para
resultados positivos de patógenos objetivo. Una carga elevada de otro analito puede conducir a
una reducción o ausencia de la señal del Control Interno.
**Si no se observa ninguna de las señales incluyendo el Control Interno, véase Solución de
Problemas TROUBLESHOOTING.
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Panel respiratorio AllplexTM 2
2. Aplicación a Muestras Clínicas
Muestra 1
Muestra 2
Muestra 3
Muestra
FAM (Ct) HEX (Ct) Cal Red 610 (Ct) Quasar 670 (Ct) Auto
interpretación PIV4 MPV PVI2 PIV1 AdV HEV PIV3
IC
1 N/A N/A N/A N/A N/A N/A N/A 34.78 AdV
2 N/A N/A N/A 24.99 N/A N/A N/A 34.76 PIV1
3 N/A N/A N/A N/A N/A 29.57 20.86 33.51 HEV, PIV3
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Panel Respiratorio AllplexTM 2
SOLUCIÓN DE PROBLEMAS
Panel Respiratorio AllplexTM 1
OBSERVACIONES CAUSAS PROBABLES SOLUCIÓN
No se observa señal Los fluoróforos para análisis
de datos no cumplen con el
protocolo.
Seleccione los fluoróforos correctos para el
análisis de datos y exporte los datos de nuevo. No
hay necesidad de repetir la prueba en este caso.
Ajustes incorrectos del
termociclador en tiempo real
Verifique las condiciones del ciclo térmico y repita
la prueba bajo los ajustes correctos.
Almacenamiento incorrecto o
posterior a la fecha de
vencimiento del kit de la
prueba.
Verifique las condiciones de almacenamiento
(Véase página 9) y la fecha de vencimiento
(remítase a la etiqueta) del kit de la prueba y
utilice un nuevo kit, si es necesario.
Fallo en el aislamiento de
ácidos nucleicos
Una ausencia de señal de IC puede indicar la
pérdida de ácidos nucleicos durante su
aislamiento. Asegúrese de utilizar el método de
aislamiento recomendado.
Si es debido a los inhibidores, re-aísle la muestra
original o diluya la muestra (1/3~1/10) en solución
salina y repita la prueba desde el paso de
aislamiento.
No se observa señal
de Control Interno
Alta carga del ácido nucleico
del patógeno
Si se observa la señal del patógeno objetivo pero
no la del IC, entonces la amplificación del IC
podrá haberse inhibido por la alta carga del
patógeno objetivo. Con el fin de confirmar la señal
de IC, diluya la muestra (1/3~1/10) en solución
salina y repita la prueba desde el paso de
aislamiento.
Presencia de inhibidores de
RT-PCR
Diluya la muestra (1/3~1/10) en solución salina y
repita la prueba desde el paso de aislamiento.
Se observan señales
objetivo o falsos
positivos putativos
en el Control
Negativo
Contaminación Descontamine todas las superficies y los equipos
con hipoclorito de sodio y etanol. Utilice
solamente puntas con filtro durante el
procedimiento y cambie las puntas entre cada
tubo. Repita todo el procedimiento del aislamiento
de ácidos nucleicos con un nuevo set de
reactivos.
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Panel respiratorio AllplexTM 2
Panel Respiratorio AllplexTM 1
OBSERVACIONES CAUSAS PROBABLES SOLUCIÓN
No se observan
señales o falsos
negativos putativos
en el Control
Positivo
Error en la toma de muestras Verifique el método de toma de muestras y tome
de nuevo la muestra.
Almacenamiento incorrecto
de la muestra
Tome de nuevo la muestra y repita todo el
procedimiento. Asegúrese de que la muestra sea
almacenada, según las recomendaciones.
Error en el aislamiento de
ácido nucleico
Verifique el procedimiento de aislamiento de
ácidos nucleicos así como la concentración de
ácidos nucleicos, y re-aísle el ácido nucleico.
Error en la adición de ácido
nucleico a los tubos de PCR
correspondientes
Verifique los números de muestra de los tubos
que contienen ácido nucleico y asegúrese de
adicionar ácido nucleico en el tubo correcto de
PCR y repita cuidadosamente la prueba, si es
necesario.
Presencia de inhibidores Diluya la muestra (1/3~1/10) en solución salina y
repita la prueba desde el paso de aislamiento.
Mezclado de la PCR
incorrecto
Confirme que todos los componentes sean
adicionados al mezclado de la RTPCR (La
sensibilidad está comprometida con el pre-mix
compuesto). Todos los reactivos deben ser
homogeneizados y girados hacia abajo antes de
ser utilizados.
Solo se detecta
el subtipo del
virus de
Influenza A pero
no el virus de
Influenza A
Carga baja del ácido
nucleico del patógeno
Los resultados se deberían interpretar de acuerdo
con la tabla de interpretación proporcionada, pero
se puede realizar una nueva prueba con un
volumen disminuido de agua libre de RNasa y un
mayor volumen de ácido nucleico.
Picos en los ciclos
de la curva de
amplificación
Burbuja en el tubo de PCR Centrifugue el tubo de PCR antes de iniciar.
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Panel Respiratorio AllplexTM 2
RENDIMIENTO
1. Especificidad
La alta especificidad del Panel Respiratorio AllplexTM 2 está asegurada por los oligos
diseñados específicamente para los blancos de interés bajo las condiciones definidas de
reacción. Se evaluó reactividad cruzada del Panel respiratorio AllplexTM 2 con 85 patógenos
diferentes, y en la amplificación RT-PCR y detección se identificaron únicamente los blancos
específicos.
No. Organismo Número de Cepa Resultado
1 Adenovirus Humano C tipo 1 ATCC VR-1 AdV Detectado
2 Adenovirus Humano C tipo 2 ATCC VR-58 AdV Detectado
3 Adenovirus Humano B tipo 3 ATCC VR-3 AdV Detectado
4 Adenovirus Humano E tipo 4 ATCC VR-1572 AdV Detectado
5 Adenovirus Humano C tipo 5 ATCC VR-61 AdV Detectado
6 Adenovirus Humano D tipo 6 ATCC VR-1368 AdV Detectado
7 Adenovirus Humano A tipo 7 ATCC VR-1095 AdV Detectado
8 Adenovirus Humano D tipo 23 ATCC VR-1101 AdV Detectado
9 Adenovirus Humano F tipo 40 ATCC VR-931 AdV Detectado
10 Metapneumovirus humano Aislamiento koreano MPV Detectado
11 Virus Coxsackie humano A9 KBPV VR-11 HEV Detectado
12 Virus Coxsackie humano B1 KBPV VR-13 HEV Detectado
13 Virus Coxsackie humano B2 KBPV VR-14 HEV Detectado
14 Virus Coxsackie humano B3 KBPV VR-15 HEV Detectado
15 Virus Coxsackie humano B4 KBPV VR-16 HEV Detectado
16 Virus Coxsackie humano B5 KBPV VR-18 HEV Detectado
17 Virus Coxsackie humano B6 KBPV VR-18 HEV Detectado
18 Echovirus humano 6 KBPV VR-19 HEV Detectado
19 Echovirus humano 7 KBPV VR-20 HEV Detectado
20 Echovirus humano 9 ATCC VR-39 HEV Detectado
21 Echovirus humano 11 KBPV VR-22 HEV Detectado
22 Echovirus humano 22 (Parechovirus) KBPV VR-23 HEV Detectado
23 Echovirus humano 25 KBPV VR-24 HEV Detectado
24 Echovirus humano 30 KBPV VR-25 HEV Detectado
30 10/2015 V1.02
Panel respiratorio AllplexTM 2
No. Organismo Número de Cepa Resultado
25 Echovirus Humano 34 (Cox A24C) ATCC VR-583 HEV Detectado
26 Echovirus Humano 70 (D) ATCC VR-836 HEV Detectado
27 Echovirus Humano 71 (A) ATCC VR-784 HEV Detectado
28 Virus de polio KBPV VR-74 HEV Detectado
29 Virus de parainfluenza humana 1 ATCC VR-1380 PIV1 Detectado
30 Virus de parainfluenza humana 2 ATCC VR-92 PIV2 Detectado
31 Virus de parainfluenza humana 3 ATCC VR-93 PIV3 Detectado
32 Virus de parainfluenza humana 4A ATCC VR-1378 PIV4 Detectado
33 Virus de parainfluenza humana 4B ATCC VR-1377 PIV4 Detectado
34 Virus de influenza A humana (H3N2) ATCC VR-544 No Detectado
35 Virus de influenza A humana (H3N2) ATCC VR-547 No Detectado
36 Virus de influenza A humana (H3N2) ATCC VR-822 No Detectado
37 Virus de influenza A humana (H3N2) ATCC VR-810 No Detectado
38 Virus de influenza A humana (H1N1) ATCC VR-546 No Detectado
39 Virus de influenza A humana (H1N1) ATCC VR -95 No Detectado
40 Virus de influenza A humana (H1N1) ATCC VR-97 No Detectado
41 Virus de influenza A humana (H1N1) ATCC VR-219 No Detectado
42 Virus de influenza A humana (H1N1) ATCC VR-98 No Detectado
43 Virus de influenza A humana (H1N1) ATCC VR-825 No Detectado
44 Virus de influenza A humana (H1N1) ATCC VR-897 No Detectado
45 Virus de influenza A humana (H1N1) ATCC VR-1683 No Detectado
46 Virus de influenza A humana (H1 pdm09)
KBPV VR-1736 No Detectado
47 Virus de influenza B humana KBPV VR-101 No Detectado
48 Virus de influenza B humana KBPV VR-102 No Detectado
49 Virus de influenza B humana KBPV VR-103 No Detectado
50 Virus de influenza B humana KBPV VR-295 No Detectado
51 Virus de influenza B humana KBPV VR-296 No Detectado
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Panel Respiratorio AllplexTM 2
No. Organismo Número de Cepa Resultado
52 Virus de influenza B humana ATCC VR-823 No Detectado
53 Virus de influenza B humana ATCC VR-523 No Detectado
54 Virus de influenza B humana ATCC VR-786 No Detectado
55 Virus respitarorio sincital humano A ATCC VR-26 No Detectado
56 Virus respitarorio sincital humano B ATCC VR-955 No Detectado
57 Rhinovirus Humano A8 ATCC VR-488 No Detectado
58 Rhinivirus Humano A16 ATCC VR-283 No Detectado
59 Rhinivirus Humano B14 ATCC VR-284 No Detectado
60 Rhinivirus Humano C Korean isolate No Detectado
61 Bocavirus Humano Korean isolate No Detectado
62 Coronavirus Humano 229E ATCC VR-740 No Detectado
63 Coronavirus Humano NL63 Korean isolate No Detectado
64 Coronavirus Humano OC43 ATCC VR-1558 No Detectado
65 Legionella pneumophila
ATCC 41782 No Detectado
66 Streptococcus pneumoniae ATCC BAA-255D No Detectado
67 Bordetella pertussis ATCC BAA-589D No Detectado
68 Haemophilus influenzae ATCC 51907D No Detectado
69 Mycoplasma pneumoniae ATCC 293442 No Detectado
70 Chlamydophila pneumoniae Korean isolate No Detectado
71 Klebsiella pneumoniae ATCC 700721D-5 No Detectado
72 Klebsiella oxytoca ATCC 700324D No Detectado
73 Serratia macrescens ATCC 27137D-5 No Detectado
74 Enterobacter cloacae KCTC 13047 No Detectado
75 Enterobacter aerogenes ATCC 15038D No Detectado
76 Proteus mirabilis ATCC 12453D No Detectado
77 Pseudomonas aeruginosa ATCC 47085D No Detectado
78 Pseudomonas fluorescens KCTC 49642 No Detectado
79 Candida albicans ATCC 14053 No Detectado
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Panel respiratorio AllplexTM 2
No. Organismo Número de Cepa Resultado
80 Staphylococcus aureus ATCC 700699D-5 No Detectado
81 Streptococcus mitis ATCC 3556 No Detectado
82 Streptococcus agalactiae ATCC BAA-611D No Detectado
83 Fusobacterium nucleatum ATCC 25586D-5 No Detectado
84 Herpes virus humano 1 ATCC VR-260 No Detectado
85 Herpes virus humano 1 Atcc vr-734 No Detectado
† Para evaluar la reproducibilidad de los resultados, el experimento se repitió tres veces.
2. Sensibilidad
Con el fin de determinar la sensibilidad del Panel Respiratorio AllplexTM 2 se realizó una
dilución seriada estándar de ADN blanco clonado desde 105 a 100 copias/reacción y se
analizó con el Panel Respiratorio AllplexTM 2. El límite de detección del Panel Respiratorio
AllplexTM 2 fue 100 copias/reacción. metapneumovirus humano y el virus de la parainfluenza
humana 4 se decidio de ellos el límite de detección a 1.000 copias / reacción, y los otros se
decidieron con un límite de detección a 100 copias / reacción.
3. Reproducibilidad
Se realizaron pruebas de reproducibilidad en 5 momentos diferentes en el transcurso de 5
días, por 3 experimentadores diferentes, y con 3 lotes de producto distintos. Se obtuvieron los
mismos resultados en todas las pruebas, confirmando la reproducibilidad del Panel
Respiratorio AllplexTM 2.
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Panel Respiratorio AllplexTM 2
REFERENCIAS
1. A. J. Easton, J. B. Domachowske, and H. F. Rosenberg. [Animal pneumoviruses: molecular genetics and
pathogenesis.] Clinical Microbiology Reviews. (2004) 17: 390-412
2. A. Purkayastha, S. E. Ditty, et al. [Genomic and bioinformatics analysis of HAdV-4, a human adenovirus
causing acute respiratory disease: implication for gene therapy and vaccine vector development.] Journal of
Virology. (2005) 79: 2559-2572 D. H. Lee. [TOCE: Innovative Technology for High Multiplex Real-time PCR.]
Seegene Bulletin. (2012) 1: 5-10
3. C. E. Corless, M. Guiver, R. Borrow, V. Edwards-Jones, E. B. Kaczmarski, and A. J.
Fox. [Contamination and sensitivity issues with a real-time universal 16S rRNA PCR.]
Journal of Clinical Microbiology. (2000) 38: 1747-1752
4. D. H. Lee. [TOCE: Innovative Technology for High Multiplex Real-time PCR.] Seegene
Bulletin. (2012) 1: 5-10
5. J. Y. Chun. [High Multiplex Molecular Diagnostics.] Seegene Bulletin. (2012) 1: 1-4
6. J. Y. Chun, K. J. Kim, I. T. Hwang, Y. J. Kim, D. H. Lee, I. K. Lee, and J. K. Kim. [Dual
priming oligonucleotide system for the multiplex detection of respiratory viruses and
SNP genotyping of CYP2C19 gene.] Nucleic Acids Research. (2007) 35: e40
7. M. T. Coiras, J. C. Aguilar, M. L. Garcia, I. Casas, and P. Perez-Brena. [Simultaneous
detection of fourteen respiratory viruses in clinical specimens by two multiplex reverse
transcription nested-PCR assays.] Journal of Medical Virology. (2004) 72: 484-495
8. M. T. Coiras, P. Perez-Brena, M. L. Garcia, and I. Casas. [Simultaneous detection of
influenza A, B, and C viruses, respiratory syncytial virus, and adenoviruses in clinical
samples by multiplex reverse transcription nested-PCR assays.] Journal of Medical
Virology. (2003) 69: 132-144
9. M. W. Syrmis, D. M. Whiley, M. Thomas, I. M. Mackay, J. Williamson, D. J. Siebert, M.
D. Nissen, and T. P. Sloots. [A sensitive, specific, and cost-effective multiplex reverse
transcriptase-PCR assay for the detection of seven common respiratory viruses in
respiratory samples.] Journal of Diagnostics. (2004) 6: 125-131
10. S. Bellau-Pujol, A. Vabret, L. Legrand, J. Dina, S. Gouarin, J. Petitjean-Lecherbonnier,
B. Pozzetto, C. Ginevra, and F. Freymuth. [Development of three multiplex RT-PCR
assays for the detection of 12 respiratory RNA viruses.] Journal of Virological Methods.
(2005) 126: 53-63
11. S. Gottlieb [Metapneumovirus is a leading cause of respiratory tract infection in infants.]
BMJ. (2004) 328: 7434
12. Y. J. Lee, D. Y. Kim, K. H. Lee, and J. Y. Chun. [Single-channel multiplexing without
melting curve analysis in real-time PCR.] Scientific Reports. (2014) 4: 1-6
13. Y. Jinno, K. Yoshiura, and N. Niikawa. [Use of psoralen as extinguisher of
contaminated DNA in PCR.] Nucleic Acids Research. (1990) 18: 6739
14. Medimmune progresses development of respiratory syncytial virus and parainfluenza
virus type-3 vaccines. Pharmaceutical News, Oct 13, 2004
34 10/2015 V1.02
Panel respiratorio AllplexTM 2
SIMBOLOGÍA
Explicación de los símbolos utilizados en el manual y en las etiquetas.
Símbolo Explicación
Dispositivo médico de diagnóstico In vitro
Uso exclusivo en investigación
Número de lote
Número de catálogo
Fecha de vencimiento
Límite de temperatura de almacenamiento
Mezcla de oligonucleotidos para amplificación y detección
Mezcla de enzimas
Buffer
Agua libre de RNasa
Control Positivo (PC)
Control Interno (IC)
Consulte instrucciones de uso
Fabricante
Fecha de fabricación
Representante autorizado en la Comunidad Europea
Precaución
35 10/2015 V1.02
Panel Respiratorio AllplexTM 2
INFORMACIÓN DE PEDIDO
Cat. No. Producto Tamaño
Serie AllplexTM
RP9801Y Panel Respiratorio AllplexTM 1 50 rxns
RP9801X Panel Respiratorio AllplexTM 1 100 rxns*
RP9802Y Panel Respiratorio AllplexTM 2 50 rxns
RP9802X Panel Respiratorio AllplexTM 2 100 rxns*
RP9601Y Panel Respiratorio AllplexTM 3 50 rxns
RP9601X Panel Respiratorio AllplexTM 3 100 rxns*
RP9803Y Panel Respiratorio AllplexTM 4 50 rxns
RP9803X Panel Respiratorio AllplexTM 4 100 rxns*
* Para su uso exclusivo con MICROLAB NIMBUS IVD y MICROLAB STARlet
Serie AnyplexTM
RV7G01Y Detección AnyplexTM II RV16 (V1.1) 50 rxns
RV7G01X Detección AnyplexTM II RV16 (V1.1) 100 rxns*
RB7500Y Detección AnyplexTM II RB5 50 rxns
RB7500X Detección AnyplexTM II RB5 100 rxns*
RV7310X Detección en tiempo real de digitación AnyplexTM FluA/B (V1.1)
100 rxns
* Para su uso exclusivo con MICROLAB NIMBUS IVD y MICROLAB STARlet
Serie Seeplex®
RV3210 Detección Seeplex® RV7 50 rxns
RV6C00Y Detección Seeplex® RV12 ACE 50 rxns
RV6F00Y Detección Seeplex® RV15 ACE 50 rxns
RV6F01Y Detección Seeplex® RV15 OneStep ACE (V1.1) 50 rxns
RV6520X Seeplex® Influenza A/B OneStep Typing (V2.1) 100 rxns
PB1610Y Detección Seeplex® PneumoBacter ACE (V3.0) 50 rxns
Productos accesorios
SG1701 Ribo_spin vRD (Kit de aislamiento de ARN/AND Viral) 50 preps
36 10/2015 V1.02
Panel respiratorio AllplexTM 2
Sistemas automáticos de aislamiento
65415-02 MICROLAB NIMBUS IVD EA
173000-075 MICROLAB STARlet EA
744800.4.205875 STARMag 96 Virus 384T / 1 caja
744800.4.VC384 STARMag 48 X 8 Virus Cartridge kit 384T / 1 caja
744300.4.205875 STARMag 96 Tissue 384T / 1 caja
744300.4.TC384 STARMag 48 X 8 Tissue Cartridge kit 384T / 1 caja