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Projecto Interfruta
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12.1 Identificacin de Hongos Fitopatgenos en cultivos de Terceira, Azores
12.1.1 Introduccin
Uno de los principales problemas que se
plantean a la
hora de trabajar con los hongos, es la identificacin de losmismos. La clasificacin morfolgica de los hongos se realiza
a partir del estudio de las estructuras reproductoras y de las
hifas, crecimiento del micelio, tamao y ornamentacin de
las esporas, etc. Sin embargo, en ocasiones estos criterios
no son suficientes para diferenciar especies de hongos con
caractersticas similares entre s, a lo que hay que sumar el
hecho de que algunos organismos fngicos no dan lugar
a estructuras reproductoras utilizadas habitualmente para
su identificacin.
En este aspecto, los avances en biologa molecular engeneral, y la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
en particular, han facilitado enormemente el anlisis de
microorganismos, aportando una capacidad superior paracaracterizar y clasificar cepas y facilitar el estudio de la
diversidad gentica de poblaciones (Malvrez, 2001). La
tcnica de la PCR se dio a conocer en el ao 1983, y se basa
en la sntesis in vitro de millones de copias de determi-
nadas secuencias especficas de DNA. El factor clave de la
aplicacin de la tcnica de PCR para la caracterizacin de
microorganismos, hongos en este caso, es la determinacinde oligonucletidos iniciadores (primers) especficos para la
identificacin de los lmites del sitio a amplificar. Usando pri-
mers adecuados, pueden ser estudiados diferentes aspectos
en diferentes niveles taxonmicos (Malvrez, 2001).
La zona ms idnea del genoma fngico para realizar
estudios a nivel molecular debe presentar una serie de
caractersticas: tiene que estar presente en todos los hon-
gos, ser fcilmente amplificada y adems poseer regiones
variables que permitan diferenciar los organismos a nivelestaxonmicos tales como variedades, especies o gneros. De
ah que la mayor parte de los estudios filogenticos y de
identificacin molecular se hayan centrado en el estudio
de los genes que codifican para el RNA ribosmico (DNAr),ya que poseen regiones de secuencia conservada as como
regiones con diferente grado de variacin ( Turenne, 1999;
Arenal, 2000).
12.1.2 Material y Mtodos
12.1.2.1 Recoleccin y tratamiento de las muestras
La recogida de muestras para la determinacin del
agente causal deber ser representativa de los sntomas
observados en el campo. Si, por ejemplo, con lo que nos
encontramos es un cncer, bastar con recoger trozos
que contengan parte enferma y parte sana. Si los snto-
mas apuntan a una necrosis vascular, un trozo de tallo con
los vasos necrosados ser suficiente, por norma general.Recomendaciones anlogas sirven para la recoleccin de
hojas y ramas enfermas. (Tello et al.1.991). Cada muestra se
coloca en una bolsa de plstico desinfectada y etiquetada.En las etiquetas se ponen los datos identificativos, tanto de
la muestra como de la planta y del cultivo, as como la fecha
12.1 Identificacin de Hongos Fitopatgenos en cultivos de Terceira, AzoresPrendes, C.(1); Lorenzo, CD.; Melo, C. (2); Cabrera, R.(1); Gimnez, C.(1) & Lopes, D.J.H.(2)
(1) U.D.I. Fitopatologa. Facultad de Biologa. Universidad de La Laguna, Avda. Francisco Snchez s.n. 38206. La Laguna. Tenerife. Islas Canarias. Espaa, Tfno: (+34)922318347, Fax: (+34)922318347, e-mail: [email protected](2) Dep. de Ciencias Agrarias. Centro de Biotecnologia. Seccin de Proteccin de Plantas. Universidad de Aores. 9701-851, Angra do H erosmo. Terceira. Azores. Portugal.
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de recoleccin y todos aquellos datos que se consideren
importantes para hacer un seguimiento, lo mas completo
posible de cada planta si as fuera necesario. En el laboratoriose seleccionan las muestras cortando pequeos trozos que
contengan parte enferma y parte sana, para luego, previa
desinfeccin, seguir dos caminos para su identificacin: una
parte se emplear para su estudio morfolgico y otra parte
para se analizar por PCR (ampliacin y secuenciacin).
I. Estudio Morfolgico.
Las muestras seleccionadas son sembradas en cmaras
hmedas y en medio de cultivo PDA (Papa Dextrosa Agar)para que se desarrollen los hongos presentes en ellas.
Antes de poner el material vegetal en medio de cul-
tivo hay que realizar un tratamiento adecuado del mismo,
siguiendo dos caminos:
1. Parte de las muestras son sembradas llevando a cabo
un lavado previo con agua destilada estril, para elimi-
nar los restos extraos sin alterar la micoflora asociada
a la superficie foliar.
2. Otra parte es tratada con productos desinfectantesque eliminan determinados hongos no deseados,
de crecimiento rpido, dejando manifestarse a
otros. Los productos empleados son los siguientes:
* Etanol al 70%, con un tiempo de tratamiento
de 1 a 5 minutos y dos aclarados posteriores en
agua destilada estril de 3 minutos de duracin
para rehidratar los tejidos tratados con etanol.
* Leja comercial al 10% en tratamiento de 1 a 3 minu-tos seguido de tres aclareos con agua destilada estril
de 10 minutos cada uno.
I.a.- Siembra de las Muestras
Tras el tratamiento previo de las muestras, la siembra del
material vegetal puede efectuarse de dos maneras:
1. Siembra en cmara hmeda:
Para favorecer el crecimiento del hongo empleamos
cmaras hmedas mediante placas Petri estriles, en
cuyo interior colocamos papel de filtro. A continuacin,humedecemos el papel de filtro con agua destilada
esterilizada para alcanzar una humedad del 100% y
colocamos el material seleccionado. Todo el proceso
se realiza en la cmara de flujo laminar.
2. Siembra en medios de cultivo:
Se ha utilizado PDA (Papa Dextrosa Agar) para la siem-bra del material vegetal, aplicando 10 ml de medio
en cada placa Petri. En la cmara de flujo laminar los
trozos de material vegetal, previamente desinfectados,se siembran en la placa.
I.b.- Cultivos Puros
Las condiciones de humedad creadas en el interior de
las placas, as como las temperaturas apropiadas, favorecen
el desarrollo de los hongos presentes en las porciones de
material, al cabo de 3 4 das aproximadamente.
El aislamiento de hongos, para obtener cultivo puro,
se lleva a cabo repicando, en placas Petri con medio de
cultivo PDA, pequeas porciones de micelio procedente delos hongos desarrollados a partir del material de siembra.
Tambin este procedimiento se realiza en cmara de flujo
laminar bajo condiciones de rigurosa asepsia.
I.c.- Determinacin y Descripcin del Hongo Aislado
Tras la incubacin del hongo, se procede a su determi-
nacin y descripcin de la siguiente manera:
1. Descripcin morfolgica y medicin de sus estructu-
ras en el microscopio ptico, conjuntamente con la
realizacin de microfotografas.2. Bsqueda bibliogrfica.
3. Establecimiento de una micoteca con los hongos
hallados para posteriores estudios.
Para la determinacin de los hongos se han empleado
las fuentes bibliogrficas adecuadas en cada caso (Von Arx,
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12.1 Identificacin de Hongos Fitopatgenos en cultivos de Terceira, Azores
1987;Ellis, 1993; Goidnich 1994; Lanier, 1978; Watanabe,
2.002), utilizando, cuando es posible, trabajos monogrficos
de los gneros en estudio (Booth, 1977, Guba, 1961).
II. Anlisis por PCR (Amplificacin y Secuenciacin)
La identificacin de los organismos fngicos mediantela tcnica de la PCR se llev a cabo a travs de dos vas: porun lado, a partir de los aislados crecidos en placas con medio
de cultivo PDA y por otro a partir del propio material vegetal.
El protocolo seguido para la extraccin del DNA en amboscasos fue el establecido por el fabricante sigma-aldrich
empleando el kit de extraccin REDExtract-N-AmpTMPlant PCR Kit: se colocaron discos de material vegetal de
aproximadamente 0.5-0.7 cm o bien una pequea can-
tidad del micelio fngico a estudiar en un eppendorf de
1,5ml. Se aaden 100 l de la solucin de extraccin y se
agita en el vortex durante unos segundos. Posteriormente
los eppendorf se incuban a 95C durante 10 min (bao
seco). Luego se aaden 100 l de la solucin de dilucin
y se agitan en el vortex de nuevo. Si la muestra no va a ser
procesada de inmediato es necesario conservarla a 2-8C
hasta el momento de su utilizacin.Una vez extrado el DNA, se procedi a su amplificacin.
Se tomaron 4ul de la solucin de DNA y se depositaron en
un eppendorf de 200ul, al cual se le aadieron 16ul de la
siguiente mezcla: agua PCR (5,2ul/muestra), Red extract
(10ul/muestra), Primers (0,4ul/muestra).
El reactivo Red extract pertenece al kit completo de
extraccin REDExtract-N-AmpTM Plant PCR Kit citado
anteriormente, y contiene la mezcla de buffer, sales, dNTPsy Taq polimerasa necesarios para que tenga lugar la ampli-
ficacin.Para la amplificacin del DNA extrado directamente del
micelio fngico se emple la pareja de primers generales
ITS1-ITS4, mientras que para amplificar el DNA extrado
directamente del material vegetal se emplearon, adems de
los primers generales, parejas de primer diseados especfi-
camente para detectar aquellas especies patgenas que se
suponan causantes de la sintomatologa observada.
Las muestras analizadas fueron amplificadas y posterior-mente los productos de amplificacin fueron visualizados
por electroforesis en geles de agarosa al 1% con tampn
TBE 1x. Como indicador de tamao molecular se utiliz el
marcador de 50-2000 pb. Tras la tincin de los geles en una
solucin de bromuro de etidio 1:10000, stos se visualizaron
y fotografiaron. Aquellas muestras que presentaban una
seal de amplificacin clara fueron purificadas utilizando el
kit de purificacin GenEluteTM PCR Clean-Up Kit. Una vez
purificadas, se mandaron a secuenciar y posteriormente,
las secuencias de los distintos organismos endfitos secontrastaron con las almacenadas en la base de datos
del NCBI (National Center for Biotechnology Information),
identificando as los hongos a nivel de especie en la mayorparte de los casos.
12.1.3 Resultados
Se han obtenido, mediante los mtodos descritos, los
siguientes hongos, en cada uno de los cultivos estudiados
Platanera
Alternaria alternata (Fr.:Fr.) Keissler, Colletotrichum gloeospo-rioides(Penz.) Penz. & Sacc. In Penz, Colletotrichum musae
(Berk. & M.A. Curtis) Arx, Fusarium oxysporum Schlechtend.:Fr. f.sp.cubense (E.F.Sm.) W.C. Snyder & H.N. Hans, Pestalotia
leprogena Speg., Phoma glomerata (Corda) Wollenweb. &
Hochapfel, Phoma musaecolaTassi, Rizoctonia solani Khn,
Verticillium teobromae (Tureoni) E. Mason & S.J. Hughers
Manzanero
Alternaria mali Robers, Aspergilliumsp, Botryosphaeria luteaA.J.L.
Phillips, Botryosphaeria ribis Gross. & Duggar, Phoma glomerata
(Corda) Woll., Rhizoctonia solani Khn., Verticilliumsp.
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Melocotonero
Alternaria alternata (Fr.:Fr.) Keissler, Fusarium lateritium Nees,
Pestalotia gracilis Kleb.
Naranjero
Alternaria citri Ellis & Pierce apud Pierce, Botryosphaeria ribis
Gross. & Duggar, Cephalosporium sp, Colletotrychum gloeos-
porioides (Penz). Penz. & Sacc. In Penz, Phytophthora sp
Alternaria
Este gnero incluye gran cantidad de especies patgenas deplantas, en muchos casos con hospedadores especficos. Lascolonias son efusas, generalmente de color gris, marrn oscuro
o negro. El micelio se encuentra inmerso total o parcialmente
en el sustrato y las hifas son coloreadas, de color marrn oli-
vceo o marrn claro. Los conidiforos presentan una gran
diferencia con las hifas vegetativas, formando ramificacionessimples o irregulares de color marrn claro. Los conidios se
forman solos o en cadenas acrpetas. Consisten en un cuerpoovoide o elipsoidal con una base claramente redondeada, con
varios septos transversales y unos pocos septos longitudinales.
Los conidios terminan en un cuello de longitud variable. Su
coloracin va de marrn claro a oscuro. (Ellis, 1993).
Alternaria alternata(Fr.:Fr.) Keissler
Presenta hifas tabicadas y coloreadas, en las que se desar-
rollan los conidiforos. Estos conidiforos surgen solitarios
o en grupos pequeos, simples o ramificados, rectos o fle-
xuosos, a veces geniculados; son de color olivceo plido a
medio, o marrn dorado, de longitud superior a 50 m, y de
3 a 6 m de grosor. Tiene una o varias cicatrices conidiales.
Los conidios crecen de forma acrpeta dando lugar a largas
cadenas, frecuentemente superior a 10, que pueden sersimples o ramificadas (Ellis, 1993). Estos son de color marrn
plido, por lo que las colonias en placas petri adquieren uncolor oscuro (fig. 12.1), de forma muy variada, desde ovoides
a piriformes, pero siempre presentan un cuello, de un grosor
entre 2 y 5 m, de forma cnica o cilndrica, que no excede
de la tercera parte de la longitud del conidio, de 3-8 septostransversales y generalmente 1-2 septos longitudinales (fig
12.2), y paredes que pueden ser l isas o ligeramente rugo-
sas. Se han descrito podredumbres en ctricos, manzanas
y peras; clorosis en hojas jvenes de manzanas, albinismoen semillas de ctricos y otras plantas, diversas alteracionesfoliares en plantas ornamentales, etc.
Alternaria citriEllis & Pierce apud Pierce
Colonias difusas, de olivceas a negras. Conidiforos simples
Fig. 12.1 Fig. 12.2
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12.1 Identificacin de Hongos Fitopatgenos en cultivos de Terceira, Azores
o ramificados, rectos o flexuosos, septado, de color marrnclaro o marrn olivceo. Conidios solitarios o en cadenas
cortas (2-7), recto o ligeramente curvados, forma variada
pero comnmente oclavada u oval, de color que va desde
meloso a marrn oscuro u olivceo, lisos o verrucosos, conmas de 8 septos transversales y numerosos oblicuos o
transversales. (Ellis, 1.993). Produce la mancha parda de los
ctricos. Se ha encontrado actuando conjuntamente con
Colletotrichum gloeosporioides.Las reseas bibliogrficas
sealan la existencia de sinergismo entre los dos hongos
aislados, siendo el agente primario de la enfermedadA. citri,
actuando C. gloeosporioides como organismo secundario
ya que interviene indirectamente en el proceso infectivo,es decir, se comporta como un hongo saprofitito. A. citri,
tambin causa la podredumbre negra del fruto. El hongo
penetra por la cicatriz estilar y provoca en el interior de sta
una podredumbre seca de evolucin lenta que despus
de la recoleccin se produce un oscurecimiento del eje
central.
Alternaria maliRobers
Hifas de hialinas a gris oscuro o verde oliva oscuro. Conidios
de color verde oliva oscuro o pardo negruzcos, oclavados,ovalados o redondeados, formando largas cadenas. Tabiques
externos generalmente lisos y, a veces, verrugosos. Pico muy
corto o carecen de l. Produce toxinas (AM) especficas de
sus hospederos. Causa la podredumbre en los manzanos.
(Jones y Aldwinckle, 2002)
Aspergillus
Este gnero es fcilmente reconocible por la presencia de
conidiforos erectos que terminan en una vescula a modo
de cabeza, sobre la que se desarrollan directamente lasclulas conidigenas (filides) en empalizada, o una capa
de clulas que portan las filides (estructura biseriada). Lascolonias son de crecimiento muy rpido y aspecto pul-
verulento, de coloracin variada, aunque generalmente
verde y a veces oscuras, marrones o negras. El micelio se
desarrolla parcialmente inmerso o superficial en el sustrato,
sin formar estroma.
Las especies deAspergillushan sido descritas sobre muchos
cultivos, generalmente como patgenos secundarios,
ocasionando pudriciones de postcosecha. Se consideran
hongos saprofitos, aunque tambin han sido nombrados
como causantes primarios de pudriciones en semillas
almacenadas. Son frecuentemente aislados de semillas,
especialmente en cereales, que presentan una reduccin
en la geminacin. Los sntomas que presenta el material
vegetal afectado por las especies de este gnero son
pudriciones blandas en la epidermis, en las que aparece
el micelio del hongo.
Botryosphaeria
Saprfito, ocasionalmente parsito causando canceres.
Micelio inmerso, ocasionalmente puede ser superficial,
pigmentado, formando un seudoestroma, a menudo
estroma rompiente formado por clulas angulosas. Ascoma
separado o gregario, a menudo botr ioso, esfrico u oval, no
ostiolado, al madurar abre por el pice. Ascas, claviformes,
bitunicadas. (von Arx, 1.987).
Botryosphaeria luteaA.J.L. Phillips
Anamorfo Fusicoccum luteum Pennycook & Samuels.
Ascocarpo indistinguible de B. dothidea. Estroma inicial-
mente inmerso, posteriormente irrumpe a travs del tejido
del hospedero. Seudotecio con cuello corto que abre a
travs de un ostiolo. Ascas bitunicadas, cilndricas, clavadas,
estipitadas con 8 ascosporas, asociadas con seudoparafisisfilamentosas. Ascosporas biseriadas irregularmente, hialinas,
gutuladas, lisas, aseptadas, oval, fusiformes.
Botryosphaeria ribis Gross. & Duggar
Anamorfo: Fusicoccum ribis Slippers, Crous, M.J. Wingf.
Patgeno dbil que causa chancros en muchas plantas
leosas. El ascocarpo irrumpe a traves de los tejidos del hos-
pedero, globoso con ostiolo central, paipado o no, marrn o
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Fusarium lateritium Nees
Colonia bien desarrollada con micelio areo casi siempre
abundante; aspecto algodonoso, a veces decumbente,
blanco, rosado, amarillo, ocre, anaranjado, violceo, azulverdoso. El sustrato es de color variable: amarillo, castao,
marrn, salmn, prpura, rosa. Hay formacin de un estroma
esclerocial de color azul. Microconidios por lo general poco
abundantes o escasos, 0-1 tabicados, y de forma variable:
elipsoidales, fusiformes, ovales, piriformes, forma de coma.
Los macroconidios se forman sobre el micelio; forman
esporodoquios tpicos gregarios. Son dorsiventrales, subrec-
tilneos, con curvatura dorsal suave y de dimetro ms o
menos uniforme. Tienen el pice constreido, a veces conuna ligera curvatura a modo de garfio, ms pronunciada
que en la parte media. La base est bien pedicelada, y los
tabiques y las paredes son ms bien finas. Tienen entre 3 y 7
septos, abundando ms los de 3 y 4 tabiques. Los sntomas
observados se caracterizan por la presencia de cancros que
Fig. 12.3
Fig. 12.5
Fig. 12.4
Fig. 12.6
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se presentaban preferentemente en ramillas de crecimiento
del ao anterior, as como tambin en madera ms vieja. Los
cancros se iniciaban a partir de las heridas producidas por la
poda. Lo hemos encontrado actuando en melocotonero.
Fusarium oxysporum Schlechtend.: Fr. f.sp.cubense(E.F.Sm.)
W.C. Snyder & H.N. Hans,
Esta es la forma especializada de Fusariumque ataca a la pla-
tanera, causndole la enfermedad llamada Mal de Panam
que es letal para la platanera. Los sntomas se inician con un
amarillamiento anormal en las hojas ms viejas empezando
por los bordes (fig.12.3). Al poco tiempo las hojas se doblan
en la base de los pecolos y se secan, quedando colgadasde las plantas. Posteriormente en las hojas jvenes sucede
lo mismo.
El patgeno se encuentra en el suelo, por lo que la infeccin
tiene lugar a travs de las races. El ataque se ve facilitado por
heridas producidas en las mismas, bien debidas a la forma-cin de races secundarias, bien por picaduras de nemato-
dos o insectos. El hongo se instala en el xilema (fig.12.4) y la
enfermedad va progresando de abajo hacia arriba. Cuando
se hace un corte transversal del pseudotallo se aprecia el
oscurecimiento de los vasos conductores(fig.12.5), lo que elagricultor conoce como veteado. En cultivo puro (fig.12.6)
las colonias de este hongo son de color blanquecino o
incluso rojo brillante. Producen dos tipos de esporas (micro-
conidios unicelulares, y macroconidios pluricelulares). Se
han descrito 4 razas de este hongo, que afectan a distintoscultivares de plataneras en diferentes zonas del mundo.
Pestalotia
Acrvulos negruzcos, subepidermicos. Conidios alargados,
fusiformes, pluricelulares, tpicamente oscuros en la partecentral e hialinos en los extremos, provistos pedicelos y
apndices apicales (stulas) hialinos (normalmente de 2-
4). (Goidnich, 1.994). Son parsitos dbiles o saprfitos.
Pueden producir antracnosis.
Pestalotia gracilis Kleb.
Conidios con cinco clulas, fusiformes ligeramente curvados.
Las dos clulas coloreadas superiores son ms oscuras quela inferior, de coloracin olivcea. La clula basal hialina, deforma cnica. La clula apical, hialina, cnica o cilndrica,
con 2-4, usualmente 3, stulas muy divergentes. Pedicelo
erecto (Guba, 1961).
Pestalotia leprogenaSpeg.
Se encuentra sobre platanera. Los cultivos puros presentan
una coloracn blanquecina (fig. 12.7). Conidios con 5 clulas,
clavados, eliptico-fusiformes, curva o de lados desiguales.
Las clulas intermedias coloreadas. Las dos superiores usu-almente fuliginosas, engrosadas, opacas. La tercera, olivcea.Las clulas exteriores hialinas, cnicas, la basal con margenagudo. 3 stulas (Guba, 1961) (fig.12.8).
Phoma
Las especies de este gnero presentan un micelio inmerso y
ramificado, septado, hialino o plido. La estructura reproduc-
tora es un picnidio, que puede ser inmerso o casi inmerso,
marrn, globoso, que puede presentarse aislado o agregado
y las paredes delgadas. Las clulas que lo conforman son decolor marrn plido y son de forma angular. Puede presentar
varios ostiolos, generalmente no papilados. Los conidiforos
no estn presentes. Los conidios son hialinos, aseptados,
de paredes finas frecuentemente gutulados y de forma
elipsoidal, fusiforme, piriforme o globosa. La mayora de las
especies del gnero Phoma son saprfitas, tan slo algu-
nas son patgenas. Estas causan necrosis, podredumbres
secas y dumping off (Arx Von, 1987). Las especies ms
comunes aparecen sobre hojas y tallo. Los hospedadores
son numerosos.
Phoma glomerata. (Corda) Wollenweb. & Hochapfel (fig.12.9
y fig 12.10)
Picnidio globoso o subgloboso, marrn oscuro, ostiolo
conspicuo, peridio marrn oscuro, seudoparenquimatoso.
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Conidios hialinos, elipsoidales, unicelulares. Clamidospora
marrn oscura, subglobosa, muriforme con septos trans-
versales y longitudinales, bastante irregulares. (Watanabe,
2002). Encontrada en hojas de platanera.
Phoma musaecolaTassi(fig.12.11 y 12.12)
Acta sobre las hojas de platanera.
Phytophthora
Parsito, acta sobre todas las partes de la planta, esporan-gios esfricos, ovales, o elipsoides, zoosporas formadas en el
esporangio, biflageladas; oogonio usualmente inmerso enel tejido del hospedero, de pared gruesa, lisa, conteniendooospora plertica o aplertica, ocasionalmente ausente o
desconocida, anteridio anfigino o paragino. (von Arx 1.987).
Se aisl en naranjeros. Causa gomosis, podredumbres de
pie y cuello y podredumbre parda de los ctricos.
Fig. 12.7
Fig. 12.9
Fig. 12.8
Fig. 12.10
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A Fruticultura na Macaronsia O Contributo do Projecto Interfruta para o seu desenvolvimento
Rizoctonia
Organismo de suelo que produce enfermedades graves
en muchos hospederos ya que afectan a las races, tallos,
tubrculos, cormos, etc. Se incluye dentro de los hongos
esteriles, debido a que muchos aos se pens que eran
incapaces de producir algn tipo de esporas, tanto sexual
como asexual. Los sntomas ms corrientes, principalmente
los producidos por Rizoctonia solani, son ahogamiento de
las plntulas, pudriciones de raz, as como pudricionescancros en los tallos de plantas adultas y en proceso de
crecimiento. (Agrios, 1.995)
Rizoctonia solaniKhn
Su forma sexual (Thanatephorus cucumeris)produce basi-
diosporas. Hifas incoloras en estados juveniles, pero se
tornan amarillas o caf claro a medida que maduran. Elmicelio est constituido por clulas alargadas y produce
ramificaciones que crecen casi en ngulo recto con respecto
a la hifa principal, estrechndose ligeramente a nivel de labifurcacin y poseen un septo cerca de ella. Las caracte-
rsticas de las ramificaciones comnmente son los nicos
medios disponibles para identificarlo. En ciertas ocasiones
el hongo produce ramilletes de clulas cortas, anchas, de
forma oval o triangular y que se asemeja a esclerocios, los
cuales funcionan como clamidosporas, o en todo caso,
dicho ramilletes se desarrollan en pequeos esclerocios de
color caf a negro, dispuestos en forma laxa. (Agrios, 1.995).
Encontrada en platanera y manzano.
Verticillium
Se caracteriza este gnero por tener conidiforos hialinos
ramificados de forma verticilada y los conidios unicelulares,
hialinos, ovoides o elipsoidales, solitarios o reunidos engrupos en el extremo de las filides. Dependiendo de la
especie pueden existir microesclerocios.
Las especies pertenecientes al gnero Verticillium poseen
un papel fitopatolgico muy importante; algunas espe-
cies parecen ser especficas de los tejidos leosos y cau-
san alteraciones conocidas como traqueomicosis o ms
concretamente verticilosis. Estas se caracterizan por un
amarilleamiento seguido de la desecacin de las hojas; estos
sntomas pueden presentarse de forma localizada en una
parte de la planta o por el contrario generalizarse.Verticilliumocasiona marchitamientos vasculares en gran
cantidad de plantas. Las hojas de plantas infectadas pierden
su turgencia, se debilitan, adquieren una tonalidad que va
del verde claro al amarillo verdoso, decaen y finalmente
se marchitan, se tornan amarillas, empardecen y mueren.
Fig. 12.11 Fig. 12.12
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12.1 Identificacin de Hongos Fitopatgenos en cultivos de Terceira, Azores
Los cortes trasnversales que se hacen de tallos y ramitas
infectados muestran varias zonas de color caf dispuestas
en forma de un anillo completo o interrumpido que consta
de tejidos vasculares decolorados. En los vasos xilmicos
de tallos, races y otros rganos infectados, puede haber
micelio y esporas del hongo.
Verticillium aparece con mayor frecuencia en las zonas
templadas y es considerablemente ms resistente al fro
que Fusarium. Los sntomas de marchitez por Verticilliumson casi idnticos a los que ocasiona Fusarium. Sin embargo,
en muchos de los hospedantes y en la mayora de las reas,
Verticilliuminduce marchitez a temperaturas ms bajas que
Fusariumy los sntomas se desarrollan ms lentamente.
Con frecuencia aparecen solos sobre la parte inferior de la
planta o sobre su superficie o nicamente sobre algunas
de sus ramas. En muchos hospedantes, la infeccin por
Verticillium da como resultado la defoliacin, marchitez
gradual y muerte de ramas sucesivas o un colapso repentino
y muerte de toda la planta (Agrios, 1995).
Verticillium teobromae(Tureoni) E. Mason & S.J. Hughers
En la platanera daa la punta de los dedos por donde
penetra el agente patgeno a travs de los restos de la
flor que quedan adheridos a aquellos. A consecuencia de
este ataque, la punta del fruto se ennegrece, se seca, se
vuelve fibrosa y toma una forma idntica a la ceniza del
tabaco prendido., de ah el que se conozca vulgarmente
como cigarro puro. Puede a tacar a uno o a varios dedos.
La frecuencia de la enfermedad aumenta durante los perio-
dos de alta humedad y lluvia. Las esporas del hongo son
diseminadas por el viento y contamina las flores.
Tenemos que sealar que en las plataneras de Terceira
(Azores), hemos observado una sintomatologa con ciertoparecido a Sigatoka, presentando las plantas sus hojas
basales con unas coloraciones caractersticas (fig. 12.12
y 12.14). Sin embargo, ni al hacer los cultivos de las hojas
afectadas, ni mediante el empleo de primers especifi-
cos, en ningn momento se ha aislado o identificado la
presencia del hongo responsable de dicha enfermedad,
Mycosphaerella.Por el contrario, se aislaron, de forma repe-tida, un conjunto de hongos que inicialmente pueden ser
los causantes de dicha sintomatologa:Alternaria alternata,
Pestalotia leprogena, Phoma glomerata., Phoma musaecola.Por lo tanto, provisionalmente hemos denominado a esta
enfermedad con el nombre de complejo hasta tanto se
confirme inequvocamente el o los organismos causales.
Fig. 12.13 Fig. 12.14
7/22/2019 Morfologia de Hongos
12/12
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A Fruticultura na Macaronsia O Contributo do Projecto Interfruta para o seu desenvolvimento
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