7/23/2019 Metodos de Extraccion e Identificacion de Lipidos
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METODOS DE EXTRACCION EIDENTIFICACION DE LIPIDOS
TANIA DE LA FLOR BELLIDO G
DEYSI MALA
JUANITO HERRERA
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LIPIDOS
• Definición.- Los lípios os!s"#$%i#s &'#s#s (i)$)$ # s)'*!í+i%#+)$") +),%l#s%o$s"i"!i#s po' )s")')s ) l#&li%)'i$# ) o"'os #l%ool)s %o$los /%ios &'#sos. P!))$ %o$")$)'#)+/s /%ios &'#sos li0')s1&li%)'i$# li0')1 ')si$#s1 )s)$%i#s1#l0!+i$#s1 pi&+)$"os1 )"%. Es #()%)s # )s"#s s!s"#$%i#s *!) s))0)$ s!s #%%io$)s
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Clasificación.-
Lípidos saponificables: Los lípidos
saponificables son los lípidos que contienen
ácidos grasos en su molécula y producen
reacciones químicas de saponificación. A su
vez los lípidos saponificables se dividen en:Lípidos simples
Lípidos compleos
Lípidos insaponificables: !on los lípidos que no poseen ácidos grasos en
producen reacciones de saponificación. "ntre los lípidos insaponificables encon
"steroides y %rostaglandinas.
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Funciones
• Función de reserva• Función estructural
• Función Aislante
• Función
biocatalizadora• Función
transportadora
• Función Reguladora:
• Función de
Localización.- Las grasas provien
vegetales como de los animales. "n
se localizan preferentemente en las s
las células del albumen &ricino' o en
cotiledones &almendras$ maní' o en
adormidera$ etc.' y además en el per
frutos como el olivo.
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EXTRACCION DE LIPIDOS
• Los +4"oos ) )5"'#%%i3$ ) l#s&'#s#s #%)$ !so ) op)'#%io$)s2ísi%#s # ()%)s *!í+i%#s1 o$)s!)l) "'#0#6#'s) )$ 2'io o 0i)$#p'o()%#$o )l %#lo'.
• T#+0i4$ p!)) !s#'s) isol()$")s#p'opi#os 74")'1 %lo'o2o'+o1s!l2!'o ) %#'0o$o. B)$%i$#1 #%)i")s) p)"'3l)o8 #!+)$"#' l# p')si3$#"+os24'i%#.
• E$ &)$)'#l s) %o$si)'#$ los
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METODOS DE EXTRACCION DE LIPIDOS A PARTIRDE LAS DROGAS
• Ex!esión en F!io.- S)p')sio$#$ los 3'&#$os 'i%os )$#%)i")s )$ p')$s#s1 lo *!)p'o(o%# )l )s%!''i+i)$"o )
los #%)i")s )$ )5%)l)$"))s"#o ) p!'),#. El p'o!%"oo0")$io )s ) p'i+)'#%#li#. S) )+pl)# p#'##l&!$#s s)+ill#s ol)#&i$os#s p#'# )l #%)i") ) í&#o )
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• Ex!esión en Calien"e.- Al p'opio "i)+po *!) s)3'&#$os1 s) #%) #%"!#' l# #%%i3$ )l %#lo'1')$i+i)$"o )s +#o'1 l# %#li# )l p'o!%"o )
')si!o1 o "o'"#1 p'o()$i)$") ) l# %o+p')si3$ s) )2o''#6) #0o$o1 p!)s pos)) #!$ los p'i$%ipios p'os)+ill#s.
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METODOS DE EXTRACCION DE LIPIDOS APARTIR DE LAS DROGAS
• Po! el #ao! $e a%ua.-El (#po' ) #&!# so0'o0'# #0l#$#$o l#s %4l!l#s *!) %o$"i)$)$ )s"'!)$o l!)&o s!s +)+0'#$#s1 )l %#lo' #%":# #l 2!$i' l# &'#s# s3li# p')s%!''i+i)$"o.
• Po! acción $e $isol#en"es.- S) )+pl)#$ loisol()$")s ) &'#s#s1 solos o #so%i#os los *
s) )s"il#$ *!)#$o %o+o ')si!o l#s &'#s#s.
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METODOS DE EXTRACCION e IDENTIFICACIONDE LOS LIPIDOS
• METODOS DE SOXHLET
• El +4"oo %o$sis") )$ !$# )5"'#%%i3$ ) lípios s)+i-%o$"i$!# %o$ )l sol
2!$%io$#+i)$"o %o$"i$!o o +),%l# ) sol()$")s o'&/$i%os #)%!#o s)&:$ )5"'#)'.
• E$ )s") +4"oo )l isol()$") s) %#li)$"#1 s) (ol#"ili,# %o$)$s# &o")#$o s%!#l *!)# s!+)'&i# )$ )l isol()$"). Pos")'io'+)$") 4s") )s si2o$)#%#l)$"#+i)$"o p#'# )+p),#' ) $!)(o )l p'o%)so. El %o$")$io ) &'#s#i2)')$%i# ) p)so.
• P!ea!ación $e la &ues"!a ' ex"!acción $e los l(i$os9 E$ !$ %#'"!%o %olo%#' l# +!)s"'# s)%# p)s## 7%o$(i)$) !"ili,#' lo p'o()$i)$") ) l#!+)# po' )l +4"oo i$i')%"o81 po$)'l# )$ )l "!0o )5"'#%"o'. T#'#' )l 0%o$)%"#'lo #l +is+o. Po' l# p#'") s!p)'io' )l "!0o )5"'#%"o' #&')&#' )l 74")' )"íli%o1 4")' ) p)"'3l)o1 +),%l# ) #+0os1 )"%.8 #s"# *!) )s%#'&!) )#)+/s #l'))o' ) l# +i"# )l %o$")$io )l "!0o )5"'#%"o'. C#l)$"#' p#'
#l +)$os ; %i%los ) ll)$#o si2o$#o )l "!0o )5"'#%"o' 7!'#$") < o'#s #p
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• Recue!ación ' eli&inación $el sol#en"e9=!i"#' )l %#'"!%o )l "!0o )5"'#%"o' %o$ )l')s"o ) l# +!)s"'#. Vol()' # #'+#' )l )*!ipo ')%!p)'#' )l sol()$") li+pio *!) s) (##%!+!l#$o )$ )l "!0o )5"'#%"o'. U$# (),*!) *!)# !$ p)*!)>o (ol!+)$ )$ )l 0#l3$s)p#'#' )l sol()$") ) los lípios po')(#po'#%i3$ # 0#>o M#'í# o )$ 0#>o ) #')$#%#li)$"). Colo%#' )l 0#l3$ %o$ los lípios!$os ?@ +i$!"os )$ )s"!2# p)s#'.
• C)lculos* !$# (), %o$o%i# l# +#s# )lípios li0') ) sol()$") o'&/$i%o1 %#l%!l#' )lpo'%)$"#6) ) &'#s# )$ l# +!)s"'# ")$i)$o
)$ %!#$"# l# +#s# i$i%i#l ) +!)s"'#
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"l método de (lig)*+yer proporciona un método rápido para la e,tracción de
productos alimenticios que contienen una cantidad significativa de agua.
"l método se basa en la )omogenización de la muestra con cloroformo$ m
proporciones tales que se forme una sola fase miscible con el agua de la muestra
de cloroformo y agua se logra la separación de fases. "l material lipídico se encu
acuosa$ mientras que el material no lipídico se encuentra en la fase acuosa. Lo
e,traer de dos gramos de muestra seca )asta veinte gramos de muestra )me
agua de la muestra se austa a dieciséis mililitros para conservar la proporc
metanol y agua la cual es esencial si se pretende una separación de fase
cuantitativa de lípidos. La ventaa de este procedimiento es que las etapas de f
eliminadas. !in embargo no es un método muy cuantitativo y tiene un elevado mmuestras secas de cereales.
METODO DE +LIG, DER
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• +e acuerdo a este método$ la separación de la
grasa es lograda por amoniaco y etanol con un
posterior efecto de des)idratación sobre los
fosfolípidos. La grasa es disuelta en éter reciéndestilado y se a-ade algo de petróleo de tal
suerte que se separen algunos compuestos no
lipídicos que se puedan encontrar en la fase
etérea. "sta mezcla es completamente
inmiscible en agua de manera que mediante una
e,tracción adecuada es simple dear la grasa enla fase etérea y el residuo graso es pesado.
• "ste método es particular para lec)e fresca que
no contiene ácidos grasos libres$ los cuales en
disolución alcalina forman sales de amonio y
esto es insoluble en éter. "sta es la razón por la
cual esto no se aplica a quesos$ los cuales si
MET! !E R"E - #TTL$E%
• Aplicaciones: Determinación:
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• Aplicaciones:
• L)%)1 l)%) s)+i)s%')+##1l)%) )$ pol(o
• L)%) %o$)$s## #,!%#'## si$ #,!%#'#'
• N#"# $#"# 0#"i#• L#%"os!)'o
• Reactivos:
• Sol!%i3$ ) N#Cl @1 p(
• NHDOH 7)$si# @.?8
• E"#$ol
• E")' i)"íli%o9 i$")'(#lo ))0!lli%i3$ @-@C
• E")' ) p)"'3l)o9 i$")'(#lo ))0!lli%i3$ @-@C
Determinación:
!e seca un matraz "rlenmeyer con bo
/00 ml con algunas perlas de vidrio du
/56$ se coloca en desecador y se pesa
de 34* 1mg.La muestra se pesa también
a los valores recomendado en la tab
e,tracción de 7oonnier$ diluyéndose c
si fuera necesario )asta un volumen de
de la nata debe utilizare la solución de)asta que el producto se )aya disp
¶ la lec)e en polvo es conveniente
e,tracción y su contenido durante 19 m
de agua a 0*;056 agitando ocasionalm
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A continuación se a-aden / ml de amoníaco$ se mezcla y tras enfriar se a
etanol. +espués de a-adir /9 ml de éter dietílico$ se tapa el tubo de e,trac
durante 1 minuto invirtiéndolo suetando el tapón. <inalmente se a-aden /9
petróleo y se vuelve a agitar durante 20 segundos. =na vez que las
separado completamente$ lo que sucede después de dear reposar el tubo
o centrifugándolo durante 9 minutos a 900*00 r.p.m.$ se pasa tanta
&superior' como sea posible al erlenmeyer previamente pesado. !e repite
vez la e,tracción del residuo acuoso con otros 19 ml de éter dietílico y é
como se detalló más arriba. A continuación se renen las fase orgánicas$
solventes &también el etanol' y se seca el residuo que queda en el mat
durante 1) a 102 34* /56. !e enfría en desecador y se pesa con una p
1mg. "l secado se repite )asta obtener peso constante.
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P'o!%"o l/%")o P)so )$ &'#+os
L)%) )$")'# )$ pol(o ?-?1?
L)%) )s%')+## )$ pol(o ?1-?1
N#"#1 $#"# 0#"i# <-
L)%) %o$)$s## #,!%#'## -1
L)%) %o$)$s## si$ #,!%#'#' -
L)%) )$")'#1 l)%) )s$#"## ?@-??
%esos recomendados de muestra
&'lculo
"l porcentae de grasa > se calcula de acuerdo con la siguiente igualdad:
> ?@B ?&m/*m
1' . 10047
m1: masa en gramos del matraz "rlenmeyer con las perlas.m
/: masa en gramos del matraz "rlenmeyer con las perlas con grasa tras el secad
7: peso de la muestra en gramos
8ota: "s conveniente realizar un ensayo en blanco sustituyendo la muestra por
destilada.
Materia grasa en dulce de lec(e. M)todo de Rose #ottlieb
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Materia grasa en dulce de lec(e. M)todo de Rose #ottlieb
Reactivos
8CDEC conc.
"tanol
"ter etílico
"ter de petróleo
%esar un gramo de muestra en papel satinado previamente tarado. "ncerrar parcialmente el d
entrar en contacto con los reactivos' e introducir )asta el fondo en una probeta de 90 ml con ta
agua destilada y agitar )asta que se disuelva el dulce de lec)e &si es necesario calentar a (.7
agregar 1 ml de 8CDEC conc. Agitar y agregar 9 ml de etanol. Agitar y agregar con pipeta a
etílico. Agitar 20 seg. y agregar con pipeta aforada 10 ml de éter de petróleo.
Folver a agitar y leer bien el volumen total de la mezcla. +ear reposar entre D y /D )s. en lu
evitar la evaporación de solventesG si esto ocurriera se notará una disminución en el volume
aforada tomar 10 ml de la fase superior etérea y evaporarlos en un peque-o cristalizador tara
desecador$ pesar y e,presar en @ de grasas.
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METODO GER+ER
• s") +4"oo (ol!+4"'i%o p')s)$"# !$ %#'/%")'!$ "#$"o %!#$"o )+pí'i%o # *!) (#'ios 2#%"o')s#2)%"#$ l# &'#()# )sp)%í2i%# ) l# &'#s#s)p#'##1 (#'i#%io$)s p'opi#s ) l# &'#s#1/%ios &'#sos p')s)$")s1 sol!0ili# ) l# &'#s#
)$ los isol()$")s1 )"%. Co$ )s") +4"oo(ol!+4"'i%o l# +!)s"'# s) si":# )$ !$0!"i'3+)"'o s) )s%o+po$) !"ili,#$o /%ioso /l%#lis ) +#$)'# *!) l# &'#s# )s li0)'##1)s"# s) s)p#'# po' +4"oos +)%/$i%os7%)$"'i2! s) %ol)%"# )$ )l %!)llo %#li0'#o.
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REACCIONES CROMATICAS E IDENTIFICACIONDE LIPIDOS
• Los #%)i")s #$ %olo'#%io$)s)sp)%i#l)s1 7reacciones cromáticas)%o$ (#'ios ')#%"i(os1 %o+o /%ios1/l%#lis1 s#l)s i()'s#s #l&!$#s ))s"#s ')#%%io$)s si'()$ p#'#
is"i$&!i' %i)'"os &'!pos ) #%)i")s1o"'#s si'()$ p#'# %#'#%")'i,#')")'+i$#o #%)i") %!#$o so$)5%l!si(#+)$") )sp)%í2i%#s )l #%)i"))$ %!)s"i3$.
• E$"') l#s ')#%%io$)s ) %#'/%")'
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REACCION DE ,EDENRIC,.-• E$ !$# %#ps!l# ) po'%)l#$# ) 2o$o pl#$o s)
%olo%#$ %% ) /%io s!l2:'i%o %o$%)$"'#o so0'))l s) (i)'")$ #l&!$#s &o"#s ) #%)i") # )5#+i$#'. E$l# ,o$# ) %o$"#%"o s) o0s)'(# l# %olo'#%i3$9
• Los acei"es no secan"es* oli(o1 +#$í #l+)$'#s1$o #$ ")$io %#+0io s)$si0l) ) %olo'. A ()%)s )l#%)i") ) oli(o "o+# !$ %olo' #+#'illo ()'oso.C!#$o los #%)i")s so$ +! (i)6os o )s"/$ '#$%ios#$ %olo'#%io$)s #$#'#$6##s o p#'#s.
• Con los acei"es se&isecan"es* #l&o3$1 s4s#+o1%ol,#1 +#í,1 )"%.1 s) o0"i)$)$ %olo'#%io$)s )l#$#'#$6#o #s"# )l p#'o.
• Con los acei"es secan"es* li$#,#1 %/>#+o1#o'+i)'#1 "!$&1 %olo'#%io$)s p#'#s o $)&'#s 2o'+#%i3$ ) !$# p)lí%!l# )sp)s# )$ l# s!p)'2i%i).
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REACCION DE ,A/C,ECORNE• S) +),%l# )$ !$ "!0o ) )$s#o %% ) #%)i") %o$
<%% ) ')#%"i(o 2o'+#o po' "')s (ol:+)$)s ) /%io$í"'i%o p!'o !$ (ol!+)$ ) #&!# )s"il##.
• S) o0s)'(# l# %olo'#%i3$ *!) "o+# )l #%)i") #&i"#o%o$ )l /%io po' !$os os +i$!"os l!)&o l#%olo'#%i3$ )sp!4s ) #0)'lo ")$io !'#$") <@+i$!"os #l 0#>o +#'í#.
• Los #%)i")s $o s)%#$")s oli(o1 #l+)$'#s1#()ll#+#s1 +#$í1 %o$s)'(#$ s! %olo' )l ) oli(o"o+# # ()%)s %olo' #+#'illo ()'oso. Es"os +is+os#%)i")s %!#$o )s"/$ '#$%ios p!))$ #*!i'i' %olo'#$#'#$6#o.
• Los #%)i")s s)+is)%#$")s s)%#$")s "o+#$%olo'#%i3$ )s) )l #$#'#$6#o #s"# )l 'o6o %#s"#>o.
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REACCION DE +ELLIER • E$ !$ "!0o ) )$s#o s) %olo%#$ %% ) #%)i") o
) l# &'#s# s3li#1 2!$i# 2il"'##1 %%. )/%io $í"'i%o %o$%)$"'#o o i$%olo'o %%. D)sol!%i3$ s#"!'## )$ 2'io ) ')so'%i$# )$ 0)$,ol s) #&i"#$ 2!)'")+)$") !'#$") ?@ s)&!$os.
• Los #%)i")s ()&)"#l)s #$ %olo'#%io$)s 'o6#s1()')s o (iol)"#s1 !'#$") )l "i)+po *!) s)#&i"#$ @ s)&!$os )sp!4s. L#s %olo'#%io$)s*!) #p#')%)$ +/s "#') $o )0)$ "o+#'s) )$%!)$"#. Los #%)i")s #$i+#l)s %o$s)'(#$ s! %olo' op#s#$ #l p#'o.
• Es"# ')#%%i3$ si'() p#'# )s%!0'i' los #%)i")s()&)"#l)s ) s)+ill#s )$ l#s &'#s#s #$i+#l)s7&'#s# ) %)'o po' )6)+plo8. El #%)i") ) oli(o# %olo'#%i3$ s)$si0l) )$ )s") i$")'(#lo )"i)+po. El #%)i") ) s4s#+o # %olo'#%i3$ ()').
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ENSAO DE ELAIDINA
• Es"# 0#s#o )$ l# "'#$s2o'+#%i3$ ) l# ol)í$# li*!i# )$ s! is3+)'o )
s3li#1 po' #%%i3$ )l /%io $i"'oso1 lo *!) $o s!%)) %o$ los /%ili$ol)$i%o %#'#%")'ís"i%os ) los #%)i")s s)%#$")s.
• E$ !$ "!0o ) )$s#o s) %olo%#$ ?@%% ) #%)i") %% ) /%io $í"'i%o1+i$!"os s) #&')&# ?+& ) +)'%!'io *!) s) #%) isol()' #&i"#$o ))sp!4s s) )6# )$ ')poso 7 p'o!%%i3$ ) /%io $i"'oso81 )$!')%i+i)$"o. S) p!)) $o"#'9
• Co$ )l #%)i") ) oli(o p!'o s) o0"i)$) !$# +#s# soli# 0l#$%#i&!#l+)$") s) %o+po'"#$ los #%)i")s ) #l+)$'#s +#$i.
• Co$ los #%)i")s s)+is)%#$")s ) p)s%#o s) o0"i)$) !$# +#s# s)+is3l
• Co$ los #%)i")s s)%#$")s #$ !$ p'o!%"o li*!io #+#'illo1 #$#'#$6#ono contener oleína).
• OLEINA.-S!0s"#$%i# lí*!i#1 #l&o #+#'ill)$"#1 =!) s) ENCUENTRA EN LAS G'#s#s +#$")%#s
7/23/2019 Metodos de Extraccion e Identificacion de Lipidos
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