Evidencias clínicas, preclínicas, y toxicológicas
Gregorio Martínez Sánchez, Pharm.D, Ph.D.
gregorcuba yahoo.it
Toxicidad del Ozono
Altitud (km)
30
Insuficiencia pulmonar Riesgo cardiovascular
15
0
0 50 150 200 250 300
←Contaminación Concentración de O3 (µg/m3)
Efectos del ozono inhalado sobre la salud
• Trastornos respiratorios agudos y crónicos
• Efectos a nivel cardiovascular
• Incidencia en la mortalidad
Fuentes:
• Estudios en humanos en cámaras
• Estudios epidemiológicos
• Adicionalmente: – Estudios de toxicidad en animales
– Estudios del mecanismo de acción in vitro
Fluido alveolar
superficial
Sangre
Volumen 17-20 mL Plasma ~ 2,71 L
Proteinas
totales
~7 µg/mL Total ~130 mg ~75 µg/mL Total ~202 g
Albumina ~3,5 µg/mL Total ~63 mg ~45 µg/mL Total ~122 g
Trasferrina ~0,3 µg/mL 2-3 µg/mL
Ceruloplasmi
na
~25 µg/L 140-400 µg/L
Lactoferrina ~0,5 µg/L ?
GSH 300-400 µM Plasma ~3 µM Eritrocitos
~2,2 mM
Vitamina E ~2 µg/L ~10-20 µg/L
Vitamina C ~3,5 µg/L ~9 µg/L
Acido urico ~0,05 µg/mL ~0,04-0,07 µg/mL
Bilirrubina ? ~1,0 mg/dL
Glucosa ~0,4 µg/mL ~0,7-1,0 µg/mL
¿Por qué es tóxico el ozono para las vías respiratorias?
Peroxidación
lipídica
% i
ncr
ease
in r
isk p
er s
tan
dar
d i
ncr
emen
t
Resumen Estudios Poblacionales
all year
warm season only
Efectos respiratorios crónicos
Algunas evidencias sugiere mayor incidencia de asma y disminución de la función pulmonar
Un amplio estudio de cohortes prospectivo encontró poca relación entre el efecto del ozono y el de otros contaminantes
Los estudios ecológicos para la exposición, no arrojan evidencias claras
Las pruebas que relacionan el O3 con la morbilidad de enfermedades respiratorias crónicas son inconcluyentes
Mortalidad de un dfa- Resumen de un meta análisis
0/o Change in Mortality
0 1 2 3 4
Bell et al. (2005):
3.2 U.S.and n.on u_ s_ studies
(41 estimates)
Ito et a!. (2005):
38 u.s.and no u.s.studies
(43 estimates)
Levy et at (2001):
6 U.S.and European studies (6 estimates.PM-adjusted)
Levy et al. (2005):
28 U.S., Canadian,and European studies
(48 estimates)
Stieb et al. (2003):
10 u.s.and n.on..u.s.studies
(10 estimates, non-GAM studies only)
Thurston and Ito (2001):
7 U.S.and European studies (7 estimates .PM-adjusted)
Wor'ld Health Organization (2004):
8 European studies (15 estimates)
Mortalidad
Resumen
Asociación sólida entre la mortalidad diaria y aumento de la concentración de ozono
No se modifica por la presencia de otros contaminantes, o el estado del tiempo
El riesgo se ha analizado fundamentalmente en temporadas cálidas
La mortalidad cardiovascular algo más fuerte y más coherente que la afectación a las vías respiratorias
ALGUNAS APLICACIONES CLÍNICAS
ANGIOPATÍA Y ENFERMEDADES Arteriopatía Periférica
CIRCULATORIAS ARTERIALES Enfermedades cerebrovasculares
Úlceras Decúbito
ÚLCERAS Y LESIONES Curación y cicatrización de lesiones post-irradiación
DE LA PIEL Gangrena Diabética
Tratamiento de Quemaduras
ENFERMEDADES Proctitis
INTESTINALES Colitis
Hepatitis
Hepatitis C
INFECCIONES VIRALES
Herpes Simple y Herpes Zoster
Terapia COMPLEMENTARIA EN CÁNCER
Poli-artritis Crónica
REUMATISMO, ARTRITIS Inflamación Articular
Y OTRAS Puntos gatillos miosfasciales
Hernia Discal
ODONTOLOGÍA
JOURNAL OF APPLIED TOXICOLOGY
J. Appl. Toxicol. 21, 297-301 (2001)
DOl: I 0.1002/jat.758
Oxidative Preconditioning Affords Protection Against Carbon Tetrachloride-induced Glycogen Depletion and Oxidative Stress in Rats
E. Candelario-Jalil,1* S. Mohamm ed-A l-Dalain; 0. S. Loon Fermlnd ez;S. Men end ez,2
G. Perez-Davison;N. Merin o,3 S. Sam1 and H. H. Ajami eh 1 1 Center for Research and Biological Evaluation, Uni versity of Havana, Institute of Pharmacy and Food Sciences, Apartado Postal 6079, Havana City I 0600, Cuba 2 Ozone Research Center, Cuba 3 National Cenu·e for Scientific Research, Cuba
CONTROL
CCl4
OzonoOP + CCl4
ESTUDIO HISTOLÓGICO DEL GLUCÓGENO HEPÁTICO
El po-ozono, como mecanismo protector frente a
un desafío oxidativo quedo demostrado a través de:
Mantenimiento de la integridad hepatocelular
(histología, Transaminasas, colinesterasa)
Estimulación de enzimas secuestradoras de ero
(superóxido dismutasa y catalasa)
Preservación de enzima reguladora del calcio
intracelular (atpasa-ca2+)
Mantenimiento de los sistemas antioxidantes
endógenos (Glutatión reducido, glucosa-6-fosfato
deshidrogenasa)
DIABETES MELLITUS
“HAY EVIDENCIAS, CLÍNICAS Y EXPERIMENTALES, CONVINCENTES DE QUE LA GENERACIÓN DE ERO ESTÁ INCREMENTADA EN AMBOS TIPOS DE DIABETES Y QUE EL DESENLACE DE LA DIABETES ESTÁ ESTRECHAMENTE ASOCIADO AL ESTRÉS OXIDATIVO”
American Diabetes Association and the German Diabetes Society. 2001.
CALIDAD DE VIDA SERIAMENTE AFECTADA (Bjonk, 2001):
El RIESGO DE AMPUTACIÓN de miembros inferiores es de 15 a 40 veces
más alto en diabéticos.
La incidencia de ENFERMEDADES CARDÍACAS E INFARTO es de 2 a 4
veces más alta en diabéticos.
La DM es responsable del 40% de las ENFERMEDADES RENALES
TERMINALES y de CEGUERA.
La EXPECTATIVA DE VIDA es de 10 a 15 veces menor, en un individuo
diabético con respecto a uno no diabético.
La FRECUENCIA DE HOSPITALIZACIÓN, los GASTOS en cuidados de
salud y el PRESUPUESTO INVERTIDO EN EL TRATAMIENTO de las
complicaciones diabéticas es mayor con respecto a los no diabéticos.
INFARTO INFARTO AMPUTACIÓN DE
MIOCARDIO CEREBRAL MIEMBROS
COMPLICACIONES ASOCIADAS A LA DIABETES
HIPERGLICEMIA
MICROVASCULARES MACROVASCULARES
ATEROSCLERÓTICAS
RETINOPATÍA NEFROPATÍA NEUROPATÍA CORAZÓN CEREBRO EXTREMEDIDADES
INFERIORES
CEGUERA ENFERMEDADES ENFERMEDADES
RENALES TERMINALES DEBILITANTES
GENÉTICO
ENZIMAS PROTECTORAS
DESARROLLO
MEDIO AMBIENTAL
CONTAMINANTES Y FÁRMACOS
VIRAL
RESPUESTA INMUNE
E R O
DIETA
ANTIOXIDANTES
PROOXIDANTES
ESTADO
NUTRICIONAL
ENZIMAS INMADURAS
DEFICIENCIA
MUERTE
CELULAS
HIPERGLICEMIA
DIABETES MELLITUS TIPO 1
DIABETES TIPO 2
HIPERGLICEMIA
ERO
ESTRÉS OXIDATIVO
DISFUNCION CÉLULAS
DAÑO DE CÉLULAS
NÚMERO DE CLULAS
ESTRES OXIDATIVO Y DIABETES MELLITUS TIPO 2
LA OZONOTERAPIA EN LA DIABETES Y SUS
COMPLICACIONES VASCULARES
O
MECANISMOS PATOLÓGICOS DEL DAÑO ENDOTELIAL EN LA DIABETES
CAT H O
.-
2
SOD
H2O 2 2
GSH-Px +
ERO
GSSG GSH
GR HMPS
PTGA
NADPH NADP
NAD+ NADH
GLUCOSA AR SORBITOL SD
FRUCTOSA
NADPH NADP
LDL
OXIDADA
NOS
L-ARGININA L-CITRULINA + ON.
.NO
DAÑO
ENDOTELIAL
,
Pkwmacolagicm .J/j;:; lU'I. 44• .!Y.o.. 5.-::!001
do6:10.WOI5.o'plus.100"!_0867, s1.-ailable aWine st :llnp:/. :l.'l.l."o\I:.E me libnu:y..com o:!lllll l
OZON.E TREATl\iiENT REDUCES :MARKERS OF OXIDATIVE i\1""iD
ENDOTHE.LIAL D"' I.:. \G·E Irr; A_-x· EXPERlliE2\TAL DIABETE S lODEL 1.."" RATS
S.AID ·10H..1J...fED .AL-DJ!i.LA.Th"r., GKEGORlO :MAR.TINEZ<l., EDU. O CJL "DEI...Po.RIO-J... .IV1
SIL'VIA MENEN"DEzb, l.....!U.1BER.TO R..E= , ATTILIA GIULI.P..NJ.ti and OLGA SONI.J.l. LEON.s ...
centerfor Re::ear;c.h amJ.Biological E ·.- luancn (CJE.B-IF..!L). U11i "Br :sitJl qfH.'Jl-muz. Hal..Yr.l'J a 10400..
C tb-a.. b O=.one .R sse-an:;oh CsJJte?-; C ttb-a.. "' UMi\.'6'TS;,..:ifA.t1ctma.. 1taiJ,·. oJD'B.._r:N:.rtment oj'ChemistJy ami
_i\tediC'.al Bioc-h·e:mi:;J'J'Y.. t> E7;Si( Jl of}!!lila..tJ '. Ma 5.-.."l.lduJi, 50-20133 j\Jilm L-:aiJ,·
O:z:on.e has been used ;;,s a the rapem.t[:::al agem ar111d heneiilcca!effects ba;.-. e been ob:::;e:n;ed. Hmve-;rer
s;o f;:rz- only a fetv bioc:he mica.I ar!lld phan:nca.c.odyn<am i:i c: mecllanli.J:n.s hare beel!l ehrcidated. ue
dE!I.ll.Ol.lS"b:a.te th.a conrl:m led ozone ad.J:mni.stnt i:ol!l may promote an oxidati:,.-e PJ:·ec.oudi6om'Dg or
adap13tion to oxidati:-..·e .:;tress, p: .-e:,.--entmg the dcamage indm.c.ed by r•eac.ti.l e ox)'·ge:a speciies (ROS)_
Takiug into acc:ou.nt that dia is a disorder assor:::iated 1,:...-irth oxjdati:-..·e st:J:es:.:;, we postulate that
ozo:n.e n:ea!me:uil: in om- expe:riimental co:n.diti.ol115 might p o'tect an.ti:oxi:da:n.t .systell.l5 and ma]!nta.in,
a'l: a pb.ysio .ogacal le'i.-e othe :m.carl;.e-rs of endo!helaal ce ! damage a..ss.ociated w:Lth dlia.bet:c
COJJ.IPl iic:ati:ollS.. Fir.e gms; of :r.ats tve.re cla.£Smed as follow.s:(1) comrnl group hl:!ated on!y R<Lfu
physiological sa.liiue solution; (2) posM:i...,-e control gr0np using sb"eptmzotocin (STZ) as a di.a.hert:e.s
in.ducto1 (3) o2:one gJ"Ol!l.p, ]jf!Ceil:m,g 10 b:-e:altmenh: (1.1mg kg-1), one pe dca.j· after SYZ-indnc:ed
mabetes; {4) oxygen grGlJip (26 kg-l), 0!1.1! per dca.y, .a:; in g!'Otlp 3 but using oxy gen only;
(:5) cou1rol ozone group,.as gro.up 3, bot 't'i.'itb.-ot!J.t STZ_ The o;z;one n-ealbneu im:pro'i.--ed g!ycelillc
control and p1:·.-ented oxjd atil.-.e st:J:ess, the increase of aldose :reductase, :fi"l!Jctolys.ine e:onten.t and
adti.r;:m.c.e d oxidaiti.ou protem pmm:u::'ls. N:i',lrite and :mtt""atie eYE .5 l.'l.rere mamtain.e d wiiliou: ch;mgss
'!Arith rega d to !ll_on-d.ja"betic co:an·o _ The ll:!sults. of thi:s study .:how tha' repeate,d adwinis'lr.-:Jtion
of ozone in non-toxic doses might play a role lin ·fue conrb:o oi diabetes a!n.d its compljcations._
@ 20-Q 1Academe Press
EFECTOS DEL PostOx POR OZONO EN RATAS DIABÉTICAS
PESO CORPORAL Y CONCENTRACIONES PLASMÁTICAS DE GLUCOSA
Grupos
Cambios en el
Peso Corporal (g)1
Glucosa Plasmática
(mmol·L-1)
Significación Estadística
de Glucosa Plasmática
Inicio
Fin2
Control No Diabético
+ 41,52 ±18,16 a
12,73±1,45a
10,35±1,25a
N.S.
Diabético (STZ)
- 30,26±14,59 b
22,74±1,12b
27,12±2,12b
p < 0,001
STZ +
OzoneOxPost
+ 29,82±6,91 a
21,47±1,67b
16,10±1,45(3)c
p < 0,0001
(1) Cambios en peso corporal entre Inicio y Fin del experimento; (2) 10 días después de la diabetes inducida por STZ;
(3) Después de 10 tratamiento con ozono en ratas diabéticas.NS, No signifiativo. Datos representan la Media ± ESM.
Grupos con letras diferentes representan diferencias significativas.
EFECTOS DEL PostOx POR OZONO SOBRE MARCADORES DEL DAÑO ENDOTELIAL EN RATAS DIABÉTICAS
Niveles de ALDOSA REDUCTASA, FRUCTOLISINA, and ÓXIDO NÍTIRICO (NO3/NO2)
Grupos
AR1
FA2
ÓXIDO3
NÍTRICO
Control No Diabético
0,58±0,09(a)
6,36±0,00(a)
11,74±0,74(a)
Diabéticas (STZ)
1,38±0,08(b)
32,13±0,87(b)
5,32±0,98(b)
STZ + PostOx por Ozono
0,58±0,10(a)
9,36±0,01(a)
12,61±0,82(a)
(1) AR: Aaldosa Reductasa (mmol glucose min-1 mg protein-1); (2) FA: Fructolisina (contenido relativo de
fructolisina.mg protein-1 x 10-5); (3) Óxido Nítrico (nmol. mg protein-1).
Datos representan la Media ± ESM. Grupos con letras diferentes representan diferencias significativas
p < 0.05 entre grupos.
Availabl e onl ine at www.sciencedirect.com
SCIENCE @DI REC T "
ELSEVIER European Journa l of Pharmacology 523 (2005) 151- 161
www.elsev ier.com/locatelejphar
Therapeutic efficacy of ozone in patients with diabetic foot
Gregorio Mattinez-Sanchez a, Saied M. Al-Dalain a, Silvia Menendez b, Lamberto Re c,
Attilia Giuliani ct, Eduardo Candelario -Jalil a, Hector Alvarez e,
Jose Ignacio Fernandez-Montequin e, Olga Sonia Leon a,*
• Center of Studiesfor Research ond Biologicol Evaluation (C£1£8-/FAL), Universi(y of Havana, Havana 10400, Cuba
b Ozone Research Cente1; Cuba
c Labarat01:Y of Pharmacological Bioted111ology, Universi(y of Ancona, 60131 Ancona, lta(y
d Depm1ment of Chemislly and Medical Biochemi.rtly, Universi(y of Milan, Via Saldini, 50-20133 Milan, lta(y
• I nstitute of Angiology and Vascular Surg&:Y. Cuba
Received 21 Ju ly 2005; accepted I August 2005
Ava ilable on line 29 September 2005
ENSAYO CLÍNICO SOBRE LA EFICACIA DEL TRATAMIENTO CON O3/O2, EN
PACIENTES CON PIE DIABÉTICO NEUROINFECCIOSO.
Pacientes con diagnóstico: Pie Diabético Neuroinfeccioso, n=102, >15 años.
A (n=50)
Ozonoterapía
-Tto local: Oleozón, Bolsas de O3/O2
(50-60 mg.L-1, 1 hora, seguido por
OLEOZON)
-Sistémico O3/O2 rectal, 20 ttos (100 mL 50 mg.L-1)
B (n=52)
Terapia Convencional
-Tto local: antibiótico
-Sistémico: antibiótico
t=1
t=21d
-Concentraciones séricas de glucosa
-Planimetría Digital de las lesiones
-Indicadores clínicos generales
-Indicadores del estado redox
Glucosa Plasmática (mM)
22
20
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0
Antes Después Antes Después Tiempo de colección de la muestra
Antibiótico PostOx/Ozono Grupos
Efectos de la Ozonoterapia sobre la Tríada Redox en pacientes
diabéticos
con complicaciones vasculares
Marcador Redox/Grupo Sujetos Sanos
(n = 60)
Antibiótico
(n=49)
PostOx/Ozono
(n=51)
SOD
(U· mL-1·min-1)
Tiempo 0 1,460,14a 0,970,16b 1,090,13b
20 días
- 1,580,16a 6,870,32c
CAT
(U· mL-1·min-1) Tiempo 0 161,5723,12a 2880250b 2112,86210c
20 días
-
2370247b 3101,33290b
Hidroperóxidos
Totales
(M)
Tiempo 0 103.7817.71a 139.1229.71b 145.4331.61b
20 días
- 139.1925.23b 106.3030.92c
OZONOTERAPIA
SOD
O2.- DAÑO DEL PÁNCREAS
LIBERACIÓN INSULINA
NORMALIZACIÓN DE LA GLUCOSA SANGUÍNEA
Glucosa Plasmática (mM)
22
20
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0
Antibiotico (n=49) PostOx/Ozono (n=51)
´Relación CAT/SOD
4
3
&& **&&
2
1 &
0
t=0 t=20
Sujetos Sanos
Ozono
Antibiótico
Tiempo de Tto. (días)
D.O.·min-1
1600
1400
1200
1000
800
600
400
200
0
Contenido relativo de Fructolisina
&&
&**
Sujetos Sanos
Ozono
Antibiótico
t=0 t=20 Tiempo de Tto. (días)
Planimetría del área y perímetro de las lesiones al comienzo y al final del estudio
Parámetro Antes (XSD) Después (XSD)
Área (cm2)
Antibiótico n=50
54,840,39
40,720,35
Ozono n=52 57,970,52 23,310,36
pa 0,687 0,017
Perímetro (cm2)
Antibiótico n=50
21,490,11
17,340,14
Ozono n=52 18,490,14 12,620,13
pa 0,063 0,004
Evaluación clínica y tiempo de hospitalización para ambos grupos de tratamientos
Parámetro
Antibiótico (n=49) PostOx/Ozono
(n=51)
Evaluación
Clínica(1)
(n/%)
Curado 34 / 68 39 / 76
No Curado
16 / 32 12 / 23
N.S.
Tiempo de
Hospitalización
(días)(2)
X 34 26
Min.-Max. 7-83 6-58
DS
18 13
P=0,010(3) NS. No significativo. DS, Desviación Standard 1 Evaluación cualitativa realizada por el clínico; 2 Tiempo de hospitalización necesario para lograr una lesión aséptica, con buen
tejido de granulación, listo para recibir un injerto; 3 Test de Mc Nemar, para comparar entre grupos de tratamiento.
ENFERMEDADES “APARENTEMENTE” NO RELACIONADAS
RUTA PATOGÉNICA COMÚN DIABETES
ISQUEMIA ESTRÉS OXIDATIVO
CRÓNICO
Aterosclerosis
Neurodegenerativas
“La enfermedad cardiovascular tiene el mismo peso en la salud pública hoy que las epidemias de los siglos anteriores: el
50% de la población en los países desarrollados mueren de enfermedad
cardiovascular” (Pál Kertai)
Cada 2 min alguién sufre de un
ataque al corazón
(British Heart Foundation)
“El Infarto del miocardio, la muerte súbita y la angina de pecho inestable tienen una génesis común, la trombosis coronaria, que se desarrolla como resultado de una ruptura de una placa aterosclerótica. Mientras que en la placa aterosclerótica no se erosiona no se inducen la trombosis, la enfermedad coronaria puede ser una enfermedad clínicamente silente asociada con una mortalidad mínima. Cuando las placas comienzan a romperse y el material trombogénico entra en contacto con la sangre circulante, se crea una situación que pueden conducir al síndrome coronario agudo, asociada con una alta mortalidad”.
Enfermedad Arterial Coronaria(CAD)
• Factores de riesgo: Modificables
– Elevación de los lípidos sanguíneos
– Hipertensión
– Tabaquismo
– Obesidad
– Estilos de vida sedentario
Otros factores
– Diabetes mellitus
– Estrés/ patrones de conducta
La eficacia terapéutica del ozono está asociada a:
Bajas dosis de ozono puede inducir una reorganización de las vías bioquímicas, la activación del segundos mensajeros, que origina variados efectos biológicos.
Pre-condicionamiento oxidativo con Ozono: implican la síntesis de proteínas (sobre regulación de la expresión de las enzimas antioxidantes).
El Ozono modula las vías del óxido nítrico y otras rutas bioquímicas.
El Ozono preserva la función mitocondrial y el estado redox celular.
Leon et al., Mediat Inflamm 1998; 7:289-94.
Re et al., Arch Med Res 2008; 39:17-26
LIPOFUNDIN
Lipofundin MCT/LCT 20%
(Braun Melsungen AG, Alemania)
Jellinek et al., Atherosclerosis, 1982
Componentes Cantidad
Aceite de Soya 100 g
Triglicéridos de cadena media 100 g
Gicerina 25 g
Lecitina de huevo 12 g
-tocoferol 0,1 g
Oleato de sodio/agua p inyección Q.S. 1 L
kcal (aprox.) 1908
Milliosmosis/L (aprox.) 380
pH 6,5-8,5
International Journal of Vascular Med icine
Volume 2012, Article ID 898769, 7 pagfs
doi:I0.1155/2012/898769
Researclz Article
Lipofundin-Induced Hyperlipidemia Promotes Oxidative Stress
and Atherosclerotic Lesions in New Zealand White Rabbits
livan Delgado Roche, 1 Emilio Acosta Medina, 1 Angela Fraga Perez,1
1\briaA.B quer Viart,1 Yosdel Soto Lopez,2 Viviana Falcon Carna,3 Ana M. Vazquez Lopez,2
Hreguriu Martine .-Sanche:r., 4 and f.duardullerminde.-Sanchet.1
1 Cmttr cif'tud.:tsjvr R.twrrcli muf JJiol(lgkr.l miur.tior:s, l'li!;fllftllJ r.•r.l 1-ood Sde.wr C:ol.'t!gt, UJrl ·:!:rsifJ' cif J!m'!lJf·J,
PO.Ba 136t'\J,!A Cct,lllela,kl 1 .,HMr.na 13600.Cuivt L p!;rt:r:er;t of.4..•HU)J•Ir hr lnurhJ. Ur: tr of Mofec:r.'11r b::mmhJ•'o.• :ifll'i!; j16{)0j C!;b:l
=·fkp:.rimeroi i.fEh!;o;m, }Jim.··py,Center_t.rGmeicErosimfrinwu!Bir.•. le.,,fmolag)Hi.llWli.I1060a,Cul%'1
'MdiNcll, 60021JtijCOJ:•1. /1a/y
Atherosdero is represents a major came of death in the world. It is known that Lipofundin 20% induces atherosclerotic lesions
in rabbits, but its effects on seri!Cll lipids behaviour and redox environment have not been addressed In this study, 1\ew
Zealand cabbies were treated with 2 ml.'kg of lipofundin for 8 day . Then, rtdox biomarkers and serum lipids were determined
spectrophotometrical ly. On the other hand, the development of atheroscle rotic lesions was confirmed by eosinlhemato:q1in
staining and electron microsoopy. At the end oithe experiment, total chole terol, trig mides,chole teroi·LDL. and choleste rol
HDL levels were igni ficamly increased. Also, a high index of biomolecules damage, a disruption of both enzymatic and
nonenzymatic defenses,and a reduction of nitric oxide were oi>served.Our data demonstrated thac lifofundin 2()% induces
hyperlipidemia, which promotes an oxidative stress tate. Due to the importance of these phenomena as risk factors ior
atherogenesis, we suggest that Lipofundin induces atherosclerosis mainly through these mechanisms.
HISTOPATOLOGIA
(Tinción Eosina/HematoxiIlina
Estudio histológico de aortas de conejo. Tinción Eosina/hematoxilina, morfología normal (A y C),
grupo tratado con Lipofundin (A y D) muestra engrosamiento de la intima, distorsión de la
arquitectura vascular, amplios espacios intercelulares probablemente ocupados por lípidos
(asteriscos) Amplificación 10x (A y B) y 40x (C y D). Barra de escala 20 µm.
(A) (B)
ESTUDIO
ULTRAESTRUCTURAL
Microscopía electrónica
N
EC EC
VSMC
FC LV (C) (D) EC
Fig. A y B grupo control, fig. B, C, D y E
Lipofundin (formación de lesiones
ateroscleróticas). EC: células endoteliales,
EL: lípidos extracelulares, VSMC: células del
musculo liso vascular, N: núcleo, FC: células
espumosas, LV: vacuolas lipídicas, CF: fibras
de colágeno, M: microfibroblastos. Escala1
µm (A, B, C, D), 500 nm (E, F).
N
N N CF
LV
(E) (F)
EL
N EL
LV
M
FC
INDUCCIÓN DE HIPERLIPIDEMIA POR LIPOFUNDIN EN
CONEJOS NZW
Delgado-Roche et al., Pharmacologyonline 2010
Delgado-Roche et al., Int J Vasc Med 2011
II LIPOFUNDIN-INDUCED OXIDATIVE STRESS
Control Lipofundin
Systemic redox biomarkers
MDA, pM 2.69 + 0.07
AOPP, pM of chlorarnines 11.50 + 0.73
PP, pM of MDA 4.63 + 0.18
CAT, U/L!min 351.13 + 19.03
SOD, U/mL/min 22.03 + 26.44
N02,pM 179.18 + 11.44
GSH, flM 309.03 + 26.44
Aortic redox biomarkers
6.24 ... 0.28*
16.22 + 0.47'"
9.13 ... 0.34*
477.50 + 30.46*
32.00 + 1.60"'
134.33 ... 5.09*
191.21 ... 8.26*
MDA,pM/mgPr 18.49 ... 2.04 27.42 + 2.55"'
AOPP,pM of chloramines/mgPr
12.45 ... 1.21 24.25 + 1.86"'
PP, pM of JvlDNmgPr
13.81 ... 1.83
25.26 4- 2.29"'
CAT, U/L!min/mgPr 1023.60 ... 26.89 1609.68 ... 84.37"'
SOD, U/mL/min/mgPr 62.37 ... 3.93 105.39 ... 9.82*
N02,pM/mgPr 95.29 ... 2.54 43.96 + 6.03"'
GSH, flM/mgPr 166.70 ... 12.82 71.59 ... 10.89*
Delgado-Roche et al, lnt J Vase Med 2011
Efecto antia-aterogénico del pre-
condicionamiento con ozono
Livan Delgado-Roche, Gregorio Martínez-Sánchez, Lamberto Re. Ozone Oxidative Preconditioning Prevents Atherosclerosis Development in New Zealand White Rabbits. JCVP- 12-335. 2012. Journal of Cardiovascular Pharmacology. In press.
Diseño experimental
Ozono (OZOMED, CIO, La Habana, Cuba) a partir de oxígeno médico. El Ozono era el 3% de la mezcla de gases (O3+O2). La concentración se midió
mediante un método espectrofotométrico a 254 nm.
Los animales se trataron con 20 mL O3/O2 concentración 50 µg/mL de O3 (1
mg) vía rectal en días alternos (15 seciones).
OZONO LIPOFUNDIN
1 30 38 Tiempo (días)
Efectos del ozono en la formación de la lesión aterosclerótica
A B
C D
Tinción Eosina/hematoxilina. Loa corchetes representan la amplitud de la íntima,
características de la lesión aterosclerótica. A: Lipofundin, B: O2 + Lipofundin, C: control,
y D: O3 + Lipofundin®. Ampliación 20X, escala: 50 µm.
Análisis morfométrico
(Tinción Verhoeff-Van Giesson´s)
Grupos Relación Intima/media
(IMR)
Control 0.015 ± 0.004
O2 + Lipofundin 1.750 ± 0.341
O2 + Lipofundin 0.080 ± 0.011*
Kruskal-Wallis and Dunns * p<0,001, respecto a grupo O2
Asteriscos representas diferencias significativas p<0.001. T-student´s test
Efectos del O3 en el daño a bio moléculas
** **
**
Asteriscos representan diferencias estadísticas p<0.001. T-student´s test
Efectos del O3 en el sistema antioxidante y en
indicadores de funcionamiento endotelial
** **
** **
CONCLUSIONES
o El Pre-condicionamiento oxidativo con ozono reduce la
formación de lesiones ateroscleróticas en el modelo de aterosclerosis inducido con lipofundin.
o El Ozono no tuvo efectos sobre el perfil de lípidos séricos
en las condiciones experimentales.
o El tratamiento con una dosis baja de ozono conserva el
estado redox sistémica.
o Los resultados refuerzan las propiedades farmacológicas del
ozono y los criterios para considerarlo como una terapia integradora en el tratamiento de las enfermedades cardiovasculares.
Objetivo
Este estudio se dirigió a investigar la eficacia
terapéutica del ozono en pacientes con CAD,
tratados con terapia antitrombótica (AT): Aspirina®
y policosanol.
Diseño
Se realizó
aleatorizado
grupos:
un
con
estudio clínico controlado
53 pacientes divididos en dos
1) (n=27) AT (Aspirina 125 mg/ Polic. 5 mg)
2) (n=26) AT + O3rectal. (8 mg, 200 mL- 40 µg/mL)
3) Grupo paralelo (n=50) referencia
La eficacia de los tratamientos se evaluó
comparando índices hemostáticas y marcadores
bioquímicos del estrés oxidativo en ambos
grupos después de 20 días de tratamiento.
Datos base de los pacientes
AT AT + O3
Índice hemostaticos, durante el estudio
AT
End
AT + O3
End
*
** * Comparado con el incio
* Comparado con grupo AT
Start Start
AT AT + O3
Start End Start End
Biomarcadores del estado redox
Normal Reference
AT AT + O3 START
AT AT + O3 END
Biomarkers of oxidative damage and antioxidant-pro/oxidant balance
Normal Reference
AT AT + O3 START
AT AT + O3 END
Biomarkers of oxidative damage and antioxidant-pro/oxidant balance
Normal Reference
AT AT + O3 START
AT AT + O3 END
La justificación para el uso de 2 o + tipos de agentes antiplaquetarios
Las plaquetas pueden ser activadas por diferentes vías
Aspirina® redujo significativamente la agregación plaquetaria inducida
por colágeno (61,4%) y epinefrina (21,9%) pero no la inducida por
ADP.
Aspirina® + Policosanol significativamente inhibe la agregación
inducida por todos los agonistas, sin embargo sólo modifica algunos
marcadores del sistema de estrés oxidativo.
Aspirina® + Policosanol + O3 Significativamente inhibida agregación
inducida por todos los agonistas y modifica los marcadores del
sistema oxidativo.
Conclusiones
• El tratamiento con ozono significativamente (p < 0.001) reduce el tiempo de protrombina en comparación con el grupo AT, sin modificar el tiempo de sangrado.
• La combinación AT + O3 mejora el estado antioxidante de los pacientes reduciendo los biomarcadores de la oxidación de proteínas y lípidos
Conclusiones
• Combinación AT + O3 mejora el estado antioxidante total y modula el nivel de SOD y CAT con una reducción de 57% y 32% en las actividades SOD y CAT respectivamente, moviendo el ambiente redox a una condición de baja producción de O2•- con un aumento en la desintoxicación de H2O2.
• No se observaron efectos secundarios.
• Estos resultados muestran que el tratamiento de ozono médico podría ser una terapia complementaria en el tratamiento de la CAD y sus complicaciones.
CONCLUSIONES Generales
EL OZONO MÉDICO ES UN BIOMODULADOR. ES CAPAZ DE REGULAR LOS
PROCESOS DE OXIDACIÓN/REDUCCIÓN, LO QUE EXPLICA SU EFICACIA
TERAPÉUTICA EN ENFERMEDADES VASCULARES, ENDOCRINAS, HEPÁTICAS, DEL
SISTEMA NERVIOSO CENTRAL, INMUNE Y OTRAS.
LA OZONOTERAPIA REGULA LA ACTIVIDAD DE LA SOD, UNA IMPORTANTE ENZIMA
DEL SISTEMA DE DEFENSA ANTIOXIDANTE, CONTRIBUYENDO A LA PROTECCIÓN DE
LAS CÉLULAS , LA LIBERACIÓN DE INSULINA, EL REESTABLECIMIENTO DE LOS
NIVELES DE GLUCOSA Y PREVINIENE LAS COMPLICACIONES MICRO Y
MACROANGIOPÁTICAS DEL DIABÉTICO.
EL TRATAMIENTO CON OZONO REGULA LAS CONCENTRACIONES DE ÓXIDO
NÍTRICO, LO QUE CONTRIBUYE A UNA ADECUADA VASODILATACIÓN, MEJORA EL
FLUJO SANGUÍNEO Y HACE DEL OZONO UNA TERAPIA ESPECIALMENTE ÚTIL EN LA
HIPERTENSIÓN, ATEROESCLEROSIS Y ANGINAS.
El ozono es fuente de vida
Evidencias clínicas, preclínicas, y toxicológicas
Gregorio Martínez Sánchez, Pharm.D, Ph.D.
Gregorcuba yahoo.it
Preguntas
Contacte a:
Gregorio Martínez Sánchez, Pharm.D, Ph.D.
Top Related