Evaluación del uso de enterofagos y colifagos para detectar contaminación fecal en aguas superficiales tropicales
Nicolle E. LebrónDr. Javier Arce Nazario17 de mayo de 2013
Objetivos principales
Analizar aguas superficiales mediante el uso de enterofagos y colifagos como indicadores de contaminación fecal
Comparar la efectividad del método de Enterofago / Colifago con el método de Colilert / Enterolert
Calidad de agua
ENTEROFAGOS:Un grupo de bacteriófagos que infectan específicamente a Enterococcus faecalis
COLIFAGOS:Un grupo de bacteriófagos que infectan a Escherichia coli
¿Qué son enterofagos y colifagos?
Metodología
PREPARACIÓN DE LOS MEDIOS
PREPARACIÓN DE LOS HOSPEDEROS
RECOGER MUESTRAS DE AGUA
PROCEDIMIENTO ENTEROFAGO/COLIFAGO
MÉTODO DE ENTEROLERT/COLILERT
VER RESULTADOS
Crecimiento del hospedero• Azide Dextrose• TSB
Preparación de los medios
Inoculación de bacterias
Preparación de los hospederos
Azide Dextrose → E. faecalis
TSB → E. coli
Incubadora(24 horas / 37°C)
Procedimiento Enterofago/Colifago• ENTEROFAGO → E. faecalis• COLIFAGO → E. coli
Preparación de los medios
Agar + TSB
Un control negativo y muestras frescas• Control negativo (-): se recoge de un punto
de muestreo y se autoclavea
Recoger muestras de agua
Materiales para analizar las muestras de agua:
• Muestras de agua (100mL cada una)
• Medios preparados de Enterofago y Colifago (50mL cada uno)
• Hospederos: E. faecalis (10mL cada uno) y E. coli (1mL cada uno)
Procedimiento Enterofago/Colifago
Contaminación de las bacterias• Hablando• Condensación en las placas• Otros factores externos
Temperatura Utilizar material viejo No añadir el hospedero al medio
Errores que pueden afectar los resultados
Método de Enterolert/Colilert
35°C
41°C
Quanti-Tray
Colilert
Enterolert
RESULTADOS PRELIMINARES
Lugar de la muestra
Enterofago (PFU/50mL)
Colifago (PFU/50mL)
Entrada al Sector Los Cedros
0 127
Quebrada de Culebra Alto
0 0
Borde entre Guayama y Cayey
0 1
Sector Los Cedros 0 52
Procedimiento de Enterofago/ Colifago (sábado, 4 de mayo de 2013)
Lugar de la muestra
MPN (Total coli) MPN (E. coli) MPN
(Enterococci)
Entrada al Sector Los Cedros
>2,419.6 >2,419.6 1,046.2
Quebrada de Culebra Alto
>2,419.6 7.4 410.6
Borde entre Guayama y Cayey
>2,419.6 26.2 90.8
Sector Los Cedros >2,419.6 51.2 579.4
Método de Colilert y Enterolert (sábado, 4 de mayo de 2013)
Lugar de la muestra
Río La Plata (Puente 171)
Quebrada detrás de la universidad
UPR-Cayey (origen)
Río al lado de la plaza de Cayey
UPR-Cayey (bambús)
UPR-Cayey (detrás de la biblioteca)
UPR-Cayey (al lado de la cafetería)
Jueves, 9 de mayo de 2013
Lugar de la muestra Enterofago (PFU/50mL)
Colifago (PFU/50mL)
Río La Plata (Puente 171) 122 N/A
Quebrada detrás de la universidad N/A 13
UPR-Cayey (origen) N/A 42
Río al lado de la plaza de Cayey 1 35
UPR-Cayey (bambús) 15 30
UPR-Cayey (detrás de la biblioteca) 90 42
UPR-Cayey (al lado de la cafetería) 11 15
Procedimiento de Enterofago/ Colifago (viernes, 10 de mayo de 2013)
Lugar de la muestra MPN (Total Coli)
MPN (E. coli)
MPN (Enterococ
ci)
Río La Plata (Puente 171) >2,419.6 >2,419.6 >2,419.6
Quebrada detrás de la universidad
>2,419.6 >2,419.6 >2,419.6
UPR-Cayey (origen) >2,419.6 >2,419.6 2,419.6
Método de Colilert y Enterolert (viernes, 10 de mayo de 2013)
Reducir lo más posible los errores de procedimiento
Recoger más muestras de ríos en áreas urbanas y rurales
Incorporar pruebas químicas a la metodología
Pasos a seguir
Agradecimientos
NIH BRIC Grant # XXXXXNSF CAREER Grant # XXXXDepartamento de Biología y el Insituto de Investigaciones Interdisciplinarias de Puerto Rico