REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELAUNIVERSIDAD DEL ZULIAFACULTAD DE MEDICINACENTRO DE INVESTIGACION ENDOCRINO-METABOLICASDR. FELIX GOMEZ
REPLICACION
Prof. Estevan. A. Marin. G.
Maracaibo, Marzo 2016
REPLICACION
Es semiconservativa, ordenada y secuencial.
Utiliza sustratos activados (Desoxiribonuneotidos 5 –
trifosfato dNTP).
La replicación del ADN es discontinua.
Bioquímica de Christopher. Mathews
La Replicación es Semiconservativa.
Enzimas de la Replicación
Primasa.
Síntesis de las secuencias
cebadoras de ARN.
DNA Polimerasa
DNA Polimerasa I
DNA Polimerasa II
DNA Polimerasa III
DNA Ligasa
Elongación de la cadena de Polinucleótidos.
Replicación discontinua del ADN.
SSB
Mantenimiento de la
conformación optima del
molde
Helicasa
Desenrollamiento del ADN, encima de la horquilla.
Topoisomerasa
Alivio de las tensiones de
torsión. Bioquímica de Christopher. Mathews
DNA Polimerasa
Cataliza la reacción química de la síntesis de ADN.
Permite la creación de los enlaces fosfodiéster.
Cataliza el crecimiento de la cadena de ADN en la dirección 5 → 3.
Es dimérica, debido a que ambas cadenas están en un
posición antiparalela.
Bioquímica de Christopher. Mathews
Generalidades.
DNA Polimerasa
Mecanismo de Acción.
Ataque Nucleofílico
Apareamiento de las Bases.
1
2
DNA Polimerasa
Procariotas. Polimerasa I Completa los fragmentos de
Okazaki, reparación.
Polimerasa II Reparación del ADN dañado.
Polimerasa III Principal polimerasa replicativa.
Polimerasa IV
Polimerasa VPasar por alto las lesiones.
Bioquímica de Thomas. Devlin
DNA Polimerasa
Eucariotas. Polimerasa α Cebado de la Replicación.
Polimerasa β Reparación por escisión de base.
Polimerasa γ Replicación de ADN mitocondrial.
Polimerasa δ Principal polimerasa replicativa.
Bioquímica de Thomas. Devlin
Helicasa
Helicasa
Son proteínas multiméricas.
Catalizan el Desenrollamiento
dependiente de ATP de la doble hélice del ADN.
La principal Helicasa de la replicación es DnaB.
Bioquímica de Christopher. Mathews
Helicasa
Mecanismo de Acción.
Bioquímica de Christopher. Mathews
TopoisomerasaTopoisomeras
a Grupo de enzimas que pueden intercomvertil diferentes
isómeros tipológicos del ADN.
Mecanismo giratorio para aliviar la tensión de torsión
del ADN.
Existen dos tipos de Topoisomerasa I y II.
Topoisomerasa
Mecanismo de Acción.
Topoisomerasa I
Mecanismo de Acción.
Bioquímica de Christopher. Mathews
Rompe una sola cadena
Forma un enlace
fosfodiéster entre el P 5 y
OH de tirosina.
El extremo 3 gira
1 2
3
El extremo 3 ataca al
extremo 5 cerrando la
mella
4
Topoisomerasa II
Mecanismo de Acción.
Bioquímica de Christopher. Mathews
Rompe ambas
cadenas
Proteína de Unión al ADN (SSB).
Son proteínas desestabilizante de la
hélice.
Mantienen el molde en la conformación de una sola cadena extendida con las
base4s expuestas.
Esencial para la replicación, reparación del ADN y recombinación
genética.
Bioquímica de Christopher. Mathews
Procariotas.
Proteína A de Replicación (RPA).
Son proteínas de unión a cadena de ADN sencilla.
Mantienen el molde en la conformación de una sola cadena extendida con las
base4s expuestas.
RPA
Bioquímica de Thomas Devlin
Eucariotas.
Primasa.
Actúa en la cadena Retardada.
Sintetiza el RNA cebador para la síntesis de los
Fragmentos de Okasaki. Permite que la síntesis de la cadena retardada se de en
dirección 5→3.
Bioquímica de Christopher. Mathews
Primasa.
3´
Bioquímica de Christopher. Mathews-
DNA Ligasa.
Bioquímica de Christopher. Mathews
Cierra de manera covalente las mellas de
ADN.
La mella debe contener extremos 3 OH, 5 P.
La DNA Ligasa se activa por adenilación del residuo de lisina
del sitio activo.
DNA Ligasa.
Bioquímica de Christopher. Mathews
Mecanismo de Acción.
Etapas de la Replicacion.
INICIACION
ELONGACION
TERMINACION
Iniciación de la Replicación.
Ciclo Celular.
G1
Células que cesan la división. Fase
S
Replicación del ADN.
G2
MMitosis
CA
Iniciación de la Replicación.
Ciclina D
Activa
CDK4 CDK
6
Fosforilan
Rb E2F
RbP
E2F
Transcripción de genes
↑ Enzimas de Replicación.
CE CDK2
CEXCDK2
CA
CDK2
Síntesis de ADN.
Origen de la Replicación en Procariotas.
DnaA
DnaCDnaBÚnico Sitio de Origen.
Origen de la Replicación en Eucariotas.
ORC
ORC
T - A
ORC
MCM ORC
Origen de la Replicación en Eucariotas.
Horquilla de Replicación.
Horquilla de Replicación.
Componentes.
ADN Helicasa
Primasa
DNA Polimerasa
SSB – RPA.
Horquilla de Replicación.
Cadena Retardada.
Replicación del ADN (Procariotas).
Replicación del ADN (Eucariotas).
Pol δ
RPA
Primasa + Pol α
Pol δ
RNAsa H
Terminación de Replicación (Eucariotas).
Punto de terminació
n 180˚.
Defectos en la Replicación del ADN.
Lesiones en el ADN.
Despurinación
Metilación
Mutaciones en el ADN.
Mutaciones Puntuales
Mutación sin sentido
Inserción y Deleción
Reparación por Escisión de Bases.
Ap Endonucleasa
Ap Liasa
Reparación por Escisión de Nucleótido.
Gracias!!!.