BIOFISICA DE MEMBRANAS
Membranas biológicas
CARACTERISTICAS GENERALES
• Liposolubilidad• Estructura trilaminar• Compuestas por lípidos, proteínas y glúcidos• Son fluidas• Presentan asimetría estructural y funcional• Son estructuras dinámicas
FUNCIONES
• PERMEABILIDAD SELECTIVA• ACTIVIDAD ENZIMATICA• INTERCAMBIO DE INFORMACION • RECONOCIMIENTO
Permeabilidad difusional
1 2
NaCl g/100mL 0,9 0,45
Membrana permeable al agua e impermeable al soluto
021..21 CCAPdJ
021..12 CCAPdJ
Para el soluto:
•Para el solvente:Gradiente de concentraciónDiferencia de osmolaridad
Cálculo de la osmolaridad
NaCl g/100mL 0,9 0,45
La osmolaridad es:
gvLmmolKgmOsmdOsmolarida ..// Donde:
v = número de partículas en que se disocia
g = coeficiente osmótico
Para el ejemplo: v= 2 y g=0,93
Calcular la osmolaridad de cada comparimento
PMNaCl= 58.44
1 2
Molaridad mmol/L 154 77
Osmolaridad mOsm/L 286.4 144.4
122221 OHOHenOsmenOsm
FLUJO OSMÓTICO13 . scmJvFlujo de volumen
Flujo de moléculas de agua 1. smolJV
Jvagua
Relación con gradiente osmótico 21.. OsmOsmAPJv osm
Coeficiente de permeabilidad osmótica
Despejando:
OsmscmcmOsmcm
scm
dOsmolaridaA
JvPOsm ..
..
.
.14
32
13
Para el agua::
VELOCIDADscmcmmolcmmolcm
scm
dOsmolaridaAv
JvPagua
1
3213
13
...
.
..
Ejemplos:
Tubulo proximal (rata) 0,231
Tubulo colector (rata) 0,038
Mucosa gástrica (perro) 0,069
Intestino (rata) 0,011
Piel (sapo) 0,002
PRESIÓN OSMÓTICA
• Presión para contrarrestar el paso de agua
• Diferencia de presión hidrostática entre compartimentos
• Jv = 0 P = π
Medición de la presión osmótica
Agua
Agua + azúcar
Membrana semipermeable
Medición de la presión osmótica
Agua
Agua + azúcar
Medición de la presión osmótica
Agua
Agua + azúcar
Estado estacionario (steady state)
Entrada H20 = salida H2O
Patm
h
azúcaratm
OHOH
OHazúcarOHatm
PP
PP
PPPP
inout
inout
22
22
En este momento las presiones a ambos lados están igualadas, por lo tanto:
pero
Es decir, la presión del agua a cada lado de la membrana es la misma.
Puede calcularse la presión osmótica (cuando cesa el flujo neto) de la solución con:
Ley de Van´t Hoff
“La presión osmótica de una solución, su temperatura, el número de moles del soluto y su volúmen están ligados por la misma relación que existe entre magnitudes análogas de un gas ideal”
nRTV
Fórmula de Van’t Hoff
Donde: = presión osmótica n = número de moles del solutoV= volumen de la soluciónR = constante universal de los gasesT = temperatura absoluta
dOsmolaridaTR ..
TRV
n..1
Cumplida esta condición, dos o más soluciones tendrán la misma presión osmótica
si su temperatura es la misma.
Dos soluciones que tienen igual presión osmótica se denomina isosmóticas o
isotónicas.
Si una solución A tiene menor presión osmótica que otra B, A será
hipotónica respecto a B; y B será hipertónica respecto a A.
La determinación experimental de la presión osmótica permite calcular el peso molecular de una sustancia. En efecto, si:
= n / V . R.T
Y siendo n = m/M Donde m = masa (g); M = peso molecular
Sustituyendo resulta: = m.RT M. V
Conclusiones:
1. La presión osmótica es proporcional a la concentración del soluto a temperatura constante.
2. La presión osmótica es proporcional a la temperatura del medio si la concentración de soluto no varía
3. Para diferentes solutos, cuyas concentraciones y temperatura sean iguales, la presión osmótica es inversamente proporcional al peso molecular.
La presión osmótica en vegetales es del orden de 5 – 20 atmósferas!!!!!!
En la sangre, la presión osmótica es de 7.6 – 7.9 atmósferas.
Ejemplos:
Coeficiente de reflexión de Staverman (σ)
• Si está presente alguna permeabilidad a soluto• Desviación del valor de π• Corregida por
» Coeficiente de reflexión • Entonces se calcula
» πef= PRESIÓN OSMÓTICA EFECTIVA
dOsmolaridaTRef ...
1 ≤ ≥ 0Impermeable Permeable
calculada
real
Presión osmótica:
Medida de forma práctica
Estimada con ecc. Van´t Hoff
Por extensión:
En relación al Flujo osmótico:
calculada
real
dOsmolarida
dOsmolarida
dOsmolaridaTRAJv .....
Glucosa 0,5
Urea 0,2
NaCl 1,0
Consecuencias del Flujo Osmótico
1. Compartimentos con volúmenes similares• Var. Del volúmen• Llega a
• Igualdad de Osmolaridad, [H2O], π• Concentración de equilibrio
2. Volumen de un compartimento infinito con respecto al otro
• Flujo de agua hasta equilibrio de osmolaridad• Variación del volumen final• Existencia de un volúmen osmóticamente inactivo (b)
ffii VCVC ..
Biofísica de Membrana
Transporte pasivo
Transporte a través de las Membranas Biológicas
Debido a la naturaleza no polar de la bicapa, las membranas de fosfolípidos puros son altamente impermeables a iones y moléculas orgánicas polares.
TRANSPORTE PASIVO
CARTACTERISTICAS GENERALES:Ocurre:• Sin gasto de energía• A favor de un gradiente• Es equilibrante• por diferencias de potencial electroquímico
de la especie transportada
Proteínas de membrana transportadoras de solutos
Lodish et al. 2004
Flujo difucional• Flujo
• Densidad de flujo
• Difusión
Cantidad de sustancia que atraviesa una determinada sección perpendicular, moviéndose de un punto a otro en la unidad de tiempo
Flujo que atraviesa la sección de una membrana por unidad de área
Movimiento de soluto o de solvente, donde la agitación térmica y la diferencia de concentración son las fuerzas impulsoras. Su flujo se denomina:FLUJO DIFUSIONAL
Tipos de flujo difucional
• FLUJO UNIDIRECCIONAL: flujo en una dirección determinada a través de una membrana
• FLUJO NETO: Es la cantidad de sustancia que se mueve de un lado a otro del recipiente, por unidad de tiempo.
J = J 12 – J21
• El flujo (J) es un vector cuyo módulo mide la cantidad de partículas que atraviesan la unidad de área en la unidad de tiempo (moles/cm2 . seg).
• Su dirección y sentido es desde la región de mayor concentración hacia la de menor concentración.
C1 = C2
J12 = J21
Jneto = 0
C1 ˃ C2
J12 ˃ J21
Jneto ≠ 0
100 100 Glucosa mmol/L 200 100
LEY DE FICK
• “El flujo neto de moléculas por unidad de área de membrana es proporcional al gradiente de concentración”.
Coeficiente de difusión
Cantidad de soluto que pasa por unidad de tiempo a través de una separación perpendicular de 1 cm2, cuando el gradiente de
concentración es 1
La ley de Fick puede expresarse como :
Donde J = vector flujo ; y D = coeficiente de Difusión (moles × s-1 × cm-2)
• La constante de proporcionalidad en la expresión de la ley de Fick es el coeficiente de difusión D (cm2/seg), que depende, en general, de:
• la temperatura (aumenta con la temperatura), • del soluto (tamaño de las partículas a difundir) y• del medio a través del cual difunde (membrana).
• Esta ley es válida sólo cuando el pasaje es debido exclusivamente a una diferencia de concentraciones que se mantiene en régimen estacionario (no varía con el tiempo).
DIFUSIÓN SIMPLE
Factores de la Ley de FicK
• Temperatura» A mayor agitación térmica, mayor el número de
moléculas que en la unidad de tiempo atraviesen la membrana
• Concentración» A una misma T°, cuanto mayor sea el número de
partículas por unidad de volumen, mayor será el numero de estas en condiciones de atravesar la membrana
• Distancia» Cuanto mayor sea la distancia que separa los puntos en
los que se ha tomado la concentración, habrá un mayor efecto de fricción entre el medio material y las partículas
Gradiente de concentración
• Área de membrana» A mayor área, mayor flujo
• Coeficiente de difusión» A mayor D, mayor flujo. Su valor depende de la solución
de que se trate y de la temperatura
C1
C2
∆X
∆C
• Gradiente no es diferencia, los cocientes son gradientes y las diferencias solo numeradores
• Cuando el flujo difusional se da a través de una membrana, los valores de C1 y C2 están determinador por:
» Concentración a ambos lados de la membrana» Coeficiente de partición e la interfase
Espesor de la membrana
Consecuencias del flujo difucional • Se llega a una concentración de equilibrio
• Hay un gradiente de concentración en función del tiempo. Al llegar al equilibrio Jneto se torna CERO, pero habrán flujos unidireccionales
• Hay una relación entre flujo difucional neto y diferencia de concentración
• “a mayor diferencia de concentración, mayor flujo”
C equilibrio
C
t
DIFUSION FACILITADA
• Se produce cuando un ión o moléculas hidrosolubles cruza la membrana “a favor” de su gradiente electroquímico o de concentración, hasta que se obtiene el equilibrio.
• No hay gasto energético • Es facilitado por la presencia de canales o de
transportadores de naturaleza proteica• Sitios de unión• Cambio de conformación
Básicamente el mecanismo de transporte tiene cuatro etapas que son:
a) unión reversible del soluto a transportar a sitios específicos del transportador (receptores)
b) desplazamiento del par receptor-ligando hacia la superficie opuesta de la membrana
c) liberación del solutod) vuelta del sistema al estado inicial
La cantidad de sustancia que atraviesa la membrana depende de:
a) La diferencia de concentración del soluto a transportar entre ambos lados de la membrana
b) La cantidad de transportador disponible. Cuando se saturan los transportadores se alcanza un flujo máximo (Cinética de saturación)
c) La velocidad con que tiene lugar la unión y la separación entre el soluto y el transportador.
A medida que aumenta la diferencia de concentraciones, aumenta el flujo.
A partir de una C determinada, los transportadores se saturan y el flujo alcanza un valor constante, llamado flujo máximo.
Cualquier aumento de concentración a partir de ese punto no traerá aparejado cambio alguno en el flujo.
Este tipo de comportamiento obedece a la ecuación
de Michaelis - Menten
Canales de iones
•Son proteínas integrales de membrana plegadas formando un poro a través del que se transportan iones.
•El tamaño del poro y la densidad de cargas en su interior determinan su selectividad a los diferentes iones.
•Pueden estar en un estado conformacional no conductor (cerrado) o conductor (abierto).
• Su apertura o cierre puede estar regulada por factores físicos (voltaje, tensión mecánica) o químicos (iones, neurotransmisores, hormonas, fosforilación, etc.).
•Pueden estar constituidos por una o varias cadenas polipeptídicas.
•En el estado abierto, transportan 107 a 108 iones/s, Están involucrados en procesos fisiológicos como conducción del impulso nervioso, secreción celular, regulación del volumen celular, apertura de estomas, quimiotaxis, etc.
Modelo de la difusión facilitada de glucosa mediada por el transportador GLUT-1
1
2
3
4
Forma A = transportador con sitio activo hacia el exteriorForma S = sustancia a transportarForma B = transportador con sitio activo hacia el interiorTR = transportador
ASBS
Pudiendo darse dos situaciones:
A. Cuando la concentración de la sustancia es alta
B. Cuando la concentración de la sustancia es baja
Biofísica de Membranas
Transporte activo
CARACTERISTICAS
• SATURACION• COMPETITIVIDAD• ESPECIFICIDAD• INHIBICION• ES UNIDIRECCIONAL
FUNCIONES DEL TRANSPORTE ACTIVO
• Intercambio de material celular• Mantenimiento del pH y equilibrio iónico
intracelular• Eliminación de sustancias toxicas
Estructura química de la bomba de sodio o Na+-K+-ATPasa
Está compuesta de dos subunidades : • (110 kDa) y • (55 kDa).
Las funciones catalíticas están en la subunidad , que contiene el residuo fosforilable por el ATP. La cadena (≈1000 AAs) posee 10 segmentos de transmembrana unidos por 5 cortas asas extracelulares .
La subunidad un glicopéptido (≈ 370 AAs) tiene un solo segmento transmembrana y expone la mayor parte de su estructura muy plegada al exterior. Se postula que se requiere para el adecuado plegamiento de la proteína y su destinación a la MP.
citosol
extracelular
Sitio de fosforilación As369
Características de su transporte• Sufre cambio conformacional
• E1= forma que fija ATP y se le une Na• E2= se forma al liberarse PO4 que
» ↑afinidad por K» ↓afinidad por Na
• Sitios de unión• 3 → Na+• 2 → K+
• Hidroliza 1 ATP• Es electrogénica
• Genera corriente eléctrica hacia afuera de la célula• Su velocidad de funcionamiento depende de:
• Campo eléctrico a través de la membrana• Concentración interior de Na y exterior de K
• Es saturable
Cl
Por antiportador: Modelo
• Dos configuraciones• A = sitio activo expuesto hacia el lado externo de la MC• B = sitio activo expuesto hacia el lado interno de la MC
• El cambio de conformación implica• Variación de la energía libre
Na+ / Ca2+Na+ / H+
R = 0,008314 = 8,314 x 10-3 J/mo.°K = 1,98 cal/ml.°K
T = °KC2 = concentración en el destinoC1 = concentración en el origen
Top Related