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UNIVERSIDAD NACIONAL DE LOJA DIRECCIÓN DE INVESTIGACIÓN

LABORATORIO DE MICROPROPAGACIÓN VEGETAL “Generación de Protocolos para la propagación in vivo e in vitro de genotipos élites de

especies forestales nativas y promisorias para la reforestación en la Región Sur del Ecuador”

RESPONSABLES: Ing. Agro. Julia Minchala Patiño.

Ing. For. Víctor Hugo Eras Guamán

OBJETIVO GENERAL

Contribuir a la generación de protocolos para la producción de plántulas de genotipos élites de Bursera grabeolens (palo santo), Tabebuia billbergii (guayacán), Loxopterigium huasango (hualtaco) y Prosopis sp. (algarrobo), por métodos in vivo e in vitro, para contribuir al establecimiento de programas de reforestación de la Región Sur del Ecuador.

1. Evaluar y seleccionar genotipos sobresalientes de las especies en estudio, para la obtención de material vegetal sexual y asexual a utilizar en la propagación biotecnológica y convencional.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Delimitación del área de estudio Selección de los árboles con características sobresalientes

Colecta de material vegetal

2. Establecer los protocolos biotecnológicos de las especies en estudio, para la inducción de procesos morfogénicos in vitro, a partir de diferentes fuentes de explantes.

Germinación de semillas in vitro

a. Selección de semillas b. Escarificación c. Desinfección de semillas

d. Preparación de medio de cultivo

e. Inoculación in vitro de semillas

f. Parámetros a evaluar

% Germinación, % contaminación, % mortalidad, días a la germinación.

Cultivo de ápices caulinares y segmentos nodales (elongación del brote, brotamiento y enraizamiento)

Selección de explantes Desinfección de explantes Preparación del medio de cultivo

Inoculación in vitro de los explantes Parámetros a evaluar

% contaminación, % mortalidad, % de fenolización, altura de la planta, número de brotes, longitud del brote, número de nudos y número de hojas.

Inducción de callos

Selección de explantes Preparación del medio de cultivo

Inoculación in vitro de los explantes Parámetros a evaluar

% de contaminación, % de mortalidad, % de fenolización , formación de callos, consistencia y color del callo y cualitativos: características morfológicas y fisiológicas de los explantes, callos inducidos.

3. Establecer los protocolos convencionales para la producción de plantones en condiciones de invernadero, mediante el uso de semillas, estacas y acodos aéreos de las especies en estudio.

Propagación sexual por semillas Propagación asexual por estacas

Propagación a asexual por acodos aéreos Propagación por regeneración natural

4. Evaluar el comportamiento de las plántulas obtenidas en el laboratorio e invernadero de las especies en estudio, en las fases de aclimatación, adaptación y desarrollo inicial en condiciones de un huerto semillero ex-situ.

Aclimatación de las vitroplantas Establecimiento del huerto semillero ex-situ

Evaluación del desarrollo inicial de las plántulas establecidas en el huerto semillero ex-situ

Entrega de plántulas obtenidas por semillas y regeneración natural a actores externos

RESULTADOS ALCANZADOS

1. Calendarios fenológicos y dendofenogramas para las cuatro especies en estudio.

Protocolos para germinación de semillas in vitro

2. Protocolos para la propagación in vitro de las especies en estudio.

Prosopis sp. Tabebuia billbergii Loxoterigium huasango Bursera graveolens

Desinfección Las semillas se seleccionan en grupos de 50. Se desinfectan en alcohol del 70 % por un minuto. Se desinfecta con hipoclorito de sodio 5,25 % de i.a. + 3 gotas de Tween 80 por 10 o 15 minutos.

Medio de Cultivo Sales minerales MS (Murashige & Skoog, 1962), vitaminas (Thiamina 1,0 mg/L y m-inositol 100mg/L), sacarosa 2%, agar 0,6% y ácido giberélico (AG3) en concentraciones de 0,5 y 1,0 mg/L más un testigo sin AG3.

Protocolos para cultivo de ápice y segmentos nodales in vitro

Prosopis sp. Tabebuia billbergii

Medios de Cultivo Sales minerales MS (Murashige & Skoog, 1962), vitaminas (Thiamina 1,0 mg/L y m-inositol 100mg/L), sacarosa 2%, agar 0,6% suplementado con KIN 0,2 mg L-1, ANA 0,2 mg L-1 – KIN 0,2 mg L-1, AIA 0,2 mg L-1 – KIN 0,2 mg L-1 y AIA 0,02 mg L-1 – AG3 0,02 mg L-1.

Medios de Cultivo Sales minerales MS, vitaminas (Thiamina 1,0 mg/L y m-inositol 100mg/L), sacarosa 2%, agar 0,6% suplementado con KIN 1,0 mg L-1 y sulfato de adenina 25 mg L-1.

Protocolos para Brotamiento in vitro

Prosopis sp. Tabebuia billbergii

Medios de Cultivo Sales minerales MS, vitaminas (Thiamina 1,0 mg/L y m-inositol 100mg/L), sacarosa 2%, agar 0,6% suplementado con AIB 1,0 mg L-1.

Protocolos para enraizamiento in vitro

Loxoterigium huasango Tabebuia billbergii

3. Huerto semillero de las especies forestales en estudio, establecido con

plántulas en Centro de Formación Binacional de Zapotepamba.

Sitio: Centro de formación binacional

Zapotepamba

Área del

terreno:

1748 m2

Especies

sembradas:

Prosopis sp, Tabebuia billbergii ,

Loxoterigium huasango y Bursera

graveolens .

Tratamientos: 3 (Humus; Humus + Fertilizante

completo; Testigo)

Número de

indivíduos

por especie:

Prosopis sp= 27

Tabebuia billbergii= 21

Loxoterigium huasango= 27

Bursera graveolens= 26

ESPECIFICACIONES DEL HUERTO

COMUNIDAD DE LIMONES SR. GELMER VINCES MARTINEZ

GRACIAS POR SU ATENCION