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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOTECNOLÓGICO
Determinación de niveles de anticuerpos IgG contra neumococo en niños de 7 a 9 años de
edad vacunados contra neumococo mediante técnica de elisa en la escuela Plinio Robalino
Cruz durante el año 2014.
Proyecto de Titulación previa a la obtención del Título de licenciada en Laboratorio Clínico e
Histotecnológico.
Sandoval Reinoso Doris Raquel
TUTOR: DR. Carlos Wladimir Torres Serrano
QUITO, 2015.
ii
DEDICATORIA
A estudiantes, profesionales de la salud y especialmente a la comunidad para que
podamos informarnos e informar acerca de las vacunas contra el neumococo y así empezar
a inmunizar y evitar nuevas epidemias y a la vez nuevos brotes de esta bacteria;
contribuyendo a mejorar la calidad de salud en nuestro país (Ecuador).
iii
AGRADECIMIENTO
A Dios solamente por brindarme la vida, permitirme conocer a gente buena que han
compartido sus conocimientos (mis maestros) pues ellos me han compartido sus
experiencias.
Darme una madre ejemplar y maravillosa; porque ella siempre es de mi inspiración ya
que nos enseñó lo valioso de la vida, lo ético y lo moral.
Y por último, y no menos más importante (mi esposo) mi compañero de vida el cual
siempre está conmigo en las buenas y en las malas.
Mira que te mando que te esfuerces y seas valiente; no temas ni desmayes, porque Jehová tu
Dios estará contigo en donde quiera que vayas. (JOSUE 1:9) Tomado de la Biblia Reina
Valera versión 1960
iv
AUTORIZACIÓN DE LA PUBLICACION DEL TRABAJO DE TITULACIÓN
Yo, Sandoval Reinoso Doris Raquel en calidad de autora del Trabajo de Titulación
realizado sobre “Determinación de niveles de anticuerpos IgG contra neumococo en niños de
7 a 9 años de edad vacunados contra neumococo mediante técnica de elisa en la Escuela
Plinio Robalino Cruz durante el Año 2014” por la presente autorizo a la UNIVERSIDAD
CENTRAL DEL ECUADOR , hacer uso de todos los con tenidos que me pertenecen o de
parte de los que contienen esta obra, con fines estrictamente académicos o de investigación.
Los derechos que como autor me corresponden, con excepción de la presente autorización,
seguirán vigentes a mi favor, de conformidad con lo establecido en los artículos 5.6.8; 19 y
demás pertinentes de la Ley de Propiedad Intelectual y su Reglamento.
Quito, 10 de noviembre del 2015.
----------------------------------------
Doris Raquel Sandoval Reinoso
CI: 1720275690
Teléfono: 0992621317
v
APROBACIÓN DEL TUTOR/A
DEL TRABAJO DE TITULACIÓN
En mi calidad de tutor del trabajo de Titulación, presentado por DORIS RAQUEL
SANDOVAL REINOSO, para optar por el Grado de Licenciada en Laboratorio Clínico e
Histotecnológico; cuyo Título es “DETERMINACIÓN DE NIVELES DE
ANTICUERPOS IGG CONTRA NEUMOCOCO EN NIÑOS DE 7 A 9 AÑOS DE
EDAD VACUNADOS CONTRA NEUMOCOCO MEDIANTE TÉCNICA DE ELISA
EN LA ESCUELA PLINIO ROBALINO CRUZ DURANTE EL AÑO 2014”, considero
que dicho trabajo reúne los requisitos y méritos suficientes para ser sometidos a la
presentación pública y evaluación por parte del jurado examinador que se designe.
En la ciudad de Quito, a los 12 días del mes de noviembre del 2015
Atentamente:
--------------------------------------
Dr. Carlos Wladimir Torres Serrano
DOCENTE-TUTOR
vi
APROBACIÓN DEL TRIBUNAL
Los miembros del Tribunal Examinador aprueban el informe de titulación “Determinación
de niveles de anticuerpos IgG contra neumococo en niños de 7 a 9 años de edad
vacunados contra neumococo mediante técnica de elisa en la Escuela Plinio Robalino
Cruz durante el año 2014”, presentado por: DORIS RAQUEL SANDOVAL REINOSO
Para constancia certifican,
Dr. Ángel Alarcon Dr. Milton Tapia
PRESIDENTE VOCAL
M.Sc. Yolanda Paredes
VOCAL
vii
ÍNDICE
CONTENIDO PAGS
DEDICATORIA.......................................................................................................................... ii
AGRADECIMIENTO ............................................................................................................... iii
AUTORIZACIÓN DE LA PUBLICACION DEL TRABAJO DE TITULACIÓN ....................... iv
APROBACIÓN DEL TUTOR/A ................................................................................................. v
APROBACIÓN DEL TRIBUNAL .............................................................................................. vi
ÍNDICE .................................................................................................................................... vii
LISTA DE IMÁGENES ............................................................................................................. xi
LISTA DE GRÁFICOS ............................................................................................................. xii
LISTA DE TABLAS ................................................................................................................. xiii
LISTA DE ANEXOS ................................................................................................................ xiv
RESUMEN .............................................................................................................................. xv
ABSTRACT ............................................................................................................................ xvi
INTRODUCCIÓN ..................................................................................................................... 1
CAPÍTULO I ............................................................................................................................. 3
1.- EL PROBLEMA................................................................................................................... 3
1.1.- PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ............................................................................. 3
1.2.- UBICACIÓN ...................................................................................................................... 4
1.3.- FORMULACIÓN DEL PROBLEMA ................................................................................. 5
1.4.- OBJETIVOS ....................................................................................................................... 6
1.4.1.- Objetivos generales ............................................................................................................................. 6 1.4.2.- Objetivos específicos ......................................................................................................................... 6
1.5.- Justificación ....................................................................................................................... 6
CAPITULO II ............................................................................................................................ 9
2.- MARCO TEÓRICO ............................................................................................................ 9
2.1.- MARCO LEGAL ............................................................................................................... 9
2.2.- AGENTE NEUMOCOCO .................................................................................................. 9
IMAGEN N° 1: Bacteria Neumocócica ................................................................................... 10
2.3.- ESTRUCTURA................................................................................................................. 10
2.3.1.- ESTRUCTURA CELULAR DEL NEUMOCOCO ......................................................................... 10
viii
2.3.1.1.- LA CÁPSULA .......................................................................................................................... 11 2.3.1.2.- PARED CELULAR ................................................................................................................. 12
2.3.2.- ESTRUCTURA ANTIGENICA....................................................................................................... 12
2.4.- RESERVORIO ................................................................................................................. 13
2.5.- PATOGENIA ................................................................................................................... 13
2.6.- MECANISMOS DE TRANSMISIÓN ............................................................................... 14
2.7.- SINTOMATOLOGIA ....................................................................................................... 15
2.8.- CLÍNICA PRONOSTICO ................................................................................................ 15
2.9.- INMUNIDAD PARA EL NEUMOCOCO ........................................................................ 15
2.9.1.- CÉLULAS DE LA INMUNIDAD INNATA ................................................................................... 16 2.9.2.- COMPLEMENTO ............................................................................................................................ 16
2.10.- SINDROME DE NEUMOCOCO................................................................................... 17
2.11.- DIAGNOSTICO ............................................................................................................. 17
2.11.1.- TINCIÓN DE GRAM Y CULTIVO DE MUESTRAS BIOLÓGICAS ......................................... 17 2.11.2.- TÉCNICAS MOLECULARES: TEST DE AMPLIFICACIÓN DE ADN (PCR) ......................... 18 2.11.3.- TÉCNICA DE ELISA .................................................................................................................... 18
2.11.3.1.- HISTORIA .............................................................................................................................. 18 2.11.3.2.- FUNDAMENTO Y TIPOS DE ELISA.................................................................................. 19 2.11.3.3.- ELISA DIRECTO. .................................................................................................................. 19 2.11.3.5. - ELISA SÁNDWICH .............................................................................................................. 20 2.11.3.6.- ELISA HETEROGÉNEO ...................................................................................................... 21 2.11.3.7.- ELISA COMPETITIVO.......................................................................................................... 22 2.11.3.8.- SOLUCIÓN DE LAVADO. .................................................................................................... 24 2.11.3.7.- CONJUGADOS. ..................................................................................................................... 24
2.12.- EPIDEMIOLOGIA ........................................................................................................ 25
2.12.1.- EPIDEMIOLOGIA MUNDAL ...................................................................................................... 25 2.11.2.- EPIDEMIOLOGIA DEL ECUADOR ............................................................................................ 25
TABLA N° 1. DEFUNCIONES TOTALES POR AÑO Y GRUPO DE EDAD, SEGÚN
CAUSA DE MUERTE NEUMONÍAS. ECUADOR 1999 A 2003 ........................................ 26
TABLA 2. DATOS DE SEROTIPOS DE NEUMOCOCO CORRESPONDIENTES A
ECUADOR (2005 – 2011)...................................................................................................... 27
2.13.- VACUNAS Y ANTIBIÓTICOS ....................................................................................... 27
2.13.1.- VACUNA NO CONJUGADA (23 VALENTE) ............................................................................ 28 2.13.1.1.- INDICACIONES .................................................................................................................... 28 2.13.1.2.- INMUNIDAD ......................................................................................................................... 28 2.13.1.3.- CONTRAINDICACIONES .................................................................................................... 28
2.13.2.- VACUNA CONJUGADA DE SIETE SEROTIPOS ...................................................................... 29 2.13.2.1.- INMUNIDAD ......................................................................................................................... 29 2.13.2.2.- CONTRAINDICACIONES .................................................................................................... 29
2.13.3.- VACUNA ANTINEUMOCÓCICA CONJUGADA 13-VALENTE. ............................................ 29 2.13.4.- VACUNA CONJUGADA DE 10 SEROTIPOS (PCV) ................................................................. 30
CAPITULO III ......................................................................................................................... 32
ix
METODOLOGIA .................................................................................................................... 32
3.1.- TIPO DE INVESTIGACION ............................................................................................ 32
3.2.- NIVELES DE INVESTIGACION ..................................................................................... 32
3.3.- TECNICAS E INSTRUMENTOS DE INVESTIGACION................................................ 32
3.4.- UNIVERSO Y MUESTRA ............................................................................................... 32
3.4.1.- UNIVERSO ................................................................................................................... 32
3.4.2.- MUESTREO ..................................................................................................................................... 33 3.4.2.1.- CRITERIOS DE INCLUSIÓN ...................................................................................................... 33
3.4.2.2.- CRITERIOS DE EXCLUSIÓN ................................................................................................ 33
3.5.- TÉCNICA E INSTRUMENTO DE RECOLECCIÓN DE DATOS ................................... 33
3.5.1.- TECNICA ......................................................................................................................................... 33 3.5.2.- PROCEDIMIENTO DE LA TECNICA DE ELISA (INSERTO DEL KIT E-DG-96 PARA
NEUMOCOCO IgG PARA TÉCNICA DE ELISA) .................................................................................. 33
3.6.- TIPOS DE ANÁLISIS....................................................................................................... 34
3.7.- CONSIDERACIONES ÉTICAS ....................................................................................... 34
CAPITULO VI......................................................................................................................... 35
4.1.- RESULTADOS ................................................................................................................. 35
TABLA Nº3 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN SEXO ................................................. 35
GRÁFICO Nº 1: DISTRBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN SEXO ........................................... 35
TABLA Nº4 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS DE 7 A 9 AÑOS DE EDAD ............................ 36
GRÁFICO Nº2 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN EDAD DE 7 A 9 AÑOS.............. 36
TABLA Nº5 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN GRADO DE ESCOLARIDAD .......... 37
GRÁFICO Nº3 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN GRADO DE ESCOLARIDAD ..... 37
TABLA Nº6 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN DIAGNOSTICO DE ENFERMEDAD
NEUMOCOCICA POR ENCUESTAS ................................................................................... 38
GRÁFICO Nº 4 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN DIAGNOSTICO DE
ENFERMEDAD NEUMOCOCICA ....................................................................................... 38
TABLA Nº7 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS POR ANTECEDENTES FAMILIARES DE
ENFERMEDAD NEUMOCÓSICA MEDIANTE ENCUESTAS .......................................... 39
GRÁFICO Nº 5 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS POR ANTECEDENTES FAMILIARES DE
ENFERMEDAD NEUMOCÓSICA MEDIANTE ENCUESTAS .......................................... 39
TABLA Nº8 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS CON APLICACIÓN DE VACUNA CONTRA
NEUMOCOCO ........................................................................................................................ 40
GRÁFICO Nº 6 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS CON APLICACIÓN DE VACUNA
CONTRA NEUMOCOCO ...................................................................................................... 40
x
TABLA Nº9 NÚMERO DE DOSIS DE VACUNA EN NIÑOS CONTRA NEUMOCOCO
.................................................................................................................................................. 41
GRÁFICO Nº 7 NÚMERO DE DOSIS DE VACUNA EN NIÑOS CONTRA
NEUMOCOCO ........................................................................................................................ 41
TABLA Nº 10 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN RESULTADO MEDIANTE LA
TECNICA DE ELISA PARA NEUMOCOCO IgG ............................................................... 42
GRÁFICO Nº 8 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN RESULTADO MEDIANTE LA
TECNICA DE ELISA PARA NEUMOCOCO IgG ............................................................... 42
TABLA Nº 11 DISTIRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN RESULTADO DE IgG Y NUMERO
DE DOSIS ................................................................................................................................ 43
GRÁFICO Nº 9 DISTIRBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN RESULTADO DE IgG Y NUMERO
DE DOSIS ................................................................................................................................ 43
4.2.- DISCUSIÓN..................................................................................................................... 44
4.3.- CONCLUSIONES ............................................................................................................ 45
4.4.- RECOMENDACIÓNES ................................................................................................... 45
CAPITULO V .......................................................................................................................... 46
LA PROPUESTA .................................................................................................................... 46
BIBLIOGRAFÍA ..................................................................................................................... 47
ANEXOS ................................................................................................................................. 50
ANEXO N°1.- RECURSOS Y COSTOS ................................................................................... 50
ANEXO N°2.- FORMULARIO PARA PADRES DE FAMILIA ............................................... 52
ANEXO N°3.- HOJA DE ENCUESTA A LOS PADRES DE FAMILIA ................................... 53
ANEXO N°4 ............................................................................................................................. 55
xi
LISTA DE IMÁGENES
CONTENIDO PAGS.
IMAGEN Nº 1 BACTERIA NEUMOCÓCICA .................................................................... 10
IMAGEN Nº 2 ESTRUCTURA DE LA PARED DEL NEUMOCOCO ............................... 11
IMAGEN Nº 3 ESTRUCTURA ANTIGÉNICA DEL NEUMOCOCO ................................ 13
IMAGEN Nº 4 MICROPLACAS DE POLIESTILENO DE 96 POCILLOS ......................... 23
IMAGEN Nº 5 LAVADOR DE MICROPLACAS DE 96 POCILLOS .................................. 23
xii
LISTA DE GRÁFICOS
CONTENIDO PAGS.
GRÁFICO Nº 1: DISTRBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN SEXO ........................................... 35
GRÁFICO Nº5 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN EDAD DE 7 A 9 AÑOS.............. 36
GRÁFICO Nº3 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN GRADO DE ESCOLARIDAD ..... 37
GRÁFICO Nº 4 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN DIAGNOSTICO DE
ENFERMEDAD NEUMOCOCICA ....................................................................................... 38
GRÁFICO Nº 5 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS POR ANTECEDENTES FAMILIARES DE
ENFERMEDAD NEUMOCÓSICA MEDIANTE ENCUESTAS .......................................... 39
GRÁFICO Nº 6 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS CON APLICACIÓN DE VACUNA
CONTRA NEUMOCOCO ...................................................................................................... 40
GRÁFICO Nº 7 DISTRIBUCIÓN DE NÚMERO DE DOSIS DE VACUNA RECIBIDO
POR NIÑOS............................................................................................................................. 41
GRÁFICO Nº 8 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN RESULTADO MEDIANTE LA
TECNICA DE ELISA PARA NEUMOCOCO IgG ............................................................... 42
GRÁFICO Nº 9 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN RESULTADO DE IgG Y NUMERO
DE DOSIS ................................................................................................................................ 43
xiii
LISTA DE TABLAS
CONTENIDO PAGS.
TABLA N° 1 DEFUNCIONES TOTALES POR AÑO Y GRUPO DE EDAD, SEGÚN
CAUSA DE MUERTE NEUMONÍAS. ECUADOR 1999 A 2003 ........................................ 26
TABLA Nº 2 DATOS DE SEROTIPOS DE NEUMOCOCO CORRESPONDIENTES A
ECUADOR (2005 – 2011)...................................................................................................... 27
TABLA Nº3 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN SEXO ................................................. 35
TABLA Nº4 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS DE 7 A 9 AÑOS DE EDAD ............................ 36
TABLA Nº5 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN GRADO DE ESCOLARIDAD .......... 37
TABLA Nº6 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN DIAGNOSTICO DE ENFERMEDAD
NEUMOCOCICA POR ENCUESTAS ................................................................................... 38
TABLA Nº7 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS POR ANTECEDENTES FAMILIARES DE
ENFERMEDAD NEUMOCÓSICA MEDIANTE ENCUESTAS .......................................... 39
TABLA Nº8 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS CON APLICACIÓN DE VACUNA CONTRA
NEUMOCOCO ........................................................................................................................ 40
TABLA Nº9 DISTRIBUCIÓN DE NÚMERO DE DOSIS DE VACUNA RECIBIDO POR
NIÑOS ..................................................................................................................................... 41
TABLA Nº 10 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN RESULTADO MEDIANTE LA
TECNICA DE ELISA PARA NEUMOCOCO IgG ............................................................... 42
TABLA Nº 11 DISTIRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN RESULTADO DE IgG Y NUMERO
DE DOSIS ................................................................................................................................ 43
xiv
LISTA DE ANEXOS
CONTENIDO PAGS.
ANEXO N°1.- RECURSOS Y COSTOS ................................................................................ 50
ANEXO N°2.- FORMULARIO PARA PADRES DE FAMILIA .......................................... 52
ANEXO N°3.- HOJA DE ENCUESTA A LOS PADRES DE FAMILIA ............................. 53
ANEXO N°4.- TRÌPTICO ....................................................................................................... 54
xv
TITULO: Determinación de niveles de anticuerpos IgG contra neumococo en niños
de 7 a 9 años de edad vacunados contra neumococo mediante técnica de elisa en la escuela
Plinio Robalino Cruz durante el año 2014.
Autora: Doris Raquel Sandoval Reinoso
Tutor: Dr. Carlos Wladimir Torres Serrano
RESUMEN
Se realizó este estudio debido a que aproximadamente, un millón de niños menores de 10
años de edad mueren por enfermedad neumocócica anualmente. Ministerio de Salud Pública,
Programa Amplio de Inmunizaciones (MSP,PAI 2009), pues la neumonía es la segunda causa
más común de meningitis bacteriana.
El neumococo se encuentra en los humanos y convive con ellos en el día a día, y afecta
por igual a todas las edades.
El 40 al 70 % de las personas normales son portadores asintomáticos de neumococos. La
patogenicidad del microorganismo depende de sus propiedades invasivas y está relacionada
con la presencia de su cápsula.
En esta investigación que fue descriptiva, de corte transversal, técnica estadística en Excel;
con un período de duración de un año, los resultados determinan que el 96 % no tiene
antecedentes de infección por Neumococo pero el 4 % si, lo que demuestra que la bacteria
está circulando en la ciudad de Quito. Según el Simposio Regional de Lima - Perú en Latina
America y el Caribe 1.6 millones de niños menores de 9 años tiene un episodio de
enfermedad neumocócica cada año (QUADROS.C,2008) y la Asociación Española de
Pediatría esta bacteria coloniza la nasofaringe del 25-80 % de los niños menores de 10 años
y causa dos formas de enfermedad: invasiva (meningitis, bacteriemia, sepsis, neumonía
bacteriana y otras) y no invasiva, como la neumonía, la otitis media y la sinusitis. Más del 60
% de los casos de la enfermedad neumocócica ocurre en niños mayores de 24 meses, sobre
todo a expensas de las neumonías bacterianas.
Por tanto el aporte de este trabajo es dar a conocer que la bacteria neumococo puede ser
una causa de muerte de niños en nuestro país, así como también concientizar a la población
sobre la importancia de la vacuna, las consecuencias que puede provocar el no vacunar
responsablemente a los niños, el no aplicar las cuatro dosis de vacunas en el tiempo adecuado
ya que puede ocasionar que los niños pierdan su inmunización y la bacteria ataque
nuevamente; todo esto contribuirá a evitar que existan nuevos brotes de serotipos de la
bacteria neumococo.
xvi
PALABRAS CLAVES: NEUMOCOCO/ BACTERIA/ ELISA/ INMUNOLOGÍA
TITLE: “Determining antibodies against IgG pneumococcus in children 7 to 9 years old
immunized against pneumococcus through elisa technique at Plinio Robalino Cruz during
2014”
Author: Doris Raquel Sandoval Reinoso
Tutor: Dr. Carlos Wladimir Torres Serrano
ABSTRACT
This study was performed because approximately one million children under 10 years old
die every year due to pneumococcus, Ministry of Public Health, Broad Immunization
Program (MSP,PAI 2009), with pneumonia being the second most common cause of bacterial
meningitis.
Humans carry and cohabit with pneumococcus every day, and it affects all ages equally.
From 40 to 70% of normal people are asymptomatic carries of pneumococcus. The
Microorganism’s pathogenicity depends on its invasive properties and is related to the
presence of its capsule.
This investigation was descriptive, crosscutting and the statistic technique was used in
Excel; it lasted one year and the results determine that 96% have no record of pneumococcus
infection, but 4 % does. This shows that the bacteria are circulating in the city of Quito.
According to the Regional Symposium held in Lima, Peru, in Latin America the Caribbean
1.6 million children under 9 years old have a pneumococcus episode every year
(QUADROS.C,2008) and according to the Spanish Pediatrician Association, this bacteria
colonizes the nasopharynx in 25-80% of children under 10 years old and leads to two types of
diseases: an invasive disease ( meningitis, bacteremia, sepsis, bacterial pneumonia and
others) and non-invasive, such as pneumonia, the otitis medium and the sinusitis.
More than 60% of the cases of pneumococcus disease happen in children over 24 months,
particularly at the expense of bacterial pneumonia.
Therefore, this work’s contribution is to inform that the pneumococcus bacteria could be the
reason for the death of children in our country; and the importance of the vaccine and the
consequences of not immunizing children in a responsible way, of not applying four doses of
vaccines on time and that this could make children loose their immunization and have the
bacteria attack once again. All this will contribute to avoid new serotype outbreaks of
pneumococcus bacteria.
KEYWORDS: PNEUMOCOCCUS / BACTERIA / ELISA / IMMUNOLOGY
xvii
CERTIFICACIÓN
Certifico haber realizado la anterior traducción del español al inglés. Declaro, además, que
los datos y el espíritu del texto se han mantenido totalmente en la traducción según lo mejor
de mi conocimiento.
Quito, 23 de enero del 2016
Mariacruz González C.
Perito Traductora
CC 1704608130
1
INTRODUCCIÓN
Streptococcus pneumoniae es un patógeno humano destacado pues es responsables de
muchas enfermedades graves y la principal causa de mortalidad infantil en todo el mundo. El
neumococo es muy apto a colonizar e infectar diferentes nichos en el cuerpo humano, y su
adaptación al entorno es un aspecto central de su patogenia. En la actualidad el genoma
reveló que el gen neumocócico también codifica múltiples sRNAs, muchos de los cuales
tienen un papel importante en la virulencia.
El conocimiento de la bacteria neumococo sigue siendo muy limitado, y se necesita
investigación futura para una mejor comprensión de las funciones y mecanismos. (MSP,PAI.
2009)
El neumococo se transmite de persona a persona por las secreciones (gotitas) respiratorias,
siendo los pacientes más susceptibles a las infecciones neumocócicas graves e invasivas los
niños y aquellos con linfomas o mielomas, sida y otras deficiencias inmunológicas. La lesión
previa del epitelio respiratorio por bronquitis crónica o virus respiratorios comunes, en
especial el virus de la gripe, parece predisponer a la invasión neumocócica. (LONGO.D,
2011)
Luego de la colonización de la nasofaringe se produce una infección si los organismos
pasan a zonas adyacentes como: senos paranasales, trompa de Eustaquio; y su eliminación se
dificulta por edema de la mucosa que produce el mismo microorganismo. (BELLO.A,2007)
El sistema inmune innato representa el primer evento en la defensa del huésped, siendo de
tipo inespecífico, constituye la respuesta más precoz a la invasión microbiana. Actúa para
contener la infección desde los primeros minutos a través de mecanismos incluyendo
fagocitosis, activación de citoquinas y muerte microbiana. Además, el sistema inmune innato
inicia y apoya a la inmunidad adaptativa. (PATIÑO.S., 2010)
La OMS, afirma que las enfermedades causadas por Streptococo pneumoniae constituyen
un importante problema mundial de salud pública.
2
En el año 2000, se produjeron alrededor de 14,5 millones de sucesos de enfermedad
neumocócica grave, lo que ocasionó cerca de 826.000 muertes en niños de 1 a 5 años, de los
que unos 91.000 eran niños VIH-positivos. Organización Mundial de la Salud (OMS, 2013)
En el Ecuador el Ministerio de Salud Pública estableció una prevalencia de enfermedades
causadas por el agente neumococo del 22,9 por 100.000 habitantes en niños que fueron
atendidos en hospitales de la red Pública de Salud, (MSP,PAI. 2009)
3
CAPÍTULO I
1.- EL PROBLEMA
1.1.- PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Las infecciones por neumococo dan lugar a una enfermedad invasora o no invasora a
partir de la nasofaringe, la cual se establece y se extender siendo uno de los principales
agentes causantes de meningitis y la causa más frecuente de neumonía, bacteriemia, sinusitis
y otitis media aguda en los niños menores de 2 años de edad. El neumococo causa una gran
variedad de manifestaciones clínicas, desde el estado de portador asintomático o colonización
nasofaríngea hasta la sepsis fulminante. (MSP,PAI. 2009
El neumococo es uno de los patógenos con mayor impacto global, el S. pneumoniae quizá
sea uno de los más complejos de estudiar, tanto desde el punto de vista clínico como
epidemiológico. El cual afecta a individuos de todas las edades. (MSP,PAI. 2009)
Aproximadamente, un millón de niños menores de 10 años de edad mueren por
enfermedad neumocócica anualmente. (MSP,PAI. 2009)
Los pacientes con otitis media y un porcentaje grande de casos de sinusitis y neumonías
son causados por el Streptococcus pneumoniae conocido como neumococo. La enfermedad
neumocócica constituye una de las diez primeras causas de muerte en los países
subdesarrollados. Se estima que el 15-30% de todas las neumonías son debidas al
neumococo. (MSP,PAI. 2009)
Las enfermedades no invasivas suelen ser más frecuentes y menos graves, generalmente
limitadas a vías respiratorias, y se pueden manifestar como una infección ótica, sinusal y
bronquial. (MSP,PAI. 2009)
El riesgo de infectarse con la bacteria neumocócica es mayor en los niños menores de 2
años por la incapacidad para responder a antígenos polisacáridos debido a la inmadurez de su
sistema inmune, así como también en niños de 5 a 10 años ya que esta población está más
expuesta a relacionarse con multitudes de gentes infectadas y en individuos
inmunodeprimidos. Otros factores de riesgo de meningitis neumocócica son los niños con
bajo peso al nacer o pretérminos con peso menor a 2.500 gramos o menos de 37 semanas de
4
gestación. El padecimiento de insuficiencia renal crónica o síndrome nefrótico, la infección
por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) asintomática o sintomática, las
inmunodeficiencias y otras enfermedades crónicas del corazón, pulmones e hígado suponen
un mayor riesgo de padecimiento de enfermedad neumocócica invasiva. (MSP,PAI. 2009)
Aunque el Neumococo ha sido bastante sensible a numerosos antibióticos, incluyendo
penicilinas, cefalosporinas, tetraciclinas, cloranfenicol, vancomicina, etc., uno de los factores
que hacen indispensable la utilización de la vacuna es el aumento de cepas resistentes a los
antibióticos dado el uso indiscriminado de éstos, lo que aumenta la agresividad y
patogenicidad del virus aumentando las complicaciones y muertes originadas por esta
bacteria. Siendo en estas dos últimas décadas que ha desencadenado la aparición de
neumococos resistentes a algunos antibacterianos, e incluso cepas multiresistentes.
(MSP,PAI. 2009)
1.2.- UBICACIÓN
En Ecuador, las infecciones de vías respiratorias continúan siendo una de las 10 primeras
causas de morbilidad y mortalidad en los menores de cinco años de edad. En las infecciones
de origen comunitario los principales agentes etiológicos son virus y bacterias. Dentro de las
bacterias, Streptococcus pneumoniae y Moraxella catharralis son las que se aíslan con mayor
frecuencia. (SOLORZANO.S, 2015). En niños menores de cinco años, S. pneumoniae causa
infecciones como otitis media, sinusitis o neumonía, que pueden ir acompañadas de otras
enfermedades invasoras como meningitis y bacteriemia. (ECHANIZ.A, 1997)
El S. pneumoniae habita en la faringe y nasofaringe de sujetos sanos. La frecuencia de
portadores es variable pero se estima entre 5 a 75%. (GRAY.B, 1997) La colonización inicia
en la etapa de lactancia y la cantidad de portadores disminuye en forma inversamente
proporcional a la edad; se encuentra de 38 a 45% en menores de cinco años, de 29 a 39% en
niños de 5 a 9 años y de 9 a 25% en niños de 9 a 14 años. (LEIBERMAN.A, 1999)
Los estudios de desarrollo nasofaríngeo han sido utilizados para conocer, desde el punto
de vista epidemiológico, tanto la frecuencia como los serotipos que dominan en una
población. Se ha reconocido que existe variación de los serotipos en cada país. Existen 90
serotipos de S. pneumoniae, de los cuales casi la mitad han sido implicados en distintas
5
enfermedades, lo que ha complicado el desarrollo de una vacuna con cobertura total de los
serotipos. (LOPEZ.J, 1995)
Recientemente en diversos países del mundo y en Ecuador se está utilizando una vacuna
conjugada, que contiene trece serotipos de S. pneumoniae de mayor predominio en
enfermedad invasora (meningitis, neumonía, bacteriemia) y otitis media aguda en Estados
Unidos de América (EUA), Canadá y algunos países europeos. (MIRANDA.N, 1995)
Después de la introducción de la vacuna conjugada heptavalente (PCV-7), se han descrito
cambios en la epidemiología de los diferentes serotipos de neumococo, consistentes en la
disminución del estado de portador nasofaríngeo y la incidencia de enfermedad neumocócica
invasiva (ENI), por los serotipos contenidos en la PVC-7.Debido a la vacunación masiva de
niños con PCV-7 se observa la proliferación de nuevos serotipos emergentes como
consecuencia de un fenómeno de sustitución o de cambio capsular. (DAGAN.R, 1998)
En Ecuador el Ministerio de Salud Pública estableció una prevalencia de 22,9 por 100000
habitantes en niños que fueron atendidos en hospitales de la red Pública de Salud, esto es una
alarma en la integridad de la niñez ya que no se sabe si existan nuevos brotes o no se esté
inmunizando como es correcto. (MSP,PAI. 2009)
1.3.- FORMULACIÓN DEL PROBLEMA
¿Cuáles son los niveles de anticuerpos IgG contra neumococo en niños de 7 a 9 años de
edad vacunados contra neumococo mediante técnica de Elisa en la escuela Plinio Robalino
Cruz durante el año 2014?
6
1.4.- OBJETIVOS
1.4.1.- Objetivos generales
Determinar los niveles de anticuerpos IgG contra la bacteria neumococo en niños de 7
a 9 años de edad en la Escuela Plinio Robalino Cruz mediante técnica de ELISA, en el
Laboratorio de Genética de la Facultad de Ciencias Médicas.
1.4.2.- Objetivos específicos
Identificar el número de casos de neumococo en niños de 7 a 9 años.
Conocer cuántas dosis de vacuna existe en dichos niños contra Neumococo mediante
encuestas.
Determinar los niveles de anticuerpos IgG contra neumococo el los niños de 7 a 9
años de edad.
Elaborar un folleto informativo de la importancia de vacunar a los niños con el
número de dosis adecuadas.
1.5.- Justificación
Según datos de la OMS, las enfermedades causadas por S. neumoniae constituyen
un importante problema mundial de salud pública. En el año 2000, se produjeron alrededor
de 14,5 millones de sucesos de enfermedad neumocócica grave, lo que ocasionó cerca
de 826.000 muertes en niños de 1 a 59 meses, de los que unos 91.000 eran niños VIH-
positivos. Las muertes en los niños VIH- negativos, más del 61% se produjo en diez países
africanos y asiáticos (India 27%, China 12%, Nigeria 5%, Pakistán 5%, Bangladesh 4%,
Indonesia 3%, Etiopía 3%, Congo 3%, Kenya 2%, y Filipinas 2%). En 2007, la
OMS recomendó ya el uso de vacunas contra el neumococo en todos los países, insistiendo
en la más alta prioridad para aquellos países con altas tasas de neumonía secundaria y de
mortalidad en menores de cinco años. (SUAREZ.M, 2013)
7
Como su nombre indica, el Streptococcus pneumoniae o Neumococo es el agente
etiológico de las infecciones neumocócicas. El microorganismo es capaz de escapar a la
fagocitosis y a la acción del complemento. Las cepas no capsuladas no son patógenas. Así
mismo es el polisacárido capsular el que permite la clasificación del neumococo en 90 tipos
serológicos distintos y es también responsable de la creación de los anticuerpos protectores,
confiriendo una inmunidad que es característicamente tipo específica, de manera que la
infección o vacunación con un tipo, no protege de la infección por los restantes.
(SUAREZ.M, 2013)
El S. pneumoniae tiene predilección por el tracto respiratorio, con eventual invasión, por
continuidad o a distancia, gracias a su capacidad bacteriana. Las características clínicas de la
infección están determinadas por el sitio de infección y las características del huésped y del
agente, variando entre la portación por individuos sanos o la faringitis leve hasta la
septicemia fulminante o la meningitis. Habitualmente se separan en infecciones invasoras o
sistémicas (neumonía, septicemia, meningitis, etc.) y localizadas o no invasoras (otitis media,
sinusitis, conjuntivitis, artritis, etc.). (SUAREZ.M, 2013)
Las infecciones neumocócicas presentan una contagio continuo, siendo más frecuente
en países en vías de desarrollo y en grupos socioeconómicos bajos. Pero por lo general es
de aparición esporádica en países desarrollados, aunque pueden surgir epidemias en grupos
cerrados. Su incidencia es máxima en invierno y primavera en zona templadas, lo que se
corresponde lógicamente con la forma de transmisión (aérea, de persona a persona). Las
epidemias de gripe, por la alteración de la mucosa respiratoria y otros factores, predisponen
una mayor incidencia de enfermedad neumocócica. (SUAREZ.M, 2013)
Se han descrito epidemias recurrentes en Sudáfrica y existen otros lugares con elevada
incidencia, como Nueva Guinea, probablemente debido a un elevado número de portadores y
la existencia de un estrecho contacto interpersonal. (SUAREZ.M, 2013)
En EEUU, la tasa anual de incidencia de infecciones neumocócicas en 1997 fue de 15-30
casos/100.000 habitantes, elevándose a 50-83/100.000 en mayores de 65 años y hasta
160/100.000 en menores de 2 años. En adultos predomina la neumonía bacteriémica pero en
los niños el sitio primario de infección fue más variable. En 2007 las estimaciones fueron de
40.000 casos y 4.400 muertes por enfermedad neumocócica invasiva (bacteriemias y
8
meningitis) en 2008 la incidencia global de la enfermedad neumocócica invasiva.
(SUAREZ.M, 2013)
En Europa la incidencia de enfermedad invasiva por neumococo oscila entre los 0,4 casos
por 100.000 habitantes y los 20 casos por 100.000. Debe tenerse en cuenta que las
estrategias de vigilancia son muy heterogéneas según regiones de Europa, lo que ha
dificultado la comparación de datos. Ya en 2010, con grandes mejoras en la vigilancia, se
dispone de más y mejores datos de incidencia de esta enfermedad. Durante ese año se
registraron 21.565 casos de enfermedad neumocócica invasiva en el total de los 26 países.
Las tasas de notificación más altas fueron entre los niños menores de un año y en los niños de
5 años o más. (SUAREZ.M, 2013)
En el Ecuador entre los años 1999 y 2003 existen aproximadamente 14.000 defunciones
por causas de enfermedades agudas del tracto respiratorio y solo de las neumonías un
(90.25%), siendo esta patología la que define el comportamiento de las enfermedades agudas
del tracto respiratorio. Ministerio de Salud Publica. (MSP. 2008).
9
CAPITULO II
2.- MARCO TEÓRICO
2.1.- MARCO LEGAL
Según la Constitución de la República del Ecuador del 2008, Capitulo segundo, Derechos del
Buen Vivir Sección Séptima: Salud, Artículo 32:
“La salud es un derecho que garantiza el Estado, cuya realización se vincula al ejercicio de
otros derechos, entre ellos el derecho al agua, la alimentación, la educación, la cultura física,
el trabajo, la seguridad social, los ambientes sanos y otros que sustentan el buen vivir.
El Estado garantizara este derecho mediante políticas económicas, sociales, culturales,
ambientales; y el acceso permanente, oportuno y sin exclusión a programas, acciones y
servicios de promoción y atención integral de salud, salud sexual y salud reproductiva. La
presencia de los servicios de salud se regirá por los principios de equidad, universalidad,
solidaridad, interculturalidad, calidad, eficacia, precaución y bioética, con enfoque de género
y generacional”
Por lo tanto el derecho a la salud debe aplicarse a todos los ciudadanos sin preferencia
alguna, todos deben ser atendidos por igual y sobre todo un trato especial, ya que los
pacientes son vulnerables y ello ayudara al paciente a sentirse bien. (MSP, 2008)
2.2.- AGENTE NEUMOCOCO
El neumococo es un tipo de microorganismo estreptocócica. Los individuos se infectan a
través de la relación con personas que están contagiadas o con personas que no están
enfermas pero que llevan la bacteria en la parte extrema de su nariz, los contagios
neumocócicos pueden ser leves o graves. (QUINTANA.D, 2015)
El neumococo causa otitis, sinusitis y neumonía; y la causa más común de meningitis
bacteriana (tras el meningococo). Este microorganismo se encuentra en los individuos y que
conviven con ellos en el día a día. Afecta a todas las edades aunque la generalidad de los
casos se da entre los mayores de 60 años. Además, las personas afectadas de muchas
10
enfermedades crónicas y de inmunodeficiencias tienen un riesgo alto de padecer la infección.
(FARRE.G, 2012)
IMAGEN N° 1: Bacteria Neumocócica
Fuente: http://www.losmicrobios.com.ar/microbios/?page_id=1292
CONSULTADO EN: 25/06/2015
2.3.- ESTRUCTURA
2.3.1.- ESTRUCTURA CELULAR DEL NEUMOCOCO
Es un microorganismo Gram positivo de 1,2-1,8 µm de longitud, que presenta una forma
ovalada y el extremo distal como punta de lanza. Es inmóvil, no forma endosporas, y es un
miembro alfa-hemolítico del género Streptococcus. Generalmente, se muestra en forma de
diplococo, por lo que fue denominado Diplococcus pneumoniae. (TORRES.C, 2014)
El neumococo es un patógeno humano autor de un gran número de infecciones
(neumonía, sinusitis, peritonitis) y de procesos invasivos severos (meningitis, sepsis),
especialmente en ancianos, niños y personas inmunodeprimidas. Es la principal bacteria
causante de Neumonia adquirida en la sociedad. (BAUTISTA.G, 2011)
11
Metabólicamente el neumococo es una bacteria microaerófilo, catalasa negativo, que se
encuentra dentro del grupo de los microorganismos ácido láctica, ya que este mezclado; es el
importante producto resultante de la fermentación de carbohidratos. (PEÑA.S, 2014)
La diferencia morfológica más repetidamente aislada en personas infectadas con
neumococo es la forma “lisa” de Griffith, que se presenta encapsulada, con los bordes lisos y
cuyos cultivos tienen una apariencia de tipo mucosa. Fue esencialmente Griffith, quien, en
1928, dio a conocer que la cápsula es el primordial factor de virulencia. (OMS, 2013)
2.3.1.1.- LA CÁPSULA
La cápsula es la parte más externa y el primer factor de virulencia del neumococo. Está
formada, por polisacáridos cargados negativamente que envuelven a la célula y que se
conservan unidos a la superficie del germen, mediante enlaces covalentes. (PASTOR.M,
2007)
Existen 92 serotipos capsulares distintos conocidos hasta el momento con una
composición química compleja e inconstante. (PIO.R, 2004)
La cápsula no parece tener nada que ver en los fenómenos de adherencia, invasión o
inflamación, es fundamental para la virulencia del germen debido a su capacidad para
encerrar el reconocimiento de neumococo por parte del hospedador, impidiendo así
su fagocitosis. (RUBIO.T, 2011)
IMAGEN N° 2: Estructura de la pared del neumococo
12
Fuente:http://lacienciaysusdemonios.com/2010/11/19/plagas-del-siglo-xxi-el-
%E2%80%9Cneumococo%E2%80%9D/
CONSULTADO EN: 25/06/2015
2.3.1.2.- PARED CELULAR
La pared celular envuelve a la membrana citoplasmática y concede a la bacteria una
morfología típica. La estructuras, a modo de exoesqueleto, sirve a las bacterias como
elemento de ajuste al medio externo, protegiéndola de su posible lisis, ya sea osmótica o
mecánica. Además de ser el intermedio de intercambio de solutos entre el exterior y el
interior celular, la pared del germen sirve de punto de unión para toda una batería de
proteínas mezcladas en procesos de desarrollo y división celular, y en las interacciones de la
célula con el medio exterior. La pared desempeña un papel importante en los procesos de
población, adherencia, inflamación e invasión bacteriana. (MEDINA.Y, 2015)
La composición de la pared varía de unos géneros a otros. En el caso de neumococo está
constituida por un armazón de cadenas de peptidoglicano (mureína) y los ácidos teicoicos y
lipoteicoicos asociados a ellas, formando este conjunto una organización multilaminar con un
espesor comprendido entre 15-40 nm. (PROAÑO.U, 2014).
Los importantes componentes de su pared celular son el peptidoglicanos, el ácido teicoico
y la integridad de la pared está dada por la presencia de cadenas laterales peptídicas entre
cogidos por acción de enzimas como las transpeptidasas y carboxipeptidasas. Estas enzimas
son inactivas por los antibióticos B – lactamicos. (BELLO.A, 2007)
2.3.2.- ESTRUCTURA ANTIGENICA
El polisacárido capsular es inmunológicamente distinto y permite la diferencia en más de
80 tipos sexológicos de neumococos con antisueros específicos. (RED.O, 2014)
La parte somática del neumococo tiene una proteína M, y un carbohidrato C que es
frecuente para todos los neumococos. El carbohidrato C puede ser precipitado por la proteína
C reactiva, substancia presente en el suero de pacientes con procesos inflamatorios,
neoplásicos. (RED.O, 2014)
13
IMAGEN N° 3: Estructura Antigénica Del Neumococo
Fuente: http://slideplayer.es/slide/37543/
CONSULTADO EN: 28/06/2015
2.4.- RESERVORIO
El reservorio del neumococo es el hombre. Esta bacteria forma parte de la flora frecuente
de la rinofaringe de las personas sanas, durante el invierno y el principio de la primavera. Los
niños de edad preescolar están infectados entre un 30 y 60%, los escolares el 20- 30% y los
niños mayores un 15-20%. Los adultos que viven con niños preescolares están colonizados
más comúnmente que los que no lo hacen. ( POMA.D, 2015)
2.5.- PATOGENIA
Luego de la colonización de la nasofaringe se produce una infección, si las bacterias pasan
a zonas adyacentes como: senos paranasales, trompa de Eustaquio; y su expulsión se niega
por edema de la mucosa que produce el mismo germen puede producir meninguitis.
(BELLO.A, 2007)
También produce neumonía si la bacteria se inhala por los bronquiolos o los alveolos y no
son eliminados. Los que no se aparten pueden ser por la presencia de infección vírica, humo
de cigarrillo u otra sustancia toxica que aumenta la cantidad de mucus y la disminución de la
acción ciliar. (BELLO.A, 2007)
14
Luego que las bacterias llegan a una zona no usual activan el complemento por la vía
clásica y alterna, se producen citocinas y la afinidad de neutrófilos y así de fagocitosis, pero
la capsula es resistente a ella. Y como no puede ser fagocitada empieza la infección, la cual
se puede esparcir a espacios articulares, meninges, cavidad peritoneal. (POZO.F, 2005)
La patogenicidad de este germen está dada por el avance de la fagocitosis y de estimular
inflamación y daño de tejidos, todo dado por su encapsulación, ya que los neumococos no
encapsulados nunca causan enfermedades invasoras. (BELLO.A, 2007)
Los síntomas de la enfermedad se deben a la inflamación de los tejidos que producen.
Cuando ataca el sistema nervioso central en la meningitis produce lesión neuronal.
(HOLGER.J, 2012)
También en la patogenicidad actúa la autolisina, que al causar la lisis del microorganismo
esta deja sus contenidos y aumenta la reacción de inflamación. También en la meningitis se
liberan aminoácidos excitadores por el tejido neuronal lo que ayuda a las lesiones de esta
enfermedad. (BELLO.A, 2007)
Del 40 al 70 % de las personas normales son transportadores asintomáticos de
neumococos. La patogenicidad de la bacteria depende de sus propiedades invasivas y está
relacionada con la presencia de su cápsula, que frena la alimentación de los organismos
encapsulados por los fagocitos. (RED.O, 2014)
Los neumococos penetran por las vías respiratorias superiores a partir de las secreciones
respiratorias de individuos infectados. El neumococo es el importante agente causal de
neumonías bacterianas. También produce meningitis, septicemia e infecciones del oído medio
(otitis) y de los senos paranasales (sinusitis). (RED.O, 2014)
2.6.- MECANISMOS DE TRANSMISIÓN
Se transmite de persona a persona por las secreciones (gotitas) respiratorias, estando los
pacientes más susceptibles a las infecciones neumocócicas graves e invasivas aquellos con
linfomas o mielomas, sida y otras deficiencias inmunológicas. (LONGO.D, 2011)
15
Se considera un microorganismo esencialmente invasor debido al polisacárido capsular,
del que depende su virulencia por la capacidad de esquivar a la fagocitosis y a la acción del
complemento. (LONGO.D, 2011)
El neumococo puede contaminar las vías respiratorias superiores, causando cuadros de
otitis media y sinusitis. También contagia las vías respiratorias inferiores por microaspiración
desde la orofaringe, alcanzando la cavidad pleural y el corazón. Si las defensas pulmonares
no son capaces de parar la infección, esta puede alcanzar hasta los ganglios linfáticos y,
puede atacar el torrente sanguíneo. (POMA.D, 2015).
2.7.- SINTOMATOLOGIA
La sintomatología del agente neumococo son: dificultad de tragar, dolor de garganta,
fiebre y ocasionalmente náuseas, vómitos y manifestaciones intestinales.
Signos: Aumento de tamaño de las amígdalas, inflamación de la faringe y amígdalas
(enrojecimiento de la faringe y amígdalas), es habitual observar las amígdalas recubiertas por
un exudado faringoamigdalar (exudado blanco amarillento con predomino de
polimorfonucleares) y ganglios regionales aumentados de tamaño y dolorosos a la palpación.
(VALLEJO.M, 2007)
Diagnóstico Diferencial: Virus Epstein Barr, Adenovirus, Neisseria Gonorrhoeae
(VALLEJO.M, 2007)
2.8.- CLÍNICA PRONOSTICO
El pronóstico del paciente depende de qué tan rápido reciba el tratamiento.
Aproximadamente 1 de cada 5 personas que contraen esta enfermedad morirá a causa de ella.
Entre el 25 y el 50% tendrá dificultades serias del cerebro y del sistema nervioso a largo
plazo (MUÑOZ.K, 2015)
2.9.- INMUNIDAD PARA EL NEUMOCOCO
El sistema innato constituye la primera respuesta en la protección del huésped, pues
constituye la respuesta más rápida a la invasión microbiana. Actúa para proliferar la infección
desde los primeros minutos a través de fagocitosis, activación de citoquinas y muerte
16
microbiana. Además, el sistema innato inicia y apoya a la inmunidad adaptativa.
(ZEPEDA.F, 2013)
2.9.1.- CÉLULAS DE LA INMUNIDAD INNATA
Las células alveolares tipo I y tipo II participan en la respuesta innata produciendo
citoquinas y quimioquinas durante la neumonía. Los macrófagos alveolares son esenciales en
la fagocitosis de esta bacteria y en la coordinación de la respuesta innata a la infección.
(ZEPEDA.F, 2013)
Los neutrófilos son principales para conseguir la expulsión de la bacteria y para la
terminación de la neumonía. La destreza del neutrófilo para luchar contra el neumococo, se
puede decir que es la más importante, junto con las quimiotaxis y fagocitosis puede producir
la muerte microbiana. La respuesta del sistema inmune innato aumenta la fabricación de
neutrófilos desde la médula ósea y estimula la liberación de formas maduras e inmaduras a la
circulación. (ZEPEDA.F, 2013)
2.9.2.- COMPLEMENTO
El sistema del complemento comprende más de 30 proteínas séricas, cuando estas son
activadas ayudan a la defensa del huésped al realizar sus funciones de quimiotaxis y acción
bactericida (este último es el ataque de membrana). Las tres vías de activación del
complemento descritas: (ZEPEDA.F, 2013)
a) La vía clásica es activada por anticuerpos que se unen a un antígeno. (ZEPEDA.F,
2013)
b) La vía alternativa es activada continuamente en bajos niveles pero sólo es amplificada
sobre superficies extrañas. (ZEPEDA.F, 2013)
c) La vía de la lectina es activada por reconocimiento de la lectina ligadora de manosa que
se une a los carbohidratos sobre la superficie microbiana. (ZEPEDA.F, 2013)
La importancia del complemento en la defensa del huésped contra el neumococo es
reconocido por las severas infecciones sufridas cuando existen defectos congénitos de este
sistema. De este modo, se producen infecciones neumocócicas recurrentes a lo largo de la
vida. Este hecho se ve en el laboratorio a través de estudios experimentales, donde se aprecia
17
que la vía clásica del complemento es la más importante en la protección contra la infección
del neumococo. La vía alternativa también contribuiría, pero su rol en la defensa contra el
neumococo sería menor. (ZEPEDA.F, 2013)
En este sentido la acción protectora de la vacuna, al estimular la producción de anticuerpos
específicos contra el neumococo, facilitaría la activación del complemento por la vía clásica
sobre la superficie bacteriana. Sin embargo, el neumococo ha desarrollado diversos
mecanismos de evasión a la acción del complemento. La cápsula del neumococo evita la
fagocitosis mediante diferentes mecanismos, como la disminución de la activación de la vía
clásica y por reducción de la activación de la vía alternativa. Cuando se produce estos efectos
combinados, la cápsula neumocócica impide la fagocitosis. Además, la cápsula evitaría que la
bacteria sea atrapada en el mucus y la trampa de los neutrófilos. (ZEPEDA.F, 2013)
2.10.- SINDROME DE NEUMOCOCO
La tríada de neumonía, endocarditis y meningitis neumocócica es conocida como
síndrome de Austrian, cuyo nombre se debe al Dr. Robert Austrian (1916-2007), que
describió la tríada en una serie de 8 pacientes en el año 1957. (SOLORZANO.S, 2010)
Antes del descubrimiento de la penicilina, el neumococo era una de las causas más
comunes de endocarditis. (SOLORZANO.S, 2010)
La puerta de ingreso del síndrome de Austrian son las vías respiratorias. El síndrome de
Austrian se caracteriza por afectar principalmente a las cavidades del corazón.
(SOLORZANO.S,2010)
2.11.- DIAGNOSTICO
2.11.1.- TINCIÓN DE GRAM Y CULTIVO DE MUESTRAS BIOLÓGICAS
El análisis de los contagios se ha fundado tradicionalmente en el cultivo microbiológico de
muestras (gold standard o patrón oro), antecedidas por la tinción de Gram (de esputo en el
caso de la neumonía y del LCR en la meningitis, así como del hemocultivo en ambos). Las
muestras biológicas se deben conseguir idealmente antes de iniciar el tratamiento antibiótico.
(MARTINEZ.C,2014)
18
La sensibilidad de los hemocultivos es baja, alrededor de 20% en niños. Los hemocultivos
positivos son más frecuentes en los casos de meningitis Neumocócica. La tinción de Gram
más el cultivo de LCR sirven para determinar la mayoría de los casos de meningitis
neumocócica. (MARTINEZ.C, 2014)
2.11.2.- TÉCNICAS MOLECULARES: TEST DE AMPLIFICACIÓN DE ADN (PCR)
Las técnicas fundadas en la amplificación de ADN, como la PCR (polymerase chain
reaction o reacción en cadena de la polimerasa) tienen cada vez más importancia como
herramientas diagnósticas. Sus ventajas son que pueden descubrir mínimas cantidades de
ADN de patógenos microbianos, se afectan menos por el uso primero de antibióticos y
proporcionan resultados en poco tiempo (horas). La técnica de PCR puede ser cualitativa y
cuantitativa (PCR a tiempo real). La PCR se puede realizar en sangre o en otros fluidos
corporales como son: esputo, saliva. En sangre se puede realizar en sangre fresca con EDTA.
(PATIÑO.S, 2000)
En niños la PCR, en esputo, ofrece una baja especificidad y una elevada posibilidad de
obtener falsos positivos por contaminación, añadido a la dificultad de obtener esputos.
(PATIÑO.S,2010)
Las ventajas de las técnicas moleculares son su elevada especificidad, permiten obtener el
serotipo y se obtiene el resultado en horas. Los inconvenientes son posibilidad de falsos
positivos por detectar microorganismos no infectivos. Además exigen laboratorios y personal
técnico, utilizable sólo en algunos centros, y es un método muy costoso.
(MARTINEZ.C,2014)
2.11.3.- TÉCNICA DE ELISA
2.11.3.1.- HISTORIA
1966 Avrameas y Uriel pensaron la idea de marcar antígenos y anticuerpos con
enzimas. (FERNANDEZ.N, 2015)
1966 Nekane, Pierce conjugaron enzimáticamente anticuerpos para localizar
antígenos víricos en cortes de tejidos de animales. (FERNANDEZ.N, 2015)
19
1971, Engvall y Perlmann describieron el primer método de ELISA, como alternativa
al radioinmunoanalisis (RIA), para titular inmunoglobulinas. (FERNANDEZ.N,
2015)
1974, Voller utilizó el método de la microplaca y propuso su uso para cuantificar
anticuerpos inducidos por enfermedades infecciosas. (FERNANDEZ.N, 2015)
1985, Primer Kit comercial para detectar la enfermedad de Aujeszky (rabia)
(FERNANDEZ.N, 2015)
2.11.3.2.- FUNDAMENTO Y TIPOS DE ELISA.
Según Fernández,.N.(2015) la técnica de ELISA se basa en el uso de antígenos o
anticuerpos marcados con una enzima, de forma que los conjugados resultantes tengan
actividad tanto inmunológica como enzimática. Al estar uno de los componentes (antígeno o
anticuerpo) marcado con una enzima, la reacción antígeno-anticuerpo quedará inmovilizada
y, por tanto, será revelada mediante la adición de un substrato especifico que al actuar la
enzima producirá un color observable a simple vista o cuantificable mediante el uso de un
espectrofotómetro o un colorímetro.
Los diferentes tipos de ELISA son los que se enumeran a continuación:
ELISA Directo.
ELISA Indirecto.
ELISA sándwich o Doble.
ELISA Heterólogo.
ELISA competitivo
2.11.3.3.- ELISA DIRECTO.
Según Fernández,.N. (2015) consta de las siguientes etapas:
• Fijación al soporte insoluble de antígenos específicos para los anticuerpos objeto de
estudio.
Lavado para eliminar los antígenos fijados o no fijados.
• Adición de anticuerpos marcados con una enzima; si los anticuerpos reaccionan con los
antígenos, el complejo quedará solubilizado.
20
Lavado para eliminar los anticuerpos marcados que no hayan reaccionado.
• Adición de un substrato sobre el que sea capaz de actuar la enzima marcadora.
Lectura visual o colorimétrica del producto final coloreado.
2.11.3.4.- ELISA INDIRECTO.
Según Fernández,.N. (2015) consta de las siguientes etapas:
• Fijación al soporte insoluble de antígenos específicos para los anticuerpos objeto de
estudio.
Lavado para eliminar los antígenos fijados o no fijados.
• Adición del suero problema, de tal forma que sus anticuerpos reaccionarán
específicamente con los antígenos fijados al soporte.
Lavado para eliminar los anticuerpos marcados que no hayan reaccionado.
• Adición de anti-anticuerpos conjugados con una enzima, los cuales reaccionan con los
anticuerpos específicos añadidos en el paso anterior y que se encuentran fijados a los
antígenos.
Lavado para eliminar los anti-anticuerpos marcados que no hayan reaccionado.
• Adición de un substrato sobre el que sea capaz de actuar la enzima marcadora. Se puede
parar la reacción si se desea.
• Lectura visual o colorimétrica del producto final coloreado.
2.11.3.5. - ELISA SÁNDWICH
Según Fernández,.N. (2015) consta de las siguientes etapas:
• Fijación al soporte insoluble de anticuerpos específicos del agente patógeno a detectar.
Lavado para eliminar los anticuerpos fijados o no fijados.
• Adición de la muestra problema de tal forma que si está presente el agente patógeno de
diagnóstico (antígeno), reaccionará específicamente con los anticuerpos fijados al soporte.
21
Lavado para eliminar los antígenos que no hayan reaccionado y los restos de la muestra
no fijados.
• Adición de anticuerpos específicos del antígeno a detectar (deben tener un determinante
antigénico diferente de los anticuerpos) conjugados con una enzima, los cuales reaccionan
con los antígenos añadidos con la muestra problema y que se encuentran fijados a los
anticuerpos.
Lavado para eliminar los anticuerpos marcados que no hayan reaccionado.
• Adición de un substrato sobre el que sea capaz de actuar la enzima marcadora.
• Lectura visual o colorimétrica del producto final coloreado.
2.11.3.6.- ELISA HETEROGÉNEO
Según Fernández,.N. (2015) consta de las siguientes etapas:
• Fijación al soporte insoluble de anticuerpos específicos del agente patógeno a detectar.
Lavado para eliminar los anticuerpos fijados o no fijados.
• Adición de la muestra problema de tal forma que si está presente el agente patógeno de
diagnóstico (antígeno), reaccionará específicamente con los anticuerpos fijados al soporte.
Lavado para eliminar los antígenos que no hayan reaccionado y los restos de la muestra no
fijados.
• Adición de anticuerpos específicos del antígeno a detectar), los cuales reaccionan con los
antígenos añadidos con la muestra problema y que se encuentran fijados a los anticuerpos.
Lavado para eliminar los anticuerpos que no hayan reaccionado.
• Adición de anticuerpos conjugados con una enzima anti-anticuerpos empleados en el
paso anterior.
Lavado para eliminar los anti-anticuerpos marcados que no hayan reaccionado.
• Adición de un substrato sobre el que sea capaz de actuar la enzima marcadora.
22
• Lectura visual o colorimétrica del producto final coloreado.
2.11.3.7.- ELISA COMPETITIVO.
Según Fernández,.N. (2015) consta de las siguientes etapas:
• Fijación al soporte insoluble de anticuerpos específicos del agente patógeno a detectar.
Lavado para eliminar los anticuerpos fijados deficientemente o no fijados.
• Adición en concentración conocida de una mezcla de antígenos del anticuerpo utilizado
en el paso anterior, marcados con una enzima y antígenos desconocidos objeto de estudio.
Paralelamente, añadir únicamente antígenos del anticuerpo usado en el paso anterior,
marcados con una enzima.
Lavar para eliminar los antígenos que no hayan reaccionado.
• Adición de un substrato sobre el que sea capaz de actuar la enzima marcadora.
• Lectura visual o colorimétrica del producto final coloreado de ambas pruebas y comparar
los resultados.
Si las lecturas de ambas pruebas son similares, el antígeno a estudio no tienen nada que ver
con los anticuerpos empleados para tapizar el soporte. Si hay diferencia en las lecturas de
ambos pocillos, el antígeno objeto de estudio, está relacionado serológicamente con el
anticuerpo empleado para tapizar el soporte y la diferencia de densidad óptica, es
proporcional a la concentración del antígeno problema en la muestra.
La fase sólida debe ser de un tipo que permita un fácil manejo (especialmente en los
procesos de lavado) y la creación de la unión de antígenos o anticuerpos sobre su superficie.
Las microplacas de 96 pocillos y un volumen de 350µL son especialmente ventajosos
para procesar un elevado número de muestras y una vez tapizadas, el material inmovilizado
permanece reactivo mucho tiempo siempre que se mantenga seco y a baja temperatura.
Normalmente se utilizan microplacas de poliestireno de fondo plano que pueden adquirirse
estériles y con o sin tapa.
23
IMAGEN N° 4: Microplacas De Poliestireno De 96 Pocillos
Fuente: http://www.cultek.com/inf/otros/soluciones/Soluciones-ELISA-protocolos.pdf
CONSULTADO EN: 28/06/2015
Las técnicas de ELISA se realizan mediante la adición secuencial de todos los reactivos
necesarios separados por etapas de lavado. Cada una de las operaciones puede realizarse
manualmente con micropipetas o con equipamiento para la automatización de todas y cada
una de las etapas. Esta completa automatización se justifica por la necesidad de procesar y
analizar un gran número de muestras y necesitar una elevada repetición de resultados.
IMAGEN N° 5: Lavador De Microplacas De 96 Pocillos
Fuente: http://www.cultek.com/inf/otros/soluciones/Soluciones-ELISA-protocolos.pdf
CONSULTADO EN: 28/06/2015
24
2.11.3.8.- SOLUCIÓN DE LAVADO.
Solución salina con Tween
ClNa ................................................... 8,5gr
Tween 20 ........................................... 0,5mL
Agua destilada .................................... 1000mL
2.11.3.7.- CONJUGADOS.
La enzima escogida como marcador debe unirse fácilmente a antígenos y anticuerpos,
encontrarse en estado puro a un precio razonable y tener un substrato cromogénico
conveniente y de fácil preparación. Las enzimas más utilizadas son fosfatas alcalina,
peroxidasa de rábano y ß-galactosidasa. (FERNANDEZ.N, 2015)
Las operaciones de marcado o conjugación, llevan implícitas dos etapas:
• Purificación de los anticuerpos a partir de un antisuero bruto mediante una precipitación
generalmente salina de las proteínas del antisuero. (CULTEK.A,2015)
• Marcado de los anticuerpos con la enzima mediante el uso de un agente puente que
normalmente suele ser el glutaraldehído o el del periodato sódico. (CULTEK.A,2015)
2.11.3.9.- VENTAJAS
Estable cuando se almacena y manipula adecuadamente.
Puede almacenarse a más de 4 grados centígrados durante más de 6 meses.
Disponible como enzima libre o como conjugado.
Bastante barata.
Tamaño pequeño.
Amplia variedad de sustratos comerciales disponibles. (CULTEK.A,2015)
25
2.11.3.10.- DESVENTAJAS
Incompatible con bastantes estabilizantes.
La peroxidasa y algunos metales interfieren en su actividad. (CULTEK.A,2015)
2.12.- EPIDEMIOLOGIA
La enfermedad neumocócica constituye una de las diez primeras causas de muerte en los
países desarrollados. (PARRA.D, 2015)
La infección neumocócica es la causa de 40.000 muertes anuales en los EE.UU, cifra
superior a la de cualquier otra enfermedad bacteriana prevenible con vacunas. Se estima que
el 15-30% de todas las neumonías son debidas al neumococo, siendo el agente etiológico más
frecuente de las neumonías de origen comunitario. (PARRA.D, 2015) Los niños pequeños de
edad entre los recién nacidos hasta los 10 años son los más susceptibles para contraer esta
bacteria y asi producir una alta tasa de mortalidad infantil. (PARRA.D, 2015)
La máxima incidencia de las infecciones neumocócicas tiene lugar en los niños menores
de 10 años por la incapacidad para responder a antígenos polisacáridos debido a la inmadurez
de su sistema inmune. ( PARRA.D, 2015)
2.12.1.- EPIDEMIOLOGIA MUNDAL
Según la Organización Mundial de la Salud (OMS), la neumonía provoca la muerte de dos
millones de niños cada año, más defunciones que las causadas por el sida, la malaria y el
sarampión juntos. (OMS. 2013).
2.11.2.- EPIDEMIOLOGIA DEL ECUADOR
Según el Ministerio de Salud Pública del Ecuador (MSP), de 14.001 defunciones por
causas de enfermedades agudas del tracto respiratorio entre los años 1.999-2003 se
diagnosticó que el resfriado común e influenza tiene un (0.93%) y el (90.25%) en neumonías.
26
TABLA N° 1. DEFUNCIONES TOTALES POR AÑO Y GRUPO DE EDAD, SEGÚN
CAUSA DE MUERTE NEUMONÍAS. ECUADOR 1999 A 2003
Fuente:https://aplicaciones.msp.gob.ec/salud/archivosdigitales/documentosDirecciones/dnn/a
rchivos/lineamientos%20t%c3%89cnicos%20operativos%20para%20la%20vacunaci%c3%9
3n%20contra%20la%20influenza%20estacional%20y%20neumococo%20de.pdf
CONSULTADO EN: 25/11/2015
La neumonía ha provocado la muerte de más de seis mil niños en el año 2003 como se
explica en la tabla N° 1, pues existe en nuestro país 36 serotipos de la bacteria neumococo
como se explica en la tabla N°2. (MSP. 2008).
Como se observa en dicha tabla en el año 2000 a 2005 se ha obtenido datos de 55
serotipos de neumococo y en el año 2011 se a erradicado 22 serotipos de el neumococo por lo
que se presenta 36 serotipos de estan dia a dia en personas portadoras transitando en en pais.
(MSP. 2008).
27
TABLA 2. DATOS DE SEROTIPOS DE NEUMOCOCO CORRESPONDIENTES A
ECUADOR (2005 – 2011)
Fuente: http://dspace.ucuenca.edu.ec/bitstream/123456789/22038/1/scopus%2071.pdf
CONSULTADO EN: 28/06/2015
2.13.- VACUNAS Y ANTIBIÓTICOS
Las vacunas se vienen utilizando en la prevención de las enfermedades neumocócicas
desde hace más de 30 años.
Dada la alta capacidad de reproducción de las bacterias del neumococo y a sus
mecanismos de resistencia a antibióticos, algunos niños pueden presentar resistencia a los
antibióticos, de modo que frente a una infección de 200.000 bacterias, un antibiótico puede
eliminar a 199.999 pero si queda una bacteria con capacidad de resistencia a ese antibiótico,
gracias a su maquinaria de replicación, en pocas horas habrá generado, nuevamente, millones
de bacterias resistentes a los antibióticos. (SALVADOR. F, 2014)
Saber cómo está constituida la capsula del neumococo es algo esencial para
desarrollar nuevas vacunas y antibióticos porque al conocer su estructura podemos diseñar
moléculas dirigidas directamente contra esta proteína (PcsB), esencial para la reproducción
del neumococo y evitar así que prolifere la infección de esta bacteria resistente.
(SALVADOR.F, 2014)
Existen disponibles 4 tipos de vacunas:
a) Vacuna elaborada a base de antígenos polisacáridos capsulares (23 valente).
28
b) Vacuna conjugada (7 valente).
c) Vacuna Conjugada (10 valente).
d) Vacuna Conjugada (13 valente). (BASTIDAZ.N, 2006)
2.13.1.- VACUNA NO CONJUGADA (23 VALENTE)
2.13.1.1.- INDICACIONES
La vacuna antineumocóccica no conjugada está indicada en niños a partir de los 2 años de
edad, que integran los grupos de alto riesgo de padecer enfermedad invasiva por
Streptococcus pneumoniae. (BASTIDAZ.N, 2006)
Mayores de 2 años con:
• Cardiopatía congénita
• Enfermedades pulmonares crónicas
• Diabetes mellitus
• VIH
• Leucemias
2.13.1.2.- INMUNIDAD
La eficacia protectora de la vacuna, se presenta a partir de los 15 días de aplicación. La
duración de la inmunidad se estima en 5 años, disminuyendo a 3 años en pacientes
inmunocomprometidos. Esto genera una respuesta inmunitaria; a través de anticuerpos tipo-
específicos que favorecen la fagocitosis y muerte de neumococos por células fagocitarias.
(BASTIDAZ.N, 2006)
2.13.1.3.- CONTRAINDICACIONES
Reacción alérgica grave (anafilaxia) algún componente de la vacuna. Está contraindicada
la revacunación antes de los 3 años de la dosis anterior. (BASTIDAZ.N, 2006)
29
2.13.2.- VACUNA CONJUGADA DE SIETE SEROTIPOS
Se han desarrollado vacunas utilizando la técnica de conjugar antígenos polisacáridos a
proteínas transportadoras. (BASTIDAZ.N, 2006)
Las proteínas utilizadas para este proceso son la toxina diftérica atenuada, membrana
externa de Neisseria meningitidis, toxoide diftérico o toxoide tetánico. (BASTIDAZ.N, 2006)
Estas vacunas han demostrado muy buena inmunidad para la mayoría de los serotipos
evaluados y eficacia protectora desde los 2 meses de edad, para infecciones invasivas
incluyendo neumonía y meningitis. Además, disminuyen la portación nasofaringea de
Streptococcus pneumoniae en los niños vacunados. Un conjugado 7-valente, que incluye los
serotipos polisacáridos 4, 6B, 9V, 14, 19F, 23F, fue aprobado en Estados Unidos y otros
países donde estos serotipos representan el 82 % de los causantes de infecciones invasivas.
Los niños recibieron una dosis a los 2, 4 y 6 meses y una dosis de refuerzo entre los 5 y 6
años de edad. La eficacia para prevenir infección invasiva fue mayor al 90 %, y del 6 % para
prevenir episodios de otitis media. (BASTIDAZ.N, 2006)
2.13.2.1.- INMUNIDAD
Se observó después de 3 o 4 dosis, una eficacia estimada frente a los serotipos específicos
de la vacuna del 94 al 97%. (BASTIDAZ.N, 2006)
2.13.2.2.- CONTRAINDICACIONES
Hipersensibilidad a algún componente de la vacuna. (BASTIDAZ.N, 2006)
2.13.3.- VACUNA ANTINEUMOCÓCICA CONJUGADA 13-VALENTE.
Esta vacuna ha incrementado los serotipos 1, 3, 5, 6A, 7F y 19A a la heptavalente.
(BERMUDEZ.O, 2008)
30
En relación a la decavalente, la inclusión del serotipo 6A, pero sobre todo el 3 y el 19A,
ofrecerá un gran beneficio especialmente en países en vías de desarrollo, donde el 19A tenga
un papel significativo. (BERMUDEZ.O, 2008)
El estudio de esta vacuna se basa en estudios de inmunidad y de no inferioridad frente a la
heptavalente, así como de seguridad y de compatibilidad con el resto de vacunas que se
administran en el calendario. Se comparó la inmunidad utilizando el test de ELISA para cada
serotipo de neumococo. (BERMUDEZ.O, 2008)Se comprobó una adecuada respuesta, con
elevación de los diferentes anticuerpos para los 13 serotipos incluidos.
Se comprobó una repuesta inmunitaria adecuada para todos los antígenos de la vacuna
combinada sin diferencias significativas entre los que recibieron la vacuna 13-valente.
(BERMUDEZ.O, 2008)
2.13.4.- VACUNA CONJUGADA DE 10 SEROTIPOS (PCV)
La vacuna pcv 10 fue introducida en el calendario básico de vacunación infantil 2010. La
vacuna PCV 10 es una vacuna conjugada frente a Streptococcus pneumoniae de los serotipos
1, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F y 23F. Está constituida por polisacáridos de los serotipos
neumocócicos mencionados unidos covalentemente (conjugados) con proteína D de
Haemophilus influenzae. (TROYA.H, 2014).
La vacuna PCV 10 está indicada para la inmunización activa frente a enfermedad
invasora, neumonía y otitis media aguda causada por S. pneumoniae en lactantes y niños a
partir de las 6 semanas hasta los 10 años de edad. (TROYA.H, 2014).
El perfil de seguridad favorable de la PCV7 está bien establecido. Varios estudios han
revelado que la PCV10 y la PCV13 tienen perfiles de seguridad similares a los de la PCV7 en
lactantes y niños pequeños. (TROYA.H, 2014).
Cuando se considere apropiada la inmunización con una PCV y la PPV23 en una persona
inmunodeficiente de edad más de 2 años, la PCV debe administrarse siempre antes para
evitar la inducción de hiporeactividad, dejando un intervalo de al menos 2 meses hasta la
administración de la PPV23 de refuerzo. (TROYA.H, 2014).
31
La OMS recomienda la inclusión de las PCV en los programas de inmunización infantil de
todo el mundo. En particular, los países con una alta mortalidad infantil (es decir, una tasa de
mortalidad de los menores de 8 años > 50 muertes/1000 nacimientos) deberían conceder gran
prioridad a la introducción de estas PCV con múltiples componentes. OMS. (2013).
32
CAPITULO III
METODOLOGIA
3.1.- TIPO DE INVESTIGACION
El diseño de este estudio es descriptivo de corte transversal, realizado en 91 niños de 7 a
9 años vacunados contra el neumococo en la escuela Plinio Robalino Cruz durante el 2014.
A los cuales se realizó encuestas y se extrajo 5 cc de sangre para obtener suero para
realizar determinación de IgG contra Neumococo, la muestra se trasladó conservando la
cadena de frio al laboratorio de Genética de la Facultad de Ciencias Médicas donde se
procesó la muestra mediante técnica de ELISA en el Equipo ELISYS Uno.
3.2.- NIVELES DE INVESTIGACION
Este estudio tendrá un nivel descriptivo de corte transversal.
3.3.- TECNICAS E INSTRUMENTOS DE INVESTIGACION
El procedimiento de toma de muestra y técnica ELISA se realizó aplicando normas
Bioéticas, controles de calidad, calibraciones para determinar el nivel de distancia de la
longitud focal del lente de dicho equipo en el Laboratorio de Genética de la Facultad de
Ciencias Médicas.
3.4.- UNIVERSO Y MUESTRA
3.4.1.- UNIVERSO
Para la realización de la investigación sobre “DETERMINACIÓN DE NIVELES DE
ANTICUERPOS IGG CONTRA NEUMOCOCO EN NIÑOS DE 7 A 9 AÑOS
VACUNADOS CONTRA NEUMOCOCO MEDIANTE TECNICA DE ELISA EN LA
ESCUELA PLINIO ROBALINO CRUZ DURANTE EN EL AÑO 2014.” se tomó como
universo a todos los niños de la edad de 7 a 9 años de la escuela Plinio Robalino Cruz
vacunados contra neumococo de la ciudad de Quito.
33
3.4.2.- MUESTREO
La muestra fue entre 91 niños y niñas.
3.4.2.1.- CRITERIOS DE INCLUSIÓN
Tener una edad entre 7 a 9 años
Ser estudiante de la escuela Plinio Robalino Cruz.
3.4.2.2.- CRITERIOS DE EXCLUSIÓN
Tener enfermedad viral aguda con alguna patología que origine inmunodepresión.
3.5.- TÉCNICA E INSTRUMENTO DE RECOLECCIÓN DE DATOS
3.5.1.- TECNICA
Se utilizó Kit comercial E-DG-96 para Neumococo IgG ELISA Inmunoensayo
enzimático para la determinación cuantitativa de anticuerpos anti neumococo en suero y
plasma humanos, Marca ZENTECH Kit ELISA (PCP).
3.5.2.- PROCEDIMIENTO DE LA TECNICA DE ELISA (INSERTO DEL KIT E-DG-
96 PARA NEUMOCOCO IgG PARA TÉCNICA DE ELISA)
1. Pipetee 100 µL de cada Estándar y muestra en cada pocillo respectivo de la Placa de 96
pocillos.
2. Cubra la placa con un folio adhesivo. Incube 60 min a 18-25 °C.
3. Remueva el folio adhesivo. Descargue la solución de incubación.
4. Lave la placa con 300 µL de Solución Buffer de Lavado diluida. Remueva el exceso de
solución golpeando cuidadosamente la placa invertida sobre una toalla de papel.
5. Pipetee 100 µL de Conjugado Enzimático en cada pocillo.
34
6. Cubra la placa con un nuevo folio adhesivo. Incube 30 min a 18-25 °C.
7. Remueva el folio adhesivo. Descargue la solución de incubación.
8. Lave la placa con 300 µL de Solución Buffer de Lavado diluida. Remueva el exceso de
solución golpeando cuidadosamente la placa invertida sobre una toalla de papel.
9. Para la adición del substrato y solución de parada utilice, de ser posible, una pipeta de 8
canales. La adición de substrato y solución de parada debe llevarse a cabo en intervalos de
tiempo iguales. Evite la formación de burbujas pipeteando con sobre volumen.
10. Pipetee 100 µL de Solución de Substrato TMB en cada pocillo.
11. Incube 20 min a 18-25 °C en la oscuridad (sin el folio adhesivo).
12. Detenga la reacción del substrato añadiendo 100 µL de Solución de Parada TMB en
cada pocillo.
13. Mezcle el contenido brevemente agitando cuidadosamente la placa. El color cambia de
azul a amarillo.
14. Mida la densidad óptica con un fotómetro a 450 nm (Longitud de onda de referencia:
600-650 nm) dentro de los 60 min de haber agregado la Solución de Parada.
3.6.- TIPOS DE ANÁLISIS
El análisis que se utilizará para la elaboración de esta investigación será de tipo
cuantitativo mediante estadística descriptiva con tablas, gráficos medidas de tendencia central
promedios, medianas, porcentajes y medidas de dispersión con desvíos estándar, análisis de
cuadrados.
3.7.- CONSIDERACIONES ÉTICAS
Para la toma de muestras de sangre se contó con consentimiento informado de ser
vacunados contra neumococo, bajo normas de manejo ético, moral y profesional.
35
CAPITULO VI
4.1.- RESULTADOS
TABLA Nº3 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN SEXO
Fuente: Base de datos según encuestas realizadas
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
GRÁFICO Nº 1: DISTRBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN SEXO
Fuente: Base de datos según encuestas realizadas
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
Se visualiza que el sexo más frecuente fue el masculino con 51,65% y femenino con
el 48,35, aunque no hubo diferencia estadísticamente significativa.
48,35
51,65
FEMENINO MASCULINO
SEXO
DISTRIBUCION DE NIÑOS SEGUN SEXO
SEXO FRECUENCIA PORCENTAJE
FEMENINO 44 48,35
MASCULINO 47 51,65
Total general 91 100,00
36
TABLA Nº4 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS DE 7 A 9 AÑOS DE EDAD
AÑOS FRECUENCIA PORCENTAJE
EDAD FRECUENCIA PORCENTAJE
7 7 7,69
8 63 69,23
9 21 23,08
Total general 91 100,00
Fuente: Base de datos según encuestas realizadas
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
GRÁFICO Nº2 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN EDAD DE 7 A 9 AÑOS
Fuente: Base de datos según encuestas realizadas
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
Un 69,23 % de Niños tienen 8 años siendo el grupo más frecuente seguido de los
de 9 años con el 23,08 % y seguido de los de 7 años con 7,69 %. No se encontró diferencia
estadísticamente significativa entre los grupos de edad.
7,69
69,23
23,08
0
10
20
30
40
50
60
70
80
7 8 9
PO
RC
ENTA
JE
AÑOS
DISTRIBUCION DE NIÑOS SEGUN EDAD
37
TABLA Nº5 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN GRADO DE ESCOLARIDAD
GRADO FRECUENCIA PORCENTAJE
CUARTO 63 69,23
QUINTO 21 23,08
TERCERO 7 7,69
Total general 91 100,00
Fuente: Base de datos según encuestas realizadas
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
GRÁFICO Nº3 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN GRADO DE ESCOLARIDAD
Fuente: Base de datos según encuestas realizadas
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
Se observa que el grado que más aportó a la muestra fue el cuarto de básica con el
69,23%, seguido de quinto con 23,08% de los niños y el tercero de basica con el 7.69%
siendo el grado que menos aportó.
69,23
23,08
7,69
0 10 20 30 40 50 60 70 80
CUARTO
QUINTO
TERCERO
DISTRIBUCION SEGUN GRADO QUE CURSAN LOS NIÑOS
38
TABLA Nº6 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN DIAGNOSTICO DE
ENFERMEDAD NEUMOCOCICA POR ENCUESTAS
Fuente: Base de datos según encuestas realizadas
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
GRÁFICO Nº 4 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN DIAGNOSTICO DE
ENFERMEDAD NEUMOCOCICA
Fuente: Base de datos según encuestas realizadas
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
Se reporta que el 96 % no tiene antecedente de infección de Neumococo pero el 4
% si, lo que demuestra que la bacteria está circulando en la ciudad de Quito.
96%
4%
DISTRIBUCION DE NIÑOS SEGUN DIAGNOSTICO DE ENFERMEDAD NEUMOCOCICA
NO
SI
DIAGNOSTICO
de
NEUMOCOCO
FRECUENCIA PORCENTAJE
NO 88 96
SI 3 4
Total general 91 100,00
39
TABLA Nº7 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS POR ANTECEDENTES FAMILIARES
DE ENFERMEDAD NEUMOCÓSICA MEDIANTE ENCUESTAS
ANTECEDENTE
FAMILIAR DE
ENFERMEDAD DE
NEUMOCOCICA
FRECUENCIA PORCENTAJE
NO 79 86,81
SI 12 13,19
Total general 91 100,00
Fuente: Base de datos según encuestas realizadas
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
GRÁFICO Nº 5 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS POR ANTECEDENTES FAMILIARES
DE ENFERMEDAD NEUMOCÓSICA MEDIANTE ENCUESTAS
Fuente: Base de datos según encuestas realizadas
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
Se reportó que el 13,19% de niños tenían antecedente familiar de enfermedad
neumococica, sea otitis media, neumonía o laringitis y 86,81 no reportaron antecedente
familiar.
86,81 13,19
NO SI PO
RC
ENTA
JE
ANTECEDENTE
DISTRIBUCION SEGUN ANTECEDENTE FAMILIAR DE ENFERMEDAD NEUMOCOCICA
EN NIÑOS
40
TABLA Nº8 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS CON APLICACIÓN DE VACUNA
CONTRA NEUMOCOCO
VACUNA CONTRA
EL NEUMOCOCO FRECUENCIA PORCENTAJE
SI 63 69,23
NO 28 30,77
Total general 91 100,00
Fuente: Base de datos según encuestas realizadas
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
GRÁFICO Nº 6 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS CON APLICACIÓN DE VACUNA
CONTRA NEUMOCOCO
Fuente: Base de datos según encuestas realizadas
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
Según la información dada por los padres se establece que el 69% fue vacunado
contra el neumococo y el 31 % no refiere haber sido vacunado contra esta bacteria.
69%
31%
DISTRIBUCION SEGUN TENER VACUNA CONTRA NEUMOCOCO EN NIÑOS
NO
SI
41
TABLA Nº9 NÚMERO DE DOSIS DE VACUNA EN NIÑOS CONTRA
NEUMOCOCO
NUMERO DE
DOSIS
FRECUENCIA PORCENTAJE
0 12 13,19
1 59 64,84
2 12 13,19
3 7 7,69
4 1 1,10
Total general 91 100,00
Fuente: Base de datos según encuestas realizadas
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
GRÁFICO Nº 7 NÚMERO DE DOSIS DE VACUNA EN NIÑOS CONTRA
NEUMOCOCO
Fuente: Base de datos según encuestas realizadas
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
Se observa que el 64,84 % de los niños recibieron por lo menos una dosis de vacuna
contra el neumococo y solo el 7,69 % alcanzaron tres dosis, lo cual indica que no se
64,84
13,19
13,19
7,69
1,10
0,00 10,00 20,00 30,00 40,00 50,00 60,00 70,00
1
0
2
3
4
DISTRIBUCION SEGUN NUMERO DE DOSIS DE VACUNA RECIBIDO POR NIÑOS
42
cumplieron con las dosis recomendadas por el esquema nacional de inmunizaciones del
Ecuador que requiere tener 4 dosis hasta los 6 años.
TABLA Nº 10 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN RESULTADO MEDIANTE LA
TECNICA DE ELISA PARA NEUMOCOCO IgG
RESULTADO DE IgG FRECUENCIA PORCENTAJE
Negativo 16 17,58
Positivo 75 82,42
Total general 91 100,00
Fuente: Base de datos por resultados del equipo de Elisa
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
GRÁFICO Nº 8 DISTRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN RESULTADO MEDIANTE LA
TECNICA DE ELISA PARA NEUMOCOCO IgG
Fuente: Base de datos por resultados del equipo de Elisa
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
El 82 % de los niños presentaron presencia de IgG contra neumococo, lo que nos indica un
buen nivel de respuesta inmune con producción de anticuerpos contra esta enfermedad.
18%
82%
DISTRIBUCION SEGUN RESULTADO DE IgG EN NIÑOS
negativo
positivo
43
TABLA Nº 11 DISTIRIBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN RESULTADO DE IgG Y
NUMERO DE DOSIS
Fuente: Base de datos por resultados del equipo de Elisa
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
GRÁFICO Nº 9 DISTIRBUCIÓN DE NIÑOS SEGÚN RESULTADO DE IgG Y
NUMERO DE DOSIS
20,3 33,3
0 0 0
79,7 66,7
100 100 100
0
20
40
60
80
100
0 1 2 3 4
PO
RC
ENTA
JE
NUMERO DE DOSIS
DISTRIBUCION SEGUN RESULTADO DE IgG EN NIÑOS y NUMERO DE DOSIS DE VACUNA
Negativo Positivo
INTER
PRET
ACIO
N
NUMERO DOSIS
Tota
l
gene
ral
0 1 2 3 4
FRE
CUE
NCI
A
POR
CEN
TAJ
E
FRE
CUE
NCI
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CEN
TAJ
E
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E
FRE
CUE
NCI
A
POR
CEN
TAJ
E
FRE
CUE
NCI
A
POR
CEN
TAJ
E
Negati
vo 12 20,3 4 33,3 0 0 0 0 0 0 14
Positiv
o 47 79,7 8 66,7 12 100 7 100 1 100 86
Total
general 59
100,
0 12
100,
0 12 100 7 100 1 100 100
44
Fuente: Base de datos por resultados del equipo de Elisa
Elaborado por: Doris Sandoval 2015
Se encontró que el 20,3 % no tienen presencia de IgG contra Neumococo de los que no
tuvieron vacuna y el 33,3 % no tienen presencia de IgG contra Neumococo de los que
tuvieron una dosis, con dos dosis o más sube a 100 % los niños que presentaron presencia
de anticuerpo IgG contra Neumococo.
4.2.- DISCUSIÓN
El presente trabajo describe los resultados obtenidos durante un estudio transversal
llevado a cabo en 91 niños de la Escuela Plinio Robalino Cruz, interesados a conocer la
protección que brinda la vacuna contra el neumococo; que es una enfermedad infecciosa lo
cual se visualiza que el sexo más frecuente fue el masculino con 51,65% y femenino con el
48,35; aunque no hubo diferencia estadísticamente significativa.
El 69,23 % de Niños tienen 8 años siendo el grupo de edad más frecuente seguido de los
de 9 años con el 23,08 % y por último los de 7 años con 7,69 %. No se encontró diferencia
estadísticamente significativa entre los grupos de edad y resultado de Elisa.
Se observa que el grado que más aporto a la muestra fue el cuarto de básica con el
69,23%, seguido de quinto con 23,08% de los niños y el tercero de básica con 7,69%.
Se reporta que el 96 % no tiene antecedente de infección de Neumococo pero el 4 % si lo
tiene, lo que demuestra que la bacteria está circulando en la ciudad de Quito. Según la
Asociación Española de Pediatría esta bacteria coloniza la nasofaringe del 25-80 % de los
niños menores de 10 años y causa dos formas de enfermedad: invasiva (meningitis, sepsis,
neumonía bacteriana y otras) y no invasiva, como la otitis media y la sinusitis. Asociación
Española de Pediatría (AEP, 2014)
Según la información dada por los padres se establece que el 69,23% fue vacunado contra
el neumococo y el 30,77 % no refiere haber sido vacunado contra esta bacteria.
Se observa que el 64,84 % de los niños recibieron por lo menos una dosis de vacuna
contra el neumococo y solo el 7,69 % alcanzaron tres dosis, lo cual indica que no se
cumplieron con las dosis recomendadas por el esquema nacional de inmunizaciones del
Ecuador que requiere tener 4 dosis hasta los 6 años.
45
Similar a lo reportado por la Secretaría de Salud de España que indica que después de tres
dosis todos los niños desarrollaron anticuerpos frente a los serotipos contenidos en la vacuna,
siendo efectiva en el 97% contra enfermedad invasiva frente a los serotipos incluidos en la
vacuna y en el 89% frente a la enfermedad causada por todos los serotipos, aun los no
incluidos en la vacuna. Frente a la neumonía y la otitis media aguda es menos efectiva. (AEP,
2014)
4.3.- CONCLUSIONES
El 82,42 % de los niños presentaron presencia de IgG contra neumococo, lo que nos
indica un buen nivel de respuesta inmune con producción de anticuerpos contra esta
enfermedad.
Se encontró que el 20,3 % no tienen presencia de IgG contra Neumococo (los que no
tuvieron vacuna) y el 33,3 % no tienen presencia de IgG contra Neumococo (los que
tuvieron una dosis), con dos dosis o más sube a 100 % los niños que presentaron presencia
de anticuerpo IgG contra Neumococo.
4.4.- RECOMENDACIÓNES
Realizar más investigaciones de seroconversión de IgG contra Neumococo en el resto del
país; ya que en el último año de investigación fue en el año 2003 como se observa en la tabla
N°1
Establecer la realización de estudios periódicos en la vigilancia seroepidemiológica de
Neumococo en el país; puesto que no hay muchos datos estadísticos en el Ecuador de casos
de neumococo; apenas existen 2 estudios uno en el año 2003 y otro en el año 2008. (MSP,
2008)
Concientizar mediante trípticos a los padres de familia, a vacunar a sus hijos con el
número de dosis necesarias para que sus hijos estén protegidos de cualquier contagio.
46
CAPITULO V
LA PROPUESTA
5.1.- JUSTIFICACION DEL ESTUDIO REALIZADO
Tomando en cuenta los resultados de este estudio que establecen que el 30.77% de niños
no fueron vacunados por ello no adquirieron inmunidad, el 64,84 solo adquirió solo una dosis
y el 17,58 no está inmunizado, el presente trabajo pretende dar a conocer que no se colocaron
las 4 dosis que es establecido por el Ministerio de Salud Pública, que el neumococo puede
ser una causa de muerte de niños en nuestro país así como también concientizar acerca de las
consecuencias que puede provocar el no vacunar responsablemente a sus niños.
5.2.- OBJETIVO
Concientizar a los padres de familia de la importancia de llevar a los niños a los centros de
salud y que sepan a cerca de las consecuencias que puede causar el patógeno del neumococo
y las causas que pueden producir cuando no son vacunados.
5.3.- BENEFICIARIOS
5.3.1.- DIRECTOS
NIÑOS.- Como primer beneficiario directo tenemos a los niños, debido a que se trata
de su salud y de los daños que puede producir al no ser inmunizados. Daños como
neumonía, endocarditis, meningitis neumocócica y hasta la muerte.
PADRES DE FAMILIA.- Los padres de familia son beneficiarios directos porque
ellos ven por la salud de sus hijos ya que con una buena información correcta
podemos evitar vistas inesperadas a los hospitales.
47
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epidemiologica&Itemid=50
ANEXOS
ANEXO N°1.- RECURSOS Y COSTOS
RECURSOS HUMANOS CANTIDAD
INVESTIGADOR 1
TUTOR 1
TOTAL 2
MATERIALES DE
OFICINA CANTIDAD
COSTO
POR
UNIDAD
COSTO
TOTAL
ENCUESTAS 100 0.02 2.00
CONCENTIMIENTO
INFORMADO 100 0.02 2.00
ESFEROGRAFICOS 4 0.45 1.80
51
CARPETAS 2 0.30 0.60
CORRECTOR 1 1.75 1.75
RESMA DE PAPEL 3 3.85 11.55
DERMOGRAFICOS 2 1.50 3.00
MATERIALES DE
LABORATORIO
ALGODÓN 1 10.69 10.69
ALCOHOL 1 LIBRO 5.27 5.27
CURITAS 100 1.58 3.16
TUBOS DE ENSAYO 10 ml 100 11.68 11.68
JERINGUILLAS 100 10.69 10.69
TORNIQUETE 1 1.50 1.50
KIT DE ELISA PARA
NEUMOCOCO 1 380.00 380.00
EPENDOR 100 5.00 5.00
MATERIALES
TECNOLOGICOS
INTERNET 40 HORAS 0.50 20.00
IMPRESORA 1 250.00 250.00
RECARGA DE CARTUCHO 2 3.75 7.50
TOTAL 728.19
52
ANEXO N°2.- FORMULARIO PARA PADRES DE FAMILIA
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
CATEDRA DE GENETICA E INMUNOLOGIA
Fecha……………………………..
FORMULARIO DE CONSENTIMIENTO INFORMADO DE TESIS
DETERMINACIÓN DE ANTICUERPOS IGG CONTRA NEUMOCOCO
Estamos invitando a usted y otras personas de su comunidad a participar de un proyecto de
investigación científica que permitirá entender mejor la enfermedad por NEUMOCOCO en
niños escolares y su prevención, para la cual llenará una encuesta y se le obtendrá una
muestra de sangre de 5 ml por técnica de venopunción.
La información obtenida es confidencial y anónima por ende en ningún lugar se le hará
público el nombre de los niños participantes, ni sus características ni los resultados obtenidos
en dicho estudio. Solo serán publicados datos generales para el estudio de la tesis.
Su participación será muy agradecida y contribuirá a la prevención contra el Neumococo. Si
usted acepta participar de este estudio, le agradeceremos que preste su conformidad por
escrito completando y firmando dicho Formulario.
53
Yo, ……………………………………………………………………………………………...
acepto que a mi hijo puedan hacer dicha toma de muestra de sangre de 5 cc y proveer
información general para el proyecto explicado arriba, de cuyos objetivos fui informado.
Nombre y apellido N° C.I Firma
ANEXO N°3.- HOJA DE ENCUESTA A LOS PADRES DE FAMILIA
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
CATEDRA DE GENETICA E INMUNOLOGIA
ENCUESTA DE TESIS DETERMINACIÓN DE NIVELES DE ANTICUERPOS IGG
CONTRA NEUMOCOCO MEDIANTE TÉCNICA DE ELISA EN EL
LABORATORIO DE GENETICA E INMUNOLOGIA UCE 2015.
FECHA: _______________________
NOMBRE: ____________________________ CODIGO: _________
EDAD: ___________
Marcar con una x la respuesta
Sexo: masculino____ femenino____
En qué grado está el niño 1___ 2___ 3___ 4___ 5___ 6___ 7___ 8___
Ha sido diagnosticado de padecer de infección de NEUMOCOCO: si___ no___
Ha padecido alguna vez de enfermedad de NEUMONIA: si___ no___
54
Cuantos dormitorios tiene en su casa sin incluir cocina ni sala: 1__ 2__ 3__ 4__ 5__
Con cuantas personas vive: 1___ 2___ 3___ 4___ 5___ o más ___
Ha recibido vacuna contra el NEUMOCOCO: si___ no___
Cuantas dosis ha recibido: 0___ 1___ 2___ 3___ 4___ 5___ o más ___
Resultado de prueba de Elisa para NEUMOCOCO IgG: Positivo___ Negativo___
55
ANEXO N°4