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GENETICA BACTERIANA

INDICE

Introducción……………………………………………………………………………………..3

El DNA como material genético………………………………………………………………..4

Cromosoma procariotico………………………………………………………………………..6

Mutación………………………………………………………………………………………...7

Recombinación Genética………………………………………………………………………12

Transformación…………………………………………………………………………………13

Transducción…………………………………………………………………………………...15

Conjugación……………………………………………………………………………………18

Recombinación en bacteriófagos………………………………………………………………20

Tecnología de DNA recombinante…………………………………………………………….21

Bibliografía……………………………………………………………………………………24

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INTRODUCCIÓN“Las bacterias son microorganismos con una extraordinaria capacidad de adaptación a diferentes condiciones ambientales. Para comprender la esencia de esta capacidad es importante conocer las bases de su genética, es decir como esta organizada la información genética, como realizan y regulan su expresión, que mecanismos de variación génica poseen. Entre otras, la capacidad infecciosa de las bacterias patógenas, radica en que poseen la información génica necesaria para colonizar los tejidos de un huésped, invadirlos y/o producir sustancias tóxicas que en definitiva causarán la enfermedad.

Por otro lado, el conocimiento del modo de funcionamiento genético de las bacterias, sumado al hecho de que estos microorganismos son de relativo fácil manejo en el laboratorio, que en general tienen un rápido crecimiento, ha llevado a que podamos utilizarlos para sintetizar productos útiles a la medicina, tanto para el diagnóstico como para la prevención y tratamiento de varias enfermedades. Estas posibilidades se han visto incrementadas a partir del desarrollo de la ingeniería genética y la disponibilidad de técnicas de biología molecular”

Laura Betancor, Pilar Gadea, Karina Flores

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EL ADN COMO MATERIAL GENETICO

El ácido desoxirribonucleico, frecuentemente abreviado ADN constituye el principal componente del material genético de la inmensa mayoría de los organismos, junto con el ARN, siendo el componente químico primario de los cromosomas y el material con el que los genes están codificados.

La función principal del ADN es mantener a través del código genético, la información genética necesaria para crear un ser vivo idéntico a aquel del que proviene (o casi similar, en el caso de mezclarse con otra cadena como es el caso de la reproducción sexual o de sufrir mutaciones). Las cadenas de polipeptídicas codificadas por el ADN pueden ser estructurales como las proteínas de los músculos, cartílagos, pelo, etc., bien funcionales como las de la hemoglobina o las innumerables enzimas del organismo. La función principal de la herencia es la especificación de las proteínas, siendo el ADN una especie de plano o receta para nuestras proteínas.

Cada nucleótido del ADN está compuesto de tres subunidades:

o Ácido fosfórico

De fórmula H3PO4. Cada nucleótido puede contener uno (monofosfato: AMP), dos (difosfato: ADP) tres (trifosfato: ATP) grupos de acido fosfórico

o Desoxirribosa

Es un monosacárido de 5 átomos de carbono (pentosa) derivado de la ribosa, que forma parte de la estructura de nucleótidos del ADN Su fórmula es C5 H10 O4 y contiene toda la información genética que será transferida así de generación en generación.

o Bases nitrogenadas

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Hay cuatro tipo de bases nitrogenadas en los nucleótidos del ADN: timina (T), citosina (C), guanina (G) y adenina (A).

Timina

La timina es una de las cinco bases nitrogenadas que forman parte de los ácidos nucleicos y en el código genético se representa con la letra T. La timina es una base orgánica nitrogenada de fórmula C5 H6 N2 O2 y es un compuesto cíclico derivado de la pirimidina (es una ‘base pirimidínica’)

Adenina

Es un compuesto orgánico nitrogenado de fórmula C5 H5 N5. Es un derivado de la purina (es una ‘base púrica’) en la que un hidrógeno ha sido sustituido por un grupo

amino (N H2) La adenina, junto con la timina, fue descubierta en 1885 por el bioquímico alemán Albrecht Kossel.

Guanina

La guanina es una de las cinco bases nitrogenadas que forman parte de los ácidos nucleicos y en el código genético se representa con la letra G. En el ADN la guanina siempre se empareja con la citosina mediante tres enlaces de hidrógeno.

citosina

la citosina siempre se empareja con la guanina mediante tres enlace de hidrógeno. Es un derivado pirimidínico, con un anillo aromático y un grupo

amino en posición 4 y un grupo cetónico en posición 2.

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Principios principaleso las bacterias se multiplican por división.o el ADN se duplica: cada una de las células hijas recibe una copia de la molécula; es

decir se forman clones de bacterias con la misma dotación genética.o las bacterias cambian sus características, es decir su fenotipo, de forma que

adquieren resistencia frente a los antibióticos.

CROMOSOMA PROCARIOTICO

Aunque en las bacterias no se observan estructuras con las distintas características morfológicas de los cromosomas eucarióticos, su genoma se encuentra organizado en cuerpos definidos.

El cromosoma procariota es una sola molécula circular de ADN contenida en una región definida del citoplasma, denominada nucleoide que ocupa aproximadamente un tercio del volumen de la célula, sin estar separado del mismo por una membrana. Este cromosoma es el elemento obligatorio del genoma, aunque es frecuente encontrar unidades de replicación autónomas llamadas plásmidos, que si se pierden, la bacteria sigue siendo viable.

También podemos referirnos como “cromosoma bacteriano”. Muchas bacterias,

poseen además ADN extra cromosómico, también circular cerrado, denominado ADN plasmídico, por estar contenido en estructuras llamadas “plásmidos”, que portan información génica para una variedad de funciones no esenciales para la célula en condiciones normales de crecimiento. En términos bioquímicos, la composición y estructura de los ácidos nucleícos bacterianos, es la misma que para cualquier célula.

El cromosoma bacteriano, es suficientemente largo como para formar varios lazos circulares, que como tales pueden a su vez superenrollarse, formando de esta manera una serie de dominios topológicos independientes. Esta organización en dominios, colabora al estado de compactación general del genoma bacteriano, e impide que con la ruptura de una hebra en un punto cualquiera del cromosoma, se pierda el total del superenrollamiento, manteniendo de esta forma la energía almacenada.Las bacterias poseen enzimas capaces de alterar la estructura del ADN modificando su superenrollamiento.

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Estas enzimas que se denominan genéricamente "topoisomerasas", actúan introduciendo o eliminando vueltas “superhelicoidales”, cumpliendo un importante rol en los procesos de replicación y transcripción del ADN. Por otra parte, es interesante mencionar que algunas de estas topoisomerasas, como la ADN girasa, son blanco de acción para los antibióticos del grupo de las quinolonas, como el ácido nalidíxico.

MUTACION

En el ADN

Una mutación es un cambio heredable en la secuencia de bases de los ácidos nucleícos que constituyen el genoma de un organismo, que ocurren en condiciones naturales con una muy baja frecuencia y se deben fundamentalmente a errores en los procesos de replicación del ADN.

Según el mecanismo que ha provocado el cambio en el material genético, se suele hablar de de varios tipos de mutaciones. Hay una tendencia actual a considerar como mutaciones en sentido estricto solamente las génicas, mientras que los otros tipos entrarían en el término de aberraciones cromosómicas.

Mutaciones puntuales

Son aquellas que implican un cambio en una única base, y pueden provocar que se cambie un aminoácido por otro en el producto proteico (mutación por cambio de sentido). Otras veces no se traducen en ningún cambio (mutación silenciosa), ya que como sabemos existe más de un codón para cada aminoácido. También puede suceder que el codón se convierta en una señal de terminación (mutación sin sentido) y en ese caso se traducir una proteína incompleta no funcional.

Mutaciones génicas o moleculares

Son las mutaciones que alteran la secuencia de nucleótidos del ADN. Entre las mutaciones puntuales podemos distinguir:

Mutación por sustitución de bases: Se producen al cambiar en una posición un par de bases por otro (son las bases nitrogenadas las que distinguen los nucleótidos de una cadena). Distinguimos dos tipos que se producen por diferentes mecanismos bioquímicos:

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o Mutaciones transicionales, cuando un par de bases es sustituido por su alternativa del mismo tipo. Las dos bases púricas son adenina (A) y guanina (G), y las dos pirimídicas son citosina (C) y timina (T). La sustitución de un par AT, por ejemplo, por un par GC, sería una transición.

o Mutaciones transversionales, cuando un par de bases es sustituida por otra del otro tipo. Por ejemplo, la

sustitución del par AT por TA o por CG.

Mutaciones de corrimiento estructural, cuando se añaden o se quitan pares de nucleótidos alterándose la longitud de la cadena. Si se añaden o quitan pares en un número que no sea múltiplo de tres (es decir si no se trata de un número exacto de codones), las consecuencias son especialmente graves, porque a partir de ese punto, y no sólo en él, toda la información queda alterada. Hay dos casos:

o Mutación por pérdida o deleción de nucleótidos: En la secuencia de nucleótidos se pierde uno y la cadena

se acorta en una unidad. o Mutación por inserción de nuevos nucleótidos: Dentro de la secuencia del ADN

se introducen nucleótidos adicionales, interpuestos entre los que ya había, alargándose correspondientemente la cadena.

Mutaciones cromosómicas

La sustitución de un nucleótido por otro no es el único tipo posible de mutación. Algunas veces se puede ganar o perder por completo un nucleótido. Además, es posible que se produzcan modificaciones más obvias o graves, o que se altere la propia forma y el número de los cromosomas. Una parte del cromosoma se puede separar, invertir y después unirse de nuevo al cromosoma en el mismo lugar. A esto se le llama inversión. Si el fragmento separado se une a un cromosoma distinto, o a un fragmento diferente del cromosoma original, el fenómeno se denomina translocación. Algunas veces se pierde un fragmento de un cromosoma que forma parte de una pareja de cromosomas homólogos, y este fragmento es adquirido por el otro. Entonces, se dice que uno presenta una deleción o deficiencia (dependiendo si el fragmento que se pierde es intersticial o terminal, respectivamente) y el otro una duplicación. Por lo general, las deficiencias son letales en la condición homocigótica, y con frecuencia las duplicaciones también lo son. Las inversiones y las translocaciones suelen ser más viables, aunque pueden asociarse con mutaciones en los genes cerca de los puntos donde los cromosomas se han roto. Es probable que la mayoría de estos reordenamientos cromosómicos sean la consecuencia de errores en el proceso de sobre cruzamiento.

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Mutaciones espontáneas o inducidas

Espontaneas:

Son aquellas que surgen normalmente como consecuencia de errores durante el proceso de replicación del ADN. Tales errores ocurren con una probabilidad de 10 ^ -7 en células haploides y 10 ^ -14 en diploides.

Inducidas:

Surgen como consecuencia de la exposición a mutágenos químicos o biológicos o a radiaciones.

Agentes mutagénicos físicos L.U.V. Radiaciones

Agentes mutagénicos químicos

1. Análogos de bases nitrogenadas: 5 bromo uracilo Timina 2 amino purina Adenina

2. Agentes que reaccionan con el ADN:

Agentes alquilantes: mostaza nitrogenada,oxido de etileno o nitroso de guanidina

Acido Nitroso: Amino Hidroxilo Hidroxilamina: GC AT

Agentes mutagénicos biológicos Plasmidos Bacteriófagos Elementos transponibles

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Plásmidos

Pequeñas moléculas de ADN circular Autorreplicativas No contienen genes esenciales Confieren habilidades útiles en circunstancias muy especificas (ej. Resistencia a

antibióticos)

Los plásmidos pueden clasificarse según distintos criterios, por ejemplo por su tamaño en pb, su número de copias en la bacteria o por el tipo de genes que porta (plásmidos de virulencia, plásmidos de resistencia a antibióticos, etc.) También pueden clasificarse en grupos de incompatibilidad. Se dice que dos plásmidos pertenecen al mismo grupo de incompatibilidad si son incapaces de coexistir en la misma célula bacteriana. Muchos plásmidos, en general los de mayor tamaño (que pueden portar hasta 50 o 100 genes), suelen ser capaces de transferirse de una bacteria a otra mediante un proceso llamado conjugación.

Por último, algunos plásmidos no se transfieren en absoluto. La adquisición de ADN plasmídico por una cepa bacteriana, puede realizarse por medios distintos a la conjugación,

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como transformación, transducción mediada por fagos o incorporación en el cromosoma, según veremos mas adelante.

Bacteriófagos

Son pequeñas moléculas de ADN o RNA, cápside proteínica en la forma libre, sin cápside dentro de las bacterias y se multiplica dentro de estas mismas.Fagos virulentos:Solo se propagan por ciclo líticoFagos temperados:Pueden propagarse por ciclo lítico o ciclo lisogénico

Elementos transponibles

Son segmentos de ADN, de cientos o miles de pb, nunca dependientes saltan dentro de la célula y con mucha frecuencia eligen el sitio al azar. Tienen extremos repetidos invertidos.contienen genes extra, que pueden codificar para muy distintas propiedades fenotípicas, encontrándose entre las mas importantes desde el punto de vista clínico, la resistencia a

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Bacteriofago

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antimicrobianos como ser el caso de la resistencia de alto nivel a la gentamicina encontrada en algunas cepas de Enterococcus sp. Son responsables también de mutaciones en el ADN.

Los elementos transponibles están ampliamente distribuidos en la naturaleza, tanto en virus, células procariotas y eucariotas. Existen 2 variedades de elementos transponibles:

RECOMBINACIÓN GENÉTICA

Es el proceso mediante el cual elementos genéticos contenidos en genomas de diferentes individuos se combinan, lo que permite que el individuo lleve a cabo alguna nueva función y que pueda dar como resultado una adaptación a los cambios en el medio ambiente. Este es un evento evolutivo importante y las células tienen mecanismos específicos que aseguran que dicha recombinación se efectúe. A diferencia de los eucariotas donde la recombinación genética ocurre en asociación a la reproducción sexual, en los procariotas comprende una serie de mecanismos independientes del evento de reproducción célula, mas adelantes se reanudara el tema, en la recombinación en bacteriófagos.

Los mecanismos de recombinación son llamados:

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Transformación Transducción Conjugación.

Recombinación Homóloga: Intercambio genético entre secuencias homologa de ADN de dos orígenes distintos. Las secuencias homologa de ADN tienen la misma secuencia o casi la misma, por lo tanto

puede ocurrir apareamiento de bases en una longitud extensa de las dos moléculas de ADN.

TRANSFORMACION

La transformación es el proceso por el cual ciertas bacterias llamadas competentes son capaces de incorporar ADN exógeno o extraño, proveniente de otras bacterias, que se encuentra libre en el medio. La virulencia del Streptococcus pneumoniae guarda relación con la presencia de cápsula polisacarídica a su alrededor. Las colonias con bordes rugosos (R) de S. pneumoniae, carecen de cápsula y no son letales al infectar ratones. La capacidad de captar el ADN exógeno, conservarlo en forma estable

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e interaccionar con él se denomina competencia. La competencia depende de la presencia de un sistema de captación de ADN específico asociado a membrana.

Si bien la mayoría de las bacterias no presentan capacidad natural para captar ADN, es posible inducir en el laboratorio la competencia, generando por distintos medios distorsiones en la membrana celular, por ejemplo mediante pulsos eléctricos (electroporación) o mediante cambios osmóticos y térmicos. Estos procedimientos son muy utilizados para introducir experimentalmente ADN extraño, por ejemplo un plásmido, en una bacteria y así “transformarla” para que adquiera un fenotipo de interés. Las bacterias también pueden ser transformadas con ADN viral, en cuyo caso el proceso se llama transfección.

TRANSFORMACION Y TRANSDUCCION

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TRANSDUCCION

La transducción es la transferencia de ADN de una bacteria a otra por intermedio de un bacteriófago.

No todos los ciclos virales son iguales, pudiendo destacar dos ciclos principales, el lisogénico y el lítico.

I. Respuesta lítica: el virus se va replicando, formando una serie de nuevos fagos a la vez, que usan a la bacteria como elemento parasitado, hasta que son capaces de parasitar ya por ellos mismos.

II. Respuesta lisogénica: en la que el genoma del fago se integra en el de la bacteria, de forma que puede permanecer en este estado estacionario bastante tiempo hasta

que se produzca el ciclo lítico.

Este proceso es similar a la integración o desintegración del factor F, aunque la diferencia es que en la transducción, la integración del profago siempre es en el mismo punto del cromosoma bacteriano, mientras que el factor F podía integrarse en más de un punto determinado.

Existen dos formas de transducción la especializada y la generalizada.

Transducción generalizada

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Transducción

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Cuando se va a replicar un fago, se produce la lisis de la bacteria para que los fagos puedan abandonar la bacteria. Esto provoca que pueda existir el intercambio de material genético entre bacterias sin que haya contacto celular. La formación de bacterias recombinantes a partir de las originales, puede darse gracias a la acción de un agente filtrable que debía transportar los marcadores entre bacterias.Este agente es un fago, y podemos destacar el fago P22. La degradación del cromosoma bacteriano durante el ciclo lítico, posibilita el que algunos trozos de este cromosoma (siempre que sean de la longitud correcta), sean empaquetados por error dentro de cápsidas víricas, lo que provocará que cuando este fago vuelva a infectar una bacteria, introduzca el fragmento erróneo de cromosoma. Así es como se produce la transducción. Este tipo de fagos se denomina fagos transductantes y los cuales, aunque son minoritarios (1/100000), cuando infectan nuevas bacterias, pueden producir la integración de los marcadores genéticos que llevan en el cromosoma bacteriano receptor y generar bacterias transductantes. Como en la conjugación, estas bacterias recombinantes se producen por doble entrecruzamiento entre el segmento de DNA dador y la región homóloga del cromosoma receptor.

Hablamos de transducción generalizada porque teóricamente puede transducirse cualquier fragmento del cromosoma bacteriano. Podemos seleccionar bacterias transductantes para uno de los marcadores utilizados y luego, analizarlos para la presencia o no de los otros marcadores de la bacteria donadora. Teniendo en cuenta que sólo puede transducirse un 2−2,5% del genoma bacteriano, los genes sólo podrán ser introducidos conjuntamente en la partícula transductante si se encuentran próximos en el cromosoma, de forma que podrán generarse bacterias cotranductantes, o bacterias transductantes para los dos caracteres en cuestión.

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Transducción especializada

Se da gracias a la acción de algunos fagos que se insertan en regiones concretas del cromosoma bacteriano, de forma que solamente pueden transducir genes que se encuentran alrededor de estos. Un ejemplo es el fago _, que se integra por recombinación en una región denominada att del fago y otra homóloga perteneciente al cromosoma bacteriano y situada entre los genes gal y bio.

En un momento determinado, una cepa bacteriana gal+ y bio+ puede verse lisogenizada por el fago lambda, e integrase en su cromosoma como un profago. Cuando se inicia el ciclo lítico, el fago se libera del cromosoma por entrecruzamiento entre las regiones att_/att. Esta escisión suele ser precisa, de forma que suele reconstruirse el fago, pero puede ocurrir que el punto de entrecruzamiento no se de entre las regiones comentadas, sino entre otras, originándose un DNA circular anormal. Puede entonces perderse una parte del cromosoma del fago, pero en cambio se gane un trozo del cromosoma bacteriano con gal+. Así obtendremos una progenie de fagos transductantes, que reciben el nombre de _dgal+, los cuales han perdido una parte de los genes esenciales para el establecimiento del ciclo lítico. Estos fagos necesitarán la ayuda de fagos nodefectuosos ayudantes, gracias a los cuales suplirán las funciones requeridas para replicarse activamente.

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CONJUGACION

La conjugación bacteriana es un proceso de transferencia de información genética desde una célula donadora a otra receptora, promovido por determinados tipos de plásmidos, que portan un conjunto de genes cuyos productos participan en el proceso, y que requiere contactos directos entre ambas, con intervención de estructuras superficiales especializadas y de funciones específicas (pili sexuales en los Gram negativos, y contacto íntimo en los Gram positivos). La capacidad de conjugación depende de la presencia en la bacteria de plásmidos conjugativos que contienen los genes necesarios para tal proceso.

Algunos de estos plásmidos se comportan como episomas, es decir, que pueden integrarse

en el cromosoma; en este caso, si se produce la conjugación, se puede transferir el propio

plásmido más un segmento adyacente del cromosoma, que a su vez podrá recombinarse con

secuencias homólogas del cromosoma del receptor, dando lugar a un cromosoma híbrido.

Procesopodemos usar los datos de la conjugación interrumpida para realizar un mapa con frecuencias de recombinación, usando la conjugación, primero tenemos que asegurarnos de que los marcadores han pasado al cromosoma receptor, teniendo en cuenta que gracias al gradiente de transferencia natural, pasan con mayor frecuencia y facilidad, aquellos marcadores que se encuentran más cerca del punto de entrada. Esto es debido a que el apareamiento entre las bacterias suele interrumpirse espontáneamente, de forma que la transferencia de los marcadores suele ocurrir en el orden en que estos están presentes en el DNA a partir del punto de inicio de la transferencia del mismo factor F.

Nosotros seleccionamos para un determinado marcador, teniendo que controlar qué marcadores pasan, pudiendo estimar que se produce un punto de entrecruzamiento hacia el último marcador. Podemos deducir el orden de los genes que entran gracias a las frecuencias relativas de recombinantes en cruzamientos recíprocos entre los genotipos parentales. Podemos encontrar procesos relacionados con la conjugación, tales como la sexducción, en el que se usan elementos F´ para crear diploides parciales. El F´ es un caso de factor F modificado, encontrándose en algunas cepas Hfr. Podemos obtener estirpes F´ con fragmentos muy grandes del cromosoma bacteriano.

Los factores F´ son más fáciles de recombinar porque poseen más puntos para recombinar.

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RECOMBINACIÓN EN BACTERIÓFAGOS

Si dos fagos infectan a una misma bacteria, se dan las condiciones propicias para poder obtener entrecruzamientos y recombinación en el genoma vírico. Este fenómeno suele denominarse coinfección.

Obtendremos en la progenie virus que poseerán el fenotipo parental y otros individuos que serán recombinantes. Cuando ocurre la coinfección, si los genomas no mantienen contacto, entonces no podrá darse entrecruzamiento. Podremos hacer mapas según los datos de recombinantes que obtengamos. Usaremos la relación de siempre, fagos recombinantes/número total de fagos. Para determinar esta frecuencia de recombinación debemos introducir las bacterias en un medio líquido, para aumentar la probabilidad de que los fagos entren en la bacteria. Una vez se produce la recombinación, debemos detectarlos, cosa que haremos cogiendo el lisado y poniéndolo en placas sólidas, para observar el fenotipo de la progenie. Observaremos placas de lisis o calvas (que es la zona donde el fago lisa). Cabe destacar una diferencia entre procariota y eucariota con el fago, que es que a veces encontramos coeficientes de coincidencia mayores de 1, porque tenemos interferencia negativa. Esto implica que el que se produzca un entrecruzamiento favorece el establecimiento de otro en otro lugar.

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TECNOLOGIA DEL DNA RECOMBINANTE

A principios de 1970 el DNA era la molécula mas difícil de analizar, era enormemente larga y químicamente monótona.Actualmente el DNA es más fácil de estudiar, es posible separar regiones determinadas y obtenerlas en cantidades prácticamente ilimitadas. Se puede determinar su secuencia de nucleótidos a una velocidad de varios cientos de nucleótidos al día.

Las técnicas utilizadas en el ADN recombinante

Utilización de nucleasas de restricción:Ruptura especifica de ADN, facilita enormemente los aislamientos y la manipulación de los genes individuales.

Secuenciación:La secuenciación rápida de todos los nucleótidos de fragmento purificado de ADN, hace posible determinar los límites precisos de un gen y la secuencia de aminoácidos que codifica

Hibridación de los ácidos nucleídos:Hace posible localizar secuencias determinadas de ADN o de RNA, con una gran exactitud y sensibilidad, utilizando la capacidad que tiene estas moléculas de unirse a secuencias complementarias de otros ácidos nucleídos.

Clonación de ADN:Se puede conseguir que un fragmento de ADN se integre en un elemento génico autoreplicante (plásmidos, virus) que habita en una bacteria de tal manera que de una molécula de ADN puede ser reproducida generando muchos miles de millones de copias idénticas.

Ingeniería génica: Se pueden alterar secuencias de ADN produciendo versiones modificadas de los genes, los cuales pueden reinsertar en células u organismos.

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Endonucleasas de restricción

Las endonucleasas de restricción son unos enzimas bacterianos que cortan internamente las moléculas de DNA de una forma específica que viene determinada por la secuencia de los pares de bases. Una de las primeras endonucleasas de restricción que se caracterizó fue de la bacteria Escherichia coli y se designó EcoRI

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Enzimas utilizadas en la tecnología de ADN recombinante

Endonucleasa de restricción de tipo IIADN ligasaADN polimerasa ITranscriptasa inversaPolinucleotido quinasaTransferasa terminalExonucleasa IIIExonucleasa de bacteriófago deltaFosfatasa alcalina

Algunos productos de la tecnología de ADN recombinante

Expresión de los genes clonadosMutagénesis dirigida.- alterando la secuencia de ADNClonación en plantas mediada por parásitos bacterianos.- enorme potencia en agricultura.Clonación en células animalesAnimales transgénicos

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BIBLIOGRAFIA

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Microbiología medica, Murray, Kobayashi, Pfuller, Rosenthal. Ed. Harcourt

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