Biología 3er año B y D – M. Amor

Trabajo Práctico Laboratorio N°1

Extracción de ADN de banana

IMPORTANTE

Leer la práctica antes de concurrir al laboratorio

Formar 8 grupos. Traer papel con nombres al ingresar al laboratorio será

designado el número de grupo

Definir las palabras del glosario y las que no conozcas

Determinar y escribir el objetivo de esta práctica

Reconocer todo el material a utilizar

Ver el video

Traer materiales no disponibles en el laboratorio

Imprimir Trabajo práctico

Al finalizar el práctico completar la actividad párrafos – pasos

Escribir conclusiones

Objetivo:

Materiales:

• 1 tazas, vaso de plástico (por grupo) o vaso de precipitado

• Licuadora

• Una cuchara para medir y mezclar

• 1 filtros de papel

• Agua destilada

• Shampoo de color claro o detergente

• 1 banana

• Sal de mesa

• 1 embudo

• 2 tubos de ensayo

• 1 conservadora con hielo para enfriar los tubos con alcohol

• 1 varilla de vidrio o 1 pipeta Pasteur

• etanol

• 1 gradilla

• 1 vidrio reloj

Biología 3er año B y D – M. Amor

Procedimiento para la extracción del ADN

Preparar una solución de banana procesada con sal, agua destilada y shampoo

(detergente) mediante los siguientes pasos:

1. En una licuadora, mezclar una banana por taza de agua destilada (250ml).

2. Licuar por 15-20 segundos, hasta que la solución se mezcle. Dejar reposar.

Preparado 1

3. En una vaso de precipitado, preparar una solución consistente en una

cucharadita de té de shampoo y dos pizcas de sal.

4. Agregar al shampoo 20 ml (4 cucharaditas) de agua destilada.

5. Disolver la sal y el shampoo revolviendo lentamente con la cuchara de plástico

evitando formar espuma. Preparado 2

6. A la solución del Preparado 2 , agregar tres cucharaditas de té de la mezcla de

banana del Preparado 1.

7. Mezclar la solución con la cuchara por 5-10 minutos.

8. Mientras uno de los miembros del grupo mezcla la solución de banana, otro

miembro pondrá el filtro dentro del embudo.

9. Volcar la mezcla obtenida en el paso 6, vertiéndola dentro del filtro y dejar que

la solución drene por algunos minutos hasta que sean 5 ml aproximadamente de

filtrado para testear, recoger en un tubo de ensayo

10. Tomar un tubo de ensayo con alcohol frío.

11. Verter el alcohol frio sobre los 5 ml del filtrado del paso 9. Tener mucho

cuidado de vertel el alcohol sobre las paredes del tubo o ayudado por una varilla

de vidrio.

12. Dejar que la solución repose por 2 a 3 minutos sin mover. Es importante no

batir el tubo de ensayo

.13. Cuando se obtienen buenos resultados, habrá suficiente ADN para levantar

con una varilla de vidrio (el ADN se enrolla a la varilla). El ADN tiene la apariencia

de mucus blanco y fibroso. Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta

justo debajo de la separación entre el alcohol y la muestra. Remover la varilla

Biología 3er año B y D – M. Amor

hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de

mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de

alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a su extremo con el aspecto de un

copo de algodón mojado

Relaciona los siguientes párrafos con los pasos seguidos en la experiencia

a) El ADN no es soluble en alcohol. Cuando el alcohol se agrega a la mezcla,

los componentes, excepto el ADN, permanecen en la solución mientras el

ADN precipita en la capa de alcohol y permite que no se degrade con el

aire.

b) El detergente disuelve los lípidos (moléculas grasas) y las proteínas de la

membrana celular, rompiendo las uniones que mantienen la integridad de la

misma. De esta forma se libera el contenido celular

c) La sal permite que el ADN precipite en una solución fría

de alcohol y que las cadenas de ADN no se corten.

d) El frio impide que las enzimas, nucleasas, degraden el ADN.

e) AL cortar se obtienen fragmentos de tejidos

f) Neutraliza las cargas negativas de los grupos fosfatos del ADN

g) Permite separar restos del vegetal, como membranas y proteínas, de

sustancias en solución

Glosario: ADN, Precipitar, Solución, Agua destilada, Etanol.

Video realizado por un grupo escolar, en forma casera

https://www.youtube.com/watch?v=vTAseSpQZmY

Paso…………………….

Paso…………………….

Paso…………………….

Paso…………………….

Paso…………………….

Paso…………………….

UNA VEZ FINALIZADA LA TAREA, LAVAR TODOS LOS MATERIALES, DEJARLOS DENTRO DEL

CANASTO BOCA ABAJO PARA QUE SE SEQUEN Y LIMPIAR LA MESADA