Taller: Respuesta Inmune, de lo Básico a lo Aplicado...procesos de diferenciación de las células...

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Taller: Respuesta Inmune, de lo Básico a lo Aplicado Profesores: Dra. Bertha Espinoza Gutiérrez, Dr. Rafael Saavedra Durán, Dra. Leonor Huerta, Dra. Goar Gevorgyan y M. en C. Ignacio Martínez Departamento de Inmunología, Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. Cada uno de los profesores dirige su propio laboratorio, con temas de investigación en diferentes áreas de la inmunología básica, estudiando principios fundamentales tales como los mecanismos celulares de protección contra patógenos, la activación de células por antígenos y los procesos de diferenciación de las células del sistema inmune. Así mismo, se estudian los mecanismos utilizados por algunos patógenos para evadir la respuesta inmune. Se considera la participación de los estudiantes en los temas de investigación específicos de cada laboratorio, además de su participación en actividades académicas propias del taller y del Depto. de Inmunología, lo que garantiza que los estudiantes obtengan un panorama integral de la investigación en inmunología. Debido a la diversidad de los temas de investigación los participantes tendrán la oportunidad de incursionar en otras áreas del conocimiento que apoyan la investigación inmunológica como son la biología molecular, la biología celular y la identificación y caracterización de macromoléculas, siempre en el contexto del estudio del sistema inmune. REQUISITOS - Asistir a una reunión informativa el viernes 25 de enero de 2013 en la nueva sede del Instituto de Investigaciones Biomédicas (junto al Jardín Botánico) a las 11.00 a.m en el aula A003 - Tomar un curso de Inmunología Básica durante el primer semestre del taller. - Asistir al laboratorio al menos 8 9 horas a la semana. El horario se acordará con el tutor. - Haber cursado o cursar las materias de Biología Molecular de la Célula I, II y III y la asignatura de Genética. - Tener un promedio mínimo de 8.0 - Mayores informes contactar a la coordinadora del Taller, Dra. Bertha Espinoza al tel. 56-22-89-44 y 43 - E-mail: [email protected] Cultivo celular: propagación y criopreservación de líneas celulares, purificación y cultivo de células humanas y de ratón, infección de células “in vitro”. Microscopía: de luz y de fluorescencia, análisis computarizado de imágenes. Infección experimental en ratón. Producción de anticuerpos monoclonales. Trypanosoma cruzi es un protozoario hemoflagelado que parasita al hombre causándole la enfermedad conocida como Enfermedad de Chagas. Esta enfermedad en su etapa crónica produce patologías cardiacas graves. Es una enfermedad incurable, para la cual no hay vacunas y las drogas disponibles tiene muchos efectos secundarios. Se estudian los siguientes aspectos: Interacción parásitocélula hospedera: Identificación de las moléculas que intervienen en los procesos de reconocimiento y entrada del parásito a la célula hospedera. Comportamiento del parásito en modelo murino : Patología, carga parasitaria y respuesta inmune. Interacción parásito- vector : Determinación de factores entomológicos y caracterización molecular de lña respuesta inmune del insecto. BIOLOGÍA DE Trypanozoma cruzi Trypanosoma cruzi en sangre. Insecto antes y después de alimentarse con sangre. METODOLOGÍAS FUSIÓN CELULAR: Consecuencias biológicas y relevancia en enfermedades infecciosas La fusión célula-célula es un proceso que da lugar a la adquisición de nuevas propiedades biológicas por parte de las células fusionadas. La fusión de células está implicada en el desarrollo embrionario, la reparación de tejidos, infecciones virales y la induccion de metástasis en algunas formas de cáncer. En la infección por el VIH, la formación de células multinucleadas por fusión celular es frecuente tanto “in vivo” como “in vitro” . Se conoce muy poco acerca de los mecanismos y el papel de la formación de sincicios en la patogénesis del SIDA. Células utilizadas: Lineas celulares y células sanguíneas tipo linfocito, monocito y macrófagos humanos transfectadas con proteínas virales (no infectadas con virus). Estudios morfológicos y funcionales: número y tipo de células fusionadas, composición celular de sincicios y heterocariontes, agentes estimuladores de la fusión, mecanismos, efecto sobre células circundantes, viabilidad, ciclo celular, capacidad proliferativa, proteínas de membrana, producción de factores solubles, efecto de citocinas, anticuerpos y agentes inhibidores. Sincicios producidos “in vitro” por fusión celular debida a las proteínas de fusión del VIH y análisis por citometría de flujo. Fusión 17% Técnicas inmunológicas básicas y avanzadas: detección de anticuerpos por medio de ELISA y Western blot, determinación de la actividad de linfocitos y macrófagos por ensayos de proliferación, apoptosis y producción de citocinas. Citometría de flujo. Técnicas bioquímicas: análisis del proteoma para identificar moléculas del insecto que intervienen en la maduración y diferenciación de parásitos. Toxoplasma gondii Y CÉLULAS T REGULADORAS Toxoplasma gondii es un protozoario intracelular obligatorio que puede infectar a los mamíferos y a las aves. Este parásito se encuentra en todo el mundo y se estima que aproximadamente una tercera parte de la población mundial se encuentra infectada. Las células T reguladoras (Treg) son las responsables de mantener la homeostasis del sistema inmune impidiendo la autoinmunidad. En el presente proyecto estamos determinando el papel de las células Tregs durante la infección con T. gondii en el ratón. Para tal fin se eliminan las células Treg CD4+ CD25+ e infectado después con quistes de de T. gondii por vía oral. Con los resultados obtenidos hasta el momento podemos concluir que en la cepa BALB/c las células Tregs son importantes en la protección durante la fase aguda de la infección por T. gondii mientras que en la cepa C57BL/6J parecen estar implicadas en la protección en la fase crónica. Quistes y ciclo de vida de Toxoplasma gondii Inmunoterapia En nuestro laboratorio trabajamos en el diseño de inmunoterapétuicos para la prevención y/o tratamiento de la Enfermedad de Alzheimer, la principal causa de demencia en los adultos mayores de 65 años. Evaluamos diferentes protocolos de inmunización en modelos animales de la enfermedad (ratones transgénicos y conejos alimentados con una dieta alta en colesterol).

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Taller: Respuesta Inmune, de lo Básico a lo AplicadoProfesores: Dra. Bertha Espinoza Gutiérrez, Dr. Rafael Saavedra Durán, Dra. Leonor Huerta, Dra. Goar Gevorgyan y

M. en C. Ignacio Martínez

Departamento de Inmunología, Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM.

Cada uno de los profesores dirige su propio laboratorio, con temas de investigación en diferentes áreas de la inmunología básica, estudiandoprincipios fundamentales tales como los mecanismos celulares de protección contra patógenos, la activación de células por antígenos y losprocesos de diferenciación de las células del sistema inmune. Así mismo, se estudian los mecanismos utilizados por algunos patógenos paraevadir la respuesta inmune. Se considera la participación de los estudiantes en los temas de investigación específicos de cada laboratorio,además de su participación en actividades académicas propias del taller y del Depto. de Inmunología, lo que garantiza que los estudiantesobtengan un panorama integral de la investigación en inmunología.

Debido a la diversidad de los temas de investigación los participantes tendrán la oportunidad de incursionar en otras áreas del conocimiento queapoyan la investigación inmunológica como son la biología molecular, la biología celular y la identificación y caracterización de macromoléculas,siempre en el contexto del estudio del sistema inmune.

REQUISITOS

- Asistir a una reunión informativa el viernes 25 de enero de 2013 en la nueva sede del Instituto de Investigaciones Biomédicas (junto al Jardín Botánico) a las 11.00 a.m en el aula A003

- Tomar un curso de Inmunología Básica durante el primer semestre del taller.

- Asistir al laboratorio al menos 8 – 9 horas a la semana. El horario se acordará con el tutor.- Haber cursado o cursar las materias de Biología Molecular de la Célula I, II y III y la asignatura de Genética. - Tener un promedio mínimo de 8.0

- Mayores informes contactar a la coordinadora del Taller, Dra. Bertha Espinoza al tel. 56-22-89-44 y 43

- E-mail: [email protected]

Cultivo celular: propagación y criopreservación de líneas

celulares, purificación y cultivo de células humanas y de ratón,

infección de células “in vitro”.

Microscopía: de luz y de fluorescencia, análisis computarizado

de imágenes.

Infección experimental en ratón. Producción de anticuerpos

monoclonales.

Trypanosoma cruzi es un protozoario hemoflagelado que parasita al hombre causándole laenfermedad conocida como Enfermedad de Chagas. Esta enfermedad en su etapa crónicaproduce patologías cardiacas graves. Es una enfermedad incurable, para la cual no hayvacunas y las drogas disponibles tiene muchos efectos secundarios. Se estudian los siguientesaspectos: Interacción parásito–célula hospedera: Identificación de las moléculas queintervienen en los procesos de reconocimiento y entrada del parásito a la célula hospedera.Comportamiento del parásito en modelo murino: Patología, carga parasitaria y respuestainmune. Interacción parásito- vector: Determinación de factores entomológicos ycaracterización molecular de lña respuesta inmune del insecto.

BIOLOGÍA DE Trypanozoma cruzi

Trypanosoma cruzi en sangre. Insecto antes y después de alimentarse con sangre.

METODOLOGÍAS

FUSIÓN CELULAR: Consecuencias biológicas y relevancia en enfermedades infecciosas

La fusión célula-célula es un proceso que da lugar a la adquisición de nuevas propiedadesbiológicas por parte de las células fusionadas. La fusión de células está implicada en eldesarrollo embrionario, la reparación de tejidos, infecciones virales y la induccion demetástasis en algunas formas de cáncer. En la infección por el VIH, la formación de célulasmultinucleadas por fusión celular es frecuente tanto “in vivo” como “in vitro”. Se conoce muypoco acerca de los mecanismos y el papel de la formación de sincicios en la patogénesis delSIDA.

Células utilizadas: Lineas celulares y células sanguíneas tipo linfocito, monocito y macrófagoshumanos transfectadas con proteínas virales (no infectadas con virus).

Estudios morfológicos y funcionales: número y tipo de células fusionadas, composicióncelular de sincicios y heterocariontes, agentes estimuladores de la fusión, mecanismos,efecto sobre células circundantes, viabilidad, ciclo celular, capacidad proliferativa, proteínasde membrana, producción de factores solubles, efecto de citocinas, anticuerpos y agentesinhibidores.

Sincicios producidos “in vitro” por fusión celular debida a las proteínas de fusión del VIH y análisis por citometría de flujo.

Fusión

17%

Técnicas inmunológicas básicas y avanzadas: detección de

anticuerpos por medio de ELISA y Western blot, determinación de la

actividad de linfocitos y macrófagos por ensayos de proliferación,

apoptosis y producción de citocinas.

Citometría de flujo.

Técnicas bioquímicas: análisis del proteoma para identificar

moléculas del insecto que intervienen en la maduración y

diferenciación de parásitos.

Toxoplasma gondii Y CÉLULAS T REGULADORAS

Toxoplasma gondii es un protozoario intracelular obligatorio que puedeinfectar a los mamíferos y a las aves. Este parásito se encuentra en todoel mundo y se estima que aproximadamente una tercera parte de lapoblación mundial se encuentra infectada.Las células T reguladoras (Treg) son las responsables de mantener lahomeostasis del sistema inmune impidiendo la autoinmunidad.En el presente proyecto estamos determinando el papel de las célulasTregs durante la infección con T. gondii en el ratón. Para tal fin seeliminan las células Treg CD4+ CD25+ e infectado después con quistesde de T. gondii por vía oral. Con los resultados obtenidos hasta elmomento podemos concluir que en la cepa BALB/c las células Tregs sonimportantes en la protección durante la fase aguda de la infección por T.gondii mientras que en la cepa C57BL/6J parecen estar implicadas en laprotección en la fase crónica.

Quistes y ciclo de vida de Toxoplasma gondii

Inmunoterapia

En nuestro laboratorio trabajamos en el diseño de inmunoterapétuicospara la prevención y/o tratamiento de la Enfermedad de Alzheimer, la principal causa de demencia en los adultos mayores de 65 años. Evaluamos diferentes protocolos de inmunización en modelos animales de la enfermedad (ratones transgénicos y conejos alimentados con una dieta alta en colesterol).