Sonda Molecular
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Sonda molecularEste artculo o seccin necesitareferenciasque aparezcan en unapublicacin acreditada, como revistas especializadas, monografas, prensa diaria o pginas de Internetfidedignas. Este aviso fue puesto el 13 de junio de 2011.Puedesaadirlaso avisaral autor principal del artculoen su pgina de discusin pegando:{{subst:Aviso referencias|Sonda molecular}} ~~~~
Unasondaes un fragmento deADN(o raramenteARN) de pequeo tamao (normalmente entre 100 y 1000bases) usado enbiologa molecularcomo herramienta para detectar la presencia de ADN o ARN de secuencia complementaria parecida o igual.En su uso, la sonda se une a la secuencia diana monocatenaria (ADN1c ARN) mediante un mecanismo dehibridacinque forma una estructura bicatenaria, una de las hebras pertenece a la sonda, y la otra a la secuencia diana. Esta unin se establece porque tanto la sonda como la diana tienen secuencias en parte o totalmente complementarias, formndosepares de basescomplementarias.ndice[ocultar] 1Marcaje 1.1Radiactividad 1.2Inmunolgico 1.3Southern y northernMarcaje[editar]Para visualizar las molculas diana se utiliza una sonda marcada, bienradiactivamente, bien mediante marcajeinmunolgico. Para el uso de ADN de doble cadena primeramente es necesariodesnaturalizarlomediante calor o en condiciones de altaalcalinidad. Esta sonda de cadena simple marcada se une a la diana; y los lugares de unin se detectan porque los mtodos de marcaje dejan una seal detectable mediantefotografa. En los mtodos ms avanzados se utilizan marcajes mediantefluorescenciaque emiten seales detectadas mediantelser, como el utilizado en laPCRa tiempo real.La sonda de ADN es una tcnica que permite cortar, repegar, multiplicar y seleccionar fragmentos de ADN.
Radiactividad[editar]Se puede marcar radiactivamente la sonda utilizado nucletidos que tengan alguno de sus tomos con un istopo radiactivo, normalmente32P, pero tambin es frecuente el uso detritio.Inmunolgico[editar]Aunque el marcaje radiactivo es muy sensible, conlleva el peligro asociado a la utilizacin de radiactividad. Para evitar este peligro se desarrollaron otros mtodos de marcaje basados enanticuerpos. Las sondas se marcan utilizando nucletidos que llevan unida una molcula (digoxigenina), a la solucin se le aaden anticuerpos especficos que se unen a esa molcula; y estos anticuerpos llevan asociado un compuestoluminiscenteofluorescente(Como elCDP-Star) que deja impronta fotogrfica.Southernynorthern[editar]Independientemente de la naturaleza de la sonda utilizada (ADN ARN), las hibridaciones efectuadas sobre cidos nucleicos inmovilizados en membranas oin situ, sern de tipoSoutherncuando se use ADN como diana a detectar y de tiponortherncuando la diana a detectar sea mayoritariamente de ARN. La sonda molecular se utiliza para la bsqueda de genes especficos, de tal forma que construye una molecula que hace las veces de detector de genesCategoras: ADN ARN Ingeniera gentica