Sincronización de celos en Vacas

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UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA SEDE REGIONAL CAMOAPA ASIGNATURA: GINECOLOGÍA Y OBSTETRICIA VETERINARIA TEMA: SINCRONIZACIÓN DE CELOS EN VACAS DOCENTE: Dr. Otoniel López López Noviembre del 2013 UNA Dr. Vet.

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Sincronizar, Progesterona, PGF2 Alfa

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UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA

SEDE REGIONAL CAMOAPA

ASIGNATURA: GINECOLOGÍA Y OBSTETRICIA VETERINARIA

TEMA: SINCRONIZACIÓN DE CELOS EN VACAS

DOCENTE: Dr. Otoniel López López

Noviembre del 2013

UNA

Dr. Vet.

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Sincronización de celos Es una técnica complementaria a la inseminación artificial que modifica los ciclos de un grupo de hembras, permitiendo que presenten un celo fértil en uno o unos días programados, pudiendo realizar inseminación artificial, si se quiere sin detección de celos a tiempo fijo. Historia: surge para solucionar las limitaciones de la IA principalmente, la detección de celos surge también para poder realizar transferencias de embriones. INTRODUCCIÓN La inseminación artificial (IA) es la técnica reproductiva de mayor importancia ya que se ha demostrado que es eficaz para mejorar los parámetros reproductivos en un hato bovino. Sin embargo, el problema asociado es la detección oportuna del estro, sobre todo durante el periodo posparto, lo que reduce el uso potencial de la IA en explotaciones ganaderas. La detección de estros es de relevancia cuando se utiliza la IA, ya que la identificación de las hembras que inician estro mejora substancialmente el porcentaje de concepción y, por lo tanto, la tasa de gestación. La sincronización de celos o estros (SE) es una de las técnicas más desarrolladas en la actualidad, se emplean medicamentos a base de productos hormonales para lograr que un grupo de hembras presenten estro en un periodo de 2 o 3 días (Fuentes, 2005). Sin embargo, aún existen limitantes de carácter práctico que generan bajos resultados como es el caso de tasas de gestación de 15 a 17% (Ax et al., 2005). Los protocolos de sincronización están basados en el efecto luteolítico de las prostaglandinas (PGF2α), en el efecto de los progestágenos para inhibir la conducta de estro, así como en el control folicular y lúteo con hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH) en combinación con PGF2α). Objetivos de la Sincronización de celos:

Acortar el periodo de servicios y por lo tanto de pariciones. Realizar IA sin detección de celos. Inducir la actividad sexual en animales en anestro. Realizar transferencia de embriones.

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Ventajas:

Facilita la implementación de la IA:

Reduce el tiempo de trabajo.

Elimina el problema de la detección de celo.

Se concentran las tareas de manejo.

Posibilita un mejor aprovechamiento del forraje.

Aumenta la tasa de parición y de destete.

Se aumentan los pesos promedios de terneros al destete.

Se obtienen lotes de terneros con pesos uniformes.

Reduce el intervalo entre partos: incrementa en n° de terneros por año y la producción de carne y leche.

Permite comprobar con exactitud si existe baja fertilidad en el rodeo causada por una mala detección de celos.

Estimula la reanudación de la actividad cíclica ovárica en las vacas que se encuentran en anestro post parto.

TABLA DE ABREVIATURAS

ABREVIATURA SIGNIFICADO BE Benzoato de estradiol CE Ciclo estral CIDR Dispositivo intravaginal de liberación lenta de progesterona CL Cuerpo lúteo E2 Estrógenos ECP Cipionato de estradiol FD Folículo dominante FOP Folículo ovárico persistente FSH Hormona folículo estimulante GnRH Hormona liberadora de gonadotropinas hCG Gonadotropina Coriónica Humana IA Inseminación artificial IATF Inseminación artificial a tiempo fijo LH Hormona luteinizante MGA Acetato de melengestrol MPA Acetato de medroxiprogesterona P4 Progesterona PGF2α Prostaglandina F2α PRID Dispositivo intravaginal de liberación lenta de progesterona SE Sincronización de estros o celos VE Valerato de estradiol

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Palabras claves:

1) Los progestágenos sintéticos: como el acetato de melengestrol (MGA), acetato de fluorogestona (FGA) y Norgestomet.

2) Estrógenos: Valerato de Estradiol, Benzoato de estradiol. 3) FSH: eCG (Gonadotropina coriónica equina) 4) LH: hCG (Gonadotropina coriónica humana) 5) GnRH: Hormona reguladora de las gonadotropinas (Acetato de Buserelina –

Sintética) y Gonadorelina. 6) Oxitocina sintética: Carbetocina 7) Prostaglandinas PGf2 alfa: Cloprostenol, alfaprostol, fenprostalene, luprostiol y

tiaprost

Control del ciclo Estral para la sincronización de celos. En general, podemos dividir a los protocolos de IATF (Inseminación Artificial a Tiempo Fijo, o es decir, IA con sincronización de celos) en aquellos que utilizan combinaciones de GnRH y prostaglandina PGF2α (PGF), llamados protocolos Ovsynch y los que utilizan dispositivos con progesterona (P4) y estradiol. Utilización de prostaglandinas: inducción de la lisis del CL por agentes luteotróficos que induce acortamiento de los ciclos, celo y ovulación fértil al descender los niveles de progesterona en plasma. Solo actúa en animales que se encuentran ciclando y con CL funcional. Regulan la duración de vida del CL. Tratamientos de sincronización de celos:

1) ¿A cuáles animales debemos implantar? a) Vacas multíparas entre segundo y quinto parto. b) Condición corporal mayor o igual a 2.5 y menor a 4 en la escala de 1 a 5. c) No presentar enfermedades clínicas, ni tener historial de distocias o trastornos durante el puerperio.

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Sincronización de Estros en Ganado Bovino La Sincronización de Celos es una de las herramientas con mayor desarrollo en la actualidad (Ramírez y Miller, 2004). Es un método hormonal que agrupa la presentación de estros en 2 o 3 d, con el objetivo de lograr mayor número de hembras gestantes. Sin embargo, existen limitantes de carácter práctico que generan bajos resultados como lo es tasa de gestación con rango de 15 a 17% (Ax et al., 2005). La detección de estros es de relevancia cuando se utiliza la IA, ya que la identificación oportuna de las hembras que entran a estro mejora el porcentaje de concepción y, por lo tanto, la tasa de gestación (Rabiee et al., 2005). La Sincronización de celos es útil para mejorar la detección, ya que se reduce de 21 a 5 días el tiempo de observación de la hembra (Fuentes, 2005). Métodos Utilizados para la Sincronización de Estros 1) Progestágenos (P4). (Progesterona) La administración puede ser en el alimento (Acetato de melengestrol) o a través de implantes: 1) Subcutáneos y, 2) Dispositivos intravaginales, por un periodo de 7 días Los cuales son los de mayor demanda, siendo CIDR-B el de uso más común, con 1.9 mg de P4 (Chenault et al., 2003). La P4 suprime la conducta estral y ovulación de los animales tratados, la presentación de estro es hasta el retiro del progestágeno. La regresión del CL depende de la fase del ciclo en la que se encuentre la hembra al momento de iniciar el tratamiento, la cual puede ocurrir en forma natural o por la administración de PGF2α (Hafez y Hafez, 2002). El uso de progestágenos, sincroniza el estro en corto tiempo, permitiendo establecer programas de inseminación artificial a tiempo fijo (IATF), la cual deberá realizarse de 48 a 52 h después de retirar la fuente de P4 (Patterson et al., 2003). Una ventaja adicional del uso de progestágenos, es que éstos pueden ser empleados para inducir y sincronizar el estro en vacas en anestro o vaquillas prepúberes, sin embargo, los resultados de fertilidad obtenidos con estos animales han sido muy variables (20 a 60%) (Lucy et al., 2001).

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Los progestágenos mejoran la respuesta al estro, además de inducir estro y ovulación en un porcentaje aceptable de hembras anéstricas (Fike et al., 1997). La aplicación intramuscular (IM) diaria de P4 fue el primer método de administración (Ulberg et al., 1951). Posteriormente se administraron acetato de melengestrol (MGA) o acetato de medroxiprogesterona (MPA) por vía oral, mezclándose con el alimento, enseguida por vía intravaginal usando esponjas (Sreenan, 1975). Finalmente se experimentó la administración a través de dispositivos intravaginales, por ejemplo: PRID y CIDR (Macmillan y Peterson, 1993) o a través de implantes subcutáneos en la oreja. Una de las desventajas de los dispositivos intravaginales es el porcentaje de pérdida del mismo durante el programa de sincronización. Ryan (1994), reportó 3.5% de pérdida menor para CIDR 1.9 g progesterona, en comparación con PRID Dispositivo interno de liberación de Progesterona 1,55 g de progesterona), DIB (1 g de progesterona), DISPOCEL (1 g de progesterona), etc. ). El tratamiento largo a base de P4 (14 o 16 d) puede reducir la fertilidad, lo que se relaciona con el desarrollo de folículos persistentes y a la reducción de la capacidad de competencia del ovocito (Revah y Butler, 1996). La administración de P4 en ausencia de CL resulta en el desarrollo de FOP porque incrementan los pulsos de LH, similar a la frecuencia de LH durante la fase folicular del CE (Kojima et al., 1992). De hecho, tratamientos cortos de P4 en los que se administra a través de dispositivos intravaginales o implantes en combinación con un agente luteolítico se han demostrado como exitosos en el ganado bovino (Lane et al., 2001).

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2) Prostaglandinas (PGF2α). La Sincronización de celos implica lograr la presentación simultánea del comportamiento del estro en un grupo de hembras tratadas para tal efecto, una de las drogas más utilizadas para este fin son las PGF2α. Esta hormona fue aislada por primera vez del semen humano, atribuyéndose a la próstata su elaboración, de donde deriva su nombre (Adeyemo et al., 1979). Actualmente se sabe que existen diferentes tipos, distintos en su composición química y funciones, según el órgano donde se producen (Lauderdale, 2002). En reproducción la más importante es la PGF2α secretada por el útero, que provoca la ruptura o lisis de una estructura presente normalmente en el ovario luego de la ovulación denominada CL, frenando la secreción de P4 al final de un CE no fértil (Ramírez y Miller, 2004). Este hecho marca el fin de un CE, que en el bovino tiene una duración de 21 d, y la reiniciación del siguiente (Bo et al., 2002). Lane et al. (2001), recomendaron la aplicación de PGF2α en tratamientos de duración corta en la fase temprana o media del CE, ya que la mayoría de animales requieren de la inducción de la luteolisis durante ésta fase. El mecanismo de acción de las PGF2α requiere necesariamente que el vientre tratado se encuentre ciclando, por lo que se considera el tratamiento más sencillo y aplicable para vaquillas de primer servicio y vacas sin cría al pie (Murugavel, 2003). La luteólisis que causan las PGF2α, es capaz de provocar el aborto en hembras gestantes, por lo que se recomienda realizar la palpación rectal de los vientres, previo al inicio de los tratamientos para identificar aquellos que se encuentren gestantes. La capacidad de PGF2α y sus análogos sintéticos, alfaprostol, cloprostenol, fenprostalene, luprostiol y tiaprost para causar la regresión de un CL maduro presente en el ovario y así, provocar la SE, ha sido demostrada en diversos estudios (Salverson et al., 2002). La capacidad de la prostaglandina exógena para causar la regresión del cuerpo lúteo (CL) presente en el ovario de hembras que están ciclando, además de la inducción de un estro fértil en un periodo de 3 a 5 d ha facilitado su uso en programas de sincronización (Salverson et al., 2002).

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3) Estrógenos (E2). La administración de E2 suprime el crecimiento del Folículo dominante inhibiendo la secreción de gonadotropinas, el efecto es más consistente cuando se combina con el uso de P4 (Bo et al., 2000). El término de una onda folicular resulta en la emergencia de otra, de 3 a 5 d después (Martínez et al., 1997) para asegurar el crecimiento del siguiente FD al término del tratamiento con P4 (García y Salaheddine, 2001). Existe evidencia respecto al efecto de los E2 exógenos sobre la dinámica folicular y en la SE que reportan cada uno de los productos disponibles a nivel comercial; valerato de estradiol (VE) (Bo et al., 1993), cipionato de estradiol (ECP) (Thundathil et al., 1997), benzoato de estradiol (BE) (Macmillan et al., 1993) y estradiol 17-β (Tributo et al., 1995).

Los cuales fueron administrados durante pocos días o después de la P4 a través de implantes o dispositivos intravaginales. En la mayoría de los estudios se han

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utilizado los E2 al principio del tratamiento con P4, diversas investigaciones posteriores recomendaron el uso de E2 al retiro o después del tratamiento de P4

(McDougall et al., 2001). Diversos autores reportan que la administración de BE de 24 a 72 h después de retirar el tratamiento de P4 (9 a 14 d), incrementa la expresión de estro y mejora la ovulación sin reducir el porcentaje de gestación en vacas posparto, ya que acelera o amplifica el pico preovulatorio de LH. La administración de E2 24 a 30 h después del tratamiento de P4 por 7 d no solo aumenta el número de vacas y vaquillas en estro, sino que mejoró también la sincronía del estro (Macmillan y Burke, 1996). Day et al. (2000), aplicaron 2 dosis de Benzoato de E, la primera inyección se aplicó al inicio del tratamiento de P4, para manipular el desarrollo folicular, y la segunda 48 h después del retiro del dispositivo de P4 y determinaron que es buena estrategia ya que mejora la precisión del estro sincronizado con tasa de gestación comparable al estro natural en vacas ciclando y en anestro.

Uso de E2 en Combinación con PGF2α. Diversas investigaciones se han desarrollado para avalar los resultados respecto al uso de BE en combinación con PGF2α para mejorar la sincronía del estro y la ovulación en vacas y vaquillas (Inskeep et al., 1980). Los E2 actúan en el SNC en forma sinérgica con la P4 para inducir estro en la hembra, el estradiol biológicamente activo es producido por el ovario a partir de precursores androgénicos y mediante retroalimentación tanto positiva como negativa sobre el hipotálamo.

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PROTOCOLOS DE SINCRONIZACIÓN DE CELOS:

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3. Sincronización de celos con GnRH y PGF2α: IATF sin utilización de progesterona. Método Ovsynch:

La primera GnRH se da para inducir la ovulación (simula la descarga fasica preovulatoria de LH y gonadotrofinas) y promover la formación de un nuevo cuerpo lúteo (CL) y una nueva onda folicular; es decir, para devolver a la vaca “al comienzo de ciclo estral”. La prostaglandina administrada 7 días después se utiliza para provocar la regresión del nuevo CL y la última GnRH se administra 48 horas después para inducir la ovulación del nuevo folículo.

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La inseminación a tiempo fijo (IATF) se lleva a cabo de 16 a 24 horas después; o antes del tiempo esperado de ovulación el cual es aproximadamente 24 a 34 horas después de la segunda GnRH en el protocolo ovsynch clásico.

Sincronización de celos con progestágenos combinados con otras hormonas: en general una de las hormonas complementarias debe ser luteolitica, a fin de acortar el tratamiento con P4 y no afectar la fertilidad del celo inducido. Norgestomet (P4) con PGF2α: para acortar el periodo de acción con P4, se completa con una dosis de PGF2α, que se aplica al retirar la P4 (9 días), asegurando la lisis de los CL funcionales. El % de preñez aumenta un 10% si la PGF2α, se aplica 48 hs antes de retirar el progestágeno. La IATF se realiza a las 48 hs de retirado el progestágeno en vaquillonas y 56 hs después en vacas.

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El Crestar® Consiste en un implante impregnado de Norgestomet 3 mg que es aplicado en forma subcutánea en la base de la oreja donde permanece de 9 a 10 días. En el momento de su aplicación son inyectados 5mg de valerato de estradiol y al ser retirado, 500 UI de eCG por vía intramuscular (Intervet 1995). El CIDR® Es un dispositivo intravaginal que contiene progesterona natural. La progesterona se libera por difusión desde una cápsula de silicón sobre una espina de nylon, la cual está adaptada para retener el dispositivo dentro de la vagina. La progesterona del dispositivo, se absorbe a través de la mucosa vaginal dando como resultado niveles en plasma suficientes para suprimir la liberación de LH y FSH del hipotálamo, previniendo el estro y la ovulación. Al remover el CIDR® la FSH y LH aumenta, lo que resulta en estro y ovulación del folículo dominante (Pfizer 2008).

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Transferencia de embriones La transferencia de embriones es una biotecnología aplicada para el incremento de la producción animal y la conservación e intercambio de material genético a nivel mundial. El trasplante de embriones es un método de reproducción artificial basado en la transferencia de embriones producidos por una hembra donante (madre genética superior) a hembras receptoras (madres portadoras) que lo gestan hasta su nacimiento.

Objetivos: incrementar la tasa reproductiva de las hembras genéticamente superiores.

Ventajas: I. La principal ventaja de esta técnica es el incremento de la capacidad

reproductora de una vaca o ternera valiosa; por sí sola, una vaca puede producir 6 o 7 terneros en su vida; la TE incrementa la eficiencia reproductiva a numerosos descendientes por año.

II. Disminuye el intervalo generacional, obteniendo un gran número de progenie de jóvenes donantes, lo cual acelera la evaluación y selección de los mejores ejemplares.

III. Método excelente para transportar genética. IV. Bajo riesgo de transmisión de enfermedades. V. Permite la reproducción de ejemplares infértiles debido a enfermedades,

traumas o edad avanzada. VI. Elección de sexos.

Limitantes: A. Alto costo. B. Personal capacitado. C. Instalaciones. D. Tasa de supervivencia de los embriones.

Para realizar el trasplante de embriones se deben tomar en consideración los siguientes factores: a) Anatomía, endocrinología y cambios genitales en el ciclo estral de la vaca. b) Detección oportuna del celo. c) Selección y manejo adecuado de las hembras donadoras. d) Técnicas de superovulación mediante tratamiento hormonal. e) Inseminación artificial. f) Desarrollo embrionario. g) Factores que causan fallas en la fertilización y la muerte embrionaria. h) Recolección de embriones. i) Preparación del material para la recolección y la transferencia.

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j) Selección, manejo y sincronización estral de las receptoras. k) Búsqueda, manejo y evaluación de los embriones obtenidos. l) Métodos de transferencia. m) Diagnóstico de gestación. n) Congelación y descongelación de embriones. o) Reglamentación de asociaciones de raza pura. Los pasos a contemplar son los siguientes: 1. Selección de la donante 2. Tratamiento de superovulación 3. Sincronización de las receptoras 4. Inseminación 5. Obtención de los embriones (lavado uterino) 6. Búsqueda y selección de los embriones 7. Transferencia en fresco 8. Congelación del embrión

Tratamiento de superovulacion: Tratamientos para rescatar de la atresia a un grupo de folículos y permitir que puedan ovular todos juntos. Consiste en la administración de FSH (hormona estimulante de los folículos) para inducir una ovulación múltiple. Después de un celo natural o inducido, se inicia el tratamiento entre los días 8º y 12º del ciclo estral (generalmente al 11º día), para evitar la presencia de un folículo dominante que eclipse el desarrollo de nuevos folículos. Debemos confirmar la presencia de un cuerpo lúteo activo.

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Día 0: progesterona + CIDR (dispositivo de aplicación intravaginal a base de progesterona)

-5-6-7: dosis crecientes de FSH a la mañana y tarde (cada 12 hs).

rula compacta). Sincronización de las receptoras Suelen utilizarse novillas como receptoras: tienen el tracto reproductivo virgen, menos problemas clínicos, menos alteraciones ováricas... se logran mejores porcentajes de gestación. Se utilizan 10 receptoras por donante ya que no todas responden igual que para la IA. Las receptoras ideales son las holstein. Hay dos métodos de sincronización:

horas antes que a la vaca donante (suelen responder peor a la prostaglandina).

Inseminación Hay que observar atentamente los signos del celo; a causa del tratamiento superovulatorio, no siempre muestran un celo evidente. El semen debe ser de primera calidad y de toros de primera categoría. Para asegurar la fertilización de los ovocitos, es conveniente efectuar tres inseminaciones artificiales, separadas 12 horas entre sí, y aplicar más semen del que se usa normalmente.

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Lavado uterino (Flushing) La recogida de los embriones se efectúa entre el 6º y el 8º día después de la I.A.; antes, puede haber embriones en el oviducto que no serán recuperados y después, los embriones rompen la zona pelúcida (barrera protectora muy importante) y empieza la implantación en el útero.

La técnica más comúnmente usada es el lavado uterino; se introduce un catéter por vía transcervical y se hacen diversos lavados con un medio especial (PBS; tampón fosfato salino con antibióticos y proteínas séricas). Sonda doble vía: por una se produce el lavado con una solución fosfatada del cuerno y por el otro se forma un globo, para que se fije la sonda en la curvatura mayor de los cuernos y evitar el reflujo. El líquido se aspira con la misma jeringa. Por gravedad: el lavado se hace de 9-10 veces por cuerno, primero se vacía y luego se recoge. Búsqueda y evaluación de los embriones El líquido recogido es filtrado y depositado en placas de Petri, los embriones se buscan al microscopio a 40x. Una vez encontrados, se transfieren a pequeños discos con medios de cultivo para ser lavados, identificados y clasificados. Búsqueda de los embriones Aspecto de los embriones Los embriones viables pueden seguir 3 caminos:

Transferencia del embrión Se seleccionarán las receptoras con un buen cuerpo lúteo, que asegure niveles elevados de progesterona, indispensables para la implantación del embrión y el mantenimiento de la gestación. El método es similar al de la inseminación artificial, con la diferencia que el cuello uterino se encuentra cerrado, por lo cual el operador debe extremar las precauciones al momento de atravesarlo. El embrión se deposita en el cuerno uterino ipsilateral al cuerpo lúteo activo. Congelación del embrión La congelación permite el mantenimiento de la viabilidad por largos periodos de tiempo, así como un transporte cómodo y seguro. Dos factores fundamentales causan la muerte celular durante la congelación/descongelación: la formación de cristales de hielo en el citoplasma y las fuertes concentraciones salinas. Para evitarlo, se usan crioprotectores, que deshidratan al embrión parcial y progresivamente.

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Los productos usados son el glicerol y el etilenglicol, siendo más usado éste último porque la descongelación es directa, mientras que el glicerol requiere un proceso en etapas. El embrión, después de ser inmerso en el medio crioprotector, es introducido en una pajuela, la cual será congelada. Al llegar a los -30ºC, la pajuela se introduce directamente en nitrógeno líquido. RESULTADOS La media obtenida por tratamiento, teniendo en cuenta una enorme variabilidad individual, es la siguiente: 8-12 embriones recuperados 6-7 embriones transferibles 4-5 gestaciones Se considera que:

La tasa de fertilidad es de un 65% para la transferencia en fresco y de un 60% para embriones congelados, aunque varían del 20 al 70%, dependiendo principalmente de la habilidad del técnico. Factores que inciden en la respuesta superovulatoria (SOV): Factores individuales: o Edad óptima: 2-5años. A partir de los 7-8 años disminuye la respuesta o Nivel de producción: >40 kg leche/día no se recomienda la SOV o Intervalo parto-SOV: mínimo 90-120 días o Patología: tanto sistémica como del aparato reproductor o Repetición del SOV: Esperar al menos 60 días entre 2 SOV. Si se superovula varias veces, tiende a disminuir la respuesta.

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Factores ligados al Hato:

I. Alimentación: equilibrada. Evitar excesos de grasa, proteína y carencias específicas.

II. Estrés: evitar cualquier factor estresante III. Ganadero: es muy importante que comprenda todo el proceso de SOV. La

detección de celos es básica para el éxito del programa.

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