Control de calidad interno

Control de calidad internoEn el Laboratorio Clnico

INDICE

Introduccin _____________________________________________________________________________ Pgina 2Marco Terico Control de Calidad Interno__________________________________________________________ Pgina 3 6 Marco Prctico Metodologa de Trabajo _____________________________________________________________Pgina 7

Protocolo de Trabajo ________________________________________________________________ Pgina 7Determinacin de Suero control cido rico ____________________________________________________________________________ Pgina

Albumina ______________________________________________________________________________ Pgina

Colesterol ______________________________________________________________________________ Pgina

Protena total __________________________________________________________________________ Pgina

Triglicridos ___________________________________________________________________________ PginaConclusin _________________________________________________________________________________ PginaBibliografa ________________________________________________________________________________ Pgina

INTRODUCCINEn la prctica diaria del laboratorio clnico es esencial y es prioridad otorgar prestaciones que cumplan con los requisitos de calidad, y realizar cambios, para establecer una mejora continua de sus procesos.La implementacin de un sistema d gestin de calidad, es importante porque permite el desarrollo de estrategias que pueden conducir a, la identificacin de problemas analticos, con lo cual pueden dirigirse esfuerzos para la resolucin, limitacin, eliminacin, o prevencin, de errores en beneficio del laboratorio, y de la comunidad que solicita el servicio. Segn lo anterior los laboratorios nacionales, se han adjuntado a un sistema de gestin de calidad, implementado por el Instituto de Salud Pblica de Chile, con la finalidad de mejorar la calidad del servicio, otorgado por estos centros hacia a sus usuarios, entregndoles a estos, la confianza de que los resultados entregados de sus respectivos anlisis biolgicos, sean certeros y fidedignos. Para ello, se han desarrollado herramientas tecnolgicas, como informticas, que permiten, planear y controlar la calidad analtica de los exmenes, asegurando la liberacin de resultados tiles, para el diagnstico clnico. Para cumplir tales objetivos, se establece tanto un control de Calidad Externo y un control de Calidad Interno en el laboratorio que tiene como objetivo, el seguimiento de los procesos pre analtico, analtico, y post analticos, para el aseguramiento de la calidad del laboratorio.- En el siguiente trabajo se abordara especficamente el control interno del laboratorio de la seccin de bioqumica clnica, aplicado en un marco prctico, el cual se bas en el uso de un material de control (hecho en el laboratorio) para la revisin de diferentes analitos, utilizados en el laboratorio de docencia de la Universidad Santo Toms.-

MARCO TERICOControl de calidad InternoEl propsito de control de calidad interno es evaluar el desempeo del sistema de medicin para liberar los resultados de las muestras de pacientes procesadas bajo las mimas condiciones de trabajo, permiten detectar desvos y variabilidad del sistema analtico para tomar acciones preventivas y apoyar en la mejora del desempeo.EL proceso ms importante que es evaluado dentro del control interno de calidad del laboratorio es la etapa analtica y una forma de poder evaluar el desempeo analtico de los procesos de medicin de analitos es el uso de materiales de control.Se define como material de control como un lquido o sustancia liofilizada de origen humano, animal o qumico que se usan para monitorear la calidad y consistencia del proceso analtico. El profesional debe seleccionar el material de control basado en las siguientes premisas: Que se parezcan lo ms posible a muestras de pacientes en cuanto a su reactividad con el sistema de medicin utilizado.

Se pueden elegir de primera opinin o de tercera opinin siendo los ltimos ms recomendables como alternativa.

Los controles pueden ser preparados por el propio laboratorio (pool de sueros normales), este debe realizarse con las precauciones de estabilidad y seguridad para el personal de laboratorio.

Se debe seleccionar considerando su estabilidad disponibilidad en cantidad para mantener un stock por al menos de 6 meses.

El nivel de concentracin del control en lo posible debe estar comprendido en el intervalo de referencia comprendido en el intervalo de referencia biolgica normal, bajo o sobre este.

Cuadro 1: Flujograma para el aseguramiento de la calidad analtica en el laboratorio clnico.

Para evaluar los resultados obtenidos desde los controles y analizarlos se cre un mtodo llamado carta control de Levey Jennings.Este es un mtodo grafico que muestra los resultados de los controles y como estos se comportan en un periodo de tiempo determinado.Los resultados se grafican secuencialmente en el tiempo (eje X), y el resultado de la medicin (eje Y).Para realizar la carta control de Levey Jennigs debemos:

Obtener con cada uno de los controles como mnimo 20 resultados en a lo menos 20 das distintos. Si se dispone de menos tiempo se pueden hacer dos determinaciones diarias por 10 das consecutivos y establecer una media y desviacin standard provisoria, hasta tener un mes de resultados.

Eliminar los valores extremos por la prueba de Dixon o Grubbs u otro que cumpla con el mismo objetivo.

Los resultados obtenidos durante la valoracin de material control permite calcular la media aritmtica y desviacin estndar para poder construir la carta control.

Media Es la suma de los alores de todas las observaciones dividida por el nmero de observaciones

Desviacin estndar Se define como la raz cuadrada de la varianza. Permite obtener una medida de la variabilidad de los datos expresados en la misma unidad de medida de la variable.

Coeficiente de variacinExpresa la desviacin estndar como porcentaje de la media.

Se sugiere calcular el coeficiente de variacin del mtodo al menos mensualmente para conocer su imprecisin y posterior anlisis de su desempeo.

En la carta control de Levey Jenning se deben aplicar las reglas de Westgard que son una serie de pautas de control usadas en el procedimiento de control de calidad para analizar la medicin del control (ver cuadro 2).-

Cuadro 2: Reglas de Westgard y el tipo de error al que se asocian

MARCO PRCTICOSe realiz en el laboratorio de docencia de la universidad Santo Tomas, el control de calidad en bioqumica clnica a travs de material de control, con el objetivo de poder aplicar los contenidos mencionados en este trabajo.

Metodologa de trabajoSe realiz un control de calidad interno en una corrida analtica de varios analitos utilizando un material de control realizado por el grupo de trabajo, se analiz los datos obtenidos a travs de la carta de control de Levy Jenning, y esta a su vez se le aplicaron las reglas de Westgard para poder ver el comportamiento de nuestro control en un periodo de tiempo.

Protocolo de trabajo

1. Obtencin de 10 muestras sanguneas de pacientes sanos y que se encontraban en ayuno completo. La obtencin de la muestra se realiza en tubos sin anticoagulante (tapa roja).

2. Posteriormente se procedi a centrifugar las muestras sanguneas con el objetivo de separar los elementos sanguneos y as obtener suero. La centrifugacin se realiza a 3500 rpm por 5 minutos.

3. Luego de centrifugar y obtener los sueros de cada muestra, se procedi a extraer el suero residual para colocarlo en un tubo khan. Los sueros ya separados se centrifugaron nuevamente para evitar el hallazgo de trazas de sangre total.

4. Ya obtenido los sueros, en un matraz estril se procedi a colocar todos los sueros para as lograr mezclarlos de manera homognea. Despus se dispuso a colocar de manera equitativo el suero en diferentes tubos, para que puedan ser utilizados como material de control.

5. Se utiliz este material de control para los siguientes analitos: Protenas totales, Albumina, cido rico, Colesterol y Triglicridos.

6. El anlisis bioqumico fue semi automatizado con la medicin a travs de mtodos espectrofotomtricos.

Se realizara el detalle de cada analito en la siguiente pauta:

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DETERMINACIN DE CIDO RICO PARA POOL DE SUERO CONTROLEs el principal producto del catabolismo de las bases pricas, excretado por la orina.se forma a partir de la xantina por accin de la xantino oxidasa se sintetiza principalmente en el hgado y el intestino delgado. El adulto tiene un contenido de 1,2 gramos en el organismo.

Mtodo Uricasa Enzimtico

Fundamento del Mtodo:El cido rico es oxidado por la accin de la uricasa, en alantoina y perxido de hidrgeno. En presencia de peroxidasa (POD) la mezcla de diclorofenol sulfonato (DCFS) y 4 aminoantipirina (4-AA) se condensan por accin del perxido de hidrgeno, formando una quinonaimina coloreada proporcional a la concentracin de cido rico en la muestra.

Concentracin del estndar: 8 mg/dl Absorbancia del estndar: 0,146 Longitud de onda: 546 nm Tipo de reaccin: Ascendente enzimtico Tiempo de incubacin: 5 minutos a 37C Rango de referencia: H: 3,5 7,2 mg/dl // M: 2,6 6 mg/dl

F.C = 54, 79 mg/dl

CIDO RICO

Lecturas AbsorbanciaConcentracin (FC x Abs)

L10,0935,09 mg/dl

L20,090 4,93 mg/dl

L30,103 5,64 mg/dl

L40,092 5,04 mg/dl

L5 0,0814,43 mg/dl

L60,0854,65 mg/dl

L70,0804,38 mg/dl

L80,0824,49 mg/dl

L90,074 4,05 mg/dl

L100,0733,99 mg/dl

L110,0824,49 mg/dl

L120,0874,76 mg/dl

L130,0884,82 mg/dl

L140,0894,89 mg/dl

L150,0935,09 mg/dl

L160,0744,05 mg/dl

L170,0764,16 mg/dl

L180,0713,89 mg/dl

L190,0794,32 mg/dl

L200,0864,71 mg/dl

Promedio

4,5935

Desviacin estndar:

0,45252828

Coeficiente de variacin:9,8514 %

Grafico de Levey Jennings:

CONCENTRACION g/L

LECTURA

SIMBOLOGIA

Promedio

1era desviacin estndar

2da desviacin estndar

Concentracin del pool de muestras

DETERMINACIN DE PROTENAS TOTALES PARA POOL DE SUERO CONTROL

Las protenas son compuestos orgnicos macromoleculares, ampliamente distribuidos en el organismo y esenciales para la vida. Actan como elementos estructurales y de transporte aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulacin, etc.

Mtodo Biuret Colorimtrico

Fundamento del Mtodo:Los enlaces peptdicos de las protenas reacciones con el in cprico, en medio alcalino, para dar un complejo color violeta, con mximo de absorcin a 540 nm, cuya intensidad es proporcional a la concentracin de protenas totales en la muestra.

Concentracin del estndar: 4,7 g/dl Absorbancia del estndar: 1,105 Longitud de onda: 540 nm Tipo de reaccin: Ascendente enzimtico Tiempo de incubacin: 5 minutos a 37C Rango de referencia: 6,1 7,9 g/dl

F.C = 4,25 g/dl

PROTENAS TOTALES

LecturasAbsorbanciaConcentracin(FC x Abs)

L11,646,97 g/dl

L21,576,6 g/dl

L31,596,75 g/dl

L41,576,7 g/dl

L51,586,72 g/dl

L6 1,636,92 g/dl

L7 1,626,88 g/dl

L8 1,64 6,97 g/dl

L9 1,546,54 g/dl

L10 1,486,2 g/dl

L11 1,626,8 g/dl

L12 1,556,5 g/dl

L13 1,556,58 g/dl

L14 1,657,0 g/dl

L15 1,426,0 g/dl

L16 1,456,16 g/dl

L17 1,536,5 g/dl

L18 1,516,4 g/dl

L19 1,576,6 g/dl

L20 1,536,5 g/dl

Promedio

6,6145

Desviacin estndar:

0,27955745

Coeficiente de variacin:4,2264 %

Grafico de Levey Jennings:CONCENTRACION g/L

LECTURA

SIMBOLOGIA

Promedio

1era desviacin estndar

2da desviacin estndar

Concentracin del pool de muestras

DETERMINACIN DE ALBUMINA PARA POOL DE SUERO CONTROL

La albmina srica constituye ms de la mitad de las protenas sanguneas y en una forma muy general representa aproximadamente el 50% de la actividad sinttica del hgado. La albmina humana es una pequea protena relativamente simtrica y que siendo la principal protena del plasma, es una molcula altamente soluble, que a pesar de su elevada carga negativa puede ligarse reversiblemente tanto con cationes como con aniones, lo que hace posible que su situacin plasmtica sea ptima para poder transportar o inactivar una serie de sustancias como metales pesados, drogas, tinturas, cidos grasos, hormonas y enzimas. Su principal indicacin se relaciona con su accin onctica como un excelente expansor del volumen plasmtico. Los efectos fisiolgicos de la propiedad de ligarse que tiene la albmina a otras sustancias, pueden ser determinantes para la utilizacin futura de esta protena.

Mtodo Biuret Colorimtrico

Fundamento del mtodoLa albmina reacciona especficamente sin separacin previa con la forma aninica de la 3,3',5,5'-tetrabromo cresolsulfon ftalena (BCF), en presencia de un exceso de colorante, en medio tamponado a pH 3,8. El aumento de absorbanciaa 625 nm respecto del Blanco de reactivo, es proporcional a la cantidad de albmina presente en la muestra. Concentracin del estndar: 2,7 g/dl Absorbancia del estndar:2,57 Longitud de onda: 625 nm Tipo de reaccin: Ascendente enzimtico Tiempo de incubacin: 10 minutos a T ambiente Rango de referencia: 3,5 4,8 g/dl

F.C = 1,05 g/dl

Albumina

LecturaAbsorbancia (ABS)Concentracin (FC x ABS)

L13,313,47

L23,353,81

L33,323,48

L43,303,46

L53,333,49

L63,413,58

L73,443,61

L83,393,55

L93,363,52

L103,433,6

L113,383,9

L123,853,7

L133,444,62

L143,373,5

L153,423,59

L163,433,6

L173,363,52

L183,453,62

L193,503,67

L203,523,69

Promedio

6,6145

Desviacin estndar:

0,27955745

Coeficiente de variacin:4,2264 %

Grafico de Levey Jennings: CONCENTRACION g/L

LECTURA

SIMBOLOGIA

Promedio

1era desviacin estndar

2da desviacin estndar

Concentracin del pool de muestras

DETERMINACIN DE COLESTEROLPARA POOL DE SUERO CONTROLEl colesterol es un lpido esteroide que se encuentra en los tejidos corporales y en plasma sanguneo. Las concentraciones mas altas de este lpido las encontramos en cerebro, hgado, medula espinal y pncreas. Esta constituido por cuatro carboxilos y posee una cabeza polar formada por el grupo OH y una porcin apolar. El colesterol lo obtenemos de forma exgena a travs de la dieta y de forma endgena sintetizndose en el hgado, es precursor de hormonas y sales biliares y es uno de los principales componentes estructurales de las membranas plasmticas de todas nuestras celulas a las que les otorga firmeza. La determinacin de colesterol en forma aislada en una muestra sangunea tiene utilidad diagnostica limitada, sin embargo, su concentracin ser indicativo de diversas condiciones clnicas y patolgicas. Se ha visto que el colesterol es uno de los factores contribuyentes en la formacin de ateromas dado que las complicaciones aterosclerticas prevalecen en individuos hipercolesterolemicos, lo cual es un riesgo latente a contraer enfermedad cardiaca coronaria y como consecuente un infarto agudo al miocardio.Metodo CHOD PAP colorimtrico Fundamento:El Colesterol es oxidado enzimticamente por la colesterol oxidasa (CHOD), previa hidrlisis enzimtica de los steres mediante una lipasa de origen fungal. El Agua oxigenada (H2O2) generada en la oxidacin permite la union oxidativa del fenol con la 4-aminofenazona (4-AF) mediante una reaccin catalizada por la peroxidasa (POD). El indicador final es la quinonimina roja. Concentracin del estndar: 200 mg/dl Absorbancia del estndar: 0,328 Longitud de onda: 505 nm Tipo de reaccin: Ascendente enzimtico Tiempo de incubacin: 5 minutos a 37C Rango de referencia: