CBTis 103Materia: bioquímica

Alumnos: Barrios Hernández Nadia

Gabriela Flores Gerardo Claudia

Marlene García Hernández Yadira Gómez Hernández lluvia

Jazmín Pérez Jerónimo Yazmin

Alejandra Rodríguez Peña Carlos

Emmanuel

Maestra: Elizabeth lima lima

Equipo: 3

Semestre: 6 grupo: AVQ

FUNDAMENTO

Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc.La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que al actuar sobre la proteína ladesordenan por destrucción de sus estructuras secundaria y terciaria.

RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS

Coagulación de proteínas

Para conseguir más volumen puede prepararse para toda la clase una dilución de clara de huevo en agua de forma que quede una mezcla aun espesa

Desarrollo:

-Colocar en un tubo de ensayo una pequeña

Cantidad de clara de huevo

-Añadir 5 gotas de acido acético

Observaciones:

Primero colocamos una pequeña cantidad de clara de huevo en el tubo, le agregamos 5 gotas de ácido acético con el cual no hubo cambio alguno. Después lo colocamos en el mechero por 2 minutos aproximadamente, vimos los cambios al momento de calentarse que la muestra se hacía más brumosa, como si tuviera una especie de masa dentro del tubo, eso era la coagulación de proteínas, el proceso fue muy rápido, otra observación fue que salió mucho humo y tenía un olor poco agradable y así concluí la práctica

Conclusiones:La coagulación de la proteína de huevo es la conversión del huevo líquido a un estado sólido o semi-sólido, generalmente acompañado de calentamiento, así como lo calentamos en el mechero y dio como resultado a una especie de masa, esto es la coagulación de proteínas.

-Calentar el tubo a la llama del mechero

Reacciones coloreadas

Reacción xantoproteica

Es debido a la formación de un compuesto aromático pintado de color amarillo, cuando las proteínas son tratadas con acido nítrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos bencénicos, especialmente en presencia de tirosina, una vez realizada la prueba se neutraliza con un alcalivina a un color anaranjado oscuro

Desarrollo:

-poner en el tubo de ensayo 2cc de solución problema clara de huevo

-Añadir 1cc de HNO3 concentrado

-calentar al baño maría a 100c - enfriar en agua fría

Observaciones:

AL añadir el ml de HNO3 concentrado a la clara de huevo dio como resultado la formación de un compuesto de color amarillo ; se calentó a baño maría a 100°C, se enfrió en agua fría y se añadió de gota a gota la disolución de sosa al 40% obteniéndose un color anaranjado oscuro.

Conclusión:

La reacción xantoproteica dio como resultado positivo, ya que al neutralizar la muestra con disolución de sosa al 40% viro a un color anaranjado oscuro, esto significa que la muestra es portadora de grupos benceticos, con presencia de tirosina.

Reacción de biuret

La producen las péptidos y las proteínas pero no los aminoácidos, ya que se debe a la presencia del en lance peptidico (-CO-NH-) que se destruye al liberarse los aminoácidos cuando una proteína se pone en contacto con un álcali concentrado se forma una sustancia compleja denominado biuret

Desarrollo:

Observaciones:

-Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3cc e albumina de huevo

-Añadir 2cc e solución e hidróxido sódico al 20%

-A continuación 4 o 5 gotas de solución de sulfato cúprico diluida al 1%

-Debe aparecer una solución violeta

Al agregar el hidróxido sódico al 20% solo se pudo observar que la llama de huevo se separaba una poco

Pero al agregar gota a gota solución de sulfato cúprico diluido al 1% cambiaba la llama de huevo a color violeta

Conclusión:

Se detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida.Está hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio (KNaC4H4O6·4H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con polipéptidos de cadena corta. El hidróxido de potasio no participa en la reacción, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar.

Reacción de los aminoácidos azufrados

Se pone de manifiesto por la formación de un precipitado de sulfuro de plomo. Se basa esta reacción en la separación mediante un álcali, del azufre de los aminoácidos, el al reaccionar con una solución de acetato de plomo forma el sulfuro de plomo

Desarrollo:

-Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3cc de albumina de huevo

-Añadir 2cc de solución de hidróxido sódico 20%

-Añadir 10gotas de solución de acetato de plomo al 5%

-Calentar el tubo hasta ebullición

Observaciones:

Se puso 3 ml de clara de huevo en tubo de ensayo y se le agrego 2 ml de NaOH al 20% y observamos que rápidamente se vio la separación de la clara del huevo y el NaOH y se le agrego 10 gotas de acetato de plomo y la separación que existía en la parte inferior que era el NaOH cambio a blanco se calentó a ebullición y rápidamente se observo el cambio de coloración a negro y con centro negro y nos dimos cuenta que había formado sulfuro de plomo

Conclusión:El cambio de color se debe a la formación de un precipitado de aspecto negruzco llamado sulfuro de plomo, el cual fue el producto final de la reacción de ovoalbúmina con hidróxido de sodio y acetato de plomo, de manera indirecta, es decir, mediante la obtención de un compuesto derivado de azufre, podemos comprobar que la ovoalbúmina contiene aminoácidos azufrados (cisteína o metionina).

Cuestionario

1.- ¿Cuáles son los Aminoácidos (fenolicos) que forman parte de las proteínas? (formulas)

R= Serina: OH-CH2-CH (NH2)-COOH

Treonina: OH-CH (CH3)-CH (NH2)-COOH

Tirosina: OH-C6H4-CH2-CH (NH2)-COOH

2.- ¿Cuáles son los agentes que ocasionan la desnaturalización de las proteínas?

R=agentes físicos: pH, temperatura

Agentes químicos: congelamiento, presión

Agentes mecánicos: alcohol, acetona

3.- ¿Qué le sucede a la proteína desnaturalizada?

R=La mayoría de las proteínas pierden su función biológica cuando están desnaturalizadas, por ejemplo, las enzimas pierden su actividad catalítica, porque los sustratos no pueden unirse más al centro activo, y porque los residuos del aminoácido implicados en la estabilización de los sustratos no están posicionados para hacerlo

4.- ¿Qué le pasa estructuralmente a las cadenas proteicas?

R=hay rompimiento de enlaces ya sean hidrofobicos, puentes de hidrogeno o iónicos

5.- Anota las reacciones de la práctica.

-Coagulación de proteínas:

Proteína con aminoácido aromatico+C2H4O2+CALOR=coagulación de proteínas

-Reacción xantoproteica:

-Reacción de biuret:

O=C(NH2)2 + O=C(NH2)2 ----> O=C(NH2)-NH-C(NH2)=O + NH3.

-Reacción de los aminoácidos azufrados:

cys+NaOH----->H2S (acido sulfhídrico) ---->Pb(CH3COO)2----->SPb (precipitado)

Donde: Cys= al aminoácido cisteína

Pb (CH3COO)2= acetato de plomo

SPb= sulfuro de plomo

Conclusión general:

Las proteínas son compuestos químicos muy complejos que se encuentran en todas las células vivas: en la sangre, en la leche, en los huevos En todas se encuentran un alto porcentaje de nitrógeno, así como de oxígeno, hidrógeno y carbono. En la mayor parte de ellas existe azufre, y en algunas fósforo y hierro. Posteriormente al reconocimiento de las proteínas  se precedió a la siguiente practica denominada desnaturalización de la proteína por pH extremos y temperatura, en este caso utilizamos una clara de huevo, la practica tuvo como objetivo Observar el comportamiento de una proteína globular hidrosoluble en diferentes medios para relacionar los cambios con su estructura molecular, al ser expuesto a temperaturas elevadas en el baño maría