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Principios Básicos De La Microbiología Médica
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Principios Básicos De La Microbiología Médica
María Constanza Blanco LópezEstudiante de Enfermería
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.1
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.2
Principios Básicos De La Microbiología Médica
Clasificación de las bacterias Morfología y pared celular Metabolismo y crecimiento Genética bacteriana Clasificación, estructura y replicación de virus Clasificación, estructura y multiplicación de hongos Clasificación, estructura y crecimiento de parásitos Flora microbiana comensal y patógena Esterilización, desinfección y antisepsia
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.3
Clasificación Fenotípica De Bacterias
Morfología celular y agrupación (al microscopio).
Tinción de gram (gram + y gram -). En cultivos: colonias, tipo de hemólisis. Perfil bioquímico (biotipificación). Reacciones ag-ac (serotipificación). Patrones de sensibilidad a los antimicrobianos. Fagotipificación.
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.4
Clasificación Analítica
Acidos grasos de la pared celular (micobacterias)
Lípidos celulares (bacterias y hongos) Proteínas celulares* Enzimas (electroforesis)** Con fines epidemiológicos
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.5
Clasificación Genotípica
Relación G-C (el más antiguo) Análisis de la secuencia del ácido nucleico Análisis de plasmidos Ribotipificación Fragmento de ADN cromosómico
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.6
Taxonomia
Clasificación Dominio Reino División (gracillicutes, firmicutes, tenericutes) Clase Orden (---ales)
Familia (----aceae) Género
Especie Cepa
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.7
Taxonomía
Nomenclatura científica Especie: se usa el sistema binomial de linneo Ejemplo: Staphylococcus aureus
Genero: Staphylococcus Staphylococcus sp (una especie) Staphylococcus spp (más de una especie)
Cepa: individuos que conforman la especie
Nombre vulgar no científico: “bacilo de la TBC” o bacilo de la TBC
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.8
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.9
Célula Procariota vs. Célula Eucariota
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.10
Microfotografia electrónica
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.11
Función De La Pared Celular
1.- Proteger a la bacteria de los cambios osmóticos del medio (lisis)
2.- Mantener la forma celular
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.12
Formas bacterianas
– Cocáceas (cocos)
– Bacilos
– Curvas (Espiroquetas, espirilos, treponemas, vibrios)
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.13
Según la Pared Celular las Bacterias se clasifican en:
Bacterias con pared celular– Gram positivas: Staphylococcus spp, Streptococcus spp,
Clostridium spp, Lactobacillus spp, Listeria spp,
Gardnerella spp,– Gram negativas: Escherichia coli, Salmonella spp,
Shigella spp, Proteus spp, Klebsiella spp, Enterobacter spp, Acinetobacter spp, Pseudomonas spp, Helicobacter spp,Bordetella spp, Haemophilus spp, Neisseria spp, Moraxella spp, Vibrio spp
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.14
…….Continuación
Bacterias con ácidos micólicos en su pared– Gram positivos: Corynebacterium spp,
Mycobacterium spp
Bacterias sin pared celular: Mycoplasma spp, Ureaplasma spp,
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.15
Tinción de Gram
Fijación
Cristal violeta
Lugol
Decoloración
Safranina
Grampositiva Gramnegativa
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.16
Tinción De Gram
1. Preparar los frotis bacterianos.
2. Teñir con cristal violeta 1min.
3. Lavar con abundante agua el exceso de colorante.
4. Cubrir con Lugol 1min.
5. Lavar con agua el exceso de Lugol.
6. Decolorar con alcohol-acetona o simplemente con alcohol hasta que la preparación deje de perder color (30seg).
7. Lavar con abundante agua para eliminar el resto de disolvente.
8. Teñir con safranina 1min.
9. Lavar con agua para eliminar el colorante de contraste.
10. Secar la preparación y agregar aceite inmersión.
11. Examinar al microscopio con objetivo 100x (lente inmersión).
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.17
Tinción de Gram
GRAM (+)
AZULES
GRAM (-)
ROJOS
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.18
Muestras Clinicas teñidas con tinción de Gram
Desgarro de paciente con neumonía: se observan diplococos Gram positivos y cocos en racimos y cadenas cortas
Secreción uretral de paciente masculino: Se observan diplococos reniformes Gram negativos intracelulares
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.19
Agrupaciones de cocáceas
Diplococos
Estafilococos
Estreptococos
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.20
Estructura de Gram positivas
-Membrana interna o citoplasmática
-Pared Celular
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.21
Estructura de Gram negativas
Pared Celular
Membrana interna
EndotoxinaAntígeno O
(se usa para
identificar estas
bacterias
(Membrana externa)
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.22
Lisozima
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.23
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.24
Membrana Citoplasmática: funciones
1.- Es la barrera osmótica de la célula2.- es sede de los sistemas de transporte activo y de las permeasas específicas3.- en la membrana (o junto a ella) se encuentran las enzimas y componentes del transporte de electrones y fosforilación oxidativa (recordemos que en eucariotas las mismas están en las mitocondrias)4.- allí se realiza la síntesis de componentes de la pared celular y de las cápsulas5.- lugar de excreción de exoenzimas6.- sede del centro de replicación del ADN7.- punto de anclaje de los flagelos
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.25
La membrana interna o citoplasmática de las bacterias hace lo mismo que la mitocondria: una fuerza protónica se mueve través de la membrana para generar energía, dar movimiento y permitir el transporte de nutrientes.
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.26
Formación del septum o tabique en la pared celular para dar dos células hijas
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.27
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.28
Acción de β-lactámicos sobre la pared celular de bacterias
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.29
Flagelos bacterianos Movilidad Visibles al microscopio óptico
solo con tinciones especiales Naturaleza proteica (flagelina) Antígeno H (se usa para
identificar bacterias móviles) Monótricos, perítricos,
lofótricos, anfítricos.
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.30
Patrón de flagelación
Monotricas: un solo flagelo Lofotricas: dos o más flagelos en penacho, desde
uno de los polos Anfitricas: dos penachos, uno en cada polo Peritricas: flagelos alrededor del cuerpo celular Inserción lateral
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.31
Bacterias perítricasBacterias lofótricas
Pseudomonas spp Escherichia coli
Bacterias móviles
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.32
Apéndices largos:flagelos
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.33
Natación aleatoria y quimiotaxis en E. coli
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.34
Apéndices cortos Fimbrias:Adherencia a tejidosPili Sexual: Transferencia de material genético
Pili F ó sexual
Fimbrias
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.35
Cápsula bacteriana
Estrechamente adheridas a la superficie bacteriana
Son rígidas y altamente hidratadas, dificil de teñir
Antifagocitarias Interfieren la acción del
complemento Son antigénicos (Ag K)Tinción negativa
realizada con tinta china (la cápsula no se tiñe)
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.36
Evasión de una bacteria patógena capsulada del sistema complemento
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.37
Glicocalix
• Es flexible
• Se une en forma laxa a las bacterias
• Forma Biofilms (biopelículas)
• Se favorece la formación de microcolonias.
• Adherencia a superficies inertes, p.e. material protésico y catéteres.
• protege a las bacterias de antimicrobianos, anticuerpos y fagocitosis
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.38
Biofilms en un dispositivo intrauterino (DIU)
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.39
Algunas bacterias forman una endospora cuando se encuentran en condiciones adversas
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.40
Observación de la endospora al microscopio óptico
Endospora refringente
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.41
Las endosporas no se tiñen con la Tinción de Gram
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.42
Generalidades de las endosporas
Producidas por ciertas bacterias Gram-positivas: Bacillus spp, Clostridium spp
Cuando la bacteria detecta bajos niveles de nutrientes (C, N, P) desencadena el proceso de esporulación (medio adverso)
La espora se forma dentro de la célula vegetativa (endospora) La endospora es altamente deshidratada Al final de la esporulación, la célula madre se autolisa, y la
espora queda libre. No se reproduce solo permanece en u estado de dormancia (latencia) al igual que las semillas de vegetales
La endospora soporta larguísimos periodos (años) en ausencia de nutrientes, falta de agua, radiaciones UV y temperaturas cercanas a la ebullición del agua, desinfectantes.
En condiciones adecuadas, la espora germina y se transforma en una célula vegetativa
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.43
Célula vegetativa y espora
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.44
La endospora a microscopio electrónico: partes principales
Región central o Core
pared
corteza
cubiertas
exosporio
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.45
La endospora cuando encuentra condiciones favorables ( Factores mecanicos, el pH, el calor, agua y nutrientes ) puede germinar, liberando la forma vegetativa.
Restos de la espora
Forma vegetativa
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.46
Requerimientos para la multiplicación bacteriana
Fuentes de C, N, S, P. Fuentes para obtener la energía,
por ej. Azúcares. Agua Minerales y vitaminas
Las bacterias obtienen estos nutrientes desde los tejidos humanos o desde los medios de cultivo usados en el laboratorio de Microbiología
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.47
Otros Requerimientos: oxígeno
a) Bacterias aerobias
b) Bacterias anaerobias
d) Bacterias microaerófilas
e) Bacterias anaerobias facultativas
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.48
Otros Requerimientos: temperatura
Bacterias psicrófilas crecen a temperaturas del refrigerador
Bacterias mesófilas crecen a temperaturas del cuerpo humano ( alrededor de los 37ºC)
Bacterias termófilas crecen a temperaturas sobre los 55ºC
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.49
Otros conceptos sobre nutrición y metabolismo
Heterótrofos: son los microorganismos que utilizan compuestos orgánicos como fuente de carbono y de energía
Fermentación: proceso anaeróbico que realizan algunos microorganismos a partir del piruvato para generar diversos productos como alcohol, CO2 ,ácidos orgánicos, etc.
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.50
Tiempo generacional (tg) es el tiempo que demora una bacteria en dividirse para dar dos bacterias hijas de igual tamaño. Por ejemplo 15 a 20 minutos
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.51
Metabolismo y Crecimiento de las bacterias
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.52
1.- Fase de latencia
2.- (..2,4,8,16,32,64…2n ) Los tg son los más cortos. Las bacterias son más susceptibles a los ATB y desinfectantes
3 4
Fases de la Curva de Crecimiento bacteriano
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.53
Crecimiento bacteriano en medios de cultivo líquidos y sólidos
Turbidez en los caldos
Colonias en los agares
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.54
Genética bacteriana
ADN cromosomal (circular de doble hebra unido a los mesosomas, super-enrrollado, susceptible a la acción de las quinolonas).
ADN extracromosomales: plasmidios, transposones, bacteriofagos.Codifican factores de virulencia, resistencia antibiotica. Se usan como Metabolizar sustratos.
Ingeniería genética. Vectores de clonación. Tecnología del ADN recombinante.
Mutaciones: cambios en la secuencia de bases del ADN Mecanismos de reparación Las mutaciones pueden ser espontáneas o inducidas por agentes
mutagénicos) Agentes mutagénicos (UV, radiaciones ionizantes, análogos de bases,
químicos, etc)
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.55
PLASMIDOS Y FAGOS
PLASMIDIO (ADN) BACTERIOFAGO (ADN o ARN
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.56
Mecanismos de intercambio genético
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.57
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.58
Características de los virus
Agentes infecciosos no celulares Nucleoproteínas: compuestos por proteínas y ácidos nucleicos
(ADN o ARN) Genoma viral codifica para proteínas estructurales y no
estructurales No tienen metabolismo intrínseco Se replican sólo dentro de células (parásitos intracelulares) A menudo inhiben la síntesis de macromoléculas del huésped.
Usa la maquinaria enzimática de la célula hospedera Tamaño pequeño (entre 30 y 300 nm)
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.59
Estructura viral
Acido nucleico: DNA o RNA (proteínas estructurales y funcionales). Una o doble hebra. A veces segmentado
Cápside: cubierta proteica formada por subunidades: capsómeros. Protección y antigénica
Envoltura: bicapa lipídica + glicoproteínas virales
nucleocápside
virión
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.60
Estructura VIH
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.61
Estructura virus influenza
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.62
Clasificación de los virus
Tipo ácido nucleico:– Virus ADN– Virus ARN
Número de hebras de ácido nucleico/lineal o circular:– De hebra única (ss) (monocatenario)– De doble hebra (ds) (bicatenario)
Polaridad del genoma:– Genoma positivo (sentido del ARN mensajero)– Genoma negativo
Simetría de la nucleocápside:– Icosahédrico– Helicoidal– Complejo
Presencia o no de envoltura:– Desnudos– Envueltos
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.63
Nomenclatura viral
Familias: ..viridae– Adenoviridae– Herpesviridae– Retroviridae
Géneros ..virus– Adenovirus– Enterovirus
Especies– HIV 1 y 2
CuasiespeciesSiglas (en inglés): HSV, VZV, CMV
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.64
Virus DNA de importancia médica
ViruelaHerpesAdenovirusHepatitis B
Parvovirus B19
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.65
Virus RNA de importancia médica
InfluenzaVRS, rubéola, sarampiónRabiaVIHEbolaHanta
PolioEnterovirus
Rotavirus
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.66
Tropismo viral
Afinidad biológica de un virus por un tejido Presencia de receptores específicos que el
virus reconoce Por Ejemplo: Adenovirus tiene afinidad por las
células del tracto respiratorio
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.67
Virus solo con cápside:
La cápside es de naturaleza proteica Son resistentes a temperatura, ácido estomacal y
bilis, proteasas, desecación, detergentes. Son liberados por lisis de la célula Muchos son transmitidos por vía fecal-oral Transmitidos por medio de aguas servidas
procesadas. Inmunidad adquirida a través de anticuerpos
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.68
Virus con cápside y envoltura
La envoltura está formada por lípidos, proteínas y glucoproteínas.
Son lábiles a los solventes orgánicos, los ácidos, el calor, la desecación y detergentes.
Son liberados por gemación o lisis celular Deben permanecer en zonas húmedas, siendo
transmitidas por líquidos, gotitas respiratorias, sangre y tejidos.
La mayoría de ellos no resiste la acidez gástrica
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.69
Entrada del virus a la célula hospedera y su liberación
Replicación del ácido nucleico y producción de proteinas virales
Ensamblaje de nuevos virus
Adhesion
Denudamiento del virus
6.- Liberación (gemación o lisis)
Penetración (endocitosis o fusión)
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.70
Replicación VIH
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.71
HONGOS
• Los hongos (Fungi) son eucariontes
• con quitina en su pared celular.
• Contiene ergosterol en su membrana citoplasmática
• No son fotosintéticos
• son Aerobios
• saprófitos (La mayoría son descomponedores primarios de materia orgánica)
• Nutrición absortiva
• Al menos 200 especies pueden infectar a los humanos.
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.72
FUNGI
Mohos Levaduras Dermatofitos Setas u hongos de sombrero
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.73
CLASIFICACIÓN DE LOS HONGOS
Zygomycetes : mohos como Rhizopus spp, Mucor spp
Ascomycetes: levaduras del género Saccharomyces spp
Basidiomycetes: hongos de sombrero del género Agaricus spp, o levaduras del género Cryptococcus spp
Deuteromycetes: mohos como Penicillium spp
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.74
REPRODUCCION DE LOS HONGOS
Gemación en levaduras
Hifas tabicadas o hifas cenocíticas
Hongo dimorfico es el que alterna estos dos estados
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.75
Esporas sexuadas y asexuadas
Mitosporas: son las esporas asexuadas, También se les conoce con el nombre de conidios
Meiosporas son las esporas sexuadas. No todos los hongos las forman
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.76
Cultivo de los hongos
Levaduras forman colonias parecidas a la de bacterias
Los hongos filamentosos forma colonias algodonosas. El conjunto de hifas se denomina micelio
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.77
Reglas de la nomenclatura de hongos
Anamorfo: se denomina al estado asexuado del hongo. Ej. Histoplasma capsulatum
Teleomorfo: se denomina al estado sexual del hongo. Ej. Ajellomyces capsulatum.
Holomorfo: se usa para designar los dos estados del hongo. Ej. Histoplasma/Ajellomyces
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.78
PARASITOS
Seres eucariontes (REINO Animalia) que viven a expensas de otro de distinta especie y le produce daño
Se caracterizan por desarrollar ciclos evolutivos simples o complejos
Se reconoce como ciclo evolutivo o biológico a las etapas secuenciales del desarrollo de un parásito.
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.79
Parásitos : clasificaciones
morfológica– protozoos, helmintos, artrópodos
ubicación topográfica– endoparásitos, ectoparásitos
ubicación en órganos y sistemas– enteroparásitos, histo y hemoparásitos
taxonomía– reino, phylum, clase, orden, familia, género, especie,
variedad
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.80
Parásitos : clasificación morfológica
Protozoos– seres unicelulares
Metazoos – seres pluricelulares
helmintos artrópodos
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.81
Protozoos : formas evolutivas
Trofozoíto– forma vegetativa a través de la cual, el parásito
se alimenta y se reproduce
Quiste – forma de resistencia, que le permite vivir en
condiciones ambientales adversas– hay quistes (simples), que provienen de un zoìto
recubierto, y ooquistes, producto de un cigoto que está en fases de reproducción
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.82
Protozoos
rizopodos– desarrollan seudopodios para su locomoción
flagelados– tienen diferente número de flagelos
ciliados– poseen cilios en su superficie
coccidios– tienen forma de banano, poseen un cono apical , y tienen
reproducciones complejas microsporidios
– poseen esporas
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.83
Helmintos
Nematelmintos– gusanos de redondos a la sección horizontal
Platelmintos– gusanos planos a la sección horizontal
cestodes, forma de cinta trematodes, forma de hoja
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.84
Artrópodos
seres de patas articuladas, simetría bilateral cientos de especies,metamorfosis (completa,
incompleta) insectos, arácnidos, crustáceos autóctonos:
– Pediculus spp, Sarcoptes scabiei, Loxosceles laeta, Latrodectus mactans
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.85
Flora microbiana comensal y patógena del ser humano
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.86
TERMINOS USADOS
Comensal Patógenos Patógenos oportunistas Infección Colonización Enfermedad Portador sano
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.87
GERMICIDA: Agente químico capaz de matar microorganismos.
ESPORICIDA: Germicida capaz de matar las esporas bacterianas.
LIMPIEZA: Eliminación de todo elemento extraño o material orgánico de objetos mediante lavado con agua y jabón.
SANITIZACION: Empleo de agentes físicos o químicos sobre objetos inanimados para reducir carga bacteriana, no elimina formas vegetativas ni esporas.
DESCONTAMINACION: corresponde al empleo de agentes químicos y físicos para erradicar formas vegetativas y esporas a límites que no constituyan un riesgo para el operador
DEFINICIONES
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.88
PIEL Y MUCOSAS
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.89
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.90
Zonas con flora normal
Boca, nariz, piel Tracto respiratorio superior Tracto gastrointestinal Uretra Vagina Tracto urinario inferior
En mucosas es frecuente encontrar una mayor cantidad de anaerobios que de aerobios
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.91
Zonas estériles
Sangre, médula ósea SNC (LCR, cerebro) Líquido articular, peritoneal, pleural,
pericárdico. Tejidos Tracto respiratorio inferior Tracto urinario superior
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.92
DEFINICIONES
Esterilización Desinfección Antisepsia Germicida Esporicida
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.93
Métodos físicos de esterilización
Vapor de agua a presión (121ºC por 15-20 minutos a 15 libras de presión de vapor).
Calor seco: 160-180ºC por 1-2 horas. Filtración: membranas de 0.22-0.45 um de poro
filtros HEPA. Rayos ultravioleta: exposición variable a 254 nm. Radiaciones ionizantes: exposiciones variables a
rayos gama
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.94
Métodos gaseosos de esterilización
Oxido de etileno Vapor de formaldehido Vapor de peróxido de hidrógeno Plasma gaseoso: Gas de peróxido de
hidrógeno ionizado, Gas de dióxido de cloro
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.95
Esterilizantes químicos
Acido peracético Glutaraldehido
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.96
AUTOCLAVE
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.97
Cinta autoclaveCinta autoclave: cambia de color café oscuro solo en presencia de la combinación de los parámetros de esterilización ( tiempo, calor, vapor)
Ventaja: mantiene la seguridad del sello en envoltorios de ropa, papel metal o vidrio.
Controles de esterilización:indicadores Controles de esterilización:indicadores químicosquímicos
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.98
Controles de esterilización:Indicadores Controles de esterilización:Indicadores biológicosbiológicos
Bacillus subtilis var nigerBacillus subtilis var niger.cambia de color verde a amarillo al sobrevivir esporas en un proceso inadecuado.Control Oxido de etileno, Hornos Pasteur
Bacillus stearothermophilusBacillus stearothermophilus. Cambia decolor morado a amarillo al sobrevivir las esporas: Autoclave
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.99
Uso de agentes químicos para destruir la mayoría de los microorganismos, elimina microorganismos patógenos.
DesinfectantesDesinfectantes se clasifican de nivel alto, nivel intermedio y nivel bajo. ALTO: esterilización
INTERMEDIO: sobreviven esporas
BAJO: microorganismos viables
DESINFECCIONDESINFECCION::
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.100
Nivel de Actividad Nivel de Actividad Alto Intermedio Bajo
Esporas bacterianas + - - - Micobacterias + + -
Virus pequeños o sin lípidos + + -
Hongos + + -
Bacterias vegetativas + + ++
Virus tamaño medio o con lípidos + + + +
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.101
Método físicoMétodo físico : :FiltraciónFiltración
Procedimiento mecánico: membranas de nitrocelulosa con poros de diámetro conocido: Filtros.- 0.2 umRetención selectiva de microorganismos(bacterias y esporas hongos)
Usos:Sueros, soluciones de enzimas y vitaminas, medios de cultivos azucarados o termolábiles.
El aire puede esterilizarse por filtración. Ejs: mascarillas y tapones de algodón de los tubos de cultivo ,
Cabinas de seguridad de flujo laminar utilizan filtros de alta eficacia de retención de partículas de aire (HEPA: high-efficiency particulate air) elimina 99.97% de las partículas mayores de 0.3 um.
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.102
Método físico:RadiacionesMétodo físico:Radiaciones
Mecanismo de acción: bloqueo en la síntesis o por ruptura del ADN
Radiaciones Gamma: utiliza Cesio o Cobalto. Usos: material desechable: jeringas,plásticos, catéteres de
polietileno, prótesis. Alimentos enlatados - Vacunas-Antibióticos - Hormonas.
Luz ultravioleta: ondas de 250 a 260 de longitud son absorbidas por bases de ADN.
Uso limitado: salas de preparación de medicamentos, quirófanos, ambientes.
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.103
Agentes químicosAgentes químicos :: Oxido de etilenoOxido de etileno
Gas incoloro,soluble en agua y solventes comunes. Acción : alquilante ( grupos hidroxilo,carboxilo, amino y sulfidrilo
terminales , necesarios para funciones metabólicas esenciales ) .
Proceso de esterilización lento. Requiere un equipo esterilizador y aireador con
controles automáticos de calor, humedad y presión . Temperatura: 60° - Humedad sobre 35% -Concentración de gas: 450-800 mgs/lt.
Tiempo de aireación: 12 hrs mínimo
Usos: material plástico desechable.
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.104
GlutaraldehidoGlutaraldehido : : Líquido Concentración Concentración : 2% Acción : alquilante . Inactivado por materia orgánica . Importante : limpieza
Plasma de peróxido de hidrógeno:Plasma de peróxido de hidrógeno: líquido
Utiliza agua oxigenada y se adiciona una onda de energía de radio-frecuencia. Se crea un campo electromagnético que genera el plasma.
Es un método rápido, se usa en artículos termosensibles.
Es incompatible en derivados de la celulosa como fibra, papel.
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.105
FenolesFenoles
Interés histórico: coeficiente fenólicocoeficiente fenólico: patrón de comparación para evaluar la actividad de otros desinfectantes.
Originalmente usado por Lister. Sustancia tóxica, poco uso como desinfectante Concentraciones 0.5-3% Nivel de actividad :intermedia a baja.intermedia a baja. Hexaclorofeno: bifenol halogenado,se utiliza en jabones.
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.106
AlcoholesAlcoholes
Concentraciones : 70% -Desinfectante común Mayor eficacia en presencia de agua. Denaturación de proteinas Nivel de actividad: intermediaNivel de actividad: intermedia Usos: superficies cutáneas,desinfección de termómetros clínicos.
Compuestos de amonio cuaternarioCompuestos de amonio cuaternario
Concentración : 0.1-0.2 % , Denaturación de proteínas Nivel de actividad :baja Cloruro de benzalconio- cetilpiridinio Resistentes: Pseudomonas, Mycobacterium,Trichophyton
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.107
HalógenosHalógenos
Yodo : Yodo : Compuestos de yodo : más eficaces Oxidante Concentración: 30-50 mg de yodo libre/litro a 10.000 mg de yodo
disponible/lt Nivel : intermedio a bajo.intermedio a bajo. Alcohol yodado- Povidona yodada.
CloroCloro: Oxidante Concentración :500-5000 mg de cloro libre o disponible/lt. Nivel de actividad:intermediaintermedia Materia orgánica y detergente:reducen efectividad
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.108
Factores que influyen en la actividadFactores que influyen en la actividad
Naturaleza del objeto a desinfectar. Tipo y magnitud de la contaminación microbiana. Presencia materia orgánica (sangre,pus,mucus, deposiciones)- inactivan el desinfectante Tipo y concentración del desinfectante Tiempo de exposición Temperatura de exposición
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.109
AntisépticosAntisépticos Nivel de actividad
Alcoholes 70% intermedio
Yodóforos 1-2 mg yodo libre/lt intermedio
1-2% yodo disponible
Clorhexidina 0.75-4% bajo
Hexaclorofeno 1-3% bajo
12/04/23 Rodolfo Norambuena A.110
DesinfectantesDesinfectantes
Objetos relacionados con intervenciones invasivas (objeto crítico)
Endoscopios Instrumentos quirúrgicos con partes de
plástico que no pueden esterilizarse al autoclave.
Superficies limpias o instrumentos y dispositivos semi-críticos.Fibroendoscopios flexibles. LaringoscopiosEspéculos vaginalesCircuitos respiratorios de anestesia.
Instrumentos y dispositivos no críticosManguitos para medir presión arterialElectrodos radiográficosFonendoscopios
Alto nivel
Nivel Intermedio
Bajo nivel