UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLNDEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLGICASSECCIN DE BIOQUMICA Y FARMACOLOGA HUMANAS

ANATOMA E HISTOLOGAS HUMANAS

PRCTICA N 1 MICROSCOPIA PTICA Y SU APLICACIN EN ANATOMA E HISTOLOGA HUMANAS

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ASESORES: cD TAIS NOPAL GUERRERO M en C MA. VERNICA VZQUEZ CIANCA QFB DANIEL RAYGOZA TREJO

ALUMNO:TAPIA MUCIO JOS ANTONIO

CICLO ESCOLAR 2015- IIFECHA DE ENTREGA 11 DE FEBRERO DE 2015 1-. Sobre la base de las consideraciones anteriores se ha definido la microscopa como la tcnica que permite observar objetos con un microscopio (simple o compuesto) y obtener una imagen aumentada del mismo y para ello es necesario tener en cuenta estos tres elementos: El objeto a estudiar (preparado histolgico por ejemplo). Una fuente de iluminacin. Un sistema ptico.

Cuando se plantea el estudio de alguna clula, tejido u rgano, previamente se debe definir cuales aspectos (morfolgicos, bioqumicos, fisiolgicos, genticos, entre otros) se desean analizar, o si se desea observar clulas vivas o clulas fijadas. En base a esto ltimo se definir y planificar la metodologa a seguir. Se seleccionar la tcnica de visualizacin y el tipo de instrumento ptico para obtener las imgenes. Las tcnicas de laboratorio para preparar la muestra y obtener el preparado histolgico que ser observado, dependern en gran medida del tipo de microscopio requerido para visualizarlo, segn los aspectos que han sido definidos previamente.De la misma manera que se ha razonado en relacin al preparado histolgico (objeto), se debe analizar el papel que juega la luz o sistema de iluminacin empleado. Se desea evidenciar y distinguir a mayor aumento los detalles del objeto que se estudia. Generalmente se habla de la iluminacin, trmino ampliamente utilizado, que en microscopa no siempre denota el empleo de un rayo luminoso conformado por fotones, los cuales si pueden ser captados por la retina del ojo.Adems de la luz solar y la luz producida por bombillas incandescentes, tambin se pueden emplear otros tipos de radiaciones electromagnticas, tales como la luz ultravioleta, los rayos lser o un haz de electrones. Estos ltimos no son captados por la retina pero si por una placa fotogrfica o una pantalla fluorescente, siendo considerados como un tipo de iluminacin, que a pesar de no estar constituida por fotones, tambin permite la formacin de una imagen que muestra los detalles finos de un espcimen.Para iluminar el objeto se pueden emplear dos mecanismos, ya sea que el rayo de luz lo atraviese o que simplemente incida en cierto ngulo sobre el objeto. En el primer caso se habla de trans-iluminacin y en el segundo caso de epi-iluminacin.

- Sistema mecnico: est formado por aquellas piezas que no intervienen en la formacin de la imagen ni en el camino de la luz (ej: tornillos micro y macromtrico, columna, pi, platina, tc.); - Sistema de iluminacin: lo integran aquellos componentes encargados de colectar la luz, dosificarla y dirigirla a travs del preparado (ej: espejo, condensador, diafragma); - Sistema ptico: incluye todos los elementos que colaboran en la ampliacin de la imagen, es decir: objetivos y oculares que son las lentes del microscopio. El objetivo recoge los rayos de luz que atraviesan la muestra, y producen una imagen aumentada de la misma. Los microscopios suelen tener varios objetivos, de distintos aumentos, fijados a una pieza giratoria o revlver. El ocular amplifica la imagen producida por el objetivo, y la enfoca sobre el ojo humano. El condensador concentra los rayos de luz sobre la muestra obtenindose as una mayor iluminacin; suele llevar un diafragma para regular la cantidad de luz.

2.-El ocular normalmente tiene un aumento de 10x (la "x" indica "aumento") por lo que amplifica una imagen 10 veces su tamao normal. En cuanto a los objetivos, por lo comn tienen un aumento que vara entre 4x a 45x. Lo normal es encontrar tres objetivos de distinto aumento (4x, 10x y 40x) montados sobre una base giratoria que permite intercambiarlos para aumentar, en forma creciente, el tamao de la imagen. La imagen resultante estar ampliada tantas veces como el producto de las lentes con las que estoy observando, es decir que si utilizo un ocular de 10x y un objetivo de 4x, ver la imagen cuarenta veces ms grande que su tamao original3.-Microscopio pticoMicroscopio electrnicoMICROSCOPO ESTEREOSCOPICO

Caractersticas: Permite aumentos desde 25 a 1500veces El poder de resolucin es de 0,2 m La muestra es atravesada por la luz Las lentes son de vidrio Los cortes son muy finos y se obtienen con un microtomoCaractersticas: Permite aumentos superiores a 10.000, 200.000 y excepcionalmente 500.00 El poder de resolucin es de unos 3 a 10 La muestra es atravesada por un haz de electrones emitidos por un filamento de tungsteno Las lentes son campos magnticos Los cortes son ultra finos y se obtienen con un ultramicrotomo Este tipo de microscopio proporciona una imagen estereoscpica, en tres dimensiones (3D) del espcimen. Se fundamenta en la visin binocular convencional, en la que los dos ojos observan el espcimen con ngulos levemente distintos. El microscopio estereoscpico debe ser binocular.

Ventajas: Se pueden observar clulas vivas Se pueden ver clulas enteras Ventajas: Se puede ver la ultraestructura de la clula en los cortes de los orgnulosSe utiliza para observar especmenes de gran tamao, sin corte o preparacin previa puesto que emplea luz incidente y no funciona por trans-iluminacin. Es ideal para realizar microdiseccion

Inconvenientes: Los anlisis no pueden ser muy detallados y profundosInconvenientes: No permite observar clulas vivas No se pueden realizar visiones de conjunto

Unidades de medida: El micrmetro o micrn (m)Unidades de medida: La unidad oficial es el nanmetro (nm) per es ms empleada el angstrom ()

4-MICROSCOPA

5.-l. Verificar que la iluminacin sea la correcta. 2. Verificar que las lentes del objetivo estn limpias. 3. Comprobar que entre el diafragma de campo y el de abertura, no haya ningn filtro difusor. 4. El centrado del revlver portaobjetivos debe ser el correcto. 5. El portaobjetos y el cubreobjetos deben estar limpios. Comprobar que el primero est bien colocado, y que no haya dos cubreobjetos superpuestos. 6. Verificar la limpieza de todo el sistema ptico. 7. Comprobar que el aceite de inmersin sea el suficiente, sin burbujas ni impurezas, y que no sea fluorescente. 6-.DISTANCIA FOCAL: Ladistancia focalo longitud focal de una lente es ladistanciaentre el centro ptico de lalenteo plano nodal posterior y elfoco(o punto focal) cuando enfocamos al infinito.DIFRACCIN: La difraccin es el fenmeno que se observa cuando la luz, al pasar por el extremo de una superficie se "dobla" desviandose del trayecto y no sigue su propagacin en lnea recta.REFRACCIN: es el fenmeno que se presenta en un rayo sonoro o luminoso cuando incide oblicuamente sobre la superficie de separacin de dos medios, y en virtud del cual el rayo cambia de direccin y velocidad.RESOLUCIN: Es la capacidad que tiene un sistema ptico de aislar dos puntos que se encuentran muy prximos entre s, de manera que se puedan ver individualizados uno del otro ILUMINACION DE KOHLEREXAMINAR MICROSCOPIO, IDENTIFICAR OBJETIVOS Y DIAFRAGMA

UNA VEZ LIMPIO DEBE TAPARSE CON UNA FUNDA Y/O COLOCARLO EN SU LUGARDESPUS DE USAR APAGAR LA LMPARA, LIMPIAR Y VERIFICAR SI HAY POLVO O GRASALEVANTAR EL TUBO DEL MICROSCOPIO HASTA EL TOPE, GIRAR EL REVLVER Y POSICIONAR EL OBJETIVO DE MAYOR AUMENTO. APLICAR UNA PEQUEA GOTA DE ACEITE DE INMERSIN ENCIMA DE LA PREPARACIN EN EL CENTRO DEL CONDENSADOR. BAJAR EL OBJETIVO HASTA ESTAR EN CONTACTO CON EL ACEITE DE INMERSIN, MIRAR POR EL OCULAR CON AYUDA DEL MACROMTRICO.CAMBIAR EL OBJETIVO POR EL QUE SIGUE EN MAYOR AUMENTO.ENFOCAR CON EL OJO IZQUIERDO EL OCULAR. JUNTAR LOS OCULARES Y AJUSTAR CON EL MICROMTRICO SI ES NECESARIO.DESENFOCAR LIGERAMENTE EL CONDENSADOR PARA ELIMINAR EL DIBUJO QUE PUEDE PERJUDICAR LA VISIN DE LA PREPARACIN.LEVANTAR EL OBJETIVO A MAYOR ALTURA, OBSERVAR CON OJO DERECHO DEL OCULAR Y, POR MEDIO DEL TORNILLO MACROMTRICO, BAJAR EL OBJETIVO HASTA QUE EMPIECE A VERSE EL OBJETOLEVANTAR LA SUBPLATINA. CONDENSADOR Y PLATINA AL MISMO NIVEL, ABRIR COMPLETAMENTE EL DIAFRAGMA

EL CAMPO DE OBSERVACIN ADECUADO PARA LAMINILLAS ES:1- TINCIN PTIMA2- POBLACIN DE CLULAS3- NO DEBE ESTAR EN LAS ORILLAS DEL PORTAOBJETOS4- DEBE SER REPRESENTATIVA DEL TEJIDO QUE SE EST OBSERVANDO.REVISAR PRIMERO CON EL OBJETIVO 10X LA LAMINILLA PROPORCIONADA POR EL ASESOR Y REALIZA UN ESCANEO DE IZQ. A DER. Y DE ARRIBA ABAJO

LA OBSERVACIIN A 100X SE REALIZAR SOLO SI ES NECESARIO Y SI LO INDICA EL ASESOR.SI ES NECESARIO OBSERVA A 40X