PRESENTACION

Blg. Wilbetr Quispe Ziga. Docente de la asignatura Microbiologa General a continuacin hago presente el siguiente informe de prctica de laboratorio, identificacin de bacterias gran negativa y gran positiva. De gran importancia en Microbiologa porque permite diferenciar dos grandes grupos de bacterias (Gram+ y Gram-), segn se comporten ante esta tincin. El fundamento radica en la diferente estructura de la pared celular de ambos grupos: las bacterias Gram+ tienen una gruesa capa de peptidoglicano en su pared, mientras que las bacterias Gram- tienen una capa de peptidoglicano ms fina y una capa lipopolisacardica externa. Tras la tincin con el primer colorante (Cristal violeta) se efecta un lavado conetanol que arrastrar al coloranteslo en las Gram (-), mientras que en lasGram (+) elcolorante queda retenidoy las clulas permanecern azules. Las clulas Gram (-) se teirn despus con un colorante de contraste (safranina) para que puedan observarse.

Hago presente este trabajo para su calificacin y revisin y haber cumplido con sus expectativas el presente informe.

IDENTIFICACION DE BACTERIAS GRAN POSITIVAS Y GRAN NEGATIVAS

I. INTRODUCCINEl tamao de la mayora de las clulas bacterianas es tal que resultan difciles de ver con el microscopio ptico. La principal dificultad es la falta de contraste entre la clula y el medio que la rodea. El modo ms simple de aumentar el contraste es la utilizacin de colorantes.Si se desea simplemente aumentar el contraste de las clulas para la microscopa, son suficientes los procedimientos que usan un solo colorante llamado de tincin simple. Sin embargo, a menudo se utilizan mtodos que no tien de igual modo todas las clulas, es el proceso denominado tincin diferencial. Uno muy usado en microbiologa es la tincin Gram. Basndose en su reaccin a la tincin Gram, las bacteras pueden dividirse en dos grupos: grampositivas y gramnegativas. Esta tincin tiene gran importancia en taxonoma bacteriana ya que indica diferencias fundamentales de la pared celular de las distintas bacterias.Mientras que las bacterias gramnegativas son constantes en su reaccin, los microorganismos grampositivos pueden presentar respuestas variables en ciertas condiciones (son gramlbiles). Por ejemplo, los cultivos viejos de algunas bacterias grampositivas pierden la propiedad de retener el cristal violeta, y en consecuencia, se tien por la safranina apareciendo como gramnegativas. Anlogo efecto se produce en ocasiones por cambio en el medio del organismo, o por ligeras modificaciones en la ejecucin de la tcnica. Por este motivo, es preciso atenerse, en la prctica, al procedimiento establecido.Para explicar el mecanismo de la tincin de gram se han propuesto varias hiptesis fundadas en la naturaleza qumica de las paredes celulares de los microorganismos.

OBJETIVOS:Reconocer los microorganismos Gram positivas y negativas, al igual de las aplicaciones de los reactivos.Observar la morfologa bacteriana y aprender a distinguir los distintos tipos de agrupaciones que existen, y su clasificacin segn el tipo de tincin Gram. Comprender los pasos necesarios para realizar la tincin de Gram. Identificar las bacterias GRAM + y GRAM 1. MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales

Placas Petri Hisopos Portaobjeto Mechero Goteros Guantes quirrgicos Aza de siembra

Muestras: Hgado de pollo pescado huevo naranja Reactivos: Cristal de violeta Lugol Alcohol acido safranina Azul de Metileno Agua destilada

Equipo: Microscopio2. PROCEDIMIENTO:

Codificar las muestras que se observa. Rotular sobre la lmina portaobjeto el cdigo de la muestra. Colocar cada muestra en sus respetivas placas Petri y adicionarle solucin fisiolgica. Esterilizar la aza de siembra Con la aza de siembra realizar un extendido fino de la muestra sobre la lmina portaobjetos. Secar el extendi en condiciones naturales. Flamear el extendido hacindola pasar 2 o 3 veces, de forma rpida de forma rpida, por encima de la flama. Coloreara) Colorear el frotis previamente fijado con cristal de violeta x un minutob) Lacar a chorro de agua destilada moderadoc) Aplicar lugol sobre la muestra coloreada y esperar por 3 minutod) Volver a lavar con agua de chorro moderada.e) Decolorar brevemente con alcohol por 3 minutos.f) Repetir el lavado.g) Aplicar la fucsina como colorante de contraste por 3 minutos.h) Lavar por ltima vez con agua destilada.i) Secar la lmina coloreada al medio ambiente.j) Observar al microscopio a 100X, pero previamente colocar una gota de aceite de inmersin sobre el frotis coloreado. Identificar el tipo de bacteria observada por el microscopio con sus respectivas codificaciones.

PROCEDIMIENTO GRAFICO.

Materiales de trabajo

Frotis de mestra

Observando por el microscopio la muestra

Identificacin de bacterias gran negativas y gran positivas FUNDAMENTOS ENCONTRADOSEl imperceptible tamao de las bacterias y otros microorganismos as como la dificultad para observarlas en detalle con el microscopio ptico por causa de la falta de contraste que existe entre estos, debido a que son usualmente transparente en el medio que les rodea; hizo que se crearan mtodos para poder apreciarlas, siendo los mtodos ms sencillos el de fijacin y tincin, iniciados por Paul Ehrlich y Robert Koch, los que permitieron a los microbilogos distinguir muchas caractersticas estructurales normalmente vistas as el uso de colorantes, es el medio ms simple de aumentar el contraste. Estos pueden utilizarse para distinguir entre distintos tipos de clulas o para apreciar la presencia de algunos elementos celulares, como flagelos, esporas, cpsulas, paredes celulares, mitocondrias, ncleos, membranas celulares, etc.Existen numerosos colorantes, y en su mayora son compuestos orgnicos naturales que tienen alguna afinidad especfica por los materiales celulares. Los colorantes que se utilizan usualmente son molculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los componentes celulares cargados negativamente, tales como los cidos nucleicos y los polisacridos (azul de metileno, el cristal violeta y la safranina); otros colorantes son molculas cargadas negativamente (aniones) los que se combinan con los elementos celulares cargados positivamente, como son las protenas (Eosina, la fucsina cida y el rojo Congo). Existe otro grupo de colorantes conformado por sustancias liposolubles.

TIPOS DE COLORACIONESCOLORACION SIMPLELas tinciones se basan en la utilizacin de colorantes que pueden clasificarse como naturales o sintticos. Los naturales se utilizan principalmente con fines histolgicos.La mayor parte de los colorantes que se utilizan para teir bacterias son sintticos, muchos de ellos son las anilinas y los derivados del benceno.

TINCION GRAMLa tincin de Gram es uno de los mtodos de tincin ms importantes. Su aplicacin prctica es innegable sobre todo en el trabajo microscpico de rutina; las referencias a la morfologa celular bacteriana (cocos, bacilos, espirilos, negativos y positivos) se basan precisamente en la tincin de GRAM*

Esta tcnica de coloracin de contraste fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884, la reaccin de Gram puede variar con el tiempo del cultivo y el pH del medio. La capacidad de las clulas para captar la coloracin Gram solo es aplicable en bacterias, el fundamento de la tcnica se hace con base en las diferencias entre las paredes celulares de las bacterias Gram positivas y Gram negativas. La pared celular de las bacterias Gram positivas, posee una gruesa capa de peptidoglucano, adems de dos clases de cido teicoico. Anclado en la cara interna de la pared celular y unido a la membrana plasmtica, se encuentra el acodo lipteicoico y en la superficie, el cido teicoico que est anclado solamente en el peptidoglucano. Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las Gram negativas es delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana plasmtica exterior (de composicin distinta a la interna) por medio de lipoprotenas. Tiene una capa delgada de peptidoglucano unida a una membrana exterior por lipoprotenas La membrana exterior est hecha de protena, fosfolpido y lipopolisacrido (que se encuentra en la cara externa de la membrana externa de este tipo de bacterias).

EL PEPTIDOGLUCANO es el material que confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las Gram positivas lo poseen en mucha mayor proporcin que las Gram negativas. Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tien de manera distinta debido a estas diferencias de su pared.

La diferencia en la resistencia a la decoloracin, es debido a que la membrana externa de las Gram negativas es soluble en solventes orgnicos, como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa de peptidoglucano que posee es demasiado delgada como para poder retener el complejo de cristal violeta/yodo que se form previamente, y por lo tanto este complejo se escapa, perdindose la coloracin azul-violcea. Pero, las Gram positivas, al poseer una pared celular ms resistente y con mayor proporcin de peptidoglucano, no son susceptibles a la accin del solvente orgnico, sino que este acta deshidratando los poros cerrndolos, lo que impide que pueda escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloracin azul-violcea.

En este mtodo de tincin, la extensin bacteriana se cubre con solucin de uno de los colorantes de violeta de metilo, que se deja actuar durante un lapso determinado. Se escurre luego el exceso de violeta de metilo y se aade luego una solucin de yodo, que se deja durante el mismo tiempo que la anterior; despus se lava el portaobjetos con alcohol hasta que ste no arrastre ms colorante. Sigue a tal tratamiento una coloracin de contraste, como safranina, fucsina fenicada diluida, pardo Bismarck, pironin B o hasta inclusive verde de malaquita

Un microorganismo grampositivo debe presentar una pared celular sana, si sufre dao de la pared por una u otra causa, se vuelve gramnegativo. Esto indica la importancia de la pared para la retencin o el escape del colorante.Varias son las teoras para explicar el mecanismo de la tincin de Gram:

EARN Y STEARN (1923) establecen que es una combinacin qumica entre el colorante y las protenas de las bacterias, ambos investigadores comprobaron que la reaccin de tincin de las bacterias obedece en gran parte a su contenido protenico; estos microorganismos se conducen como cuerpos anfteros, al combinarse con colorantes cidos en soluciones cidas y los bsicos en medio alcalinos. La combinacin con ambos tipos de colorante no se produce en el punto isoelctrico. Como los microbios contienen ms de una protena, ese punto no tiene un valor preciso y definido, sino que constituye ms bien una gama o escala que comprende dos o tres unidades de pH. Segn estos investigadores, los grmenes grampositivos tienen una escala isoelctrica de pH inferior a la de los grmenes gramnegativos; y, a base de sus experimentos deducen las siguientes conclusiones:1. Los microorganismos grampositivos pueden hacerse gramnegativos al aumentar la acidez.2. Los microorganismos gramnegativos pueden hacerse grampositivos al aumentar la alcalinidad.3. Los microbios de reaccin positiva a los colorantes cidos pueden hacerse gramnegativos por aumentar la alcalinidad.4. Los microbios de reaccin positiva a los colorantes bsicos pueden hacerse gramnegativos por aumentar la acidez.5. En la zona isoelctrica caracterstica de cada especie es muy escasa la tendencia a retener cualquier colorante.6. Parece estar bien demostrado que las protenas de las bacterias no son simples, sino una dbil combinacin de sustancias protenicas con otras lipoideas o grasas.7. La materia grasa extrada de los microorganismos grampositivos difiere de la obtenida de los microbios gramnegativos, en que la primera contiene una proporcin mucho mayor de cidos no saturados que muestren gran afinidad por los agentes oxidantes. Todos los mordientes (como el yodo) empleados en la coloracin Gram son oxidantes; su efecto, consiste en dar a la sustancia oxidada un carcter ms cido. Esto aumenta la afinidad de un microorganismo por los colorantes bsicos.8. El cambio de respuesta a la coloracin de Gram con el tiempo es propio, sobre todo, de los microorganismos dbilmente grampositivos cultivados en los medios que contengan sustancias capaces de fermentar, y cuya reaccin se vuelve cida en el curso del desarrollo.

GIANNI (1952) comprob que los microorganismos grampositivos Bacillus subtilis y B. anthracis tomaban negativamente el Gram cuando los cultivos correspondan a periodos de dos a tres horas. Luego se desarrollaba la sustancia grampositiva debajo de la pared celular, para invertir la reaccin.

Otra explicacin de la reaccin de Gram puede ser la posible existencia de una capa exterior alrededor de un ncleo gramnegativo.

LIBENSON Y MCLLROY, han comunicado que si la reaccin grampositiva depende de que se forme una combinacin compleja entre los componentes de la coloracin de Gram y las protenas de la pared celular, sera de esperar que las bacterias desintegradas por medios fsicos retuviesen este tinte, ya que ese tratamiento no podra cambiar el carcter qumico de los materiales de dicha pared. Por el contrario, los grmenes grampositivos desintegrados pierden su capacidad de retener el colorante primario y toman negativamente el Gram.

La pared celular de las bacterias grampositivas y gramnegativas es permeable al violeta cristal. Sin embargo, la de las primeras no lo es al complejo de yodo y colorante formado en el interior de la clula. Los resultados experimentales obtenidos con una difusin celular exenta de protenas, y la escasa solubilidad del complejo de yodo y violeta cristal en alcohol y acetona, parecen sustentar la opinin de que la reaccin grampositiva consiste en la formacin, dentro de la clula, de una cantidad apreciable de complejo de yodo y colorante difcil de eliminar con el disolvente. La pared celular de las bacterias grampositivas, a diferencia de la de las gramnegativas, sera prcticamente impermeable al violeta cristal. Los microorganismos aparecern teidos despus de tratarlos con violeta cristal, por ser absorbido el colorante en la superficie externa de la pared celular, y el disolvente eliminar sin dificultad el complejo formado despus del tratamiento con yodo.

LIBENSON Y MCLLROY han sostenido que la permeabilidad de la pared celular al violeta cristal, la escasa solubilidad del complejo de yodo y colorante en alcohol y acetona, y el libre acceso del disolvente al complejo constituido, son los principales factores que intervienen en el mecanismo de esa coloracin.

Las bacterias resistentes a la tincin Gram son Mycobacterias, Micoplasmas, formas L, Protoplasmas y esferoplastos

El primer paso en cualquier tincin debe ser siempre la fijacin con calor. Posteriormente el cristal violeta penetra en todas las clulas bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas).El lugol est formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio), el cual est presente para solubilizar el yodo. El yodo entra en las clulas y forma un complejo insoluble en solucin acuosa con el cristal violeta.La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para realizar la decoloracin, ya que en la misma es soluble el complejo yodo/cristal violeta. Los organismos Gram positivos no se decoloran, mientras que los Gram negativos s lo hacen. La funcin del alcohol-acetona es la quitar el colorante de las bacterias, as si la bacteria conserva el tinte, es Gram positiva y si el tinte no se mantiene es Gram negativa.

Para poner de manifiesto las clulas Gram negativas se utiliza una coloracin de contraste. Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina bsica. Despus de la coloracin de contraste las clulas Gram negativas son rojas, mientras que las Gram positivas permanecen azules.La safranina no es crucial para la tcnica por lo que puede o no utilizarse. Sirve para hacer una tincin de contraste que pone de manifiesto las bacterias Gram negativas.Al trmino de la tincin, las Gram positivas se vern azl-violceas y las Gram negativas, se vern rosas (si no se hizo la tincin de contraste) o rojas (si se us, por ejemplo, safranina)Los colorantes de p-rosanilina son los que mejores resultados dan en la coloracin Gram. Los representantes ms usados de este grupo son violeta de metilo y violeta cristal o de genciana. En realidad, violeta de metilo es el nombre atribuido al compuesto tetrametil-p-rosanilina.El matiz de color de la p-rosanilina se intensifica al aumentar el nmero de grupos metilo en la molcula; por consiguiente, de los tres grupos, el tono ms oscuro es la hexametil-p-rosanilina (violeta cristal), y el tinte ms ligero, la tetrametil-p-rosanilina (violeta de metilo). Los nombres violeta de metilo 3R, 2R, R, B, 2B, 3B, etc., se refieren al nmero de grupos metilo contenido. La letra R indica matices rojos, y la letra B, tonos azules. El violeta de cristal contiene seis grupos metilo, y se considera como el colorante primario mejor para teir por el mtodo de Gram.

OJO La tincin de Gram es uno de los mtodos de tincin ms importantes. Su aplicacin prctica es innegable sobre todo en el trabajo microscpico de rutina; las referencias a la morfologa celular bacteriana (cocos, bacilos, espirilos, negativos y positivos) se basan precisamente en la tincin de GRAM*ESTRUCTURA DEL PECTIDOGLUCANO

DIFERENCIA DE CAPAS DE PEPTIDOGLUCANO EN GRAM+ Y GRAM-

SISTEMA DE COLORACIN EN LAS BACTERIAS

FUNCION DE LOS COLORANTESSEGN Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992.Productos que se utilizanReaccin y coloracin de las bacterias

GRAM + GRAM -

1) Cristal violetaClulas color violetaClulas color violeta

2) Lugol solucin iodadaSe forma el complejo CV-I. Las clulas continan teidas de color violeta.Se forma el complejo CV-I. Las clulas continan teidas de color violeta.

3) AlcoholSe deshidratan las paredes celulares. Se contraen los poros. Disminuye la permeabilidad. El complejo CV-I no sale de las clulas que continan teidas de color violeta.Eliminacin por extraccin de grasas de las paredes celulares. Aumenta la porosidad. El complejo CV-I se separa de la clula.

4) SafraninaClulas no decoloradas; quedan teidas de color violeta.Clulas decoloradas; se tien de color rosado.

SEGN Seely. H; Van Demark, P.DESVENTAJAS DE LA TECNICA DE TINCION Segn Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992.existen varios factores que pueden influir en la tincin de manera equivoca los cuales son:

Requieren de fijar la muestra con calor provocando que las clulas puedan morir. Calor + qumicos pueden distorsionar la forma original de las clulas. Se ha encontrado que el mal uso de alcohol acetona. Solucin decolorante para GRAM en la fase de decoloracin puede llegar a decolorar los grmenes gram positivos. No diferencia a Micobacterias(que poseen una envoltura externa cerosa y se distinguen mediante la tincin de acidorresistencia) y los Micoplasmas(carecen de peptidoglucano). Es importante controlar la fijacin por el calor por que puede dar coloraciones errneas. El agua altamente clorada puede debilitar la coloracin de contraste.

Tincin cido alcohol resistenciaEsta tincin sirve principalmente para clasificar micobacterias y actinomicetos, que tienen un alto contenido en lpidos y en cidos miclicos y que no pueden ser calificadas por la tincin de Gram. Para empezar se hecha sobre el portaobjetos una mezcla de fucsina fenol, en la que la fucsina hace de colorante rosa y el fenol de mordiente. Las clulas se tien de rosa, tanto las cido alcoholes sensibles como las resistentes. Despus se usa un decolorante orgnico que hace que las bacterias cido alcohol sensibles se decoloren mientras que las cido alcohol resistentes se quedan rosa. Como en la tincin de Gram se utiliza un colorante de contraste que en este caso es el azul de metileno que tie las clulas cido alcohol sensibles de color azul quedando las clulas cido alcohol resistentes de color rosa.Figura

Composicin de la pared de las bacterias cido alcohol Resistentes (AAR):Nos referiremos como bacteria modelo de este grupo al gnero Mycobacterium.Adems del peptidoglicano, la pared celular de las micobacterias contiene una gran cantidad de glicolpidos como el complejo lipdico arabinogalactano y los cidosmiclicos, stos ltimos son slo encontrados en Mycobacterium y Corynebacterium Spp. Esta gran cantidad de lpidos hace que las bacterias AAR no se coloreen o se coloreen mal con la coloracin de Gram.Para colorearlas, se somete a las bacterias a una coloracin con Fucsina (colorante rojo) con ayuda de calentamiento y luego que son teidas as, resisten la decoloracin con una mezcla de alcohol cido. Esta gran cantidad de lpidos de la pared, 10% del total del peso de la clula de micobacterias, protege a la bacteria de la accin deletrea de los componentes del fagolisosoma y, probablemente, sea esta la razn por la que las micobacterias pueden sobrevivir dentro de los macrfagos. Los componentes de la pared de las micobacterias tambin tienen la capacidad de estimular al sistema inmune, tanto es as que se utiliza para aumentar la produccin de anticuerpos cuando se inyecta antgenos proteicos, o sea, se utiliza como adyuvante. El adyuvante de Freund tiene como componente bsico, la pared micobacteriana.

MORFOLOGIA

A partir de la tincin de Gram pueden distinguirse varias formas distintas:- Los cocos de forma esfrica. Pueden presentarse aislados despus de la divisin celular (Micrococos), por pares (Diplococos), formar cadenas (Estreptococos), o agruparse de manera irregular (Estafilococos).- Los bacilos poseen forma alargada. En general suelen agruparse en forma de cadena (Estreptobacilos) o en empalizada.- Tambin pueden distinguirse los espirales, que se clasifican en espirilos si son de forma rgida o espiroquetas si son blandas y onduladas, si poseen forma decoma, - curvados, entonces se les llama vibriones.

AGRUPACIONES

}CLASIFICACIN DE LAS BACTERIAS*

1. ESPIROQUETAS.Bacilos flexuosos en forma de espiral con movilidad debida a un filamento axial y semejante a un sacacorchos. Son Gram negativos.OrdenFamiliaGneroEspecie

SPIROCHAETALESSPIROCHAETACEAETREPONEMAT. Pallidum

BORRELIA

LEPTOSPIRACEAELEPTOSPIRAB. RecurrentisL. Interrogans

2. BACTERIAS GRAM NEGATIVAS AEROBIAS O MICROAEROFILAS (VIBRIOIDES):Gnero CAMPYLOBACTER: Bacilos espirales curvados y mviles Parsitos del hombre y animales.Especies: C. fetus, C. jejuni y C. coliGnero HELICOBACTER. Especie: H pylori, agente productor del Ulcus pepticum.

3. BACILOS Y COCOS GRAM NEGATIVOS AEROBIOS:Familia PSUDOMONADACEAE.G. PSEUDOMONAS. Especie Pseudomonas auruginosa.Bacilos gram negativos con flagelos polares. Producen citocromo oxidasa.Familia MORAXELACEAE.G MORAXELLA. Especies: M. lacunate, M catharralis. G ACINETOBACTER. Especie: A baunannii.Familia XANTHOMONADACEAEG STENOTROPHOMONAS. Especie: S. maltophilia.Familia BURKHOLDERIAG BURKHOLDERIA. Especie B. cepaceaFamilia LEGIONELLACEAE.G. LEGIONELLA. Bacilos mviles de vida libre. Patgenos para el hombre. Especie: L. pneumophila.Familia NEISSERIACEAE.G. NEISSERIA. Cocos agrupados en parejas con las zonas adyacentes planas. Especies patgenas: N. meningitidis, N. gonorrhoeae.G. KINGELLA. K. kingae.Familia BARTONELLACEAE G BARTONELLAFamilia BRUCELLACEAEG. BRUCELLA. Cocobacilos gram negativos. Parsitos del hombre y animales.B. melitensis, B. abortus.Familia BRADYRHIZOBIACEAEG AFIPIA. Especie: A. felisOtros gneros de inters:G. FLAVOBACTERIUM: F. meningosepticum.G. ALCALIGENES. A. faecalis.G. BORDETELLA. B. pertussis.G. FRANCISELLA. F. tularensis.

4. BACILOS GRAM NEGATIVOS ANAEROBIOS FACULTATIVOS:F. ENTEROBACTERIACEAE: Bacilos gram negativos no esporulados. Fermentan la glucosa con formacin de cido o cido y gas. Reducen los nitratos a nitritos y no poseen citocromooxidasa.Principales gneros y especies tipo:G. ESCHERICHIA. E. coliG. SHIGELLA. S. dysenteriae, S. sonneyG. SALMONELLA. S. entericaG. CITROBACTER. C. freundiiG. KLEBSIELLA. K. pneumoniaeG. ENTEROBACTER. E. cloacae, E. aerogenesG. SERRATIA. S. marcescensG. PROTEUS. P. mirabilisG. YERSINIA. Y. enterocolitica, Y. pseudotuberculosis, Y. pestis

5. RICKETTSIAS Y CHLAMIDIAS:Microorganismos pleomrficos que necesitan para su cultivo clulas vivas donde originan corpsculos de inclusin.G. RICKETTSIA. R. prowazecki, R. connoriG. COXIELLA. C. burnettiF. CHLAMYDIACEAE.G. CHLAMYDIA. C. trachomatis. C. psittaci, C. pneumoniae

6. MYCOPLASMASCarecen de pared celular. Son los menores microorganismos cultivables en medios sintticos.F. MYCOPLASMATACEAE.G. MYCOPLASMA. M. pneumoniae, M. hominisG. UREAPLASMA. U. urealyticum

7. COCOS GRAM POSITIVOS: Aerobios anaerobios facultativos.G. MICROCOCCUS. M. luteus.G. STAPHILOCOCCUS. S. aureus, S. epidermidis, S. saprophyticusG. STREPTOCOCCUS. S. pyogenes, S. pneumoniaeG. ENTEROCOCCUS. E. faecalis. Otros ESTREPTOCOCOS.Anaerobios estrictos:G. PEPTOCOCCUS. P. niger.G. PEPTOSTREPTOCOCCUS. P. anaerobiusG. SARCINA

8. BACILOS GRAM POSITIVOS ESPORULADOS:G. BACILLUS. B. anthracisG. CLOSTRIDIUM. C. tetani, C. boatulinum, C. perfringens

9. OTROS BACILOS GRAM POSITIVOS:G. LISTERIA. L. monocytogenesG. CORYNEBACTERIUM. Bacilos gram positivos. Tendencia a agruparse en letras chinas. C. diphtheriaeG. ACTYNOMYCES. Forman hifas o micelios rudimentarios. A. israeliiG. NOCARDIA. N. AsteroidesF. MYCOBACTERIACEAE. Bacilos Acido-Alcohol-resistentes.G. MYCOBACTERIUM. M. tuberculosis, M. leprae

CONCLUSIONES

Con los fundamentos encontrados podemos decir que en nuestra practica se observaron bacterias gram positiva y gram negativas teidas del color respectivo esto fue en la muestra de mucosa de pollo no se pudo ver bien la morfologa pero se encontraron en forma de cocos, estreptococos (en muestra de huevo), diplococos. Tambin tuvimos muestra en la cual no se pudo ver ningn tipo de bacteria entonces como dice nuestra bibliografa se pudo haber hecho mal el frotis, se pudo lavar con mucha fuerza, entre otra causas de mala practica de manejo.

BIBLIOGRAFA

http://es.slideshare.net/jujenio/la-tincin-de-gramhttp://es.slideshare.net/AlexandraSandovalVilches/tincin-de-gram-1?related=1http://es.slideshare.net/Mardj/prctica-2-tincin-de-gram?related=2http://es.slideshare.net/BenRivSil/proceso-tincin-de-gram-15572755?related=3http://es.slideshare.net/Mardj/prctica-2-tincin-de-gram?related=4http://es.wikipedia.org/wiki/Imagen:Mycobacterial_cell_wall_diagram.png http://es.wikipedia.org/wiki/Peptidoglucano y Schlegel, 1997. Microbiologa generalhttp://www.nupedia.com/newsystem/upload_file/830/bilayer_micelle.png

UNIVERSIDAD NACIONALSAN ANTONIO ABAD DEL CUSCOFACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS TROPICALESCARRERA PROFESIONAL:INGENIERA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

TEMA:INFORME DE PRCTICAS DE LABORATORIO IDENTIFICACION DE TINCION GRAM (BACTERIAS GRAN POSITIVAS Y GRAN NEGATIVAS)

Asignatura: Microbiologa GeneralDocente: Blg. WILBERT QUISPE ZUIGAintegrante: Alberto chicllasto choqqueQUILLABAMBA-2015