PROCEDIMIENTO

A. PREPARACIÓN DE UNA SOLUCIÓN ÁCIDO OXÁLICO AL 0.4 %

B. PREPARACIÓN DE SOLUCIÓN ESTÁNDAR (MADRE) DE ÁCIDO ASCÓRBICO 0.1% EN UNA SOLUCIÓN DE ÁCIDO OXÁLICO 0.4%.

Agregar 4 g. de Ácido Oxálico en un litro de Agua destilada.

Pesar 100 mg de A. Ascórbico y agregar en una fiola añadiendo 100 ml de una solución de A. Oxálico 0.4 %

1. PREPARACIÓN DE LA CURVA ESTÁNDAR DE VITAMINA C

I. 10 ml de Agua Destilada. (Blanco).

II. 1 ml de A. Oxálico 0.4% + 9 ml de Solución coloreada. (L1).

III. 1 ml de E.T + 9 ml de Agua Destilada. (Blanco).

IV. 1 ml de E.T + 9 ml de solución coloreada. (L2).

2. ANÁLISIS DE VITAMINA C EN MANDARINA

a) Preparar los estándares de trabajo (E.T): Tomar alícuotas de 1,2, 3, 4 y 5 ml de ácido ascórbico (solución madre) y aforar en 100 ml de A. Oxálico al 0.4 %.

b) Preparar 4 tubos de ensayo prueba para cada alícuota (N° 1, N° 2, N° 3, N°

4, N° 5). Y se agrega lo siguiente:

c) Hacer las lecturas de absorbancia en un espectrofotómetro a una longitud de onda de 520nm, siguiendo el siguiente proceso:

Ajustar a cero la ab sorbancia en I.

Leer la absorbancia en tubo II (L1).

Ajustar a cero la absorbancia con la solución del tubo III.

Leer la absorbancia del tubo IV (L2).

Calcular L2-L1 de cada E.T y obtener la gráfica de la curva patrón de ácido

I. 10 ml de Agua Destilada. (Blanco).

II. 1 ml de A. Oxálico 0.4% + 9 ml de Solución coloreada. (L1).

III. 1 ml de Sol. De muestra + 9 ml de Agua Destilada. (Blanco).

Agregar 30 ml de zumo de mandarina en 210 ml de A. Oxálico.

Extraer 1 ml de la solución anterior y aforar en 100 ml de A. Oxálico.3. Preparar 4 tubos de ensayo prueba para cada alícuota (N° 1, N° 2, N° 3, N°

4, N° 5). Y se agrega lo siguiente:

IV. 1 ml de Sol. De muestra + 9 ml de solución coloreada. (L2).

4. Hacer las lecturas de absorbancia en un espectrofotómetro a una longitud de onda de 520nm, siguiendo el siguiente proceso:

Ajustar a cero la ab sorbancia en I.

Leer la absorbancia en tubo II (L1).

Ajustar a cero la absorbancia con la solución del tubo III.

Leer la absorbancia del tubo IV (L2).

5. Calcular L2-L1 y obtener la concentración de ácido ascórbico a partir de la curva estándar.