Estudio de seroprevalencia de rickettsias del grupo de las ...
MYCOPLASMAS CHLAMYDIAS Y RICKETTSIAS
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Bacterias sin pared y Bacterias sin pared y Bacterias intracelulares obligadasBacterias intracelulares obligadas
Cátedra de Microbiología General – FACENA – UNNE 2012Cátedra de Microbiología General – FACENA – UNNE 2012
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Bacterias sin pared y Bacterias sin pared y Bacterias intracelulares obligadasBacterias intracelulares obligadas
ObjetivoObjetivo
Conocer las principales características biológicas de los Mycoplasmas,
Chlamydias y Rickettsias, su capacidad para producir infecciones, las
posibilidades diagnósticas y las medidas profilácticas
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ClaseMollicutes
Familia Mycoplasmataceae
GénerosMycoplasmaUreaplasma
Especies M. pneumoniae
M. hominis
U. urealyticum
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Mycoplasmas - TaxonomíaTaxonomía
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Mycoplasmas - Características generales
• No poseen pared celular (Bacterias carentes de pared celular)
• Poseen esteroles en su membrana celular
• Requerimiento de lípidos complejos preformados (colesterol)
• Anaerobios facultativos y algunos anaerobios estrictos
• Son pleomórficos (esféricos hasta filamentosos)
• Pueden desplazarse por movimiento ameboide en medios líquidos
• Pueden existir como saprófitos o producir enfermedades
• Genoma pequeño
• Resistencia natural a los beta lactámicos
FACTORES DE VIRULENCIACapacidad de adherirse a los epitelios
mediante glicoproteinas:• Proteína P1 (Mycoplasma pneumoniae)• P50 y P100 (Mycoplasma hominis)Glicopéptido sulfatadoFosfolipasa (Ureaplasma urealyticum)Disminución de la actividad macrofágicaNucleasasNo se conoce la producción de toxinasNo son invasivos
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Mycoplasma pneumoniae
• El determinante de patogenicidad es la producción de peróxido
de hidrógeno que produce la muerte de las células epiteliales por
mecanismos desconocidos.
• Coloniza las vías respiratorias superiores
• Se adhiere a las células de la mucosa respiratoria inferior.
• Produce neumonía atípica primaria
• Se propaga por contacto directo de hombre a hombre
• Afecta a todas las edades y suelen producirse brotes familiares
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M. pneumoniae - Diagnóstico
• Cultivo a partir de secreciones respiratorias: no es muy utilizado
pues se necesitan medios especiales, muy enriquecidos y con
inhibidores para otras bacterias.
• Detección de anticuerpos en el suero del paciente: puede
hacerse por ELISA, aglutinación de látex o inmunofluorescencia
indirecta
• Los síntomas y los datos epidemiológicos contribuyen mucho al
diagnóstico etiológico
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M. hominis y U. urealyticum
• Son flora habitual del aparato génitourinario.
• Su determinante de patogenicidad es la producción de
amoníaco a partir de la urea (U. urealyticum) y de la arginina
(M. hominis)
• Pueden producir inflamación oportunista tanto en el hombre
como en la mujer.
• Las manifestaciones son uretritis en el hombre y vaginosis en
la mujer por asociación con otras bacterias.
• Pueden producir complicaciones en el hombre, la mujer y en
el recién nacido.
DIFICULTADES DIAGNÓSTICASNo se colorea al Gram
Necesitan medios especiales (ricos,
antibióticos, suero equino)
Método comercial costoso
Medio de cultivo artesanal
- Obtención del suero equinoLimitaciones presupuestarias
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Mycoplasmas urogenitales - Diagnóstico
• Cultivo a partir de secreciones genitales: no es muy utilizado
pues se necesitan medios especiales, muy enriquecidos y con
inhibidores para otras bacterias.
• Detección de anticuerpos en el suero del paciente: puede
hacerse por ELISA o inmunofluorescencia indirecta.
• Los síntomas y los datos epidemiológicos contribuyen mucho al
diagnóstico etiológico
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Familia
Chlamydiaceae
Géneros
Chlamydia
Especies
C. psittaci
C. pneumoniae
C. trachomatis
Biovar LGV (linfogranuloma venéreo)
Biovar TRIC (Tracoma-conjuntivitis de inclusión)
Otros (enfermedades genitourinarias)
Chlamydias - Chlamydias - TaxonomíaTaxonomía
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• Parásitos intracelulares obligados• Son incapaces de sintetizar ATP• Por mucho tiempo se los consideró virus• Estructura de pared de gramnegativas• Son cocoides e inmóviles• No observables con Gram por su pequeño tamaño• Poseen dos formas biológicas:
– Cuerpo elemental (CE): infectivo y no replicante– Cuerpo reticulado (CR): no infectivo y replicante
Chlamydias - Chlamydias - Características generalesCaracterísticas generales
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Chlamydias - Chlamydias - Ciclo vitalCiclo vital
Lisosomas
Núcleo
Cuerpo elemental infectante
Ingreso por endocitosis
EndososomaLisosomas
Eliminación de la progenie Transformación en cuerpo reticulado
Formación del cuerpo de inclusión Multiplicación del CR
Determinantes antigénicosLPS: Específico de géneroMOMP (proteína mayor de la membrana
externa): Contiene epítopes específicos de género, especie, subgrupo y serovariedad.
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PatogeniaC. trachomatis sintetiza proteínas “de stress”
que se expresan en la membrana de la célula huésped. La reacción inflamatoria y cicatrizal desencadenada contra estas proteínas explica la obstrucción tubaria en infecciones genitales, y la ceguera en el tracoma.
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Chlamydias - Chlamydias - PatologíasPatologías
Especie Patología Transmisión
C. trachomatisBiovar LGV
Linfogranulomavenéreo
Sexual
C. trachomatisBiovar TRIC
TracomaConjuntivitis
Infecciones genitales
Contacto directoSexual
Durante el nacim.
C. pneumoniae Neumonía atípica Respiratoria
C. psittaci Psitacosis Aves al hombre
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Chlamydias - Chlamydias - DiagnósticoDiagnóstico
• MÉTODOS DIRECTOS– Cultivo en líneas celulares
– Observación con Lugol y Giemsa (Cuerpos de inclusión)
– Detección por Inmunofluorescencia directa o ELISA
– Detección por PCR
• MÉTODOS INDIRECTOS– Detección de anticuerpos por IFI o ELISA
InmunofluorescenciaInmunofluorescencia La sensibilidad y especificidad de
la IF con el uso de anticuerpo monoclonales para el MOMP
(Mayor Outer Membrane Protein) de
C. trachomatis es del 80-90% y 98-99 % respectivamente.
La IF tiene mayor sensibilidad que la EIA ya que permite detectar de 10 a 100 cuerpos elementales.
Ventajas:
Se independiza del transporteSe puede utilizar para una
gran variedad de muestrasTiene alta especificidadSe puede utilizar como método
confirmatorio de otros métodos cuando existen discrepancias.
Desventajas
Necesita de un microscopio de fluorescencia de gran resolución
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PCRPCRLas técnicas moleculares
(PCR)tienen hasta un 96% de
sensibilidad.Detectan en forma directa el
ADN bacteriano. Permite detectar 1 cuerpo
elemental presente en la muestra
Ventajas
Se independiza del transporte
Se pueden utilizar muestras no invasivas (Ej. Orina)
Muy alta sensibilidad y especificidad.
Desventajas
Se pueden tener falsos negativos por presencia de
inhibidores Alto costo
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Familias
Rickettsiaceae Coxiellaceae
GénerosRickettsia Coxiella
Ehrlichia
Especies
R. rickettsii C. burnetii
R. prowasekii
R. typhi
E. chaffeensis
Rickettsias y Coxiellas - Rickettsias y Coxiellas - TaxonomíaTaxonomía
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• Parásitos intracelulares obligados
• Son incapaces de sintetizar ATP
• Estructura de pared de gramnegativas
• Pueden ser cocoides, bacilares o pleomórficas
• No observables con Gram por su pequeño tamaño
• Habitan en artrópodos hematófagos que actúan como vectores o huéspedes primarios.
Rickettsiales - Rickettsiales - Características generalesCaracterísticas generales
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Rickettsia y Coxiella - Patogenicidad
• Estas bacterias infectan eritrocitos, células retículoendoteliales y
epitelio vascular.• Penetran a la célula huésped induciendo la endocitosis• Rickettsia abandona el endosoma y se reproduce en el citoplasma
mientras que Coxiella se reproduce en el endolisosoma luego de la
fusión del endosoma con el lisosoma.• Finalmente la célula del huésped estalla, liberando organismos
nuevos.• Además de los efectos de la lisis celular el huésped padece los
efectos de la toxicidad de la pared.• Los síntomas aparecerán en función del tejido afectado (epitelio
pulmonar, endotelio vascular o monocitos circulantes)
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Epidemiología
Agente Vector Reservorio Transmisión Patología Manifestación
R. rickettsii Garrapatas Roedores,perros,zorros
Picadura delartrópodo
Fienremanchada
VasculitisFiebre
R. prowazekii Piojos Hombre Heces delartópodo
Tifusepidémico
VasculitisFiebre
R. typhi Pulgas Roedores Heces delartópodo
Tifusendémico
VasculitisFiebre
E. chaffeensis Garrapatas Animalessalvajes
Picadura delartrópodo
Erliquiosis Enfermedadfebril
inespecífica
C. burnetii Garrapatas(sólo en losanimales)
Animalessalvajes y
domésticos
Inhalación depolvo
contaminado
Fiebre Q Neumoníaatípica
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DiagnósticoDiagnóstico
• MÉTODOS DIRECTOS– Cultivo en líneas celulares
– Observación con Giemsa (Excepto para Coxiella)
– Detección por Inmunofluorescencia directa en las muestras
– Detección por PCR
• MÉTODOS INDIRECTOS– Detección de anticuerpos por IFI
• IgG > 1/128 e IgM > 1/32