MTODOS DE DILUCIN

Microbiologa De Los Alimentos

Q.F.B Gabriela Mayanin Mendoza OrozcoIsmael Daz Molina

MTODOS DE DILUCIN

SON UTILIZADOS PARA MEDIR LA ACTIVIDADIN VITRODE UN AGENTE ANTIMICROBIANO SOBRE UN MICROORGANISMO ESPECFICO, UTILIZANDO DIFERENTES CONCENTRACIONES DEL AGENTE Y UN INCULO CONOCIDO DE LA CEPA BACTERIANA.

Las pruebas pueden ser realizadas por dilucin en caldo o en agar, de esta forma es posible determinar la concentracin. Inhibitoriamnima(CIM) despus de la incubacin por 24 horas a 35 C.

CONCENTRACIN INHIBITORIAMNIMA(CIM):Hace referencia a la menor concentracin de una dilucin seriada de un agente antimicrobiano que inhibe el crecimiento visible de una bacteria. Las CIM obtenidas son interpretadas como susceptible, intermedio o resistente, basado en los criterios del CLSI.

MTODOS DE MACRODILUCINUtiliza 8 a 10 concentraciones decrecientes de una solucion en caldo Mueller-Hinton en tubos de vidrio (macrodilucin en caldo) o cajas de Petri con agarMueller-Hinton(dilucin en agar). A cada dilucin se le agrega un inculo bacteriano ajustado a la escala 0.5 de McFarland.

Se incuba durante 18-24 horas a 35 C y se determina la CIM mediante la observacin de la menor dilucin del antibitico en la que se observa inhibicin del crecimiento visible bacteriano.

MTODOS DE MICRODILUCINEl procedimiento es similar al de macrodilucin. Se realiza utilizando un plato con micropozos realizando 8 a 10 diluciones en caldo a las que se les adiciona un inculo bacteriano estandarizado (concentracin final en cada pozo 5 x 105UFC/mL).

Este mtodo tiene la ventaja de utilizar pequeos volmenes de los materiales empleados. Para bacterias exigentes se utilizan los medios y condiciones de crecimiento recomendados por la CLSI: Para ambos mtodos los procesos de seleccin de colonias para la preparacin de del inculo son los mismos que los descritos para el mtodo de difusin en disco