Metodos Cromatograficos.

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Myriam Lina Trigo Orsini

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La cromatografía es uno de los principales métodos para la separación de especies químicas estrechamente relacionadas en mezclas complejas. La cromatografía es un método físico de separación basado en la distribución de los componentes de una mezcla entre dos fases inmiscibles, una fija o estacionaria y otra móvil.En todas las separaciones cromatográficas la muestra se disuelve en una fase móvil, que puede ser un gas un líquido o un fluido supercrítico. Esta fase móvil se hace pasar a través de una fase estacionaria inmiscible, la cual se mantienen fija en una columna o sobre una superficie sólida. Las fases se eligen de tal forma que los componentes de la muestra se distribuyen de modo distinto entre la fase móvil y la fase estacionaria. Aquellos componentes que son retenidos con más fuerza por la fase estacionaria se mueven lentamente con el flujo; por el contrario los componentes que unen débilmente a la fase estacionaria, se mueven con rapidez. Como consecuencia de la distinta movilidad, los componentes de la muestra se separan en bandas discriminadas que pueden analizarse cualitativa y/o cuantitativamente.

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  • Myriam Lina Trigo Orsini

  • CROMATOGRAFIADefinicinMtodo fsico-qumico de separacin donde las mezclas son separadas por intercambio diferencial de sus componentes entre una FASE ESTACIONARIA (lquido o slido) y una FASE MVIL (lquido o gas).CROMATOGRAFIADefinicin

  • CROMATOGRAFIADefinicinLos componentes que tienen mayor afinidad por la fase estacionaria son ms retenidos en el sistema que aquellos que son distribudos en la fase mvil

  • CROMATOGRAFIANaturaleza de los procesos de separacinLos procedimientos de separacin tienen en comn la distribucin de los componentes de una mezcla entre dos fases que posteriormente se pueden separar mecnicamente.Razn de Distribucin (Coeficiente o Constante de distribucin , K)

  • CROMATOGRAFIATipos de Fases

    FaseEstacionariaMvilSlido, lquido o gel dispuesto sobre un slido que acta como soporteFluido (puede ser gas, lquido o fluido supercrtico) que se usa como portador de la mezcla.

    Es inmiscible con la fase mvil.La muestra se desplaza con la fase mvil.Los componentes o analitos de la mezcla se distribuyen de modo distinto entre la fase mvil y la fase estacionaria.

  • CROMATOGRAFIAHistoria

  • CROMATOGRAFIAHistoriaM. TSWETT (1903): Separacin de mezclas depigmentos vegetales en columnas empaquetadas con adsorventes slidos y solventes variados.Cromatografia =croma [color] + graph [escribir](griego)CaCO3

  • CROMATOGRAFIAHistoria

  • CROMATOGRAFIAClasificacinTIPOS DE CROMATOGRAFIATECNICAS CROMATOGRAFICASBasados en el fundamento del proceso cromatogrficoBasadas en la forma del proceso cromatogrfico

  • CROMATOGRAFIAClasificacinTIPOS DE CROMATOGRAFIAFase estacionariaSOLIDOC. de adsorcin: el slido adsorbe al componente que inicialmente estaba en la fase mvil (lquida o gaseosa) (Fuerzas de Van der Waals)C. de intercambio inico: los componentes inicos de la muestra se separan por el intercambio selectivo con contraiones de la fase estacionariaC. de exclusin: la fase estacionaria proporciona una clasificacin demolculas basadas en su mayor parte en la geometra y el tamao molecular. Este mtodo tambin se llama cromatografa de permeacin en gel, en la qumica de los polmeros, y de filtracin en gel, en la bioqumicaC. de afinidad: tipo especial de c. de adsorcin, utilizada en bioqumica, en la que un slido tiene enlazado un llamado ligando de afinidad

  • CROMATOGRAFIAClasificacin ABsorcin ADsorcin

  • CROMATOGRAFIAClasificacinTIPOS DE CROMATOGRAFIAFase estacionariaLIQUIDO que se encuentra soportado en un slido inerteCromatografa de particin o reparto: el soluto se reparte entre la fase mvil (lquido o gas) y la fase estacionaria

  • CROMATOGRAFIAClasificacinFM = LquidoFM = GasCromatografiaLquidaCromatografiaGasosa (CG)CG Fase EstacionariaSlidaLquidaCromatografiaLquido-Slido (CLS)CromatografiaGas-Lquido (CGL)Segn la naturaleza de la fase mvil, la tcnica cromatogrfica correspondiente recibe el nombre de dicha fase mvilCL Fase EstacionariaSlidaLquidaCromatografiaLquido-Lquido(CLL)CromatografiaGas-Slido (CGS)TIPOS DE CROMATOGRAFIA

  • CROMATOGRAFIAClasificacinSegn la forma de llevar a cabo la separacin cromatogrfica, es decir segn el dispositivo utilizado para llevar a cabo el proceso entre la fase mvil y la fase estacionaria se tienen dos tipos de tcnicas cromatogrficasCROMATOGRAFIA PLANALa fase estacionaria est colocada en una superficie planaCROMATOGRAFIA EN COLUMNALa fase estacionaria est colocada en una columna y la separacin se realiza por elucin con una fase mvil (lquido o gas). TECNICAS CROMATOGRAFICAS

  • CROMATOGRAFIAClasificacinCROMATOGRAFIA PLANALa fase estacionaria est colocada en una superficie planaCROMATOGRAFIA EN PAPELEn la que el papel acta como soporte de la fase estacionariaCROMATOGRAFIA EN CAPA FINAEn la que un slido acta como fase estacionaria (cromatografia de adsorcin), se extiende en una capa delgada sobre una placa, que generalmente es de vidrio o aluminio

  • CROMATOGRAFIAClasificacinCROMATOGRAFIA EN COLUMNASe utiliza un tubo cilndrico (columna), en cuyo interior se coloca la fase estacionaria y a travs de ella se hace pasar la fase mvil (lquido o gas). El flujo de la FM a travs de la FE se consigue por presin, por capilaridad o por gravedadPor presinCromatografa Lquida HPLCPor capilaridadCromatografa de gases

    Por gravedadCromatografa en columna abierta

  • Fase mvilFase estacionariaCROMATOGRAFIAClasificacinCROMATOGRAFIA EN COLUMNA

  • CROMATOGRAFIAClasificacin