Manual de Laboratorio en Bioquimica Clinica y Control de Calidad

Edición 2004

Levantado de Texto:MSc. Anita Matamoros García

Revisión de texto:Equipo Técnico Científico del CNDR y Hospitales

Cuidado de la Edición:Dr. Gianfranco ProfetiMSc. Anita Matamoros GarcíaIng. Consuelo Vega Reyes

Diagramación:Martha Medina Ruiz

Diseño de portada:MSc. Anita Matamoros García

Realización de portada:Roberto Carlos Martínez Ch.

Impresión:Litografía Nicaragüense (LITONIC)

MINISTERIO DE SALUD

El presente documento constituye un esfuerzo del Equipo Técnico Científico del Centro Nacional de Diagnóstico yReferencia del Ministerio de Salud, reservándose dicho Ministerio, todos los derechos de autor conforme lodispuesto en la legislación civil de la materia.

El presente Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad, edición 2004, nopuede reproducirse o transmitirse por método o forma alguna, sea electrónico o mecánico, incluyendo copiasfotostáticas, cintas magnetofónicas, acumulación de información con memoria ni através de ninguna otra forma,sin autorización por escrito del Ministerio de Salud de Nicaragua.

www.minsa.gob.ni

Complejo Nacional de Salud Dra. Concepción Palacios.PBX (505) 289-4700. Apartado Postal: 107. Managua.

LLLLLa edición 2004 del Manual de Pa edición 2004 del Manual de Pa edición 2004 del Manual de Pa edición 2004 del Manual de Pa edición 2004 del Manual de Procedimientosrocedimientosrocedimientosrocedimientosrocedimientosde Laboratorio en Bioquímica Clínica y Controlde Laboratorio en Bioquímica Clínica y Controlde Laboratorio en Bioquímica Clínica y Controlde Laboratorio en Bioquímica Clínica y Controlde Laboratorio en Bioquímica Clínica y Controlde Calidad fue financiada por el PMSS.de Calidad fue financiada por el PMSS.de Calidad fue financiada por el PMSS.de Calidad fue financiada por el PMSS.de Calidad fue financiada por el PMSS.

Componente “Modernización de Hospitales”

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidadii

MARCO LEGAL

El presente documento, como Manual de Procedimientos tiene susustento legal dentro del marco jurídico y regulatorio existente parael Sector Salud, principalmente lo dispuesto en la Constitución Política(Arto.59), Ley No.423 “Ley General de Salud”, su Reglamento y enla Ley Ejecutivo”, y su Reglamento, encaminados a garantizar elderecho a la salud de todos los nicaragüenses.

La Ley No. 423 “Ley General de Salud, en su Arto.4 establece:“Corresponde al Ministerio de Salud, como ente rector del Sector,coordinar, organizar, supervisar, inspeccionar, controlar, regular,ordenar y vigilar las acciones en salud, sin perjuicio de las funcionesque deba ejercer frente a las instituciones que conforman el sectorsalud, en concordancia con lo dispuesto en disposiciones legalesespeciales”.

De igual manera, la Ley General de Salud, en su Arto.2 estableceque este Ministerio es el órgano competente para aplicar, supervisar,controlar y evaluar el cumplimiento de la presente Ley y suReglamento; así como elaborar, aprobar, aplicar, supervisar y evaluarnormas técnicas, formular políticas, planes, programas, proyectos,manuales e instructivos que sean necesarios para su aplicación.

Es responsabilidad de los representantes de establecimientosproveedores de servicios de salud, entre otras consignadas en laLey General de Salud, y su Reglamento, independientemente de sunaturaleza jurídica, garantizar el cumplimiento de los manualesrelativos a la salud y estándares de calidad establecidos por el ÓrganoRector de la Salud.

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad iii

REPUBLICA DE NICARAGUAMINISTERIO DE SALUD

Lic. Margarita Gurdián LópezMinistra de Salud

Dr. Israel Kontorovsky ArtolaVice-ministro de Salud

Dr. Enrique Alvarado AbaunzaSecretario General

Dr. Alcidez González MairenaDirector General

Centro Nacional de Diagnóstico y Referencia

Equipo Técnico Científico del Centro Nacional de Diagnóstico yReferencia (CNDR) del Ministerio de Salud de Nicaragua

Dr. Gianfranco Profeti AsesorPrograma de Control de Calidad en los Laboratorios Clínicos

MSc. Anita Matamoros García Resp. Dpto. Bioquímica ClínicaCentro Nacional de Diagnóstico y Referencia

Ing. Consuelo Vega Reyes Directora Laboratorio ClínicoCentro Nacional de Diagnóstico y Referencia

Equipo Técnico Científico que colaboró en la revisión del Manual de Procedimientosde Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad:

Lic. Maritza Baca Hospital Bertha CalderónLic. Agustina Canales Hospital Manuel de Jesús RiveraLic. Cándida Pérez Hospital Antonio Lenin FonsecaLic. Alex Ramírez Hospital Alemán NicaragüenseLic. Francisco Rodríguez Hospital Fernando Vélez PáizLic. Rosa Emelina Alonso Hospital Escuela Oscar Danilo RosalesLic. Rosa Padilla Hospital Humberto AlvaradoLic. Marlene Montiel Hospital Amistad Japón-NicaraguaLic. Noel Olivas Hospital Alfonso Moncada GuillénLic. Alden Mendoza Hospital AsunciónLic. Josefina Salinas Hospital Alejandro Dávila Bolaños

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidadiv

Tabla de Contenido

PRESENTACIÓN .............................................................................................................. ix

INTRODUCCIÓN ............................................................................................................. xi

PRIMERA PARTE1.1 Finalidad ............................................................................................................... 31.2 Ámbito de referencia ............................................................................................ 31.3 Responsabilidad .................................................................................................... 31.4. Informaciones generales........................................................................................ 3

1.4.1 Aspectos éticos .......................................................................................... 31.4.2 Acceso a los servicios de salud ............................................................... 41.4.3 Acceso a las prestaciones de laboratorio ................................................. 41.4.4 Programación y reservación de los servicios de laboratorio ..................... 5

1.5 Criterios para evitar errores en la fase pre-analítica ............................................. 51.5.1 Preparación de los pacientes .................................................................... 51.5.2 Modalidad de la demanda de los exámenes ............................................ 61.5.3 Modalidad de toma de muestras .............................................................. 61.5.4 Toma de muestra de sangre .................................................................... 61.5.5 Curva de tolerancia a la glucosa ............................................................. 81.5.6 Toma de muestra de orina ...................................................................... 91.5.7 Toma de muestra de heces ....................................................................101.5.8 Modalidad de transporte .........................................................................101.5.9 Organización del trabajo .........................................................................121.5.10 Criterios de conformidad de las muestras ..............................................121.5.11 Centrifugación de las muestras ...............................................................131.5.12 Modalidad de conservación......................................................................13

1.6 Exámenes urgentes ...............................................................................................141.7 Validación ..............................................................................................................151.8 Entrega de resultados ...........................................................................................15

SEGUNDA PARTE2.1 Finalidad ..............................................................................................................192.2 Instrucción ...........................................................................................................192.3 Generalidad .........................................................................................................192.4 Operaciones preliminares .....................................................................................192.5 Calibración y control ...........................................................................................222.6 Gestión de la sesión de trabajo ..........................................................................232.7 Inicio del trabajo .................................................................................................23

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad v

2.8 Errores en la fase analítica .................................................................................232.9 Gestión de las situaciones “fuera de control” ...................................................... 242.10 Fin de la sesión de trabajo .................................................................................25

TERCERA PARTE3.1 Finalidad ..............................................................................................................293.2 Ámbito de referencia ...........................................................................................293.3 Responsabilidad ...................................................................................................293.4 Generalidad .........................................................................................................29

3.4.1 Control de Calidad Interno ........................................................................303.4.2 Objetivos del programa de CCI ................................................................31

3.5 Organización ........................................................................................................323.6 Descripción de los controles ................................................................................323.7 Aceptación de los resultados ...............................................................................32

3.7.1 Evaluación inmediata de los resultados .....................................................323.8 Estudio estadístico de los datos ..........................................................................333.9 Límites de confianza ............................................................................................363.10. Presentación gráfica manual de los resultados ....................................................37

3.10.1 Presentación gráfica de los resultados encontrados por medio de un programa de computadora, con aplicación práctica del algoritmo de Westgard (reglas sencillas y múltiples) ...............................38

3.11 Gestión de las situaciones fuera de control ........................................................403.12 Control de Calidad Interno sin sueros de control ...............................................403.13 Evaluación retrospectiva.......................................................................................413.14 Archivo ................................................................................................................42

CUARTA PARTE4.0 Finalidad ..............................................................................................................454.1 ÁCIDO ÚRICO .....................................................................................................454.2 ALBÚMINA ...........................................................................................................484.3 ALBÚMINA (en orina) .........................................................................................524.4 AMILASA .............................................................................................................544.5 BILIRRUBINA TOTAL ...........................................................................................584.6 BILIRRUBINA DIRECTA .......................................................................................624.7 BILIRRUBINA INDIRECTA ....................................................................................644.8 CALCIO ...............................................................................................................644.9 CREATINA CINASA (CK) ..................................................................................... 694.10 CREATINA CINASA (CK) MB ...............................................................................724.11 COLESTEROL TOTAL ...........................................................................................764.12 COLESTEROL HDL ...............................................................................................79

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidadvi

4.13 COLESTEROL LDL................................................................................................824.14 CREATININA........................................................................................................844.15 ACLARAMIENTO DE LA CREATININA .................................................................884.16 CLORO ................................................................................................................914.17 MAGNESIO ..........................................................................................................954.18 POTASIO .............................................................................................................984.19 SODIO ...............................................................................................................1014.20 HIERRO .............................................................................................................1054.21 FOSFATASA ÁCIDA ...........................................................................................1094.22 FOSFATASA ALCALINA......................................................................................1124.23 FÓSFORO INORGÁNICO ....................................................................................1164.24 GAMMA GLUTAMIL TRANSFERASA ...................................................................1204.25 GLUCOSA ..........................................................................................................1224.26 DESHIDROGENASA LÁCTICA ............................................................................1264.27 PROTEINAS TOTALES .......................................................................................1304.28 TRANSAMINASA (TGO-AST) .............................................................................1344.29 TRANSAMINASA (TGP-ALT) ..............................................................................1374.30 TRIGLICÉRIDOS ................................................................................................1414.31 UREA ...............................................................................................................144

QUINTA PARTE: ANEXOS5.1 BIBLIOGRAFÍA ...................................................................................................1515.2 LÉXICO ..............................................................................................................154

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad vii

PRESENTACIÓN

El presente “Manual de procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica yControl de Calidad”, es una herramienta básica y fundamental para mejorar lacalidad de los análisis bioquímicos que se realizan tanto a nivel hospitalario asícomo en las diferentes Unidades de Salud, lo cual constituirá un valioso apoyopara el diagnóstico de las diferentes enfermedades que padece la poblaciónnicaragüense.

Dicho Manual es el resultado de una revisión bibliográfica detallada y de unproceso de encuentros técnicos que surgió ante la necesidad de estandarizarmetodologías, que permitiera unificar los conocimientos y velar en formaconjunta por la calidad que brindan los servicios de laboratorio clínico, de talmanera que proporcionará los elementos necesarios para lograr la confiabilidadde los resultados de laboratorios, todo el proceso anterior recibió el apoyo delPrograma Modernización del Sector Salud.

Sirva entonces este Manual como guía a todos los Profesionales de Laboratorios,en el área de Bioquímica Clínica, el cual ayudará a mejorar la calidad de losresultados en todos los laboratorios del Sistema de Salud.

Margarita Gurdián L.Ministra de Salud

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad ix

INTRODUCCIÓN

Este primer manual de procedimientos es el resultado de un proyectoiniciado por el Centro Nacional de Diagnóstico y Referencia. En el secristaliza gran parte del trabajo de los profesionales y técnicos, de la familiade Laboratorio Clínico.

El propósito de este manual, es ofrecer un servicio profesional a losLaboratorios Clínicos, en el que se incluyen preparación del paciente, tomade la muestra, conservación y transporte de la misma. Además proporcionainformación sobre los métodos de determinación enzimáticos ycolorimétricos de punto final.

El laboratorio de análisis de Bioquímica Clínica tiene que predisponer,documentar y mantener activo un sistema de calidad, para garantizar losrequisitos especificados y la conformidad de los productos. Es tareafundamental de un laboratorio el proveer resultados confiables, entendiendopor veracidad de los resultados analíticos, la precisión, la exactitud, lasensibilidad, la especificidad y la eficiencia instrumental.

Para iniciar el Control de Calidad Interno en el Laboratorio Clínico se debeestablecer un conjunto de acciones, para asegurar la calidad en losresultados finales, cubriendo así todas las fases del laboratorio. Laveracidad, como índice de calidad, caracteriza de modo global un resultadoanalítico.

Para lograr altos estándares de calidad es necesario el seguimiento,supervisión y evaluación de las diferentes fases del laboratorio: pre-analítica,analítica y post-analítica.

En Nicaragua, el gran reto para los Laboratorios Clínicos ha sido sureadecuación y reorganización, en forma tal que permita satisfacer no sólola demanda diagnóstica de las enfermedades infecciosas, sino también paraatender las enfermedades no transmisibles y cubrir la creciente demanda enBioquímica Clínica.

Con este manual esperamos contribuir con el mejoramiento del servicio delos Laboratorios Clínicos.

Gianfranco ProfetiAsesor

Control de Calidad en Bioquímica Clínica

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad xi

PRIMERA PARTE

PROCEDIMIENTO DESDE EL ACCESO A LAS

PRESTACIONES DE QUÍMICA CLÍNICA EN LA

FASE ANALÍTICA

EXÁMENES URGENTES

VALIDACIÓN DE LOS RESULTADOS

ENTREGA DE LOS RESULTADOS

1.1. FinalidadEl presente procedimiento explica la organización del laboratorio de análisis y sus relacionescon los clientes externos e internos de acuerdo con la modalidad de:

u Acceso a las prestaciones diagnósticas

u Ejecución de muestras biológicas

u Envío y conservación de muestras

u Entrega de resultados

u Exámenes urgentes

u Validación del trabajo

1.2. Ámbito de referenciaEl presente procedimiento está aplicado a un laboratorio de análisis, desde las seccioneshospitalarias, a otros lugares de toma de muestras, y a los lugares de entrega de resultados.

1.3. ResponsabilidadLa responsabilidad debe ser conocida y distribuida según sus funciones por:

u El director del hospital

u El responsable del laboratorio

u Los responsables de las diferentes secciones del laboratorio

1.4. Informaciones generalesPara la recolección de las muestras que se analizarán en el laboratorio de química clínica,se recomienda cumplir con tres objetivos fundamentales:

a) Lograr una muestra apropiada con el volumen deseado.

b) Limitar la variabilidad de las condiciones de la toma de muestra para lograr siempre elmismo procedimiento con los diferentes pacientes.

c) Minimizar los dolores que se le pueden causar al paciente cuando se le tome la muestray excluir eventuales situaciones de riesgo.

1.4.1. Aspectos éticos

Los principios de ética médica deben estar presentes en las diferentes etapas que constituyenel diagnóstico de laboratorio, empezando desde la toma de muestra. Aunque no es necesariolograr el consenso escrito u oral del paciente, seguramente que es muy importante contarcon su colaboración, a través de una correcta información. La información para el pacienteconsiste en explicar el procedimiento médico que constituye la operación de la toma demuestra, la clase de examen que será analizado y cómo podrá ser utilizado luego el resultadode su examen.

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 3

Cualquiera que sea el procedimiento realizado en el paciente, el resultado del análisis debeser confidencial y protegido de la indiscreción. Todo el personal de laboratorio, sea derecepcion, de toma de muestra, de transporte o de entrega de resultados, tiene que respetarel secreto profesional.

Los resultados de los pacientes de consulta externa pueden ser entregados a una personaextraña, siempre y cuando ésta presente una autorización firmada por el paciente.

1.4.2. Acceso a los Servicios de SaludEl acceso a los servicios de laboratorio clínico que den respuesta a las necesidades de cadapaciente, se garantiza a través de la planificación mensual y anual que realiza el responsabledel servicio, tomando en cuenta:

u Misión y capacidad de la institución.

u Programación de insumos acorde a la producción de servicio y al perfil de la institución.

u Cobertura del servicio con personal en horarios de 24 horas para hospitalizados yemergencia; consulta externa, de 8:00 AM a 3:00 PM.

u Tiempo de espera razonable, no mayor de 15 minutos.

La información a pacientes y familiares acerca de los servicios durante el proceso deadmisión, la brinda el personal del laboratorio clínico, a través de afiches, murales, volantesque informan sobre la naturaleza, las metas, la disponibilidad y los costos de la atención.

1.4.3. Acceso a las prestaciones de laboratorioPara obtener una muestra biológica, se tiene que cumplir los siguientes procedimientos:

u Respetar los horarios de salida y llegada de las muestras biológicas.u Registrar correctamente las muestras.u Aplicar las etiquetas para la identificación de la muestra de modo que no se desprenda

y de forma vertical, para que permita la observación de la muestra por transparencia.Poner las indicaciones necesarias para la identificación del paciente (en lo posible sexoy edad) y el tipo de exámenes solicitados.

u Utilizar correctamente el tubo de ensayo para la recolección de la muestra de sangre.u Utilizar correctamente frascos de boca ancha para la recolecta de otro material biológico.u Transportar correctamente los materiales biológicos.

El respeto de estos procedimientos es esencial porque, cada vez que no se cumplen, se poneen duda la veracidad de los resultados. Algunos analitos tienen un tiempo de ejecuciónpreciso, de modo que para éstos es esencial el respeto de los horarios de la entrega de lasmuestras al laboratorio.

El laboratorio es responsable completamente de las actividades propias:

u Aceptar directamente las diferentes muestrasu Preparar las muestras para realizar los exámenesu Ejecutar el examen

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad4

u Compilar los resultadosu Entregar los resultados.

1.4.4. Programación y reservación de los servicios de laboratorio

Existen dos modalidades de acceso a los servicios de laboratorio: 1. Acceso directo porexámenes de rutina, y 2. Acceso de exámenes “URGENTE”.

1.5. Criterios para evitar errores en la fase pre-analíticaEl primer paso es minimizar los errores en la fase pre-analítica (modalidad de registro demuestras, toma de muestras, recolección de muestras, transporte, conservación de lasmuestras.

Criterios específicos por verificar:

1. Preparación del paciente2. Modalidad de la demanda de los exámenes3. Modalidad de toma de muestra4. Modalidad de transporte5. Organización del trabajo6. Conformidad de la muestra7. Centrifugación y separación correcta de la muestra8. Modalidad de conservación.

Un procedimiento pre-analítico bajo control es un elemento de seguridad en el laboratoriopara garantizar la calidad.

1.5.1 Preparación de los pacientes

La consulta del laboratorio para un fin de diagnóstico se realiza normalmente por la mañana.Para efectuar la toma de muestra, el paciente debe mantener un ayuno de 6–8 horas enparticular para exámenes del metabolismo lipídico y glucídico. La falta de ayuno puede hacerel suero opalescente, con posible interferencia en la fase analítica.

Para pruebas de tolerancia a la glucosa, es necesaria una dieta glucídica equilibrada.

Se debe evitar fumar en las horas antes de la toma de muestra, ya que la nicotina puedeaumentar los valores del cortisol, de las catecolaminas, los granulocitos y monocitos, ydisminuir los eosinófilos. El fumador crónico puede tener falsamente elevados algunosvalores de parámetros oncológicos (CEA) y cardíacos (CK).

El humo de cigarrillo del paciente o presente en el cuarto, puede elevar los valores de ladeterminación de amonio. Así como también el técnico de laboratorio que realiza lasextracciones sanguíneas no debe estar estresado porque el estrés libera amonio.

Algunos parámetros bioquímicos tienen particulares ritmos biológicos y están sometidos aimportantes variaciones circadianas. El monitoreo de éstos puede dar diversos valoresdistintos en las diferentes horas (ACTH, prolactina, cortisol, hierro, calcio, catecolamina urinaria).


Otros parámetros tienen mínimas variaciones de poco significado (cloro, VSG, potasio,factores de coagulación y hormonas de la fertilidad).

Muchos fármacos pueden interferir en la determinacion de algunos analitos. Antes de la tomade muestra, es importante observar una abstención total de fármacos, excluyendo claramenteaquéllos fármacos salvavidas y las terapias que no se pueden interrumpir.

1.5.2. Modalidad de la demanda de los exámenes

Cada muestra tiene que estar acompañada de una orden de examen bien escrita: connombre, apellidos y, si es posible, la edad, el sexo y la procedencia.

1.5.3. Modalidad de toma de muestras

Existen diferentes modalidades de toma de muestras: sangre, orina y heces.

1.5.4. Toma de muestra de sangre

La sangre periférica constituye el material biológico de elección sobre el cual se realiza lamayor parte de las investigaciones de laboratorio relacionadas con la química clínica.

u La toma de muestra de sangre puede ser venosa, capilar y arterial.

u La sangre arterial se utiliza para estudiar los parámetros de los equilibrio ácido-base.

u La sangre venosa o capilar se utiliza indiferentemente para determinar todos los analitos.

u Los instrumentos que se utilicen para la toma de muestra tienen que ser absolutamenteestériles, químicamente inertes (para evitar hemólisis), muy eficientes para la penetra-ción a través de la piel y, consecuentemente, poco traumáticos (óptimo es el sistemavacutainer).

a) Desinfección

La zona de la toma de la muestra tiene que estar limpia, desinfectada con sustancias eficacesy que no puedan hacer interferencia con el examen requerido: secar la piel con desinfectanteantes de la punción para evitar su aspiración.

b) Toma de muestraPara la técnica de la toma de muestra venosa, se deben seguir las recomendacionesinternacionales del NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards).

El personal deberá usar guantes de látex para realizar operaciones de recolección de sangrey para toda manipulación de sangre, suero, plasma y otros especimenes.

La toma de muestra se efectúa preferiblemente de una vena anterior del brazo: en la mayoría,se escoge la vena cefálica o la vena cubital mediana. También pueden utilizarse para la tomaotras venas de menor calibre; sin embargo, se tiene que considerar que el flujo de la sangrepuede ser lento y que la vena puede colapsarse con facilidad. En caso de dificultad, la tomade muestra se puede efectuar también de una vena del dorso de la mano o del pie. Se colocael torniquete por encima del sitio a puncionar, haciendo un nudo de manera que se puedaquitar fácilmente, halando el extremo libre.


Para prevenir la hemoconcentración, se precisa evitar estasis venosa prolongada: esimportante quitar el torniquete cuando la aguja está ingresada en la vena.

El tiempo prolongado de aplicación del torniquete es responsable de variaciones significativasde la concentración de numerosos componentes de la sangre (después de 3 min., aumentael 13.0 % la concentración del colesterol total y del colesterol HDL; el 12.0% del hierro,los triglicéridos, las proteínas totales y CPK, la TGO puede aumentar más del 16.0% despuésde la aplicación muy estrecha del torniquete). Solicitar al paciente que empuñe la mano parafacilitar la aparición de la vena. El área seleccionada debe estar limpia y seco de alcohol.

Introducir la aguja con el bisel hacia arriba de 1 a 2 cm hasta ver que fluya la sangre,formando un ángulo de 15º con la piel.

Retirar el pistón, retirando despacio de modo que permita fluir la sangre espontáneamente.

Sacar la aguja de la jeringa, transferir suavemente la sangre en el tubo de ensayo sin ejerceralguna presión sobre el pistón (hemólisis). La sangre tiene que fluir regulamente sin crearvórtices. Mezclar pronto la sangre con el anticoagulante por inversión con un suavemovimiento. Agitar enérgicamente la muestra podría producir hemólisis mecánica.

Es importante la relación entre el anticoagulante y la sangre, de modo particular para losanálisis de coagulación y de hematología (PT, TPT, fibrinógeno, VSG, BHC, etc.). Unainadecuada relación invalida la precisión de los resultados.

Todas las muestras de coagulación tienen que estar examinadas al menos entre dos horas,y el examen realizarse dos veces. En caso de toma de muestra complicada con el riesgo deaspiración de líquido intersticial (sumamente coagulante), se debe comunicar el problema porescrito.

La elección de un anticoagulante idóneo tiene que hacerse según el tipo de análisis que seva a realizar, tomando en consideración también que algunos anticoagulantes puedeninterferir en la determinación de algunos análisis de química clínica.

Recordar siempre que la heparina inhibe la fosfatasa ácida, el oxalato inhibe: la amilasa, lafosfatasa ácida y LDH , el citrato inhibe la fosfatasa alcalina y la amilasa y el EDTA la fosfatasaalcalina y CPK.

En caso que el paciente tenga una infusión venosa, es necesario efectuar la toma de muestraen otro brazo o en lugar lejano desde el punto de infusión.

El laboratorio tiene que preparar un documento con todas las informaciones para establecerel tipo de anticoagulante que se va a utilizar, el volumen necesario de sangre y el tipo detubos de ensayo, conforme las diferentes metódicas analíticas usadas. Establecer también sise utiliza un conservante (fluoruro para glucosa), en caso de ejecutar la investigación clínicaen un segundo momento.

El incumplimiento de estas recomendaciones generales puede crear graves alteraciones dela toma de muestra de la sangre como microcoágulos, hemólisis, activación de los factoresde coagulación y de las plaquetas, alteración de los valores de muchos parámetros de químicaclínica.


Una de las causas más importante para que una muestra de sangre se considere no idóneaestá representada por la hemólisis. La hemólisis es la ruptura del glóbulo rojo y el pasajeal plasma o suero de hemoglobina (coloración de la muestra) y de todas las sustanciascontenidas (potasio y enzimas).

Las causas más frecuentes de hemólisis son:

u Aguja de calibre pequeño.u Presencia de alcohol sobre la piel.u Excesiva aspiración (toma de muestra con jeringa).u Excesiva presión en el pasaje de la sangre con la jeringa al tubo de ensayo.u Mezcla muy violenta de la toma de muestra.u Toma de muestra muy dificultosa y prolongada.u Toma de muestra de zonas edematosas.

Existen varios tipos de hemólisis:

1. Mecánica: Provocada por excesiva fuerza de aspiración en la toma de la muestra o poruna presión excesiva sobre el pistón en el momento de la expulsión de la sangre desdela jeringa (antes sacar siempre la aguja).

2. Física: Por conservación prolongada de la muestra en condiciones no idóneas detemperatura (calor o congelación).

3. Osmótica o química: Por presencia de agua, alcohol o metales pesados en la aguja,jeringa o en los tubos de ensayo.

1.5.5. Curva de tolerancia a la glucosa

Existen al menos tres tipos de curvas de tolerancia a la glucosa: el protocolo está compuestode una parte común y de una modalidad diferente en la suministración del carbohidrato yen el tiempo de la toma de muestra.

Procedimiento común:

u Efectuar la toma de muestra para una glicemia basal utilizando, si es posible, un tubode ensayo con inhibidor de la glicolisis (monoiodoacetato).

u Enviar la muestra al laboratorio y esperar el resultado.

Antes de proceder con la suministración del carbohidrato, es necesario conocer si el pacientetiene una glicemia muy alterada y si toma alguna terapia hipoglicemizante oral o parenteral.En caso afirmativo, no se puede proceder sin la autorización de responsabilidad del médicotratante.

Excluyendo la práctica de la terapia hipoglicemizante, se puede proceder con un valor deglucosa inferior a 140.0 mg/dl. Con un valor igual o superior a 140.0 mg/dl, no proceder,y aconsejar al paciente que realice una glicemia horaria.


Procedimiento diferenciado:

Curva de tolerancia con seis tomas de muestra

u Suministrar por vía oral al paciente una carga de glucosa igual a un gramo de glucosapor kilogramo de peso corporal. Disolver la glucosa anhidra en 300 ml de agua. Tomarmuy rápidamente.

u Efectuar la toma de muestra después de 30, 60, 90, 120 y 180 minutos luego de haberingerido la glucosa.

u Enviar los tubos de ensayo correctamente etiquetados al laboratorio.

Curva de tolerancia con dos tomas de muestra (típica del monitoreo en estadode gravidez).

u Suministrar por vía oral a la paciente una carga de 50.0 g de glucosa.u Efectuar la toma de muestra después de 60 minutos, luego de ingerir la glucosa.u Enviar el tubo de ensayo correctamente etiquetado al laboratorio.

Curva de tolerancia con tres tomas de muestra

u Sumistrar por vía oral al paciente una carga de 100.0 g de glucosa disuelta en 300 mlde agua.

u Efectuar la toma de muestra después de 60 y 120 minutos de ingerir la glucosa.u Enviar el tubo de ensayo correctamente etiquetado al laboratorio.

Modalidad de toma de muestra para PROLACTINA

Efectuar:

Primera toma de muestra: El paciente tiene que estar en descanso absoluto por 30 minutosante de la toma de sangre.

Toma de muestra de confirmación: En caso que los valores de la primera toma de muestraestuviera sobre el valor de referencia, es oportuno repetir el examen efectuando la toma demuestra con las siguientes modalidades:

u Extender el paciente sobre la cama.u Aplicar una venoclisis con solución fisiológica.u Después de 30 minutos, cerrar la venoclisis.u Después de 5 minutos, aspirar y eliminar dos ml de sangre.u Llenar el tubo de ensayo para enviar al laboratorio.

1.5.6. Toma de muestra de orina

Las muestras de orina tienen que ser recogidas “a medio chorro” en envases limpios paraevitar la contaminación con sustancias azucaradas. La muestra, preferiblemente, debe ser laprimera de la mañana. Las muestras tienen que ser enviadas al laboratorio lo antes posiblepara evitar modificaciones de la morfología de los componentes del sedimento (crecimientode las bacterias, eventual daño de los cilindros).


Las muestras de orina que son recogidas para análisis pueden ser de tres tipos:

u Primera orina de la mañana, después de un período de 8 horas de descanso.u Muestra de orina casuales o a cualquier hora.u Muestra de orina recogida para un tiempo preestablecido.

En cada caso debe observarse las siguientes reglas:

a) Limpiar las manos y los genitales antes de la micción.b) Limpiar las manos después de la recogida.c) Usar contenedores de monouso con capacidad suficiente, con tapa de rosca o prefe-

riblemente con boca ancha y etiqueta idónea para anotar la información necesaria.d) Entregar la muestra cuanto antes en el laboratorio.

Recolección de orina de 24 horas

Para la recolección de orina de 24 horas, se tiene que utilizar un frasco de 2.5 - 3.0 litrosde boca ancha, con tapón de rosca. Añadir al frasco un estabilizante, si es necesario.

Para la recogida de orina, se procede de la siguiente manera:

a) En el tiempo preestablecido, vaciar la vejiga y eliminar toda la orina.b) Posteriormente, comenzar a recoger toda la orina de 24 horas.c) Al cumplir las 24 horas, vaciar de nuevo la vejiga y depositar toda la orina en el frasco.

Conservar las orinas a 2-4oC.

Al finalizar la recolección de orina, debe ser enviada inmediatamente al laboratorio.

1.5.7. Toma de muestra de heces

Para la recolección de muestra de heces, es importante la colaboración del paciente, lamodalidad de recogida y envío al laboratorio.

El frasco debe ser limpio, de plástico o de vidrio, de boca ancha y con tapa de rosca, elvolumen de las heces para recoger debe ser igual al tamaño de una nuez.

En caso de estreñimiento, recoger la muestra después de aplicar un enema para obtener lamuestra.

No recoger las heces en el período menstrual.

Evitar contaminar la muestra de heces con orina.

1.5.8. Modalidad de transporte

El transporte puede ser dentro o fuera del hospital.

En el transporte a lo interno del hospital, los tubos de ensayo deben estar tapados,con etiqueta y con las órdenes de los exámenes; las muestras de sangre deben ser enviadasen termos con gradillas, que se puedan lavar fácilmente y, posiblemente, esterilizar.


Tienen que ser lo suficientemente fuertes y manejables, garantizar una adecuada temperaturay evitar roturas con eventual esparcimiento de material.

La modalidad del transporte de las muestras debe garantizar la seguridad de quien lastransporta, del laboratorio y de quien las recibe.

El laboratorio acepta y analiza sólo muestras acompañadas con toda la información y conla orden de solicitud del análisis.

La modalidad de la demanda (con informaciones para identificar al paciente, nombre delexamen solicitado y eventuales informaciones clínicas, cuando sean necesarias) debe seracordada con la dirección del hospital y el responsable del laboratorio.

Todas las muestras tienen que llegar cuanto antes al laboratorio, evitando una inútil estanciaen las diferentes secciones del hospital o en otra parte.

El transporte de muestras susceptibles a adulteración con el tiempo, debe realizarse conrapidez, comunicando la llegada al personal de laboratorio.

Es necesario que el personal destinado a la toma de muestras en las distintas seccioneshospitalarias, debe ser educado en la ciencia y técnica de la toma de muestras y así mejorarel sistema de calidad.

Para el transporte de muestras de sangre total o sueros fuera de la unidad de salud, seaconseja usar tubos de material de polietileno con tapones.

Si la muestra exige una conservación a baja temperatura, es indispensable el empleo determos de polietileno con hielo sintético o refrigerante, esto para evitar variaciones detemperatura.

Para evitar o disminuir los efectos de las vibraciones, colocar los tubos en un porta tubosde cartón, resistente a los choques y a las compresiones.

a) Sangre

En la mayor parte, esta modalidad de transporte no representa un problema para el buenresultado de la realización de los exámenes. En el transporte de estas muestras, losproblemas están correlacionados a la temperatura y al tiempo.

En la cuarta parte de este manual, “metodología especial de los diferentes analitos”, sedescribe la eventual particularidad de la modalidad de transporte.

Temperatura:En general, la temperatura no representa un factor crítico en el transporte de la muestra.La mayor parte de las muestras puede ser transportada a temperatura ambiente (18-20o C).En caso de temperaturas más elevada, es necesario transportarlas en termos con refrigerantes.

Tiempo:Las muestras de bioquímica clínica tienen que ser examinadas dentro de 8 horas a partir dela extracción sanguínea. Las muestras para exámenes de coagulación deben examinarsedentro de 2-3 horas.


b) Orina

El transporte de la muestra de orina puede realizarse a más tardar entre 4-5 horas a partirde la recolección, es necesario refrigerar las muestras.

c) Heces

Pueden ser transportadas a temperatura ambiente en un tiempo no mayor de una hora paraexamen de citología.

1.5.9. Organización del trabajo

Para la toma de muestra, se puede utilizar:

u Un único tubo, por paciente, utilizable para varios exámenes.u Un tubo para cada sección del laboratorio.

Cuando se cuenta con una computadora, el responsable del laboratorio encarga a un técnicopara la compilación de las hojas de trabajo.

La hoja de trabajo se envía a cada sección con los sueros–plasmas por examinar. Contienela identificación del paciente y el tipo de examen por ejecutar: es muy importante noequivocar la secuencia o invertir muestras.

1.5.10. Criterios de conformidad de las muestras

A la llegada del material, el técnico responsable de recibir la muestra verifica la adopciónde todas las medidas previstas para aceptar la muestra en las diferentes fases pre-analíticas.

En función de los criterios abajo expuestos, puede aceptar con reserva (escribiendo laanomalía encontrada, y la naturaleza del problema debe ser escrito en el resultado), orechazar la muestra. Al mismo tiempo, por falta de idoneidad comprobada de la muestra,se le comunicará al remitente que envíe otra muestra.

Los criterios deben ser conocidos por todo el personal del laboratorio y las diferentessecciones del hospital.

En el Laboratorio debe existir una documentación detallada diaria de las muestras rechazadaso señaladas de no conformidad y de las causas que motivaron tal decisión.

Criterios para evaluar la aceptabilidad del material biológico:

u Respeto del horario de llegada y salida de las muestrasu Registro correcto de las muestrasu Transporte correcto de los materiales biológicosu Identificación correctau Tubo de ensayo idóneou Cantidad suficiente de la muestrau Proporción correcta entre la sangre y el anticoagulante adecuado


u Uso correcto del conservanteu Ausencia de coágulo (hematología o coagulación)u Ausencia de o moderada hemólisisu Suero no muy opalescenteu Conservación a temperatura adecuadau No exposición a la luz solar directau Respeto de régimen dietético (sangre oculta en heces).

1.5.11. Centrifugación de las muestras

u La sangre proveniente de fuera del hospital debería llegar al laboratorio separada de laparte figurada.

u Para lograr suero, la muestra se deja normalmente a temperatura ambiente por 30minutos en tubos de vidrio, o por más tiempo en tubos de plástico. El tiempo puedereducirse, si se usan sustancias especiales que activan la coagulación.

u Se establece entre 45 minutos y 1 hora desde la toma de muestra, para proceder a lacentrifugación y a la separación del suero, para evitar hemólisis.

u Para lograr plasma, se debe centrifugar cuanto antes. Centrifugar 5-15 min. a 1.000–1200 g. para química-clínica y 5.000 g. por 15 min. para hemocoagulación. Los tubostienen que estar tapados para evitar aerosol o fenómenos de evaporación.

u El tapón debe quitarse con mucho cuidado para evitar el esparcimiento de materialpotencialmente peligroso y para no mezclar las partes separadas (en modo particular elplasma).

u Muestras opalescentes se pueden clarificar con sustancias tipo PEG, lipoclean.

1.5.12. Modalidad de conservación

a) Sangre

Un intervalo de tiempo muy largo desde la toma de la muestra hasta la realización de losanálisis puede causar una modificación en la concentración del analito y en la actividadbiológica. En caso que las muestras no se puedan transferir dentro de tres horas allaboratorio, es necesario separar el suero o plasma desde la parte corpuscular, mediante lacentrifugación. En la mayor parte de los analitos, se puede conservar la concentraciónmanteniendo a 20oC. Hacen excepción el sodio, potasio, cloro, la bilirrubina, fosfatasa alcalinay glucosa. Para establecer la glucosa, se usa una sustancia que inhibe la glicólisis (fluoro,iodio). Para los exámenes de coagulación, se recomienda efectuar la determinación en el másbreve lapso de tiempo o, en caso de imposibilidad, conservar la muestra en hielo. Para evitarel fenómeno de hemólisis y alteración de la morfología celular, hay que efectuar los exámenesde hematología entre 4-8 horas a partir de la toma de muestras.

La exposición de la muestra a la luz solar puede determinar un descenso de hasta el 50%de la bilirrubina. Para las otras determinaciones, el suero se puede conservar hasta 8 horasa partir de la toma de la muestra a temperatura ambiente y por 24 horas en refrigeración.


Existen tablas para medir la glicólisis en relación con la temperatura y el tiempo de la tomade muestra y la realización del examen. En general, para la conservación de las muestras,las temperaturas más cercanas a 0°C (no congelar) reducen notablemente todas lasreacciones de naturaleza química enzimática. La entidad de la reducción podrá ser desde 5hasta 10 veces, conforme la temperatura ambiente.

b) OrinaExisten varias modalidad de conservación de la orina, según el tipo de examen requerido:

Refrigeración: La conservación a 2-4o C es el método más sencillo, especificando interferenciasólo con la determinación del peso específico.

Acido Acético: La agregación de ácido acético (15 ml de ácido acético glacial) permite ladeterminación de muchos constituyentes, evitando la degradación y una orina alcalina(aldosterona, cortisol, estrógeno).

Acido Clorhídrico: La agregación de ácido clorhídrico (15 ml de ácido clorhídrico concentradopara 1500-2000 ml de orina) se aconseja para la determinación de algunas hormonas(catecolaminas, metanefrina) y metabolitos especiales (histamina).

Carbonato de Sodio: La agregación de carbonato de sodio (5 g para una recolección de 24horas) sirve como alcalinizante y está recomendada para la determinación de algunos analitoscomo: beta2-microbulina, porfirine, urobilinógeno.

c) HecesLa conservación por varios días para el examen químico-físico y el examen de sangre oculta,se puede realizar a 2-4°C.

1.6. Exámenes urgentesEl laboratorio define un procedimiento documentado para la recepción, tratamiento y entregade resultados de muestras urgentes.

El laboratorio define una política escrita para demandas verbales de muestras urgentes.

Por examen urgente se entiende aquéllos que se tienen que realizar en el más breve tiempoposible:

u El examen de urgencia debe realizarse en un período no mayor de 1 hora.u Las prestaciones de emergencia-urgencia deben brindar el servicio las 24 horas.u La orden del examen del servicio de emergencia debe contener la siguiente información:u Nombre y apellidosu Fechau Procedenciau Sexo y edad (si es posible)u Diagnóstico presuntivou Otras eventuales informaciones.

Es indispensable la firma y sello del médico tratante.


El registro debe ser escrito de forma muy clara y legible. La toma de muestra que no cumplacon los requisitos previstos en los procedimientos de este Manual, podrá ser excluida conel señalamiento de no conformidad.

Se pueden considerar exámenes urgentes de acuerdo al perfil de cada hospital los siguientes:

u GLUCOSAu UREAu CREATININAu ELECTROLITOS (Sodio, Potasio, Cloro)u BILIRRUBINA TOTAL Y FRACCIONADAu TRANSAMINASAS (GOT Y GPT)u AMILASAu CKu CK MBu LDHu TEST DE EMBARAZOu EXAMEN GENERAL DE ORINAu BIOMETRIA HEMATICA COMPLETAu TIEMPO DE PROTOMBINAu APTTu FIBRINOGENOu CALCIO (cuando es útil en el diagnóstico de la hipocalcemia y de la pancreatitis)u BETA HCG (para el diagnóstico del embarazo extra uterino).

1.7. ValidaciónTodos los resultados son validados (confrontados con los valores de otros parámetrosanalíticos para verificar una eventual correlación clínica diagnóstica) y aprobados por elresponsable del laboratorio o una persona designada. La valoración comprende también elControl de Calidad Interno y todas las fases de preparación, interpretación y transmisión delinforme de los resultados.

El laboratorio establece procedimientos para notificar inmediatamente al médico sobre losresultados críticos. Estos límites de alarma podrían definirse previamente con los médicosclínicos que utilizan el servicio de laboratorio.

1.8. Entrega de resultadosLos resultados deben ser retirados según el horario con la modalidad prevista en cadalaboratorio, y deben ser entregados sólo al paciente.

Los resultados pueden ser entregados a otra persona, con autorizacion escrita por el paciente.

u Los resultados no se pueden entregar por teléfono.u Sólo en caso de necesidad, se pueden comunicar al médico tratante.u La entrega de resultados tiene que preservar la privacidad del paciente.


SEGUNDA PARTE

INSTRUCCIONES INFORMATIVAS

GUÍA PARA EL USO DE LOS

SISTEMAS ANALÍTICOS

COMIENZO DEL TRABAJO

ERRORES EN LA FASE ANALÍTICA

GESTIÓN DE LA SITUACIONES

FUERA DE CONTROL

TRABAJO FINAL

2.1. Finalidada) Las presentes instrucciones informativas constituyen la guía para el funcionamiento

correcto de los sistemas analíticos en química clínica.

La utilización óptima de los sistemas analíticos determinan:u El comportamiento igual de todo el personal (con mayor o menor experiencia).u El intercambio entre los operadores sin alterar la calidad del servicio.u La aplicación de controles sencillos de los sistemas.

b) Generalidad y posibles causas de error en la fase analítica.

2.2. InstrucciónLas intrucciones informativas están en relación a todo el proceso de trabajo desde lasoperaciones preliminares hasta el fin de la sesión.

2.3. GeneralidadUn sistema analítico está compuesto de:

u Tecnologíau Metódicau reactivosu calibradoresu estándares

u Controles

Si al sistema analítico se añaden los operadores que lo usan y lo controlan, se establece unsistema organizativo. Las siguientes intrucciones toman en consideración los sistemasanalíticos conforme los puntos anteriores.

2.4. Operaciones preliminaresTodas las informaciones detalladas para cada equipo deben estar accesibles en el puesto detrabajo. Para la reconstitución de los calibradores, estándares, reactivos y controles, lasmetódicas deben permanecer en su caja. Se identifican distintos procedimientos para:

INSTRUMENTOS:

u Verificar que todos los eventuales productos, residuos, muestras, reactivos y material quepueda interferir con el correcto funcionamiento sean eliminados.

u Verificar el correcto enchufe eléctrico del equipo y la ausencia de riesgo (humedad).u Encender el equipo con el interruptor específico.u Encender eventual impresora.u Esperar que los programas operativos estén cargados.u Verificar que se tenga todo lo necesario (cubetas, reactivos, agua destilada, papel, etc.).


u Verificar si se encuentran situaciones no previstas u otros problemas.u Consultar el manual específico del equipo para resolver el problema.u Si el problema persiste, llamar al responsable del laboratorio y, si el problema persiste,

también llamar al técnico para el mantenimiento correctivo.u Por cualquier problema muy grave, es preciso informar al responsable del laboratorio.

Mantenimiento y control periódico de equiposSe debe contar con un programa anual de mantenimiento y control preventivo de los aparatosy equipos de laboratorio.

Es recomendable que tanto el personal técnico, responsable de la ejecución de procedi-mientos de diagnóstico y control de calidad, como el personal de apoyo que realice tareasde limpieza o mantenimiento, conozcan claramente su rol en el equipo de trabajo así comoel del conjunto del laboratorio. La comunicación permanente de los distintos niveles deresponsabilidad permite controlar la observación de los procedimientos establecidos y de lasmedidas de seguridad, así como la optimización de los mismos con el aporte de cadaexperiencia.

Inspección diaria por parte del técnico o analista antes de comenzar a trabajar:

EspectrofotómetroPipetasDestilador o desionizadorBalanzasCubetas de lectura fotométricas

Limpieza semanal:

Cambio de agua de Baño María

Mensual:

Calibración de espectrofotómetrosCalibración de pipetasLimpieza y control de balanzas

Trimestral:

Descongelamiento y limpieza de refrigeradoresLimpieza del destilador

Semestral:Descongelamiento y limpieza de congeladoresControl general de la instalación eléctrica y de gas

Anual:

Calibración de balanzas de precisión.


EQUIPO:

Con frecuencia el control de calidad se limita al estudio del error total del análisis y lacontribución de los equipos a este error se subestima, sin embargo cada día el laboratoriodepende en mayor grado de los resultados de diversos equipos.

El espectrofotómetro tiene que ser calibrado y controlado regularmente (seis meses) conpatrones, siendo muy importante sobre todo para métodos cuyo resultado se calculan en basede un coeficiente de absorbancia y que por algún motivo no pueden ser controladospermanentemente por un patrón de la misma sustancia por ser esta inestable, cara, etc.

En los fotómetros el sistema de selección de la longitud de onda se desajusta y el error queello ocasiona puede llegar a un 16%.

Un error fotométrico sistemático resulta cuando se utiliza un fotómetro de filtro con rangoespectral ancho. Se obtienen absorbancias menores que con luz de alta pureza espectral yaún se puede perder la linealidad de una curva de calibración.

El ancho de la banda espectral de un fotómetro no es controlable, es un factor intrínsecoa la construcción del aparato.

Sin embargo el ancho de la banda de luz en los fotómetros de espectro continuo, es unfactor variable que igualmente influye en la pureza espectral, el ancho de la banda de la luzestá determinado por las aberturas de entrada y salida del monocromador.

Una abertura ancha deja entrar la luz dispersada disminuyendo la pureza espectral. Algunosequipos de abertura normal hay que controlarla y mantenerla estrecha y uniforme para cadamétodo.

Un tipo de control muy frecuente para estos equipos es el patrón de absorbancia de sulfatode cobre y amonio a 540 nm, con el que se hace estudio de la reproducibilidad, estos equiposse fundamentan en la ley de Beer.

El analista debe conocer los límites de su equipo respecto a la pureza espectral para noutilizar su fotómetro inadecuadamente para ciertos métodos.

También debe tomar en cuenta la temperatura del laboratorio debe estar entre 22 y 24oCy la humedad de 60 ± 10% para la protección de los filtros.

REACTIVOS:

u Verificar que los reactivos sean suficientes e idóneos en cantidad, fecha de preparacióny vencimiento.

u Antes de usar nuevos reactivos verificar:u Fecha de vencimiento: Si está vencido, no se puede usar por motivo alguno. Usar

siempre los reactivos con el vencimiento más cercano.u Número de lote: Usar preferiblemente el mismo lote corriente para evitar la

recalibracion del equipo.u Preparar los reactivos para el uso diario con los siguientes procedimientos:u Llevar a temperatura ambiente (si es necesario).u Abrir delicadamente el frasco de reactivo sin crear aerosol (si es liofilizado).


u “Pipetear” la cantidad necesaria de líquido para reconstituir el liofilizado, haciendo bajarsuavemente por la pared del frasco y nunca crear vórtices.

u Esperar, al menos, 30 segundos antes de volver a tapar el frasco de reactivo.

u Después de los primeros 15 minutos, agitar suavemente invirtiendo el frasco de tanto entanto. Si es posible, utilizar agitadores específicos otros 15 minutos.

CALIBRADORES, ESTANDARES Y CONTROLES:

Antes de usar calibradores, estándares y controles, verificar:

u La fecha de vencimiento: Si está vencido, no se puede usar por motivo alguno. Usarsiempre los calibradores con el vencimiento más cercano.

u El número de lote: Usar preferiblemente siempre el mismo lote, (indispensable para loscontroles).

u Si se usan productos congelados, descongelar rápidamente a 37oC y luego agitar consuavidad unas cuantas veces por inversión del recipiente. Evitar absolutamente eldescongelamiento y congelamiento.

Preparar los calibradores, estándares y controles conforme los siguientes procedimientos:u Llevar a temperatura ambiente.u Destapar suavemente el frasco de reactivo, sin crear aerosol.u Añadir pipeteando suavemente la cantidad necesaria de líquido para reconstituir el

liofilizado, haciéndolo por las paredes del frasco sin crear vórtices.u Esperar al menos 30 segundos antes de volver a tapar el frasco de reactivo.u Dejar en reposo el tiempo necesario, normalmente entre 10-15 minutos.u Después de 10 minutos, mezclar suavemente de tanto en tanto por inversión, o usar los

específicos agitadores durante otros 15 minutos.

2.5 Calibración y control

CALIBRACIÓN:

Si no es necesario efectuar una nueva calibración, verificar:

u Fecha de la última calibración.u Vencimiento de la calibración.u Número de lote del reactivo.u Es obligatorio proceder con una nueva calibración cada vez que se cambia el lote de los

reactivos.

Terminada la calibración, es necesario:

u Verificar que las reacciones son lineales.u Verificar que los valores de la calibración son aquellos esperados.

u Verificar que no hay variaciones significativas entre los valores de las calibraciones de losúltimos 15 días.


u Archivar al menos por un mes los valores de las calibraciones para un eventual control.

En caso que las calibraciones no sean aceptables, se precisa repetirlas, buscando de formaindividual el problema:

u Errada la reconstitución o el uso de los calibradores.u Errada la reconstitución o el uso de los reactivos.u Errado el funcionamiento del equipo (temperatura, limpieza, etc.).

CONTROL:

Para evaluar el correcto funcionamiento de los sistemas analíticos, se precisa evaluar prontoel C.C.I. con suero de control con valores conocidos.

En cada caso, el examen de los controles tiene que efectuarse en un tiempo losuficientemente breve para lograr las medidas correctivas antes de la validación de la entregade los resultados.

Para su valoración, el resultado del control se confronta con los valores esperados,verificando si una o más reglas establecidas son violadas.

La negatividad indica una situación “subcontrol”. La violación de una o más reglas significauna situación “fuera de control” que precisa oportunas medidas correctivas.

2.6. Gestión de la sesión de trabajoSe compone desde un inicio, de la gestión de las situaciones “fuera de control” y de la gestióndel fin de la sesión de trabajo.

2.7. Inicio del trabajoUna vez verificadas las perfectas condiciones de los diferentes requisitos específicos de losequipos, es posible empezar la sesión de trabajo.

El primero y el más importante de los controles por realizar es verificar que la mayoría delos resultados presentados por el mismo analista no estén todos “a la deriva”, sino que esténdistribuidos según un comportamiento Gaussiano.

Si se verifica un comportamiento anómalo de los valores (todos bajos, todos altos) es precisoverificar con el uso del C.C.I. y reaplicar las reglas de bajo o fuera de control.

2.8. Errores en la fase analíticaLos errores en la fase analítica pueden ser: de sistema, aleatorio o casual, y grosero.

Error de sistema

Influye siempre de la misma manera sobre cada determinación, o sea, provoca la desviaciónunívoca (arriba o abajo) del valor medio medido, con respecto al valor esperado.

Error dependiente de una alteración constante que se mantiene durante un períododeterminado.


Coincide con exactitud (concordancia entre el valor “verdadero” y el valor encontrado).

Estos errores se pueden disminuir o eliminar.

Error aleatorio o casual

Es (normalmente) de pequeña entidad, debido a causas no evidentes, ligado al desarrollode la determinación.

Los valores normalmente se distribuyen alrededor de un valor medio.

Son errores difícilmente controlables.

Este tipo de error da lugar a que la repetición de una misma medición obtenga en cadaocasión un valor distinto; coincide con la precisión-imprecisión.

Error grosero

Cae completamente fuera y alejado del rango del colectivo de los datos normalespermisibles. Posibles causas:

u Descuidos graves en la manipulación de la muestra.u Descuidos graves en el procedimiento de la técnica.u Errores en los cálculos.u Empleo errado de pipetas.u Selección errada de filtros.

2.9. Gestión de las situaciones “fuera de control”El programa del CCI tiene la finalidad de verificar si, al ejecutar una o más series analíticas,las características iniciales del sistema analítico (en su conjunto) presentó variaciones tanimportantes para estar señaladas desde el sistema de control, con una probabilidad estadísticaaceptable, generando situaciones fuera de control.

La señalación fuera de control tiene que estar disponible en un tiempo lo suficientementebreve que permita activar acciones correctivas para alcanzar la situación bajo control, antesde emitir los informes de los resultados de las muestras analizadas en el curso de la serie.

La gestión de las situaciones “fuera de control” representa el aspecto que necesita un mayorempeño profesional y el mayor conocimiento de los aspectos técnicos de los diferentesanálisis y una gran experiencia.

No es posible dar indicaciones de comportamiento unívoco.

En teoría, se tendría que eliminar todos los resultados engendrados en el contexto, buscary eliminar las causas, y repetir la serie analítica. Esto, en la práctica, casi nunca es posible.

El procedimiento analítico tendrá que ser descompuesto en todos sus elementos, los cualestendrán que ser valorados individualmente para eliminar la causa del error.

Las medidas correctivas son tarea del director del laboratorio y de los técnicos con mayorexperiencia. Se plantean algunas líneas de comportamiento:


a) Si el alejamiento de los valores de control es pequeño (sin embargo, lo suficiente paragenerar situaciones fuera de control), o limitado a un solo valor (en caso que se usendos sueros de control) y la distribución de los valores obtenidos para las muestrasdesconocidas analizadas en el contexto es sustancialmente regular, el responsable puededecidir ignorar temporalmente la señal fuera de control y considerarlo como señal dealarma.

b) En la situación como la del precedente punto a) alejamiento pequeño con valores de lasmuestras de los enfermos substancialmente regulares, se puede reanalizar sólo loscontroles y contextualmente un número limitado de muestras desconocidas: si losresultados de los controles no generan más situaciones fuera de control, se puede aceptarla serie.

c) Si el alejamiento de los resultados de control desde el valor esperado es más consistente,es necesario reanalizar los controles en el contexto a un número consistente de muestrasdesconocidas. Si los valores de controles están en el rango prefijado y los valores de lasmuestras desconocidas no se modifican substancialmente, se puede aceptar la serie.

d) En caso de alejamiento decididamente marcado, sobre todo si es acompañado de unadistribución decididamente irregular de los valores de las muestras desconocidas (todosaltos o todos bajos), se tiene que considerar atentamente la oportunidad de suspenderla validación de los valores analíticos, buscar posibles causas de la anomalía y repetir losanálisis. La modalidad de esta intervención depende de la experiencia del responsable yde las características del sistema analítico.

En cada caso, el técnico o el director asume la responsabilidad de la decisión, la cual tendráque registrarse con la respectiva nota explicativa de la motivación y conservarse (archivo).

2.10. Fin de la sesión de trabajoLa sesión de trabajo se puede considerar terminada cuando:

u Todos los exámenes para aquel equipo estén terminados según las reglas.u Los resultados están controlados y validados para el instrumento.u Los controles están archivados.u Todas las operaciones de mantenimiento preventivo se han ejecutado con la tecnología

prevista.u Los equipos están en perfecto estado de uso para el día siguiente o para el trabajo de

la tarde o de la noche.

Sólo cuando todas estas instrucciones están ejecutadas, es posible apagar (si es indicado)o dejar encendido el equipo, y terminar el propio turno de trabajo.


TERCERA PARTE

NORMAS DE PROCEDIMIENTO

DE CONTROL DE CALIDAD INTERNO

VALIDACIÓN RETROSPECTIVA

ARCHIVO

3.1. FinalidadEl presente procedimiento identifica la modalidad de verificar y controlar los sistemasanalíticos para garantizar la idoneidad de la “sesión analítica”. La verificación se basa ademásen la utilización óptima de las tecnologías (mantenimiento) sobre la idoneidad del CCI. Ellaboratorio de análisis de químicas clínicas tiene que predisponer, documentar y manteneractivo un sistema de calidad, el cual garantiza la conformidad de sus productos y losrequisitos específicos. El control de calidad es parte integrante del sistema de calidad. Elprocedimiento tiene la finalidad de:

u Verificar en tiempo real los procedimientos de la serie analítica.

u Señalar las situaciones “fuera de control” y activar en tiempo lo suficientemente brevemedidas correctivas para volver a llevar la situación “bajo control”.

u Conocer retrospectivamente la precisión y la exactitud.

3.2. Ámbito de referenciaEste procedimiento está aplicado a laboratorios de análisis para todo el personal, cada unode cuyos miembros debe conocer los principios sobre los cuales ha de tomar las propiasdecisiones. El laboratorio verifica seriamente el mantenimiento de las tecnologías y activaprocesos de control de calidad para individualizar los errores en el curso de los análisis, obien, para cambiar:

u El sistema analíticou La organización total del trabajou El técnico

3.3. ResponsabilidadLa responsabilidad en la aplicación de estos procedimientos es trabajo de:

u El director del laboratorio para la correcta aplicación del procedimiento de mantenimientoy de control de los sistemas analíticos.

u El técnico que trabaja directamente sobre los sistemas analíticos, y efectúa los exámenesy el CCI.

3.4. GeneralidadesEl laboratorio tiene que planear un sistema que permita verificar un buen funcionamientode los sistemas analíticos, las tecnologías, las metódicas y los técnicos. Este monitoreo tieneque ser ejecutado mediante la verificación del control de calidad interno. De manera que,el laboratorio:

u Realiza un programa de CCI.u Usa material idóneo de referencia.


u Cuando no es posible usar sueros de control para el CCI, usa métodos reconocidos enla literatura (cusum, método de la media diaria).

u Aplica reglas severas para el monitoreo de la sesión analítica y para introducir eventualesmedidas correctivas.

3.4.1. Control de Calidad Interno

El control interno de calidad —a través del uso de procedimientos idóneos— permitedescubrir y cuantificar los errores en la fase analítica y clasificarlos y, dentro de determinadoslímites, minimizarlos.

A través del CCI, se logra el control de la veracidad del sistema analítico, sea como precisión(concordancia entre los valores conseguidos con repetidas determinaciones sobre la mismamuestra), sea como exactitud (concordancia entre el valor “verdadero” y el valor conseguido)y sea como sistema utilizado de trabajo (sensibilidad, especificidad y eficiencia instrumental).

El control de calidad interno se realiza insertando entre las muestras por examinar una omás muestras apropiadas (suero de control), comprobando después la correspondencia entreel valor obtenido y el valor “verdadero” (exactitud) y la correspondencia entre los resultadosde más determinaciones efectuadas sobre la misma muestra en la misma serie o en seriesdistintas (precisión).

Concepto fundamental e informador:

u Analizar los controles de manera idéntica a las muestras de los pacientes.u No realizar ningún tratamiento preferencial a los sueros de control.u Anotar el resultado obtenido, y no aquél que piensa el técnico encargado.u Poner el suero de control todos los días en las diferentes series analíticas.A partir de estas premisas, resulta claro que el CCI no tiene la finalidad y tampoco laposibilidad de resolver problemas que controlan la imprecisión y la inexactitud de losresultados: sirve simplemente para descubrir, evidenciar, identificar y cuantificar los erroresen la fase analítica.

Se logra una mejoría de la calidad sólo tomando las respectivas medidas correctivas.

En caso de errores, el procedimiento analítico tendrá que revisarse en sus elementos:método, reactivos, estándares, equipo, analista, etc., valorándolos de manera individual comoposible causa de error casual o de sistema, y para eliminarlos o disminuirlos.

Posibles causas de error

Estándares: Preparación inadecuada, deterioro, vencimiento.Reactivos: Preparación inadecuada, deterioro (contaminación, oxidación, exposición a la

luz), vencimiento, almacenamiento inadecuado, espera de temperaturaambiente, después refrigeración.

Equipos: Longitud de onda equivocada, mal calibrado, voltaje eléctrico (estabilizador).Filtros: Calidad insatisfactoria, puede dar la desviación de la linealidad: con aumento

de absorbancia y extinción no lineal.


Lámpara: Envejecimiento, esperar calentamiento.Incubación: Temperatura adecuada, cumplirse el tiempo.Pipetas: En mal estado.Muestra: Compuestos coloreados podrían sufrir cambios de intensidad de color,

turbidez.Cubetas: Sucia por contactos de los dedos por el lado donde pasa la luz, rayadas,

húmedas por fuera, no suficientemente llena, burbujitas en la solución.Agua: Mala calidad.Blanco: Utilizar el blanco respectivo por cada muestra, cuando la metódica lo indica.Factor decálculo: Empleo no correcto.Método: Poca sensibilidad. El procedimiento analítico bien documentado, escrito en

español.Técnico: Errada manualidad, impericia o ignorancia.

En el caso de error grosero (que cae completamente fuera y alejado del rango del colectivode los datos normales permisibles), las posibles causas son:

u Descuidos graves en la manipulación de la muestra.u Descuidos graves en el procedimiento de la técnica.u Errores en los cálculos.u Empleo errado de pipetas.u Selección errada de filtros.

Ejecutar el CCI todos los días y sobre todas las series analíticas (emergencia, nocturna) paraaprobar la intervención, si es necesario, en cualquiera momento, con idóneas medidas antesde proceder a la entrega del resultado.

3.4.2. Objetivos del programa de CCI

1) Asegura la confiabilidad y el funcionamiento eficiente del laboratorio.2) Contribuye al mejoramiento de la calidad analítica de las determinaciones diagnósticas y

promueve la introducción de procedimientos de mayor sensibilidad y/o especificidad.3) Debe ser una actividad ejecutada íntegramente en cada laboratorio, sin perjuicio de la

adecuada supervisión y apoyo por parte de otros niveles jerárquicos.4) Garantizar una dinámica alimentación y retroalimentación entre los elementos que

producen los resultados de los análisis y el nivel que supervisa su calidad.

El programa tiene el fin de verificar si, al ejecutar una o más series analíticas, las caracte-rísticas iniciales del sistema analítico (en su conjunto) hubo variaciones importantes deseñalar desde el sistema de control, con una probabilidad estadística aceptable, generandosituaciones fuera de control.

La señalación fuera de control debe estar disponible en un tiempo breve que permita activaracciones correctivas para alcanzar la situación bajo control, antes de emitir los resultados delas muestras analizadas de la serie.


El programa sirve también para acumular a través del tiempo los mecanismos de laevaluación retrospectiva, los datos útiles para el conocimiento de las características de laprecisión de los procedimientos analíticos (desviación estándar y coeficiente de variación).

3.5. OrganizaciónLa correcta ejecución, registro, divulgación y archivo del CCI es responsabilidad directa delos técnicos y profesionales de laboratorio. El director de laboratorio vigila la ejecución yaplicación de los controles, los explica detalladamente, facilita las cartas de control paraconsultas y las archiva.

Las cartas del CCI deben ser fácilmente consultables por todo el personal, por personasexternas y por eventuales visitas de inspección.

3.6. Descripción de los controlesEl control de calidad permite la verificación interna diaria, de controlar en tiempo real elprocedimiento de cada analito y de aplicar reglas que pueden corregir la sección analítica.

Algunos criterios fundamentales en la aplicación del CCI son:

u Duración por un año.u Al cambiar un lote de reactivo, se cierra un período y se abre otro.u Para cada control tiene que conocerse su matriz, la casa comercial.u Utilización con valores conocidos, si es posible a dos niveles: uno normal y uno

patológico.u Ubicar los sueros de control antes de las muestras y, en casos particulares, en medio o

al final de la muestras.

3.7. Aceptación de los resultadosEn la evaluación de los valores del control de calidad interno se tendrá en consideración:

1. Un valor de tendencia central (media aritmética o target).

2. Una medida de dispersión (+/- 2 o +/- 3 desviación estándar y coeficiente de variación).

Los controles deben ser puestos al comienzo de la serie analítica, con el objetivo deindividualizar las condiciones ideales; si es necesario, una segunda corrida en posición casualo después de un número fijo de muestras.

3.7.1. Evaluación inmediata de los resultados

En este contexto, “inmediato” indica que la valoración se da en un tiempo lo suficientementebreve que permita efectuar las eventuales medidas correctivas antes de emitir el informe delos resultados para las muestras desconocidas analizadas contextualmente.

Los valores encontrados de los sueros de control se comparan con los rangos preestablecidosde los valores conocidos (por la casa comercial), y se verifica al mismo tiempo si son violadasuna o más reglas, establecidas en precedencia. En caso negativo, la situación está


bajo control. La violación de una o más reglas íntegra o una situación de alarma o una fuerade control, permite realizar medidas correctivas de modo oportuno.

3.8. Estudio estadístico de los datosMedidas de posición y variabilidad de los datos.

Si se repite una medida con todos los cuidados recomendados, por un mismo operador ycondiciones, está demostrado estadísticamente que los valores obtenidos no serán idénticossino presuntamente semejantes entre ellos. Cada medida es afectada por un cierto error. Esosvalores se distribuirán en torno a uno más frecuente, de modo que cuando el número demedidas sea lo suficientemente grande, la representación gráfica de estas frecuencias versussus valores, se acerque a la clásica campana de Gauss o de distribución normal, tal comoestá referida en la figura 1.

Figura 1. Curva de distribución normal (gaussiana).

Las medidas de posición y variabilidad que se definen son la media aritmética o media, ladesviación estándar y el coeficiente de variación.

Media aritmética o media (X): Es el valor promedio del conjunto de las mediciones (Xi).

X = Σ Xi N

donde:

X= es igual a la media aritmética o promedio aritméticoΣ= es la sumatoriaXi= representa cualquiera de los N valores X1, X2, X3, XN

N= número total de datos

El tamaño de la medida, la variabilidad o dispersión de cada valor alrededor del valor medioestá representada por la desviación estándar, la cual expresa el error casual.


µ − σ µ + σµ − σ µ + σµ − σ µ + σµ − σ µ + σµ − σ µ + σ

95.5 99.8

µ − 2 σ µ + 2 σµ − 2 σ µ + 2 σµ − 2 σ µ + 2 σµ − 2 σ µ + 2 σµ − 2 σ µ + 2 σ µ − 3 σ µ + 3 σµ − 3 σ µ + 3 σµ − 3 σ µ + 3 σµ − 3 σ µ + 3 σµ − 3 σ µ + 3 σ

68.3

Figura 2.- Curva de distribución normal con áreas cubiertashasta 3 desvíos estándar (ds)

donde:

s = desviación estándarn = número de las pruebasX = cada valorX = promedioX – X = diferencia entre cada valor y el promedioΣ (X – X)² = sumatoria de los cuadrados de las diferencias

En la práctica, se puede decir que la desviación estándar es igual a la raíz cuadrada de lasumatoria de los cuadrados de las diferencias de cada valor de un grupo, desde la mediaaritmética de ellos, dividido entre el número total de los valores examinados, menos uno.

La desviación estándar se utiliza para definir los límites entre los cuales un valor de controlpuede definirse como aceptable.

En una distribución normal o Gaussiana, el área comprendida entre la media (X) ± 1desviación estándar representa cerca del 68% del área total, o sea, el 68.3% de lasmediciones se estiman comprendidas en ese rango.

Si se considera el área comprendida entre (X) ± 2 desviación estándar, se abarca el 95.55%de las mediciones.

Si se considera el área comprendida entre (X) ± 3 desviación estándar, se abarca el 99.8%de las mediciones.

La desviación estándar se calcula con la fórmula:


Precisión y Exactitud

El análisis de los errores puede hacerse con gráficos que muestran las diferentesposibilidades:

Por precisión se indica la dispersión de los resultados obtenidos con análisis repetidos sobrela misma muestra, sea en la misma serie (precisión en la serie), sea en varias series(precisión entre las series). Si las series pertenecen a varios días, se obtendrá precisión entredías. En realidad, lo que se mide con este parámetro es la imprecisión de los resultados.La precisión se cuantifica por el promedio (X), la desviación estándar (ds) y el coeficientede variación.

La imprecisión se expresa cuantitativamente con la desviación estándar = s , que será tantomayor cuanto mayor resulte la dispersión de los resultados.

La exactitud, por su parte, indica la correspondencia entre el valor obtenido en una muestra(o mejor el promedio de una serie de determinaciones sobre la misma muestra) y el valor“verdadero”. Con tal parámetro se mide la inexactitud (diferencia entre el valor alcanzado yel valor “verdadero”). Precisión y exactitud están, por tanto, dos parámetros completamenteindependientes entre ellos.

El ejemplo clásico del polígono de tiro aclara los dos diferentes conceptos.

Imprecisa e inexacta: indica la presencia de errores brutos, tanto aleatorios comosistemáticos, con graves repercusiones técnicas; el problema se resuelve con la implantaciónde programas internos y externos del control de calidad. Porcentaje de error (% E) alto, yalta desviación estándar (s).

Impresisa y exacta: muchas variaciones en el nivel de desempeño la persona que ejecuta unaprueba, aunque los resultados no fuesen de valor real. La mejora del desempeño puedelograrse mediante el uso de programa interno de control de calidad. Porcentaje de error (%E)bajo y alto desviación estándar (s).


Buena precisión, escasa exactitud: los golpes están concentrados; si no, no se disponenuniformemente alrededor del blanco. Indica que los componentes de un laboratorio realizanun proceso de manera semejante, pero cometen siempre un error sistemático. Porcentaje deerror (% E) alto, y baja desviación estándar (s). La mejora del desempeño puede lograrsemediante el uso de programa externo.

Buena precisión y exactitud: módica dispersión dispuesta simétricamente alrededor delblanco. Muestra un buen desempeño de la prueba y del laboratorio. Porcentaje de error (%E)bajo, y baja desviación estándar (s).

3.9 Límites de confianzaLos valores correspondientes a X ± 2 s se denominan, en términos estadísticos “límites deconfianza” del resultado: son los límites de concentración entre los cuales se puede tener“confianza”. En cuanto a la concentración “verdadera” de la sustancia analizada en la muestra,está incluida con probabilidad igual al 95,55%.

En el laboratorio clínico asumen, sin embargo, el límite ± 3s, intervalo entre el cual seencuentra el 99,8% de todos los resultados de medida, incluyendo así prácticamente todoslos resultados de medida con relación al error casual o inevitable.


El intervalo entre los límites 2s se define como intervalo de alarma, porque en relación conlas leyes de estadística, sólo 5 sobre 100 valores tendrían que estar fuera de este intervalo.El límite 2s se denomina límite de alarma, y el límite 3s, límite de acción.

La desviación estándar puede expresarse como porcentaje del valor medio. Tal porcentaje sellama coeficiente de variación.

Se calcula con la fórmula:

s . 100CV = _________ %

X

donde:

CV = coeficiente de variaciónS = desviación estándarX = promedio

Hay que tener presente que, en los últimos años, la tecnología ha permitido mejorarnotablemente la precisión analítica, con la adopción de técnicas específicas que permitenalcanzar una mayor exactitud.

3.10. Presentación gráfica manual de los resultadosEs de gran ventaja recurrir a un tipo de soporte gráfico para la presentación numéricade los resultado de los valores de los sueros de control con un intervalo preestablecido(± 3 ds), y para verificar las observaciones de un sistema de reglas preestablecidas, que estárepresentado por la “Tabla de Control”, preparada y realizada manualmente.

Al elaborar la “tabla de control”, se deben tener presentes las siguientes reglas:

1. Predisponer papel por un período de aproximadamente un mes.2. Dar una justa expansión al eje de las “ordenadas”, de modo que los límites 3ds estén

cómodamente incluidos.3. Trazar sobre el papel las líneas (horizontales) correspondientes a 2ds y 3ds.

Las líneas ± 2ds se denominan “límite de alarma” y las líneas ± 3ds, límite de acción o“intervención”. El gráfico se alcanza, insertando diariamente los valores encontrados de lossueros de control sobre el papel, y se llama papel de control de la media o de SHEWART-LEVEY-JANNINGS.


RECONOCIMIENTO DE ALGUNOS ERRORES ANALÍTICOSPOR MEDIO DE LAS TABLAS DE CONTROL

Anomalía comprobada Causa probable de anomalía Medidas por adoptar

Descarte excesivo entre Escasa precisión al ejecutar Controlar volumen, tiemposdos estándares o dos los análisis. analíticos, temperatura, cristaleríacontroles. estabilidad fotométrica.

Imprevista descendencia Incompleto desarrollo de color Repetir serie analítica.de valores analíticos, o parcial decoloración de Si la descendencia no es excesiva,estándares y de controles. estándares o controles. se puede repetir sólo algunos análisis

Impureza en los reactivos. y utilizar la serie, si los resultadosobtenidos están sobrepuestos.Controlar tiempo y reactivos.

Descendencia progresiva Deteriorado estándar. Preparar un nuevo estándar.analítica.

3.10.1 Presentación gráfica de los resultados encontrados por medio deun programa de computadora, con aplicación práctica delalgoritmo de Westgard (reglas sencillas y múltiples)

REGLAS Y ALGORITMOS QUE SE UTILIZANPARA EVIDENCIAR SITUACIONES FUERA DE CONTROL

Con la evaluación de los controles, se comprueba la violación o no de las reglaspreestablecidas, conocidas y aceptadas por todo el personal del laboratorio.

La violación de una o más reglas engendra una situación fuera de control o de alarma, eimpone oportunas intervenciones correctivas.

Las reglas pueden ser “sencillas” o “múltiples”.

En el primer caso, se tiene que verificar la violación de cada regla (separadamente, si se usandos controles para diferentes concentraciones).

En las reglas múltiples, la evaluación fuera de control y de alarma está integrada según unprefijado algoritmo secuencial. Es de difícil aplicación en la tabla de control manual; noobstante, se puede aplicar en computadora con un programa idóneo.

Para las reglas múltiples, sirven dos sueros de control a diferentes niveles.

Reglas sencillas

u 2 sobre 3 valores de control consecutivos se posicionan al extremo de las líneas 2ds enla misma dirección.

u 4 sobre 5 valores de control consecutivos se posicionan al extremo de las líneas 1ds enla misma dirección (normalmente, estas líneas no están trazadas sobre la tabla de controlpor simplificación).


u 7 valores consecutivos de control se posicionan por encima o por debajo de la media.u 7 valores de control consecutivos se disponen en tendencia (creciente o decreciente)

continua, pudiendo una línea que los junte y que corte la línea del promedio.u Los valores de control se posicionan a lo extremo de la línea 3ds.

Reglas múltiples

u El error relativo en dos controles es superior a ± 2ds. Puede tratarse de los 2 materialesincluidos en una misma serie o de un solo material que infrinja la regla en dos seriesconsecutivas. Es una alarma por error de sistema.

u Uno u otro de los dos valores de control se posicionan al extremo de las líneas 3ds: errorcasual, o podría ser el comienzo de un considerable error de sistema.

u Ambos valores de control se posicionan al extremo de las líneas 2ds, en la mismadirección y en la misma serie analítica: Error de sistema.

u Un valor de control se posiciona al extremo de la línea 2ds y otro al extremo de otralínea 2ds (la distancia entre los dos valores supera 4ds): es una regla aplicada sólo a lointerno de la sesión: Error de imprecisión.

u Los últimos 4 valores de control (2+2) se posicionan al extremo de la línea 1ds en lamisma dirección: Error sistemático.

u Los últimos 10 valores de control (5+5) se posicionan por encima o por debajo de lalínea del promedio: Error sistemático.

La tabla siguiente (en un programa de CCI en computadora) muestra una aplicación prácticadel algoritmo de Westgard (reglas múltiples). Utilizando dos sueros de control, se entra enuna rutina de reglas de control (algoritmo de Westgard) que se examinan en secuencia. Lasalarmas son:

13s: El error relativo en uno cualquiera de los dos controles es superior a ± 3s.

22s: El error relativo en dos controles es superior a ± 2s. Puede tratarse de los 2materiales incluidos en una misma serie o de un solo material que infrinja la reglaen dos series consecutivas. Error de sistema.

R4s: La diferencia entre los errores relativos obtenidos en los dos controles de la mismaserie es superior a 4s. Por ejemplo, uno desvía +2,3s y el otro -1,8s. Error enla precisión.

41s: Se han obtenido cuatro errores relativos consecutivos superiores a ± 1s en elmismo sentido (positivo o negativo). Puede ocurrir con los dos materiales en dosseries consecutivas o con un material en cuatro series consecutivas. Error desistema.

10Xm: Se han obtenido diez errores relativos consecutivos, todos ellos positivos o todosellos negativos. Puede ocurrir con los dos materiales en cinco serie consecutivaso con un material en diez series consecutivas. Error de sistema.


El procedimiento de las reglas múltiples se considera el más “poderoso” y en capacidad deproveer la menor cantidad de falsa alarma.

3.11 Gestión de las situaciones fuera de controlLa violación de una o más reglas integra una situación “fuera de control”.

Representa el aspecto que necesita un mayor empeño profesional y el mayor conocimientode los aspectos técnicos de los diferentes análisis, lo mismo que gran experiencia.

No es posible dar indicaciones de comportamiento unívoco.

En teoría, se tendría que eliminar todos los resultados generados en el contexto, buscar yeliminar las causas, y repetir la serie analítica. Esto, en la práctica, casi nunca es posible.

El procedimiento analítico tendría que estar descompuesto en todos sus elementos, los cualestendrían que ser valorados uno a uno para eliminar la causa del error.

Se plantean algunas líneas de comportamiento:

A) Si el alejamiento de los valores de control es pequeño (aunque suficiente para generarsituaciones fuera de control), o limitado a un solo valor (en caso que se usen dos suerosde control) y la distribución de los valores obtenidos para las muestras desconocidasanalizadas contextualmente es sustancialmente regular, el responsable puede decidirignorar temporalmente la señal fuera de control y considerarla como señal de alarma.

B) En una situación como la descrita en el punto anterior (poco alejamiento con valores delas muestra de los enfermos substancialmente regular), se puede reanalizar sólo loscontroles y un número limitado de muestras desconocidas: si los resultados de loscontroles no generan más situaciones fuera de control, se puede aceptar la serie.

C) Si el alejamiento de los resultados de control desde el valor esperado es más consistente,se precisa reanalizar los controles contextualmente en un número consistente de muestrasdesconocidas. Si los valores de controles están en el rango prefijado y los valores de lasmuestras desconocidas no se modifican substancialmente, se puede aceptar la serie.

D) En caso de alejamiento decididamente marcado, sobre todo si está acompañado de unadistribución irregular de los valores de las muestras desconocidas (todos altos o todosbajos), se tiene que considerar atentamente la oportunidad de suspender la validación delos valores analíticos, buscar posibles causas de la anomalía y repetir los análisis. Lamodalidad de esta intervención depende de la experiencia del responsable y de lascaracterísticas del sistema analítico.

En cada caso, el técnico o el director asume la responsabilidad de la decisión, que deberegistrarse con nota explicativa de la motivación y conservarse (archivo).

3.12 Control de Calidad Interno sin sueros de control

Método de la suma cumulativa “cusum”Se calcula la media de todas las determinaciones de un parámetro bioquímico, ejecutadascada día (ej. glucosa, colesterol, etc.), excluyendo los resultados patológicos con un límite


arbitrario preestablecido. Si el número de las determinaciones periódicas es suficientementealto, se logrará que la media de los resultados sea casi constante en el tiempo. Si se verificaráun error de sistema de los análisis, se modificará la exactitud de los resultados y la mediaperiódica.

Establecer para cada parámetro un valor de referencia (K), el más cercano a la mediaperiódica: cada día, desde la media calculada sobre los valores, se sustrae este valor K; ylas diferencias obtenidas teniendo presente el signo, se grafican en un papel de control.

Si el método está bajo control, las diferencias de cada día tienden a anularse estadísticamen-te y se obtendrá una línea con variaciones bastante paralela a la línea central (abscisa).Variando la exactitud, se logra una mutación (hacia arriba o abajo) en la inclinación totaldel gráfico “cusum”. Las mutaciones son fácilmente observables a simple vista.

Esta técnica tiene un valor esencialmente retrospectivo, y sufre variaciones en relación conla población (pacientes hospitalizado y externos).

Método de la media diaria

Algunos autores recomiendan utilizar sólo los resultados contenidos en un intervalo normal(también con un número bajo de resultados: sólo 10) para lograr una media diaria losuficientemente estable.

Para algunos parámetros (sodio o proteínas totales, etc.), la media diaria de los pacientesexternos es diferente de aquélla de los enfermos internos.

Este método es más eficaz en la medida que es más numerosa la población examinada.

Muy útil para el control de tamaños, para los cuales no está siempre disponible el materialde control (glóbulos rojos, blancos, plaquetas).

Es el único método de control de calidad para evidenciar también variaciones pre-analíticas.

3.13 Evaluación retrospectivaCon plazo prefijado, por ejemplo mensual o, de cualquier manera, cuando estén disponiblesal menos veinte resultados de controles consecutivos, se efectúan evaluaciones retrospectivasbasadas substancialmente sobre el cálculo de:

u Media aritméticau Desviación estándaru Coeficiente de variación o C.V.

Variaciones de estos parámetros estadísticos imponen intervenciones:

u sobre la calibración.u sobre la verificación de cada característica analítica.u sobre el mantenimiento de los sistemas implicados.

Los valores encontrados del coeficiente de variación son valores típicos de precisión-imprecisión del laboratorio en un determinado período.


3.14 ArchivoEl archivo de los datos tiene en el CCI el fin de:

u Documentar la ejecución diaria del CCI.u Proveer una base de datos para la evaluación a mediano y largo plazo.u Realizar evaluaciones periódicas de las situaciones fuera de control.

El archivo puede realizarse sobre un soporte de papel o en magnético. Tiene que estarordenado, de modo que permita hacer una pronta consulta cuanto se desee.

Mantener registros, al menos, un año para la realización de las eventuales intervencionescorrectivas.


CUARTA PARTE

PROCEDIMIENTO DE

METODOLOGÍA ESPECÍFICA PARA LOS

EXÁMENES DE QUÍMICA CLÍNICA

4.0 FinalidadEl presente procedimiento describe, detallada y específicamente cada examen de químicaclínica:

1. Generalidad2. Indicaciones3. Modalidad de solicitud4. Preparación del paciente5. Modalidad de la toma de muestra6. Transporte7. Conservación8. Verificación de la muestra9. Metódicas de determinación con relativas interferencias10. Valores de referencia11. Criterio de validación12. Modo de escribir los resultados

4.1 ÁCIDO ÚRICO

Generalidad

El ácido úrico es el producto final del catabolismo de las purinas (adenina, guanina)provenientes del exterior con la alimentación (parte exógena) y del interior con el ácidonucleico (parte endógena). Todas las purinas se transforman en xantina e hipoxantina;después, la enzima xantina-oxidada las oxida y las convierte en ácido úrico. Al hombre, adiferencia de todas las especies animales, le falta la enzima uricasa, y no puede transformarel ácido úrico en alantoína. El ácido úrico es poco soluble en la sangre, se encuentra en formade urato monosódico y está ligado a proteínas (albúmina, alfa 1 y alfa 2 globulina). Lamayor parte del ácido úrico es eliminada por el riñón a través de un mecanismo de filtración,reabsorción y excreción.

Indicaciones

La alteración puede estar relacionada con dietas ricas en purinas o con aumentada producciónendógena o con una reducida excreción.

La determinación del nivel del ácido úrico está indicado en el diagnóstico y monitoreo dealgunos desórdenes metabólicos dietéticos: gota, síndrome dismetabólico alimenticio,neoplasia linfomielo-proliferativa (como linfomas, leucemias, policitemia), anemia hemolítica,enfermedad del riñón y pacientes en terapias citostática o radioterapia.

Modalidad de solicitudSólo en rutina.


Preparación del paciente

Ayuno.

Modalidad de la toma de muestra

Ninguna particularidad.

Transporte

Se puede transportar a temperatura ambiente.

Conservación

Centrifugación y separación del suero, la toma de muestra se puede conservar por cinco díasde 2-4oC y por 6 meses a –20oC.

Verificación de la muestra

Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.

A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra

Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.

C) Centrifugación

Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos ycentrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia decoágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la noidoneidad de la muestra.

Metódicas de determinación:

Método colorimetrico

El ácido úrico en ambiente alcalino reduce el ácido fosfotúngstico con formación de colorazul; la intensidad del color es proporcional a la cantidad de ácido úrico. Antes dedesproteinizar con el Folin Wu.

Método físico-enzimático

El ácido úrico presenta en ultravioleta un pico de absorbancia alrededor de 290 nm; laabsorbancia a esa longitud de onda está completamente eliminada por la acción de la uricasa,la cual transforma el ácido úrico en alantoína. Por la disminución de la extinción óptica, seconoce la concentración del ácido úrico.


Método enzimático

El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno que, en presenciade POD y 4-AF y DCPS, forma un compuesto rosáceo.

Ácido úrico + O2 + 2 H2O uricasa a alantoína + CO2 + H2O2

———>

H2O2 + 4- Amino antipirina + DCFS peroxidasa Quinoneimina + 4 H2O ————>

Materiales

u Guantes descartables no estérilesu Tubos de ensayo 16 x 100 mmu Puntas de pipeta 10-50 ulu Puntas de pipeta 50-200 ulu Puntas de pipeta 200-1000 ulu Puntas de pipeta 1000-5000 ul

Equipos

u Centrífugau Espectrofotómetrou Baño Maríau Reloj marcadoru Pipetas automáticas 10-50 ulu Pipetas automáticas 50-200 ulu Pipetas automáticas 200-1000 ulu Pipetas automáticas 1000-5000 ul

Procedimiento

Seguir las instrucciones de la casa comercial.

Control de Calidad

Se deberá usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que lasmuestras.

Notas sobre la metódica:

Linealidad

La metódica es lineal hasta 25.0 mg/dl.


Sensibilidad

La metódica tiene una sensibilidad de 0.2 mg/dl.

Especificidad

La metódica de uricasa es específica para el ácido úrico; sin embargo, también para los otrosderivados de las purinas.

Interferencias

Pueden presentar interferencias: El suero ictérico con bilirrubinas ≥ 40.0 mg/dl; la hemólisis:HB ≥ 10.0 g/l; el suero lipémico: triglicéridos ≥ 2000 mg/dl; el ácido ascórbico ≥ a 30.0mg/dl.

Algunos fármacos pueden dar valores falsamente bajos de ácido úrico: fenacetina,aminofenolo, idralazina, metildopa, levadopa.

Valores de referencias

Hombre 3.4-7.0 mg/dlMujer 2.4-5.7 mg/dl

Criterios de validación

Con valores muy elevados:

u Confrontar otros parámetros en relación con procesos inflamatorios: conteo de glóbulosblancos, VSG, PCR, fibrinógeno.

u Controlar los parámetros de alteración metabólica: glucosa, colesterol, triglicéridos,apolipoproteínas.

u Controlar los parámetros de los procesos displásicos: VSG, parámetros oncológicos,fórmula leucocitaria y glóbulos rojos.

u Controlar los parámetros de la funcionalidad del riñón: creatinina, electrolitos, examen deorina.

u Antes de la sintomatología dolorosa en la gota, se eleva el nivel de ácido úrico.

Modo de escribir los resultados

El ácido úrico se escribe con una sola cifra decimal.

4.2 ALBÚMINA

Generalidad

La albúmina es una proteína, que contiene el 55-65 % de la cantidad proteica en el plasma.Tiene un peso molecular de 66,248 Ángstrom. Sus funciones principales son de transporteen la sangre de numerosas sustancias como ácido graso libre, bilirrubina, muchas hormonas,calcio, numerosos fármacos. Otra función importante es la de regular la presión osmótica.


La concentración normal sérica es de 35-50.0 g/l, la cual representa 2/5 parte de toda laalbúmina presente en el organismo. Los neonatos y ancianos tienen una cantidad de albúminamás baja. Se habla de hipoalbuminemia, cuando el contenido de albúmina está de 32.0 g/l, yde manifestaciones edematosas, debajo de 25-30.0 g/l.

Indicaciones

La determinación de la albúmina sérica es importante en el diagnóstico de hipoalbuminemia.

Las principales causas son:

u Disminución de síntesis (hepatopatía grave, cirrosis, etc.).u Disminución alimenticia y mala absorción.u Eliminación por causas endógenas (diarrea masiva, síndrome nefrótico, etc.) y exógenas

(quemaduras).

Modalidad de solicitud

Sólo en rutina.


Ayuno.

Modalidad de toma de muestra


Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero cuanto antes; la toma de muestra se puede conservarpara tres días a 2 –4o C, y por 6 meses a –20o C.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra



C) Centrifugación



Metódica con la separación de la albúmina desde otras proteínas

1. Método de precipitación fraccionado: Las globulinas son precipitadas, y las albúminas semiden con el método de biuret.

2. Método electroforético: Con electrofóresis, se analiza la composición cuantitativa ycualitativa de las proteínas del suero.

Metódicas directas

a) Metódicas inmunoquímicas

Esta metódica se aplica en inmunodifusión radial (inmunoturbometría, Inmunonefolometría).

b) Metódicas fluorimétricas

Reacción de la albúmina con sustancias fluorescentes y relativa medida fluorométrica.

c) Metódicas con colorantes

La albúmina presente en la muestra reacciona con el verde de bromocresol en medio ácido,originando un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometría.

Materiales


Equipos

u Centrífugau Espectrofotómetrou Baño Maríau Reloj marcadoru Pipetas automáticas 10-50 ul


u Pipetas automáticas 50-200 ulu Pipetas automáticas 200-1000 ulu Pipetas automáticas 1000-5000 ul

Procedimiento


Control de Calidad

Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que lasmuestras.


Linealidad

La metódica es lineal desde 0.2-8.0 g/dl.

Sensibilidad

La metódica tiene una sensibilidad de 0.2 g/dl.

Especificidad

La metódica es específica para la determinación de albúmina.

Interferencias

Suero ictérico con bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl.Hemólisis: HB ≥ 10.0 g/dl.Lipemia: ≥ 2000 mg/dl.Acetona: ≥ 50.0 mg/dl.

Valores de referencia

Adulto: 3.4 - 4.8 g/dlNeonatos hasta 4 días: 2.8 - 5.4 g/dlNiños: 3.8 - 5.4 g/dl


u Confrontar con la funcionalidad del riñón: creatinina, urea, potasio, densidad urinaria.u Confrontar con funcionalidad del hígado: transaminasas, G.G.T, F. alcalina, LDH.u Confrontar con parámetros del equilibrio electrolíticos: sodio, cloro, potasio.u Controlar sexo y eventual estado de embarazo.u Controlar parámetros de inflamación: VSG, PCR, biometría hemática completa.



La albúmina se escribe con una cifra decimal en gramos por ciento.

4.3 ALBÚMINA (en orina)

Generalidad

La albúmina es una proteína que contiene el 55-65% de la cantidad proteica en el plasma.Tiene un peso molecular de 66,248 Ángstrom. Sus funciones principales son de transporteen la sangre de numerosas sustancias como ácido graso libre, bilirrubina, muchas hormonas,calcio, numerosos fármacos. Otra función importante es la de regular la presión osmótica.

Normalmente, el riñón impide que la albúmina sérica se pueda eliminar con las orinas. Sinembargo, en las orinas normales se encuentran pequeñas cantidades de albúmina.

Se elimina mayor cantidad de albúmina en las enfermedades glomerulares.

Indicaciones

La determinación de la albúmina en la orina es de particular importancia, como señal de unadisfunción glomerular. Un pequeño aumento de albúmina en la orina, conocida comomicroalbuminuria, es particularmente importante en el diagnóstico precoz de la nefropatíadiabética, que se desarrolla en cerca del 40.0% de los diabéticos insulino dependientes.


Sólo en rutina.


Se puede encontrar dos tipos de determinación:

A) Determinación cuantitativa en orinas de 24 horas:

Para la recolección de orina de 24 horas, se tiene que utilizar frascos de 2.5-3.0 litros, deboca ancha, con tapón de rosca. Añadir al frasco, si es necesario, un estabilizante. Para larecogida de orina, se procede del modo siguiente:

a) En el tiempo preestablecido, vaciar la vejiga e eliminar toda la orina.b) Posteriormente, comenzar a recoger toda la orina durante 24 horas.c) Al cumplir las 24 horas, vaciar de nuevo la vejiga y depositar toda la orina en el frasco.d) Conservar las orinas a 2-4oC.e) Al finalizar la recolección de orina, debe ser enviada inmediatamente al laboratorio.

B) Determinación cualitativa:

Para la determinación cualitativa de la albuminuria, se necesitan muestras de orina, recogidaen el momento oportuno.


Transporte

La recogida de la muestra de orina de 24 horas debe ser transportada en refrigeración.

Conservación

Centrifugar la muestra antes del análisis: no congelar la muestra. La albúmina es estable unasemana a 2-4oC.



Registro

Escrito claramente.

Muestra


Centrifugación


Metódica de determinación:

Metódica con colorantes

La albúmina presente en la muestra reacciona con el verde de bromocresol en medio ácido,originando un complejo coloreado, que se cuantifica por espectrofotometría.

Cálculo de la albuminuria: Valor obtenido (mg/dl) x ml diuresis.


Linealidad

La metódica es lineal desde 0.2-8.0 g/dl.

Sensibilidad

La metódica tiene una sensibilidad de 0.2 g/dl.

Especificidad

La metódica es específica para la determinación de albúmina.


Interferencias

La interferencia más significativa se debe a elementos corpusculares: antes de la ejecucióndel examen, centrifugar la muestra.

Valores de referencias

Orina de 24 horas: 2.3 g/24 horas


u Confrontar con la funcionalidad del riñón: creatinina, urea, potasio, densidad urinaria.u Confrontar con parámetros del equilibrio electrolíticos: sodio, cloro, potasio.u Controlar sexo y posible estado de embarazo.


La albúmina en 24 horas se escribe con una cifra decimal.

4.4 AMILASA

Generalidad

La amilasa es una enzima que cataliza la división de 1,4 – alfa-glicósido en lo interno dela molécula de los polisacáridos de los vegetales y animales, provocando la despolimerizacióndel almidón a destrina, y del glicógeno, a azúcar sencillo (glucosa).

La amilasa se produce en el páncreas y las glándulas salivales, y en pequeña concentración,en el hígado, el riñón y las trompas de Falopio, y es eliminada por el riñón. Se puededistinguir amilasa pancreática (isoamilasa P) y amilasa extrapancreática (isoamilasa S).

Indicaciones

La determinación de la amilasa es de importancia fundamental en el diagnóstico de lasenfermedades pancreáticas. La amilasa es útil en el diagnóstico para el control de lapancreatitis aguda. En estas enfermedades, la amilasa sérica sube en casi la totalidad de lospacientes, 5-6 horas después de la sintomatología clínica. Puede añadir valores de 10-30veces mayor de los valores normales. Parece que la amilasa sube más en correlación conel edema, en vez que en relación con la necrosis pancreática.

La amilasa puede aumentar también en otras enfermedades pancreáticas: neoplasia delpáncreas, neoplasia de la papila de Vater.


En rutina y/o emergencia.


Ayuno en rutina.




Transporte


Conservación

Centrifugación y separación el suero. La toma de muestra se puede conservar por un díaa + 20-25oC, cinco días 2-4o C, 1 mes a -20oC.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación



Metódica amilo clásica

La medida de la actividad de la enzima se efectúa con metódicas basadas sobre la disminucióno desaparición de la concentración del sustrato con:

u Medida turbidimétricau Medida viscosimétricau Medida colorimétrica yodo, almidón.

Metódica sacarogenética

La medida de la actividad de la enzima se efectúa con metódica basada sobre la producciónde azúcar reductora.


Metódica enzimática

La α amilasa es un test colorimétrico, que actúa con un nuevo substrato 2-cloro-4-nitrofenil–maltotriosido (CNPG3). Este substrato reacciona directamente con la ααααα amilasa, y norequiere la presencia del cambio del 2- cloro-4-nitrofenil (CNP) del substrato, y la lecturade la absorbancia está incrementada directamente por la actividad de la ααααα amilasa en lamuestra.

CNPG3 α amilasa 3 CNP + CNPG2 + 3G3 + 2 G ———>

Materiales


Equipos


Procedimiento


Control de calidad


Verificar el resultado

u Si el valor de la amilasa en ≥ 1000-2000 U/I, repetir la medida.u Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.u Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando

un control patológico.


u Con valores de amilasa ≥ de 1500 U/I, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2con solución fisiológica con un control patológico.

u Si está dentro los rangos establecidos, se puede entregar el resultado.u Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:4,

1:8, 1:16 con solución fisiológica, siempre usando el control patológico.


Linealidad

La metódica es lineal hasta 1500 U/I.

Sensibilidad

La metódica tiene una sensibilidad de 7.0 U/I.

Especificidad

La metódica es específica para la amilasa total y para todas las isoamilasas (P, S).

Interferencias

Hemólisis: Con Hb ≥ 2.0 g/l.Ictérico: bilirrubina ≥ 20.0 mg/dl.El citrato y el floruro inhiben la reacción.El ácido ascórbico ≥ 30 mg/dl.

Valor de referencia

Menor a 220 U/I.

Criterio de validación

u Confrontar con lipasa, calcio, funcionalidad del hígado.u Controlar parámetros de procesos inflamatorios.u Controlar glucosa y metabolismo glucídico.


La amilasa se escribe sin cifras decimales.

Comunicación de riesgo

Se tiene que comunicar inmediatamente, con valores ≥ 800.0 U/I.


4.5 BILIRRUBINA TOTAL

Generalidad

La bilirrubina se forma en el sistema retículo endotelial por la apertura del núcleotetrapirrólico en el 70–90%, y el 10-30%, en la médula ósea. La bilirrubina se origina pordegradación de los grupos hemo producido para la síntesis de hemoglobina, o desde lamisma hemoglobina derivada de la hemólisis intra medular de los eritrocitos.

Se forma en pequeña parte desde la mioglobulina. La cantidad producida es derivada en lasangre, donde se liga con la albúmina y después es capturada desde el hepatocito. En elinterior del hepatocito, se liga con ácido glucurónico, y después es excretada en el canal biliary, desde aquí, se encuentra con la bilis en el intestino. En el intestino, la bilirrubina conjugadaes reducida por la flora bacteriana a bilinógeno. Una parte del bilinógeno es eliminada enlas heces (estercobilinógeno), otra es reabsorbida por vía portal desde el hígado ynuevamente es excretada con la bilis (bilinógeno). Una parte del bilinógeno huye de lacaptación del hígado, y es eliminada por el riñón (urobilinógeno).

En la determinación de la bilirrubina, se puede evidenciar:

u Una fracción directa, correspondiente a bilirrubina conjugada (glucuronada).u Una fracción indirecta, correspondiente a la forma no conjugada libre.u La bilirrubina total, correspondiente a la suma de las dos fracciones.

Indicaciones

La determinación de la bilirrubina es un elemento fundamental para el diagnóstico de laspatologías ictéricas del hígado.

Se distinguen tres tipos de ictero:

Prehepático o hemolítico: Debido al aumento de la cantidad de bilirrubina que llega alhígado por fenómenos de hemólisis. En este caso, la fracción aumentada es la indirecta. Lapatología fundamental es la anemia hemolítica hereditaria (drepanocítica, talasemia etc.) yla anemia adquirida (infecciosas, parasitarias, tóxicas, venenos vegetales o animales, etc.),y anemia hemolítica inmunológica del neonato.

Posthepático obstructivo: Debido a un obstáculo orgánico y/o funcional al flujo de la bilis.En estos casos, la fracción que aumenta es la bilirrubina directa; sólo en un segundo tiempo,para el daño del hepatocito puede aumentar la fracción indirecta. La obstrucción puede serprovocada desde litiasis, parasitosis, patología tumoral intrínsica al hígado, o extrínseca, porcompresión externa (pancreática, etc.).

Hepatocelular: Debido a lesiones hepatocelulares, el hígado no es capaz de capturar labilirrubina y conjugarla con ácido glucorónico. En este caso, puede aumentar la fraccióndirecta e indirecta. Las causas pueden ser: infecciosas degenerativas, autoinmune, tóxica,tumoral.





Ayuno en rutina.



Transporte

Se puede transportar a temperatura ambiente, protegida de la luz.

Conservación

Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por dos díaa temperatura ambiente, 4 días a 2-4oC, y 3 meses a -20oC. La muestra debe ser conservaday protegida de la luz.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación



Metódica con medida del color de la bilirrubina en el suero

La bilirrubina presenta un espectro de absorbancia a 463 nm. Metódica poca usada porquetambién la hemoglobina en pequeña cantidad puede interferir.

Metódica con oxidación

La bilirrubina por oxidación en ambiente ácido forma productos coloreados en verde conrelativa medida colorimétrica.


Metódica con sales diaconio del ácido sulfanílico

La bilirrubina reacciona en presencia de ácido sulfanílico diazotado (ASD); en un medioalcalino, forma un azo-compuesto de color rojo-violáceo (azobilirrubina), cuya intensidad esproporcional a la cantidad de bilirrubina total presente en la muestra.

La bilirrubina conjugada (directa), muy polar, reacciona directamente en medio acuoso conel diazoreactivo; la bilirrubina no conjugada (indirecta), poco polar, no da directamente lareacción, requiere la presencia de un desarrollador acuoso que posibilite la reaccióndiazotación. Para que reaccione la bilirrubina total (conjugada y no conjugada) presente enla muestra, debe agregarse benzoato de cafeína al medio de reacción.

Ácido sulfanílico + nitrito de sodio —————> ASD

Bilirrubina + ASD —————> Azobilirrubina directa

Bilirrubina + ASD + acelerador —————> Azobilirrubina total

Materiales


Equipos


Procedimiento


Control de Calidad



Si el valor de la bilirrubina total es ≥ 10.0 mg/dl., repetir la medida.


u Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.u Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando

un control patológico.u Con valores de bilirrubina total ≥ de 20.0 mg/dl, repetir la medida, sea concentrada y

diluida 1:2 con solución fisiológica con un control patológico.u Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control

está dentro los rangos establecidos, se puede entregar el resultado.u Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir nuevamente la

muestra 1:4, 1:8, 1:16 con solución fisiológica, siempre usando el control patológico.


Linealidad

La metódica es lineal hasta 20 mg/dl

Sensibilidad

La metódica tiene una sensibilidad de 0,05 mg/dl

Especificidad

La metódica es específica para la bilirrubina total.

Interferencias

Hemólisis: También con valor muy bajo de Hb, evitar las muestras hemolizadas.La lipemia interfiere de modo relevante.Se han señalado muchas sustancias, drogas en especial, que pueden producir variaciones delresultado de bilirrubina sérica.

Valor de referencia

Hasta 1.0 mg/dl.Prematuros de 2-4 días, hasta 10.0 mg/dl.Neonatos de 24 horas, hasta 4.0 mg/dl.Neonatos de 48 horas, hasta 9.0 mg/dl.Neonatos al quinto día, hasta 13.5 mg/dl.


u Confrontar con funcionalidad hepática (transaminasas, G.G.T, TP, colinesterasa,urobilinógeno, análisis de hepatitis A, B, C y delta).

u Controlar parámetros para mononucleosis y citomegalovirus.u Controlar parámetros de estasis biliar (fosfatasa alcalina y G.G.T.).u Controlar biometría hematica completa y hierro.u Controlar enzimas cardíacas.u Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia).


Modo de escribir los resultadosLa bilirrubina total se escribe con dos cifras decimales.


Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 12.0 mg/dl.

4.6 BILIRRUBINA DIRECTALa bil irrubina conjugada (directa) reacciona directamente con el diazoreactivo(Met. Jendrassik); la bilirrubina no conjugada (indirecta) requiere la presencia de undesarrollador acuoso (benzoato de cafeína) que posibilite su reacción. De forma que, parala determinación de la bilirrubina total, debe agregarse el benzoato de cafeína y, para ladirecta, sin desarrollador.

Materialesu Guantes descartables no estérilesu Tubos de ensayo 16 x 100 mmu Puntas de pipeta 10-50 ulu Puntas de pipeta 50-200 ulu Puntas de pipeta 200-1000 ulu Puntas de pipeta 1000-5000 ul

Equipos


ProcedimientoSeguir las instrucciones de la casa comercial.

Control de CalidadSe deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que lasmuestras.


u Si el valor de la bilirrubina directa es ≥ 2.5 mg/dl., repetir la medida.u Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.


u Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizandoun control patológico.

u Con valores de bilirrubina directa ≥ de 5.0 mg/dl, repetir la medida sea concentrada odiluida 1:2 con solución fisiológica con un control patológico.

u Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el controlestá dentro de los rangos establecidos, se puede entregar el resultado.

u Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir nuevamente lamuestra 1:4, 1:8, 1:16 con solución fisiológica, siempre usando el control patológico.


Linealidad

La metódica de la bilirrubina directa es lineal hasta 5.0 mg/dl

Sensibilidad

La metódica tiene una sensibilidad de 0,003 mg/dl

Especificidad

La metódica es específica para la bilirrubina directa.

Interferencias

Hemólisis: también con valor muy bajo de Hb, evitar las muestras hemolizadas.La lipemia interfiere de modo relevante.Se han señalado muchas sustancias, drogas en especial, que pueden producir variaciones delresultado de bilirrubina sérica.

Valor de referencia

Hasta 0.3 mg/dl.


u Confrontar con funcionalidad hepática (transaminasas, G.G.T, TP, colinesterasa,urobilinógeno, análisis de hepatitis A, B, C y delta).

u Controlar parámetros para mononucleosis y citomegalovirus.u Controlar parámetros de estasis biliar (fosfatasa alcalina y G.G.T.).u Controlar biometría hemática completa y hierro.u Controlar enzimas cardíacas.u Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia).


La bilirrubina directa se escribe con dos cifras decimales.




4.7 BILIRRUBINA INDIRECTA

Metódica

Los valores para bilirrubina no conjugada (indirecta) se obtienen sustrayendo la bilirrubinaconjugada (directa) a la bilirrubina total.

Valor de referencia

Hasta 0.7 mg/dl.


u Confrontar con funcionalidad hepática (transaminasas, GGT, TP, colinesterasa, urobilinó-geno, análisis de hepatitis (A, B, C y delta).

u Controlar parámetros para mononucleosis y citomegalovirus.u Controlar parámetros de estasis biliar (fosfatasa alcalina y G.G.T.).u Controlar biometría hemática completa y hierro.u Controlar enzimas cardíacas.u Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia).


La bilirrubina indirecta se escribe con dos cifras decimales.



4.8 CALCIO

GeneralidadEl calcio sérico representa aproximadamente el 1% del calcio total del organismo, la mayorparte del cual está contenida en los huesos y en los dientes. El calcio sérico se encuentraen equilibrio dinámico con los líquidos extracelulares.

En el suero, el calcio está presente en formas distintas: el 35-45%, ligado a las proteínas;el 5-6%, ligado a ácidos débiles y no disociable (citrato); y el restante, como calcio ionizado,muy importante como regulador en la excitación neuro-muscular y de la permeabilidadcelular. El calcio cataliza también muchas reacciones enzimáticas e interviene en lacoagulación de la sangre.

El calcio ligado a las proteínas y el no disociable son biológicamente inactivos. La absorciónse realiza primero en el tracto del intestino delgado, en particular para la acción de la


vitamina D, del pH intestinal y en relación con fosfato en la dieta. Es eliminado con las hecesy la orina.

Indicaciones

La determinación se utiliza en el monitoreo del metabolismo del calcio. Se distinguen:

u Hipocalcemia debida a:Hipofuncionalidad de las paratiroides, escasa absorción por disminución de vitamina D,cirugía intestinal, pancreatitis, cirrosis, alcoholismo, insuficiencia crónica del riñón.

u Hipercalcemia debida a:Hiperparatiroidismo, aumentada destrucción de los huesos, metástasis de los huesos,neoplasia de la mama, neoplasia de la próstata y de la tiroides, osteoporosis, leucemia,linfoma, morbo de Paget, aumentada absorción intestinal, gravidez.




Ayuno en rutina. Existen pequeñas modificaciones circadianas de la calcemia.



Tipo de cristalería

La cristalería y cualquier recipiente que tenga contacto con la muestra debe ser previamentelavado con ácido para evitar contaminación por calcio. Los corchos, tapones de hule y tapasplásticas son fuentes de contaminación que deben evitarse.

Transporte


Conservación

Centrifugar y separar el suero, porque el prolongado contacto del suero con el coágulo puededisminuir los valores del calcio.

El calcio es estable 7 días a temperatura ambiente de 20-25oC, 3 semanas 2-4oC, y 8 mesesa -20oC.




A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación

Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos ycentrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia decoágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en el resultado la noidoneidad de la muestra.


Fotometría de llama

El calcio a temperatura de llama emite dos bandas moleculares con picos a 556 y 626 nm.,debidas al óxido.

Espectrometría de absorción atómica

Con flama área acetileno o protosido de asoto se puede medir con línea analítica a422.7 nm.

Metódica colorimetría y procedimiento analítico

El calcio en suero se determina por reacción directa con o-cresolftaleína complexona. Estecolorante forma un complejo violeta en presencia de calcio en medio alcalino. La8-hidroxiquinolina elimina la interferencia producida por el magnesio.

Calcio + O-Cresolftaleína complexona medio alcalino ———————>

Calcio – Cresolftaleína complexona (color violeta).

Materiales



Equipos


Procedimiento


Control de Calidad


Verificar el resultado:

u Si el valor del calcio es < 7.0 y/o ≥ 13.0 mg/dl., repetir la medida.

u Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.

u Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizandoun control patológico.

u Con valores de calcio ≥ de 16.0 mg/dl., repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2con solución fisiológica con un control patológico.

u Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el controlestá dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.

u Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir nuevamente lamuestra 1:4, 1:8, 1:16 con solución fisiológica siempre usando el control patológico.

Para transformar los valores del calcio en calcio ionizado (Ca++) se usa la siguiente fórmula:

(Ca tot mg/dl x 6) - (Prot. tot g/dl / 3)Ca++ = _____________________________________ Prot. tot g/dl + 6

Los valores de referencia del calcio ionizado son: 5.0 - 6.0 mg/dl


Linealidad

La metódica es lineal hasta 16 mg/dl.


Sensibilidad

La metódica tiene una sensibilidad de 0,2 mg/dl.

Especificidad

La metódica es específica para el calcio. Es necesario reducir la absorción de CO2 para evitaruna reducción de la estabilidad de los reactivos y de la calibración.

Interferencias

En la práctica, no existe alguna interferencia significativa del suero.

La interferencia se puede presentar con:

Hemólisis > de 10 g/l.Bilirrubinas > de 60 mg/dl.La lipemia > de 1000 mg/dl de triglicéridos.Interferencias particulares pueden deberse a sustancias anticoagulantes o quelantes (EDTA,citrato, oxalato).

Valor de referencia

Neonato de edad hasta 10 días 8.6-10.2 mg/dl.Neonatos niños de 10 días hasta 2 años 7.6-10.4 mg/dl.Niños de 2 hasta 12 años de edad 9.0-11.0 mg/dl.Adultos 8.8-11.0 mg/dl.


u Comparar con otros parámetros del metabolismo: fósforo.u Comparar con parámetros del equilibrio electrolítico (sodio, potasio y cloro).u Comparar con parámetros de funcionalidad paratiroidea y tiroidea.u Comparar con parámetros de funcionalidad pancreática (amilasa, lipasa).u Controlar parámetros de funcionalidad de riñón (creatinina, clareamiento de la creatinina,

proteinuria y densidad urinaria).u Controlar edad del paciente y eventual estado de gravidex.u Controlar eventual terapia diurética.


El calcio se escribe con una cifra decimal.


Se tiene que comunicar inmediatamente con valores inferiores a 7.0 mg/dl y ≥ 12.0 mg/dl.


4.9 CREATINA CINASA (CK)

Generalidad

La CPK o CK es una enzima fundamental en el metabolismo energético de la célula. La CPKtiene la capacidad de formar ATP, a partir del ADP y fosfocreatina, con reversibilidad de lareacción, almacenando o librando energía.

Se encuentran tres principales isoenzimas con formas moleculares dimeras:

CK - MMCK - MBCK - BB

La CK se encuentra en cantidades elevadas en músculos esqueléticos casi exclusivamente,bajo la fórmula de CK-MM, y con pequeñas cantidades de CK-MB (1-3.0%), en el cerebroy el intestino; en la vejiga, está presente como enzima CK–BB. En el músculo cardíaco, estánbien representadas dos de las tres isoenzimas citoplasmáticas, la CK–MM y la CK-MB.

Indicaciones

La determinación de CPK en el suero es importante en el diagnóstico del infarto delmiocardio.

En el infarto del miocardio agudo (IMA), la CPK aumenta muy precozmente, normalmentedespués de 4-6 horas a partir de la sintomatología dolorosa. El aumento máximo se dadespués de 18-24 horas, y regresa a los valores normales después 3-4 días.

El aumento del CPK es más precoz en relación con otros parámetros del corazón (TGO, LDH).

El interés en la determinación de la CPK para el diagnóstico del infarto de miocardio, no sólointeresa porque consigue ser un precoz diagnóstico, sino también porque el aumento enel suero no está en relación con un daño del hígado, como puede verificarse con la TGO.

La determinación de CPK en el suero es importante también en alteraciones patológicas yfisiológicas de los músculos esqueléticos (distrofia muscular, estrés muscular, inyeccionesmusculares, trauma muscular, cirugía muscular, padecimiento muscular en general,neoplasia).




Ayuno, evitar estrés muscular en los días antes de la toma de muestra.


Reducir al mínimo el trauma y la éxtasis hemática.


Transporte

Transportar a temperatura ambiente.

Conservación

Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día atemperatura ambiente de 20-25oC, y 10 días en la oscuridad a + 4oC. Se inactiva enla congelación.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación

Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos ycentrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, hemólisis,presencia de coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en el resultadola no idoneidad de la muestra.


Metódica cinética UV y procedimiento analítico

La creatina kinasa cataliza la fosforilación del ADP por el fosfato de creatina y ATP. Laconcentración catalítica, se determina empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasay glucosa 6-fosfato deshidrogenasa, a partir de la velocidad de formación del NADPH.

ADP + fosfocreatina CPK ATP creatina —>

ATP + glucosa HK ADP + glucosa 6-P —>

Glucosa 6-P + NADP+ G6PDH 6-fosfogluconato + NADPH + H+

———>

Materiales

u Guantes descartables no estérilesu Tubos de ensayo 16 x 100 mm

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad8 4 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad70

u Puntas de pipeta 10-50 ulu Puntas de pipeta 50-200 ulu Puntas de pipeta 200-1000 ulu Puntas de pipeta 1000-5000 ul

Equipos


Procedimiento


Control de Calidad

Se deberá usar suero liofilizado de origen humano que sirve para el control de la exactitudo precisión en los ensayos de CK-Nac y CK-MB.


u Si el valor de la CPK es ≥ 600 U/L, repetir la medida.u Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.u Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando

un control patológico.u Con valores de CPK ≥ de 1000 U/L, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2 con

solución fisiológica con un control patológico.u Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido, y el control

está dentro los rangos establecidos, se puede entregar el resultado.u Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:4,

1:8 con solución fisiológica, siempre usando el control patológico.


Linealidad

La metódica es lineal hasta 1000 U/L.

Sensibilidad

La metódica tiene una sensibilidad de 5.0 U/L.

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 8 5Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 71

Especificidad

La metódica es específica para la CPK.

Interferencias

Hemólisis: con Hb ≥ 1.0 g/l (muy sensible).Ictérico: bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl (poco significativo).Lipemia: triglicéridos ≥ 1000.0 mg/dl

Valor de referencia

Mujer: hasta 167.0 U/LHombre: hasta 190.0 U/L


Controlar todos los otros parámetros cardíacos: LDH, TGO, CPK-MB, mioglobina y troponina.

Confrontar parámetros musculares: LDH, aldolasa.

Controlar parámetros de funcionalidad hepática: TGP, GGT, TP, colinesterasa, parámetros dehepatitis A y B.

Controlar eventuales parámetros tóxicos (alcoholemia y colinesterasa).

Controlar parámetros tumorales.


La CPK se escribe sin cifras decimales.


Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 400.0 U/L.

4.10 CREATINA CINASA (CK) MB

Generalidad

La CPK o CK es una enzima fundamental en el metabolismo energético de la célula. La CPKtiene la capacidad de formar ATP a partir del ADP y fosfocreatina con reversibilidad de lareacción, almacenando o librando energía.

Se encuentran tres isoenzimas principales con formas moleculares dimeras:

CK - MMCK - MBCK - BB

Las CK se encuentran en cantidades elevadas en músculos esqueléticos, casi exclusivamentebajo la fórmula de CK-MM, y con pequeñas cantidades de CK-MB (1-3.0%) en el cerebro y


el intestino; en la vejiga, está presente como enzima CK–BB. En el músculo cardíaco, estánbien representadas dos de las tres isoenzimas citoplasmáticas: la CK–MM y la CK-MB.

Indicaciones

La determinación de CPK en el suero es importante en el diagnóstico del infarto delmiocardio.

En el infarto del miocardio agudo (IMA), la CPK aumenta muy precozmente, normalmentedespués de 4-6 horas a partir de la sintomatología dolorosa. El aumento máximo se dadespués de 18-24 horas, y regresa a los valores normales después 3-4 días.

El aumento del CPK es más precoz en relación con otros parámetros del corazón (TGO, LDH).

El interés en la determinación de la CPK para diagnóstico del infarto del miocardio, no sóloporque consigue ser un precoz diagnóstico, sino también porque el aumento en el suero noestá en relación con un daño del hígado, como puede verificarse con la TGO.

La determinación de CPK en el suero es importante también en alteraciones patológicas yfisiológicas de los músculos esqueléticos (distrofia muscular, estrés muscular, inyeccionesmusculares, trauma muscular, cirugía muscular, padecimiento muscular en general,neoplasia).


En rutina y/o emergencia, explicando obligatoriamente el diagnóstico.


Ayuno, evitar estrés muscular en los días antes de la toma de muestra.


Reducir al mínimo el trauma y la éxtasis hemática.

Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día atemperatura ambiente de 20-25oC y 10 días en la oscuridad a + 4oC. Se inactiva en lacongelación.



A) Registro

Escrito claramente.


B) Muestra


C) Centrifugación



Metódica cinética inmunológica y procedimiento analíticoLa CK–MB está formada por las subunidades CK-B y CK-M. La fracción CK-M está inhibida porun anticuerpo específico que no influye en la fracción CK-B. La restante actividad de estafracción, que corresponde a la mitad de la actividad de la CK-MB, es determinada mediantetécnicas cinéticas UV al igual que CK.

La creatina kinasa cataliza la fosforilación del ADP por el fosfato de creatina y ATP. Laconcentración catalítica se determina empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasay glucosa 6-fosfato deshidrogenasa, a partir de la velocidad de formación del NADPH.

ADP +fosfocreatina CPK ATP + creatina —>ATP + glucosa HK ADP + glucosa 6-P —>Glucosa 6-P + NADP+ G6PDH 6-fosfogluconato + NADPH + H +

———>

Materiales


Equipos



Procedimiento


Control de Calidad

Se deberá usar suero liofilizado de origen humano que sirve para el control de la exactitudo precision en los ensayos de CK-Nac y CK-MB.


u Si el valor de la CK-MB es ≥ 100 U/L, repetir la medida. Puede verificarse el caso en elcual CK-MB es mayor que el CK total. Esto es posible porque la metódica utilizada esinmunológica y usa un anticuerpo policlonal, para la fracción CK-M, que inhibe la actividadde la subunidad CK-B. Existen casos en los cuales en pacientes con patologías oncológicasy con deficiencias inmunitarias, se puede verificar el aumento de la fracción CK-MBsuperior al CK-total.


un control patológico.u Con valores de CK-MB ≥ de 1500 U/L, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2

con solución fisiológica con un control patológico.u Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control

está dentro los rangos establecidos, se puede entregar el resultado.u Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:4,


Notas sobre las metódicas:

Linealidad

La metódica es lineal hasta 1500 U/L.

Sensibilidad

La metódica tiene una sensibilidad de 5.0 U/L.

Especificidad

La metódica es específica para la CK-MB; sin embargo, puede interferir la presencia deconcentraciones elevadas de otras isoenzimas del CPK.

Interferencias

Hemólisis: Hb: > de 10 g/l (poca interferencia).Ictérico: bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl (poco significativo).Lipemia: triglicéridos ≥ 1000.0 mg/dl.


Valor de referencia

Hasta 24.0 U/L

Inferior al 6.0% del CPK total.


El CK-MB, la troponina y la mioglobina son los parámetros más importantes en el diagnósticodel infarto al miocadio agudo; menor importancia la tiene la TGO y LDH, y algunos factoresde la coagulación, como el fibrinógeno. Debido a que la CK-MB está presente de modoparticular en el miocardio, su mayor aumento del 6.0% del CK total indica la presencia deun daño a cargo del miocardio.


La CK-MB se escribe con una cifra decimal.


Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 100.0 U/L y/o además el 25.0% delCK- total.

En caso que la fracción MB sea superior al CK- total, comunicar al médico para verificar siexiste una condición patológica que justifique ese resultado.

4.11 COLESTEROL TOTAL

Generalidad

El colesterol es un esteroide sintetizado en muchos tejidos, especialmente en el hígado, lacorteza supra-renal, en la pared intestinal, en las gónadas y la aorta.

El colesterol origina ¼ de la alimentación y ¾ de la síntesis endógena. Un aumento en ladieta de colesterol disminuye la cuota endógena. La cuota de colesterol intestinal estácontrolada por la concentración en el intestino de las sales biliares. El colesterol, en relacióncon la alimentación, es estereficado desde las células intestinales. La cuota endógena esestereficada desde el hígado.

El significado del colesterol en cada una de sus fracciones es diferente:

VLDL: incierto (utilización directa con los tejidos periféricos).

LDL: medio de transporte a las células.

HDL: aporte desde las células.

Indicaciones

La determinación del colesterol se hace en la patología del metabolismo lipídico ylipoproteico. El colesterol circula en parte libre y en parte estereficado con ácidos grasos.La estereficación se cumple en el hígado.


u El aumento del colesterol se encuentra en algunas enfermedades hereditarias y en laalimentación no adecuada, en el hipotiroidismo, en el síndrome nefrótico, en laenfermedad de Cushing, en la diabetes mellitus, en la pancreatitis, en la glicogenosis tipoI, III, VI, y también en las glomerulonefritis.

u La disminución del colesterol se encuentra en el déficit de alfa lipoproteína, en lainsuficiencia hepática, hipertiroidismo, caquexia, mala nutrición, uremia, septicemia,enfermedad de Addison.


Sólo rutina.


Necesario ayuno al menos 6-8 horas, no tomar alcohol al menos 72 horas antes de la tomade muestra.


Evitar éxtasis venosa porque provoca hemoconcentración y la liberación de colesterol tisulary, por consiguiente, un aumento de colesterol hemático.

Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día atemperatura ambiente de 20-25oC, y 5-7 días a + 4oC, 2 meses a –20oC.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación




Metótica enzimática colorimétrica (CHOD-POD)

El colesterol es determinado por la hidrólisis y oxidación enzimática. El indicadorquinonamine es formado de peróxido de hidrógeno y 4 amino antipirina con la presenciade fenol y peroxidasa.

Colesterolester + H2O CHE colesterol- ácido graso —>Colesterol + O2 CHO colesteno 3-ona + H2O ——>H2O2 + aminoantipirina + fenol POD quinonamino + 4 H2O ——>

Materiales


Equipos


Procedimiento


Control de Calidad



Linealidad



Sensibilidad


Especificidad

La metódica es específica para colesterol.

Interferencias

Suero ictérico con bilirrubina > 25.0 mg/dl.Hemólisis hemoglobina > 7.0 g/L.Lipemia: triglicéridos > 2500.0 mg/dl.Ácido ascórbico, algunos anticoagulantes (oxalato, citrato, fluoruro) pueden interferir y darresultados falsamente bajos.

Valor de referencia

Hasta 200.0 mg/dl.


u Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (triglicéridos, colesterol HDL, VLDL,apolipoproteínas).

u Controlar parámetros del metabolismo glucídico, de la funcionalidad del riñón,funcionalidad del hígado (GGT en alcoholismo) y la funcionalidad tiroidea.


El colesterol se escribe sin cifra decimal.

4.12 COLESTEROL HDL

Generalidad

El colesterol HDL constituye la parte de las lipoproteínas de alta densidad (High DensityLipoproteins), formadas por el 50.0% de proteínas (de las cuales el 90.0% apoA); el 18.0%,colesterol; el 2.0%, triglicéridos; y el 30.0%, fosfolípidos.

El colesterol HDL es producido en el hígado. El colesterol que se encuentra en las célulasestá inmerso en las secreciones biliares y, a través de la bilis, es eliminado en el intestino.

Indicaciones

El control del colesterol HDL es importante en la determinación del diagnóstico del riesgode aterosclerosis. El aumento de la concentración del colesterol HDL tiene un efecto protectoren las cardiopatías coronarias, mientras la disminución en particular con un aumento de lostriglicéridos puede comportar un aumento del riesgo de enfermedad cardiovascular.


Las indicaciones principales son: diagnóstico de riesgo aterosclerótico, en el diagnóstico dela disfunción del metabolismo lipídico y lipoproteico.


Sólo rutina.


Necesario ayuno, al menos 6-8 horas; no tomar alcohol, al menos 72 horas antes de la tomade muestra.


Evitar éxtasis venosa porque provoca hemoconcentración y la liberación de colesterol tisular.

Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero; la muestra se puede conservar por 1 día a temperaturaambiente de 20-25oC, 5-7 días a + 4oC y 2 meses a –20oC. Sin embargo, es mejor evitarla congelación porque puede alterar los contenidos lipídicos y apolipoproteicos.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación



Metódica enzimática colorimétrica (CHOD-POD)

La precipitación de las lipoproteínas de baja densidad y las de muy baja densidad oquilomicrones (LDL y VLDL) con Mg++/sulfato de dextrano determinará el colesterol HDL.


Ester de colesterol colesterol esterasa colesterol + RCOOH ————————>

Colesterol + O2 colesterol-oxidasa colestenona + H2O2

————————>

H2O2 + indicador (incoloro) POD colorante (azul) + H2O ——>

Metódica enzimática colorimétrica (PEG) y procedimiento analítico

Metódica enzimática sin precipitación con uso de las enzimas PEG modificadas. El colesterolesterasa y el colesterol oxidasa modificados desde el PEG dan una actividad catalítica selectivaen relación con las diferentes fracciones lipoproteicas con actividad creciente desde el LDL< VLDL = quilomicrones < HDL. En presencia de iones de magnesio, se reduce la reactividadde las enzimas, especialmente en los quilomicrones (así, no es necesaria la precipitación dela muestra).

Materiales


Equipos


Procedimiento


Control de Calidad




Linealidad


Sensibilidad


Especificidad

La metódica es específica para el Colesterol HDL.

Interferencias

Limpiar muy bien la cristalería para evitar contaminación (después de la ejecución dealbúmina, PCR, ceroplasmina, magnesio).Hemólisis: con Hb ≥ 7.0 g/l.Ictérico: bilirrubina ≥ 25.0 mg/dl.Lipemia: triglicéridos ≥ 1000.0 mg/dl.Ácido ascórbico, algunos anticoagulantes (oxalato, citrato, EDTA) pueden dar valoresfalsamente bajos.Valores elevados de inmunoglobulinas pueden provocar valores falsamente elevados de HDL.

Valor de referencia

Hombre: > 55.0 mg/dl

Mujer: > 65.0 mg/dl


u Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (triglicéridos, colesterol, VLDL,apolipoproteínas).

u Controlar parámetros del metabolismo glucídico, de la funcionalidad del riñón,funcionalidad del hígado (GGT en alcoholismo) y la funcionalidad tiroidea.


El HDL-colesterol se escribe sin cifra decimal.

4.13 COLESTEROL LDL

Generalidad

La determinación del colesterol LDL es muy importante para su correlación con lahipercolesterolemia esencial y con la hipercolesterolemia secundaria (diabetes mellitus,nefrosis, hipotiroidismo, y también para el riesgo aterógeno).


La disminución se encuentra en el déficit de alfa lipoproteína, insuficiencia del hígado,hipertiroidismo, caquexia, mala nutrición, uremia, enfermedades infecciosas, septicemia,enfermedad de Addison.


Sólo rutina.


Necesario ayuno al menos 6-8 horas, no tomar alcohol al menos 72 horas antes de la tomade muestra.


Evitar éxtasis venosa porque provoca hemoconcentración y la liberación de colesterol tisular.

Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero; la muestra se puede conservar por 1 día a temperaturaambiente, 5-7 días a + 4oC, 2 meses a –20oC. Sin embargo, es mejor evitar la congelaciónporque puede alterar los contenidos lipídicos y apolipoproteínas.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación


Metódicas de determinación

Las metódicas hacen referencia a la determinación del colesterol total, HDL-colesterol y delos triglicéridos. El colesterol LDL se determina por cálculo.


LDL= Colesterol total – (HDL + 1/5 triglicéridos)

Con valores de triglicéridos por encima de 500.0 mg/dl, el cálculo no tiene significado.

Notas sobre las metódicas:

Linealidad

Referirse a las metódicas de colesterol, colesterol-HDL y triglicéridos.

Sensibilidad


Especificidad


Interferencias


Con valores de triglicéridos > de 500.0 mg/dl, el cálculo no es significativo.

Valor de referencia

Hasta 130.0 mg/dlModerado riesgo 130.0-160.0 mg/dlAlto riesgo > 160.0 mg/dl




El LDL-colesterol se escribe sin cifra decimal.

4.14 CREATININA

Generalidad

La creatinina es una sustancia que deriva del metabolismo muscular (músculo estriado, lisoy cardíaco) de la creatina y representa el subproducto de excreción. La producción decreatinina es independiente de la dieta y del ejercicio muscular; sin embargo, es proporcionaldentro de ciertos límites a la masa muscular. Se libera de los glomérulos y no es reabsorbidapor los túbulos, de los cuales puede ser excretada, especialmente cuando se aumenta laconcentración hemática. El aumento de la creatinina en el suero empieza a ser evidentecuando el filtrado glomerular es por debajo de 60 ml por minuto.


Indicaciones

La determinación de la cratinina es utilizada en el diagnóstico de las enfermedades renalesagudas o crónicas, y también para el monitoreo de la diálisis renal. El aumento de lacreatinina es un índice de la insuficiencia glomerular en cuanto ésta es eliminada por filtraciónglomerular. Mientras la uremia en la sangre puede ser controlada a través de una oportunadieta, la creatinina se correlaciona casi exclusivamente a la eficiencia de la filtraciónglomerular. La creatinina representa el índice más fiel de la insuficiencia renal.




Ayuno.



Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día atemperatura ambiente de 20-25oC, 7 días 2-4oC y 6 meses en congelación.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación




Método físico

Absorción de la cratinina sobre la resina a cambio iónico y medir la absorbancia a 235 nm.

Método cinético enzimático

El método enzimático colorimétrico consiste en la medida del color desarrollado con elreactivo de Jaffe, antes y después de una reacción con la enzima específica, la creatincinasa;esta enzima transforma la creatinina en creatina con medida final a 340 nm de la creatina.

Método colorimétrico y procedimiento analítico

Además de la determinación de la creatinina con una técnica de punto final, másfrecuentemente se utiliza una técnica cinética en la cual la creatinina en medio alcalinoreacciona con picrato produciendo un complejo coloreado rojo-naranja; la diferencia deabsorción durante el tiempo de conversión es directamente proporcional a la concentraciónde creatinina en la muestra.

Creatinina + ácido pícrico ———> creatinina picrato (complejo)

Materiales


Equipos


Procedimiento



Control de Calidad



u Si el valor de la creatinina es ≥ 7.0 mg/dl, repetir la medida.u Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.u Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando

un control patológico.u Con valores de creatinina ≥ de 25.0 mg/dl, repetir la medida, sea concentrada y diluida

1:2 con solución fisiológica y con un control patológico.u Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control

está dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.u Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:3

con solución fisiológica, siempre usando el control patológico.


Linealidad

Es lineal hasta 25.0 mg/dl.

Sensibilidad

Su sensibilidad es 0.1 mg/dl.

Especificidad

La metódica es específica para la creatinina.

Las muestras de suero tienen proteínas que pueden reaccionar no específicamente con elmétodo Jaffe; es necesario corregir el valor de 0.3 mg/dl para lograr valores más correctos.

Interferencias

Las interferencias más significativas son:Hemólisis: con Hb ≥ 10.0 g/l.Ictérico: bilirrubina ≥ 40.0 mg/dl.Lipemia: triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl.Acetona ≥ 50.0 mg/dl.Algunos antibióticos, como las cefalosporinas, pueden dar valores falsamente elevados.

Valor de referenciaHombres Hasta 1.3 mg/dlMujeres Hasta 1.1 mg/dlNeonatos o niños Hasta 0.7 mg/dl



Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, potasio, proteínas, densidad urinaria).

Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio, potasio, cloro).

Controlar sexo y edad del paciente y también eventual estado de embarazo.

Controlar parámetros del metabolismo muscular (CPK, míoglobulina).


La creatinina se escribe con una cifra decimal.



4.15 ACLARAMIENTO DE LA CREATININA

Generalidad

La cantidad de creatinina excretada con la orina está en relación con la filtración glomerular.

La creatinina es una sustancia que deriva del metabolismo muscular (músculo estriado, lisoy cardíaco) de la creatina, y representa el subproducto de excreción. La producción decreatinina es independiente de la dieta y del ejercicio muscular; sin embargo, es proporcional,dentro de algunos límites, a la masa muscular. Se libera desde los glomérulos y no esreabsorbida por los túbulos, de los cuales puede ser excretada, especialmente cuando seaumenta la concentración hemática. El aumento de la creatinina en el suero empieza a serevidente cuando el filtrado glomerular es por debajo de 60 ml por minuto.

La medida de la cantidad de creatinina en la orina, producida en un determinado períodode tiempo, simultáneamente a la medida de la concentración plasmática, lleva al cálculo elaclaramiento de la creatinina (volumen del plasma en ml que es depurado de la creatininaen un minuto de tiempo):

C= U x V/P (ml/min)

donde:

C= aclaramientoU= concentración de creatinina en la orinaV= volumen de la orina eliminadaP= concentración de creatinina en el plasma

Indicaciones

La estrecha correlación entre la velocidad de filtración glomerular y el valor de la creatininaplasmática, y el hecho que la concentración de la creatinina hemática no es influenciada porla dieta, hacen de la creatinina, en particular el aclaramiento de la creatinina, un índice defuncionalidad renal muy sensible y seguramente más significativo que la urea.


El aclaramiento de la creatinina se modifica en relación con la enfermedad renal(glomerulonefritis agudas o crónicas, riñón policístico, obstrucción de la vía renal).


En rutina y con explicación de su solicitud.


Ayuno.


A) Recoger la orina de 24 horas con el siguiente procedimiento:

Para la recolección de orina de 24 horas, se tiene que utilizar un frasco de 2.5 3.0 litros,de boca ancha, con tapón de rosca. Añadir al frasco un estabilizante, si es necesario.

Para la recogida de la orina, se procede del modo siguiente:

a) En el tiempo preestablecido, vaciar la vejiga e eliminar toda la orina.

b) Posteriormente, comenzar a recoger toda la orina de 24 horas.

c) Al cumplir las 24 horas, vaciar de nuevo la vejiga y depositar toda la orina en el frasco.


Al finalizar la recolección de orina, ésta debe ser enviada inmediatamente al laboratorio.

B) Cuando se entrega la muestra de orina, es necesario efectuar la toma de muestra desangre.

Transporte

La muestra de orina debe ser transportada de 2-4oC; la muestra de sangre, a temperaturaambiente.

Conservación





A) Registro

Escrito claramente.


B) Muestra


C) Centrifugación



Cu x V/minAclaramiento de la creatinina = ————————————

Ps

donde:

Cu= concentración de creatinina en la orina expresado en mg/dl.Ps = concentración de creatinina en suero expresado en mg/dl.V/min= volumen por minuto (cantidad de la diuresis entre 1440).

Procedimiento analítico

Ver metódica de la creatinina.


Linealidad

Referirse a las metódicas de creatinina. Es lineal hasta 25.0 mg/dl.

Sensibilidad

Referirse a las metódicas de creatinina. Su sensibilidad es 0.1 mg/dl.

Especificidad

Referirse a las metódicas de creatinina.

Las muestras de suero tienen proteínas que pueden reaccionar no específicamente con elmétodo Jaffe. Es necesario corregir el valor de 0.3 mg/dl para lograr valores más correctos.

Interferencias

Las interferencias significativas se deben:

Para las orinas:Presencia de partículas en suspensión (centrifugar las orinas).Mala recolección de orina.Presencia de bacterias, de barbitúricos, de cuerpos cetónicos.


Para la sangre:

Hemólisis: con Hb ≥ 10.0 g/l.Ictérico: bilirrubina ≥ 40.0 mg/dl.Lipemia: triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl.Acetona ≥ 50.0 mg/dl.

Valor de referencia

≥ 70ml/min.


u Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, potasio, proteínas, densidadurinaria).

u Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio, potasio, cloro).u Controlar sexo y edad del paciente, y también eventual estado de embarazo.u Controlar parámetros del metabolismo muscular (CPK, mioglobulina).


El aclaramiento de la creatinina se escribe en ml/minutos sin cifra decimal.

ELECTROLITROS

4.16 CLORO

Generalidad

El cloro representa el principal anión extracelular, como el sodio, el principal catión. Mientrasel sodio es el principal catión, el cloro comparte esta característica con los bicarbonatos; poreste motivo, el cloro se correlaciona no sólo con el equilibrio osmótico y el balance hídrico,sino que también se correlaciona con el equilibrio ácido-base.

El cloro ingresa en las células en medidas insignificantes, con la excepción de los glóbulosrojos, en los cuales sustituye los bicarbonatos que pasan al plasma.

Indicaciones

La determinación del cloro es importante en la condición de hemodilución y/o deshidrataciónhipoosmótica (enfermedad de Addison), en la acidosis y en la alcalosis metabólicas (vómito),y en la hemoconcentración (diabetes insípida y en la nefropatía).


En rutina y emergencia.



Ninguna.



Transporte

La muestra de sangre debe ser transportada a temperatura ambiente.

Conservación

Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día atemperatura ambiente de 20-25oC, 7 días + 2-4oC y 6 meses en congelación.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación



Método de Halmilton modificado por Schosinsky

El ión cloruro presente en la muetra reacciona con tiocianato de mercurio II produciendocloruro de mercurio no disociado y ión tiocianato libre. Este reacciona con ión férricoproduciendo tiocianato férrico de color rojo ladrillo, cuya intensidad es proporcional a laconcentración de cloruro.

2Cl- + Hg (SCN)2 ———> HgCl2 + 2SCN-

3SCN- + Fe+3 ———> Fe (SCN)3


A temperatura de llama, se oxidan átomos y moléculas, y cuando vuelven a la temperaturainicial, emiten radiaciones luminosas proporcionales a la cantidad de la sustancia nebolizada.


Espectrofotometría de absorción atómica

El cloro puede ser medido con esta técnica.

Electrodos a iones selectivos (ISE)

Electrodos selectivos para los iones cloro, potasio y sodio permiten utilizar esta técnicapotensiométrica y ejecutar una medida electrométrica del catión.


El método ISE (potenciometría directa) se basa en la calibración del cloro a través de dosestándares acuosos: uno con baja y uno con alta concentración conocida, y con un estándarinterno de referencia con una concentración que se pone en medio de los valores de lacalibración alta y baja durante la medida.

Materiales


Equipos

u Centrífugau Fotómetro de potenciometría directau Baño Maríau Reloj marcadoru Pipetas automáticas 10-50 ulu Pipetas automáticas 50-200 ulu Pipetas automáticas 200-1000 ulu Pipetas automáticas 1000-5000 ul

Procedimiento


Control de Calidad



u Si el valor del cloro es < 85.0 mEq/l ó ≥ 130.0 mEq/l, repetir la medida.



un control patológico.u Con valores de cloro ≥ de 150.0 mEq/l, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2

con agua destilada y con un control patológico.u Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control

está dentro los rangos establecidos, se puede entregar el resultado.u Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:3

con agua destilada, siempre usando el control patológico.


Linealidad

Es lineal hasta 150.0 mEq/l.

Sensibilidad

La sensibilidad de la metódica es de 10.0 mEq/l.

EspecificidadLa metódica es específica para el ion cloro.

InterferenciasLas interferencias más significativas son:

Hemólisis: con Hb > 10.0 g/l (el cloro se encuentra en concentraciones elevadas en losglóbulos rojos).Fármacos diuréticos, tranquilizantes (tricíclicos, fenotiazinas).

Valor de referencia

95-110 mEq/l.


Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, potasio, proteínas, densidad urinaria).

Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio, potasio, osmolaridad).

Controlar algunas hormonas (aldosterona, renina, cortisol, ACTH, TSH, FT4).

Controlar glucosa y eventual terapia diurética.


El cloro se escribe sin cifra decimal.



Se tiene que comunicar inmediatamente, con valores inferiores a 75 mEq/l y superiores a126.0 mEq/l.

4.17 MAGNESIO

Generalidad

Además del potasio, el magnesio representa el catión intracelular más importante. El ion Mges el cofactor de muchos sistemas enzimáticos, y es indispensable en todas las reaccionesATP dependientes. El magnesio se encuentra en muchos vegetales y en la carne. Delmagnesio presente en los alimentos, 1/3 se absorbe a nivel del primer tracto intestinal; seelimina por la vía renal. Una cantidad excesiva de calcio y fósforo en los alimentos disminuyela absorción del magnesio. El 69.0% del magnesio se encuentra en el tejido óseo, la otraparte participa en el metabolismo intermedio. En la sangre se encuentra en los glóbulos rojosy, en el plasma, se presenta en forma ionizada. El nivel de magnesio en el plasma semantiene de forma constante en un límite muy estrecho entre 1.58 - 2.55 mg%.

Indicaciones

Se emplea en el diagnóstico para el monitoreo del metabolismo del magnesio. Se evidenciauna correlación entre disminución de magnesio, alteraciones del calcio, potasio, fósforo yalgunas enfermedades cardíacas (arritmia ventricular, espasmos de las arterias coronarias).

La disminución del magnesio se debe a:

u Reducida introducción con dieta pobre en carne y vegetales, alcoholismo.u Reducida absorción y pérdida intestinal (diarrea, rescisión intestinal, enteritis, cirrosis

hepática, enfermedad de Crohn).u Aumento de la pérdida por vía renal (hipoparatiroidismo, diabetes, hiperaldosteronismo,

insuficiencia renal, terapia diurética, antibióticos, alcoholismo).u Hipertiroidismo.

u Embarazo.u Infección por HIV.

El aumento del magnesio se debe a:

u Reducida pérdida por vía renal (insuficiencia renal, uremia, pielonefritis, glomerulonefritis,hiperparatiroidismo).

u Hipotiroidismo.u Uso de antiácidos, laxantes que contienen magnesio.u Cetoacidosis diabética.u Quemaduras.


En rutina.



Ayuno.



Transporte


Conservación

Centrifugación y pronta separación del suero de la parte corposcular, ya que el contactoprolongado con el coágulo puede aumentar los valores del magnesio, debido a que loseritrocitos contienen aproximadamente 3 veces más iones de magnesio. La toma de muestrase puede conservar por 3 días a temperatura ambiente de 20-25oC, 7 días + 2 + 4oC y 12meses en congelación.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación



Metódica de Calmagita

El magnesio presente en la muestra reacciona con la calmagita en medio alcalino, originandoun complejo coloreado que puede determinarse espectrofotométricamente.

La presencia de EGTA en el reactivo evita la interferencia del calcio.


Metódica colorimétrica y procedimiento analítico

El magnesio forma con el azul de xilidil, en ambiente alcalino, un complejo de color rojo,la concentración del magnesio se determina midiendo fotométricamente el descenso del azulde xilidil.


Linealidad

Es lineal hasta 29.0 mg/dl.

Sensibilidad

La sensibilidad de la metódica es de 0.07 mg/dl.

Especificidad

La metódica es específica para el magnesio. Es necesario reducir la absorción de CO2 paraevitar una reducción de la estabilidad de los reactivos y de la calibración.

Interferencias

Las interferencias más significativas son:

Hemólisis: con Hb ≥ 10.0 g/l.Ictericia: bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl.Lipemia: triglicérido ≥ 1000.0 mg/dl.Fármacos diuréticos, laxantes.

Valor de referencia

Neonatos de 2-4 días 1.4-2.2 mg/dlNiños de 5-6 meses 1.7-2.3 mg/dlNiños 6-12 años 1.7-2.1 mg/dlAdultos 1.5-2.5 mg/dl


u Confrontar analitos del metabolismo (calcio, fósforo, calciuria, fosfaturia).u Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio, potasio, cloro).u Controlar parámetros de funcionalidad paratiroidea y tiroidea (PTH, TSH, hormonas

tiroideas).u Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, proteínas, densidad urinaria).


El magnesio se escribe con una cifra decimal.


4.18 POTASIO

Generalidad

El potasio es el principal catión intracelular, contenido en el 98.0 % de los espaciosintracelulares. Tiene la tarea de mantener la osmolaridad, y también regula la función de laexcitabilidad de las fibrocélulas musculares.

La cantidad de potasio intracelular es regulada, como el sodio, por la bomba de sodiopotasio, y también del equilibrio ácido–base. La principal vía de eliminación del potasio esrenal; pequeñas cantidades se eliminan con las heces.

Indicaciones

La determinación de la potasemia tiene una gran importancia para la función del miocardio.La medida del potasio sirve también en la enfermedad del riñón, intestinal, equilibriohidroelectrolítico y también para el monitoreo de la terapia diurética.

El potasio puede aumentar por:

u Una excesiva introducción (alimenticia, parenteral, transfusión de sangre conservada).u Destrucción celular (hemólisis, necrosis de parénquima).u Alteraciones orgánica y funcional del riñón.

La cantidad de la potasemia puede disminuir:

u En insuficiencias de contribución alimenticia y por enfermedades gastrointestinales(vómitos y diarrea).

u Por excesiva eliminación del riñón (exceso de la hormona córtico surenal), y también poracidosis diabética.




Ayuno en rutina.



Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día atemperatura ambiente de 20-25oC, 7 días + 2-4oC y 6 meses en congelación.




A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación

Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos ycentrifugar por 3000 r.p.m. Verificar idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia decoágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en el resultado la noidoneidad de la muestra.



A temperatura de llama, se oxidan átomos y moléculas; y cuando vuelven a la temperaturainicial, emiten radiaciones luminosas (776 nm), proporcionales a la cantidad de la sustancianebolizada.


El potasio puede ser medido con esta técnica.


Electrodos selectivos para los iones cloro, potasio y sodio permiten utilizar esta técnicapotensiométrica directa y ejecutar una medida electrométrica del catión.


El método ISE (potenciometría directa) se basa en la calibración del potasio a través de dosestándares acuosos: uno con baja y uno con alta concentración conocida, y con un estándarinterno de referencia con una concentración que se pone en medio de los valores de lacalibración alta y baja durante la medida.

Materiales

u Guantes descartables no estérilesu Tubos de ensayo 16 x 100 mmu Puntas de pipeta 10-50 ul


u Puntas de pipeta 50-200 ulu Puntas de pipeta 200-1000 ulu Puntas de pipeta 1000-5000 ul

Equipos

u Centrífugau Fotómetro electrodo selectivo de potenciometria directau Baño Maríau Reloj marcadoru Pipetas automáticas 10-50 ulu Pipetas automáticas 50-200 ulu Pipetas automáticas 200-1000 ulu Pipetas automáticas 1000-5000 ul

Procedimiento


Control de Calidad



u Si el valor del potasio es < 2.5 mEq/l ó > 6.0 mEq/l, repetir la medida.u Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.u Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando

un control patológico.u Con valores de potasio ≥ de 7.0 mEq/l, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2

con solución fisiológica y con un control patológico.u Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido, y el control

está dentro de los rangos establecidos, se puede entregar el resultado.u Si el suero diluido no esta en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:3



Linealidad

La metódica de potasio es lineal hasta 7.0 mEq/l.

Sensibilidad



Especificidad

La metódica es específica para el potasio.

Interferencias


Hemólisis: con Hb ≥ 10.0 g/l (el potasio se encuentra en concentraciones elevadas en losglóbulos rojos).Fármacos diuréticos.

Valor de referencia

3.7-5.5 mEq/l


u Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, proteínas, densidad urinaria).u Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio, cloro).u Controlar eventual terapia diurética.u Controlar parámetros de funcionalidad cardíaca.u Controlar glucosa.


El potasio se escribe con una cifra decimal.


Se tiene que comunicar inmediatamente, con valores inferiores a 2.7 mEq/l y superiores a6.2 mEq/l.

4.19 SODIO

GeneralidadEl sodio es el principal catión extracelular, que se puede difundir libremente. La salida delsodio desde la célula está compensada por la penetración del potasio, a fin de mantener laelectro neutralidad. La cantidad de potasio intracelular es regulada, como el sodio, por labomba de sodio potasio, y también de los equilibrios ácido–base. La principal eliminacióndel sodio es por el riñón; en menor cantidad, por las heces y el sudor. La principal funcióndel sodio es la de mantener la cantidad de los líquidos extracelulares y el volumen de todoslos líquidos en el organismo. El sodio condiciona las variaciones del equilibrio hídrico. Lacantidad de sodio en el organismo se mantiene constante para la regulación renal; laabsorción de sodio es controlada por la hormona aldosterona, aunque además tiene unacierta importancia el cortisol.


Indicaciones

El sodio puede disminuir por:

u Excesiva suministración de agua con disminuida capacidad de eliminación.u Excesiva retención de agua o por alteración del centro de la sed.u Pérdida enorme de sodio con la orina (diabetes insípida).u Daño de la bomba sodio-potasio (caquexia, hipo nutrición, estrés después de intervención

por cirugía).

El sodio puede aumentar:

u Contribución excesiva de sodio.u Deshidratación.u Por excesiva diuresis.u Por quemaduras graves.u Enfermedad crónica del riñón.u En diarreas imponentes.




Ayuno en rutina.



Transporte


Conservación




A) Registro

Escrito claramente.


B) Muestra


C) Centrifugación

Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos ycentrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia decoágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en el resultado la noidoneidad de la muestra.



A temperatura de llama, se oxidan átomos y moléculas, y cuando vuelven a la temperaturainicial, emiten radiaciones luminosas (589 nm) proporcionales a la cantidad de la sustancianebolizada.


El sodio puede ser medido con esta técnica.


Electrodos selectivos para los iones cloro, potasio y sodio permiten utilizar esta técnicapotensiométrica y ejecutar una medida electrométrica del catión.


El método ISE (potenciometría directa) se basa en la calibración del sodio a través de dosestándares acuosos: uno con baja y uno con alta concentración conocida, y con un estándarinterno de referencia con una concentración que se pone en medio de los valores de lacalibración alta y baja durante la medida.

Materiales



Equipos

u Centrífugau Fotómetro electrodo selectivo de potenciometría directau Baño Maríau Reloj marcadoru Pipetas automáticas 10-50 ulu Pipetas automáticas 50-200 ulu Pipetas automáticas 200-1000 ulu Pipetas automáticas 1000-5000 ul

Procedimiento


Control de Calidad



u Si el valor de sodio es < 126.0 mEq/l ó ≥ 156.0 mEq/l, repetir la medida.u Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.u Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando

un control patológico.u Con valores de sodio ≥ de 180.0 mEq/l, repetir la medida, sea concentrada y diluida

1:2 con agua destilada y con un control patológico.u Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control

está dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.u Si el suero diluido no esta en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:3

con agua destilada, siempre usando el control patológico.


Linealidad

La metódica del sodio es lineal hasta 180.0 mEq/l.

Sensibilidad


Especificidad

La metódica es específica para el sodio.


Interferencias

Interferencias más significativas:

Algunos fármacos que bajan los niveles de sodio: diuréticos, tranquilizantes tricíclicos,fenotiazina.

Valor de referencia

132.0 – 148.0 mEq/l.


u Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, proteínas, densidad urinaria).u Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (cloro, potasio, osmolaridad).u Controlar eventual terapia diurética.u Controlar glucosa.u Controlar algunos parámetros hormonales: aldosterona, renina, cortisol, ACTH, TSH y

FT4.


El sodio se escribe sin cifra decimal.


Se debe comunicar inmediatamente con valores inferiores a 125.0 mEq/l y superiores a158.0 mEq/l.

4.20 HIERRO

Generalidades

El hierro se absorbe a nivel duodenal y en la parte superior del yeyuno, de modo particular,como hierro Fe++. El hierro presente en el nivel intestinal proviene en gran parte de losalimentos de forma trivalente. La otra parte proviene del catabolismo hemoglobínico. Paraser absorbido, el hierro tiene que ser reducido mediante la vitamina C; la cantidad diariaes de 1.0 mg. El hierro se liga a las proteínas de transporte antes de ingresar al plasma.La ceroplasmina provoca la oxidación a Fe+++, que bajo tal forma se liga a la transferrina,el transporte del hierro se hace con el complejo transferrina hierro. Cada proteína detrasferrina puede transportar al máximo 2 iones de hierro.

Cuando los iones férricos son sustraídos a la sangre desde el órgano hemopoyético, aumentala cantidad de transferrina insaturada en la sangre, la cual puede cargarse de nuevo de hierrodesde los depósitos tisulares o desde las células de la mucosa intestinal. El hierro se liberatambién desde los glóbulos rojos maduros y es nuevamente utilizado para la síntesis denueva hemoglobina. La parte residual del hierro se fija en los depósitos tisulares comoferritina, la cual es utilizada más despacio por el organismo.


El hígado tiene una importancia fundamental en el metabolismo del hierro:

u Sirve como depósito principal.u Participa en la regulación de la absorción intestinal.u Sintetiza la transferrina.u Participa en la eritropoyesi.u Elimina una pequeña cantidad de hierro a través de la bilis.u Con el término de hierro se indica el hierro presente en el plasma; esta es la cuota de

hierro que constituye el hierro de transporte.

El hierro no se puede considerar un índice fiel del contenido de hierro en el organismo. Losvalores del hierro varían mucho con la edad y con el ciclo biológico circadiano. El nivel dehierro en el organismo disminuye por la tarde y sube por la mañana.

Indicaciones

La determinación de hierro sirve en el diagnóstico de anemia por carencia de hierro, en eldiagnóstico de hemocromatosi, nefropatía crónica. Las anemias por carencia de hierro sonde tipo microcítico e hipocrómico.

Disminución de hierro:

u Insuficiente introducción de hierro con la dieta (niños con nutrición exclusivamente de leche).u Insuficiente absorción en caso de aclorhidria en los pacientes gastroresegados.u Insuficiencia en la absorción por diarrea crónica.u Hemorragia crónica.u Necesidad aumentada como en el embarazo y en la lactancia.u Enfermedad infecciosa crónica y en otras enfermedades en las cuales el hierro se acumula

en las células del sistema retículo endotelial.

Aumento de hierro:

u Aumentada destrucción de los glóbulos rojos como en la anemia hemolítica.u Alterada síntesis de la hemoglobina, como en la anemia perniciosa.u Hepatitis aguda, en las cual las células del hígado liberan en la sangre el hierro contenido

en el citoplasma.u Hemosiderosis por muchas transfusiones o por introducción, vía oral, en mucho tiempo

con elevada cantidad de hierro.

Modalidad de solicitudSólo rutina.


Necesario ayuno.




Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero. La toma de muestra se puede conservar por 7 díasa temperatura ambiente de 20-25oC, por 3 semanas a 2-4oC y algunos años en congelación.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación



Espectrofotometría por absorción atómica

Con atomización con acetileno, después deproteinización, se mide a 248.3 nm.

Metódica colorimétrica con deproteinización

Estas metódicas se diferencian entre ellas:

u En función de la sustancia usada para la reducción del Fe+++ a Fe++.u En función de la modalidad de acidificación y de las condiciones deproteinización.u En función del reactivo cromógeno (ferrozina, etc.).


Metódica colorimétrica sin deproteinización

En medio ácido, el hierro es liberado de la transferrina en iones férricos libres. El ácidoascórbico reduce los iones férricos a ferrosos, los cuales reaccionan con la Ferrozineformando un complejo coloreado de violeta.

Fe++ + Ferrozine ———> complejo coloreado

Materiales


Equipos


Procedimiento




Linealidad

La metódica de hierro es lineal hasta 500.0 ug/dl.

Sensibilidad

La sensibilidad de la metódica es de 5.0 ug/dl.

Especificidad

La metódica es específica para el hierro.


Interferencias


Hemólisis con hemoglobina superiores a 1.0 g/L.Suero ictérico: bilirrubina > 60.0 mg/dl.Lipemia > 2000.0 mg/dl de triglicéridos.Muestras con precipitados deben ser bien centrifugados.El oxalato y el EDTA pueden dar valor bajo.

Valor de referencia

Hombre 60-158 ug/dl.

Mujer 37-145 ug/dl.


u Confrontar con los diferentes parámetros eritrocitarios (glóbulos rojos, hemoglobina,hematócritos, valor medio globular, valor medio de hemoglobina, índice de anisocitosis).

u Controlar otros parámetros del metabolismo del hierro (transferrina, ferritina).u Controlar parámetros de enfermedades inflamatoria, infecciosas, neoplásicas, autoinmunes

y degenerativas (VSG, fibrinógeno, PCR, leucocitos, ANA, marcadores neoplásicos).u Controlar parámetros índice de hemólisis (bilirrubina, reticulocitos, LDH, aptoglobulina).u Controlar parámetros de pérdida de sangre (sangre oculta en las heces, hematuria).u Controlar eventual terapia farmacológica.


El hierro se escribe sin cifra decimal.

4.21 FOSFATASA ACIDA

Generalidad

La fosfatasa ácida está constituida por un grupo de enzimas, las cuales hidrolizan losesteres fosfóricos en ambiente ácido. El pH óptimo de la actividad enzimática oscila entre4.8 – 6.0.

La fosfatasa ácida es muy difundida en el organismo, y se encuentra además en la próstata,donde se localiza la concentración más elevada, cerca de 100 veces más que en otros tejidos;en el estómago, hígado, bazo, en los glóbulos rojos y las plaquetas. La próstata sintetizala fosfatasa ácida bajo el estímulo de la testosterona: las células prostáticas no estimuladasno producen fosfatasa ácida.

Normalmente, la fosfatasa ácida se encuentra en el plasma sólo en pequeña cantidad,proveniente de los glóbulos rojos y plaquetas; también la fracción prostática se encuentraen cantidad muy pequeña.


Indicaciones

La determinación de la fosfatasa ácida está correlacionada a las enfermedades neoplásicasde la próstata, especialmente en los enfermos con metástasis ósea.

Se puede encontrar aumento de la fosfatasa ácida en:

u alteraciones de los glóbulos rojos, como en muchas anemias.u alteraciones de los glóbulos blancos, como leucemia.u alteraciones de las plaquetas.


Sólo rutina.





Transporte

Transportar a temperatura ambiente dentro de las cuatros horas después de obtenida lamuestra.

Conservación

Centrifugación y separación del suero. Ejecutar el examen cuanto antes: si no se puedeproceder antes, añadir a la muestra una gota de ácido acético (0.8 mol/l ), en cantidad deuna gota por cada ml. de suero. La toma de muestra se puede conservar por 2 días atemperatura ambiente de 20-25oC, por 8 días a + 4oC y por 2 meses a –20oC.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación

Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos ycentrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de


coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la noidoneidad de la muestra.

Metódica colorimétrica y procedimiento de determinación:

La fosfatasa ácida cataliza en medio ácido la hidrólisis del α –naftil fosfato. El α –naftolproducido reacciona con una sal de diazonio (FRTR), formando un cromógeno.

α –Naftil-fosfato + H2O FAC α- Naftol + fosfato —>

α –Naftol + FRTR ———> Cromógeno azoico

Materiales


Equipos


Procedimiento


Control de Calidad



Linealidad

La metódica de la fosfatasa ácida es lineal hasta 200.0 U/L.


Sensibilidad

La sensibilidad de la metódica es 0.1 U/L.

Especificidad

La metódica es específica para la fosfatasa ácida.

Interferencias


Hemólisis: con Hb ≥ 2.0 g/l (porque la fosfatasa ácida se encuentra en los glóbulos rojos).Ictericia: con bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl.Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl.La presencia de oxalato, citrato y EDTA pueden disminuir la actividad de la fosfatasa ácida.

Valor de referencia

Hasta 10.0 U/L.


u Confrontar con funcionalidad del hígado (transaminasa, TP, colinesterasa).u Confrontar con parámetros de estasis biliares (bilirrubina, fosfatasa alcalina, GGT).u Confrontar parámetros oncológicos, en particular PSA.


La fosfatasa ácida se escribe sin cifra decimal.

4.22 FOSFATASA ALCALINA

GeneralidadesLa fosfatasa alcalina es un grupo de enzimas que cataliza la hidrólisis del ligamiento estérico,entre álcali y ácido fosfórico, con liberación de fosfato inorgánico.

La fosfatasa alcalina se encuentra en muchos tejidos: huesos, mucosa intestinal, hígado,bazo, pulmones, tiroides, etc.

La fosfatasa alcalina en el plasma se encuentra constituida por algunas isoenzimas producidaspor el hígado, tejido del hueso y la mucosa intestinal.

La isoenzima de origen hepático constituye la principal fracción de la fosfatasa alcalina enadultos; en los niños, se evidencia la producida en los huesos.

El valor de la fosfatasa alcalina en el plasma es diferente con la edad: en el nacimiento, losvalores son iguales a los de adultos; después aumentan el doble valor, hasta los 10 años;se mantienen estos valores elevados entre 11 y 16 años, y después vuelven a los valoresde los adultos.


En los hombres, la fosfatasa alcalina es mayor que en las mujeres.

Indicaciones

El aumento de la fosfatasa alcalina se encuentra en:

u Enfermedad del hígado por un aumento de la fracción hepática o de la fracción de loshuesos por obstrucción de la vía biliares.

u Hepatopatías celulares.u Hepatopatía obstructiva.u Enfermedad ósea por un aumento de la fracción ósea, debido a la incrementada actividad

de los osteoblastos (raquitismo, enfermedad de Paget, hiperparatiroidismo, osteomalacia,neoplasia del tejido óseo, trauma o fracturas ósea).

La disminución de la fosfatasa alcalina se origina en la disminución del magnesio, porqueéste es el ión necesario para la actividad de la fosfatasa alcalina.


Sólo rutina.


Ayuno.



Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero. La muestra se puede conservar por 2 días atemperatura ambiente de 20-25oC, 7 días 2-4oC y 4 semanas en congelación a -20oC.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra



C) Centrifugación



Metódica colorimétrica cinética optimizada

El sustrato p-nitrofenilfosfato es hidrolizado por la enzima, produciendo p-nitrofenol y ácidofosfórico. La reacción se interrumpe con hidróxido de sodio que convierte el p-nitrofenol enión paranitrofenilato.

p-nitrofenilfosfato + H2O ALP p-nitrofenol + fosfato ——> <——

Materiales


Equipos


Procedimiento





Linealidad

La metódica de la fosfatasa alcalina es lineal hasta 2000.0 U/L.

Sensibilidad

La sensibilidad de la metódica es de 5.0 U/L.

Especificidad

La metódica es específica para la fosfatasa alcalina.

Interferencias


Hemólisis: con Hb ≥ 2.0 g/l (porque la fosfatasa alcalina se encuentra en los glóbulosrojos).Ictericia: con bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl.Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl.

La presencia de oxalato, citrato y EDTA puede disminuir la actividad de la fosfatasa alcalinapor la pérdida de iones de magnesio.

Valor de referencia

Hombres hasta 279.0 U/LMujeres hasta 240.0 U/LNeonatos inferior 600.0 U/LNiños de 6 días a 1 año inferior 1100 U/LNiños de 2- 7 años hasta 650.0 U/LNiños de 7-12 años hasta 720.0 U/L


u Controlar la edad del paciente.u Confrontar con funcionalidad del hígado (transaminasa, TP, colinesterasa).u Confrontar con parámetros de estasis biliares (bilirrubina, GGT).u Confrontar con parámetros del metabolismo óseo: (calcio, fósforo).u Confrontar el valor del magnesio.u Controlar eventual estado tóxico (alcoholismo).u Controlar los parámetros de hepatitis.


La fosfatasa alcalina se escribe sin cifra decimal.


4.23 FÓSFORO INORGÁNICO

Generalidad

El fósforo es un importante anión intra-extracelular, y se encuentra en forma orgánica einorgánica.

El 80.0% está en equilibrio dinámico en los huesos, en relación con el calcio; un 11.0%,en el tejido muscular; el restante, en los líquidos intracelulares y en todas las estructurascelulares.

En los líquidos extracelulares, el fósforo está ligado a los lípidos (fosfolípidos) y a lasproteínas (fosfoproteínas).

Es importante:

u En el procedimiento de formación de absorción del tejido óseo.u En la composición de los fosfolípidos.u En el transporte de los metabolitos a través de las membranas celulares y sobre la

transferencia de energía (ATP, UTP, fosfocreatina).u En la regulación de la reacción de la actividad de las diferentes fases metabólicas

(constituyente del AMP cíclico).u En la absorción intestinal de glúcidos y vitaminas.

El metabolismo del fósforo está estrechamente ligado al calcio, pues este último ejerce unainfluencia directa sobre los niveles de fosfato a través de una regulación, en la cual, una altaconcentración de calcio hace disminuir la absorción de los fosfatos y provoca la formaciónen el intestino de fosfato de calcio insoluble. Los factores que regulan los niveles de fosfatosen el organismo son los mismos que regulan los del calcio.

El fósforo está presente en muchos alimentos con altos contenidos proteicos (leche yproductos derivados de la leche). El fósforo es absorbido en los primeros tractos del intestinodelgado en ambiente ácido; mientras, en ambiente alcalino, hace productos insolubles. LaPTH (paratohormona) aumenta la absorción de modo indirecto, estimulando la vitamina D;la hormona del crecimiento (GH) aumenta la absorción intestinal directa del fósforo. Laregulación del fósforo se da principalmente a través de los riñones.

El fósforo se encuentra de forma orgánica en los glóbulos rojos y en el plasma comofosfolípido. Normalmente, en el laboratorio se determina el fósforo inorgánico. Los nivelesdel fósforo en el suero son diferentes durante el día; en la noche, se tiene un aumento del30.0% con referencia a los valores de la mañana.

Indicaciones

La determinación del fósforo sérico es importante en el diagnóstico de enfermedades óseasy renales.

El fósforo puede disminuir en:

u La reducción de la absorción intestinal (raquitismo, osteomalacia, mala absorciónintestinal, hipovitaminosis A).


u La eliminación renal excesiva (hiperparatiroidismo, raquitismo renal).u El excesivo pasaje intracelular (suministro parenteral de glucosa o insulina).

El fósforo puede aumentar por:

u La excesiva absorción (hipervitaminosis D).u El aumento del GH (somatotropina).u La osteolisis (metástasis ósea, algunas leucemias, plasmocitoma).

Modalidad de solicitudSólo rutina.


Ayuno.



Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero. La muestra se puede conservar por 8 horas atemperatura ambiente de 20-25oC, 1 día 2-4oC y 1 año en congelación.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación




Formación de fosfomolibdato-vanadato

El fósforo inorgánico reacciona en ambiente ácido con molibdato y vanadato con formaciónde un compuesto de color amarillo.

Metódica enzimática

El fosfato inorgánico, en presencia de glucógeno y de la enzima fosforilasa, forma glucosa-1-fosfato que produce a través de la enzima 6-fosfogluconato NADPH y que es medido a340 nm.

Formación de un complejo fosfomolibdato y procedimiento analítico

El fosfato inorgánico reacciona en medio ácido con el molibdato, para dar fosfomolibdadoque es reducido por el ácido ascórbico a azul de molibdeno, desarrollándose el color enmedio arsenito/citrato. El arsenito/citrato se combina con el exceso de molibdato, impidiendosu reacción posterior con el fosfato liberado de los esteres labiles. El color obtenido se mideentre 620-650 nm.

Materiales


Equipos


Procedimiento



Control de Calidad



Linealidad

La metódica de fósforo es lineal hasta 20.0 mg/dl.

Sensibilidad


Especificidad

La metódica es específica para el fósforo inorgánico.

Interferencias


Hemólisis: con Hb ≥ 2.0 g/l.Ictericia: con bilirrubina ≥ 56.0 mg/dl.Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl.

Valor de referencia

Adulto Hasta 4.5 mg/dl

Niños Hasta 6.5 mg/dl


u Confrontar con los analitos del metabolismo fósforo-cálcico (calcio, calciuria, fosfaturia).u Confrontar con parámetros de equilibrio electrolítico (sodio, potasio, cloro).u Confrontar con parámetros de funcionalidad paratiroidea y tiroidea (TSH, PTH, hormonas

tiroideas).u Confrontar con funcionalidad pancreática (amilasa, lipasa).u Confrontar con parámetros de funcionalidad renal (creatinina, aclaramiento de la

creatinina, proteinuria, densidad urinaria).


El fósforo se escribe sin cifra decimal.


4.24 GAMMA GLUTAMIL TRANSFERASA

Generalidad

La gamma glutamil transferasa cataliza el transporte del grupo gamma–glutamínico. Lag-GT está presente en muchos tejidos (hígado, riñón, páncreas, pulmón, bazo, intestino ytiroides).

En el suero, está presente tres isoenzimas que migran de modo distinto en la electroforesis.La g-GT también se encuentra en la orina, donde su concentración es más elevada que enel suero.

Indicaciones

Un aumento de la g-GT se encuentra en todas las enfermedades del hígado y de las víasbiliares. El aumento más alto se encuentra en la obstrucción de las vías biliares. Ladeterminación es importante en el diagnóstico de la metástasis hepática. Se usa también enel diagnóstico para identificar el alcoholismo, para el monitoreo de la abstención del alcoholen la terapia de desintoxicación, en las enfermedades del hígado. Parece que el aumento dela g-GT en las enfermedades hepáticas está en relación con una aumentada síntesis de laenzima a nivel hepático.


Emergencia y rutina.


Ninguna.



Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero. La toma de muestra se puede conservar por 3 díasa temperatura ambiente de 20-25oC, 7 días 2-4oC y 1 año en congelación.



A) Registro

Escrito claramente.


B) Muestra


C) Centrifugación



La g–glutamil transferasa es una carboxipeptidasa que cataliza la transferencia del grupogamma-glutamilo, desde el sustrato L-gamma glutamil p-nitroanilida, a una molécula deglicilglicina (aceptor), liberando p-nitroanilina en cantidades equimoleculares. En lascondiciones de reacción, la cantidad de p-nitroanilina liberada es directamente proporcionala la actividad γγγγγ–GT del suero.

γγγγγ -glutamil p-nitroanilida + glicilglicina γγγγγ-GT γγγγγ-glutamil glicilglicina + p-nitroanilina ——>

Materialesu Guantes descartables no estérilesu Tubos de ensayo 16 x 100 mmu Puntas de pipeta 10-50 ulu Puntas de pipeta 50-200 ulu Puntas de pipeta 200-1000 ulu Puntas de pipeta 1000-5000 ul

Equipos


ProcedimientoSeguir las instrucciones de la casa comercial.




Linealidad

La metódica de γγγγγ–GT es lineal hasta 1200.0 U/L.

Sensibilidad


Especificidad

La metódica es específica para γγγγγ–GT.

Interferencias



Muchos antibióticos pueden dar valores elevados.

Valor de referencia

Hombres Hasta 50.0 U/LMujeres Hasta 36.0 U/L


u Confrontar con analitos de funcionalidad hepática.

u Confrontar con parámetros de estasis biliar (bilirrubina, fosfatasa alcalina).

u Controlar eventual estado tóxico (alcoholismo).

u Controlar eventual absorción de terapia con antibióticos.

u Controlar parámetros serológicos para la mononucleosis infecciosa y el citomegalovirus.


La γγγγγ–GT se escribe sin cifra decimal.

4.25 GLUCOSA

Generalidad

La glucosa es el carbohidrato más importante presente en la sangre. La oxidación de laglucosa es la principal fuente de energía para las células del organismo. La contribución dela glucosa con la dieta se hace fundamentalmente bajo la forma de polisacárido y almidón:


dos enzimas —la ptialina salival y la amilasa pancreática— los dividen en monosacáridos:bajo esta forma, son absorbidos y entregados al hígado, el cual los transforma en glucosa.La glucosa no utilizada inmediatamente es polimerizada a glicógeno, se conserva en el hígadoy en los tejidos musculares y/o se transforma en ácidos grasos que se acumulan como grasas.

Muchas hormonas intervienen en el metabolismo glucídico. La insulina promueve lautilización de la glucosa, facilitando el pasaje entre las células, y también la fosforilación yla polimerización a glicógeno. El glucagón y la adrenalina promueven la glicogenólisishepática; los corticoides y ACTH favorecen la glicogénesis; la somatropina inhibe lafosforilación de la glucosa. Todas estas hormonas mantienen la concentración de glucosaentre los límites precisos.

Indicaciones

La determinación de glucosa se usa en el diagnóstico y control de la enfermedad delmetabolismo de los carbohidratos, como diabetes mellitus en sus diferentes formas,hipoglicemias neonatales, etc. La diabetes puede ser primaria o secundaria en relación conenfermedades del páncreas; endógenas, hormonales; puede ser insulino resistente porreducida tolerancia a los carbohidratos. Modificaciones de la glucosa se pueden encontrar enla pancreatitis, la disfunción de la tiroides, en el traumatismo craneal, en accidente cerebrovascular y en el infarto del miocardio. Puede existir exceso de consumo de glucosas en eltrabajo muscular, como en la hiperpirexia y en la tirotoxicosis.


Emergencia y rutina.


Ayuno desde 6-8 horas. Para particulares indicaciones, puede preverse una alimentaciónparticular antes de la toma de muestra.


Ninguna particularidad. Evitar estrés, ya que puede comportase como una falsa hiperglicemiapor una descarga de adrenalina.

Transporte


Conservación

La estabilidad de la glucosa en las muestras es influenciada por la temperatura deconservación, desde la contaminación de bacterias y, en modo particular, por la glicólisis.

Centrifugar y separar lo más pronto el suero de la parte celular. Se puede utilizar comoanticoagulante con fluoro o iodio. La toma de muestra se puede conservar por 8 horas atemperatura ambiente de 20-25oC y por 3 días a 2-4oC.




A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación

Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos ycentrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: hemólisis, ictericia,presencia de coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en el resultadola no idoneidad de la muestra.


Método colorimétrico o–toluidina

La glucosa en solución ácida por ácido acético se condensa con o-toluidina, con formaciónde un complejo de color verde que se puede medir fotométricamente.

Método enzimático GOD-POD y procedimiento analítico

La glucosa oxidasa cataliza la oxidación de glucosa a ácido glucónico y peróxido dehidrógeno, lo cual se valora mediante la reacción de Trinder, dando lugar a una quinonacoloreada.

Glucosa + O2 + H2O GOD H2O2 + Gluconato ——>

2H2O2 + fenol + 4-AF POD Quinona + 4 H2O —>

Materiales



Equipos

u Centrífuga.u Espectrofotómetrou Baño Maríau Reloj marcadoru Pipetas automáticas 10-50 ulu Pipetas automáticas 50-200 ulu Pipetas automáticas 200-1000 ulu Pipetas automáticas 1000-5000 ul

Procedimiento


Control de Calidad



u Si el valor de la glucosa es < 50.0 mg/dl y ≥ 350. mg/dl, repetir la medida.u Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.u Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando

un control patológico.u Con valores de glucosa ≥ de 450.0 mg/dl, repetir la medida, sea concentrada y diluida

1:2 con solución fisiológica y con un control patológico.u Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control

está dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.u Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:3


Notas sobre la metódica

Linealidad

La metódica de glucosa es lineal hasta 450.0 mg/dl.

Sensibilidad


Especificidad

La metódica es específica para la glucosa.


Interferencias

Las interferencias mas significativas son:


Algunas hormonas, el ácido ascórbico, todas las sustancias reducientes pueden dar valor bajode glucosa. La hormona adrenalina, algunas drogas y los derivados de las anfetaminaspueden dar valor alto de glucosa.

Valor de referencia

Adultos y niños 60.0 - 110.0 mg/dlNeonatos > de 6 horas 40.0 - 60.0 mg/dlNeonatos > de 5 días 50.0 - 80.0 mg/dl


u Controlar primeramente el examen de orina para eventual presencia de glucosa y/ocuerpos cetónicos.

u Controlar parámetros del metabolismo glucósido (hemoglobina glicosilada, insulinemia).u Controlar eventual parámetros de funcionalidad tiroidea y suprarrenal.u Controlar parámetros del metabolismo lipídico y el valor del ácido úrico.u Controlar electrolitos (sodio, potasio, cloro, magnesio).u Confrontar con analitos de funcionalidad hepática.


La glucosa se escribe sin cifra decimal.


Se tiene que comunicar inmediatamente con valores inferiores a 50.0 mg/dl y superiores a500.0 mg/dl.

4.26 DESHIDROGENASA LÁCTICA

Generalidad

Las deshidrogenasas lácticas son enzimas catalíticas del metabolismo intermedio de granimportancia, las cuales catalizan la dehidrogenación del ácido láctico con formación de ácidopirúvico.

Las LDH son enzimas intracelulares citoplasmáticas, que tienen difusión y están contenidasen concentraciones elevadas en el músculo esquelético, en el hígado, en el cerebro, en elcorazón, en el riñón, en el páncreas, en los pulmones y en los eritrocitos.


Se conocen cinco isoenzimas:

u LDH-1 18-33 % : miocardio, eritrocitos, cerebro, músculos y riñón.u LDH-2 24-40 % : miocardio, eritrocitos, cerebro, músculos y riñón.u LDH-3 18-30 % : riñón y cerebro.u LDH-4 6-16 % : hígado, músculos, riñón y pulmón.u LDH-5 2-13 % : hígado, músculo, riñón y pulmón.

Indicaciones

La determinación del LDH en el suero está indicada en el monitoreo del infarto del miocardio.Se encuentra presente en estos pacientes, en cantidad inclusive, 10 veces superior a losvalores normales; permanece elevado por un largo período, ofreciendo así la posibilidad dehacer el diagnóstico del infarto, también si es de pequeña entidad. El primer aumento delos valores se tiene después de 6-12 horas. Los valores máximos se añaden después de24-60 horas, y los valores regresan a la normalidad después de 7–15 días. La LDH tambiénse emplea en el diagnóstico y monitoreo de enfermedades del hígado (hepatitis viral, cirrosis,carcinoma metastásico).

Un aumento de la actividad de la LDH se encuentran en algunas hemopatías (anemiaperniciosa, crisis hemolítica, etc.), en las neoplasias malignas, en caso de enfermedadreumática, en las leucemias agudas y crónicas, en el infarto cerebral, en el linfoma malignoy en la pericarditis tuberculosa. Es muy importante el diagnóstico de la LDH en el derrameseroso: si su nivel es bajo, el derrame es seguramente de origen inflamatorio; si su niveles elevado, es de naturaleza neoplásica.

Modalidad de solicitudEmergencia y rutina.

Preparación del pacienteAyuno en rutina.



Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero. La toma de muestra se puede conservar por 1 díaa temperatura ambiente de 20-25oC, 4 días a + 4oC y 6 semanas congelada.




A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación

Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos ycentrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, hemólisis,lipemia, presencia de coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en elresultado la no idoneidad de la muestra.


La enzima deshidrogenasa láctica cataliza la reducción de ácido pirúvico a ácido láctico enpresencia de la coenzima niacín adenín dinucleótido reducido (NADH).

Piruvato + NADH + H+ LDH Lactato + NAD+

——>

Materiales


Equipos


Procedimiento



Control de Calidad



u Si el valor de la LDH es < 100.0 U/L y ≥ 800.0 U/L, repetir la medida.u Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.u Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando

un control patológico.u Con valores de LDH ≥ de 1200 U/L, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2 con

solución fisiológica y con un control patológico.u Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control

está dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.u Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:4,

1:8 con solución fisiológica siempre usando el control patológico.


Linealidad

La metódica de LDH es lineal hasta 1200.0 U/L.

Sensibilidad


Especificidad

La metódica es específica para la LDH.

Interferencias



El paracetamol puede interferir.

Valor de referencia

Adultos 230-460 U/lNiños 250-580 U/L



u Controlar el valor de otras enzimas de los parámetros cardíacos (CPK, TGO, mioglobina,CK-MB, CK–MB masa, troponina).

u Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (TGP, GGT, TP, colinesterasa,electroforesis de proteína, parámetros de hepatitis A, B, C).

u Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia, colinesterasa).u Controlar parámetros tumorales.u Controlar biometría hemática completa.u Confrontar con pruebas de funcionalidad musculares (CPK, aldolasa).


La LDH se escribe sin cifra decimal.


Se tiene que comunicar inmediatamente con valores superior a 800.0 U/L.

4.27 PROTEINAS TOTALESGeneralidad

Las proteínas son sustancias orgánicas de elevado peso molecular, formadas de numerososaminoácidos unidos con enlace peptídico. La secuencia de los aminoácidos en la cadenainterna, y el número de las cadenas determinan la estructura primaria de las proteínas. Lasíntesis proteica se da en el citoplasma celular sobre la superficie de los ribosomas. Losaminoácidos están activados enzimáticamente en presencia de ATP. Las proteínas introducidascon los alimentos, después de un proceso de hidrólisis gástrica e intestinal, se dividen enaminoácidos y son absorbidos como tales.

Las funciones principales de las proteínas son:

u Nutritiva (asimilable a la fracción albumínica).u Función tapón (proteinas/proteinatos).u Coagulación y fibrinolisis.u Inmunitaria.u Transporte.u Mantenimiento de la presión osmótica.u Hormonales.u Enzimáticas.u Inhibición de las enzimas.

En relación con las características generales de solubilidad, las proteínas se fraccionan enalbúmina (hidrosoluble) y globulinas (solubles en solución salina).

Las proteínas séricas constituyen una solución coloidal estable: la disminución de la albúminapor debajo del 50.0% del total y un aumento de las fracciones globulínicas causan unaprogresiva disminución de la estabilidad coloidal del suero.


Las proteínas plasmáticas son sintetizadas en el hígado, excepto las inmunoglobulinas deorigen plasmacelular y algunos componentes del complemento de origen macrofágico y delipoproteínas de origen intestinal, endotelial.

El plasma tiene un significado completamente diferente del suero, por la presencia delfibrinógeno.

Con la electroforesis se pueden separar distintos componentes proteicos como: Albúmina,alfa1, alfa2, beta y gamma globulina.

Indicaciones

La determinación de las proteínas es útil en el diagnóstico y monitoreo de muchasenfermedades del hígado, del riñón, de la medula ósea, de algunas enfermedadesmetabólicas, y de errores en la alimentación.

Se puede verificar:

u Una disminución de la síntesis (hepatopatías graves, cirrosis con disminución de lasalbúminas y aumento de las globulinas).

u Disminución del aporte dietético y mala absorción.u Disminución por pérdidas de causas endógenas (hemorragias, diarrea masiva,

enfermedad nefrótica, etc.) y exógena (quemaduras, hemorragias traumáticas).u Disminución por hipercatabolismo (hipertiroidismo, neoplasia, síndrome de Cushing).

Las proteínas se pueden encontrar aumentadas en:u Deshidratación grave.u Mieloma múltiple.u Displasia por hiperproducción proteica.


Sólo rutina.

Preparación del pacienteAyuno.


Evitar la extasis venosa.

Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día atemperatura ambiente de 20-25oC, por 6 días a + 4oC y 6 meses congelada.




A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación



Metódica de Kjeldahi

De exclusivo uso para referencia de la estandarización de las proteínas en suero de control.Se mide el contenido de nitrógeno de las proteínas, luego la mineralización de éstas enpresencia de un catalizador.

Metódica espectrofotométrica e índice de refracción

Es poco usada por la interferencia de otras sustancias.

Metódica de Biuret y procedimiento analítico

Las proteínas y los péptidos, a diferencia de otros compuestos nitrogenados (urea, creatinina,ácido úrico y aminoácidos), reaccionan con iones de cobre en solución alcalina, formandoun quelato de color violeta de configuración desconocida. La intensidad del color esdirectamente proporcional a la concentración de proteínas presentes en la muestra. Estemétodo se caracteriza por ser simple, preciso y exacto.

Materiales



Equipos


Procedimiento


Control de Calidad



Linealidad

La metódica de proteínas totales es lineal hasta 15.0 g/dl.

Sensibilidad

La sensibilidad de la metódica es de 0.2 g/dl.

Especificidad

La metódica es específica para las proteínas totales.

Interferencias


Hemólisis: con Hb > 6.5 g/l.Ictericia: con bilirrubina > 21.0 mg/dl.Lipemia: con triglicéridos > 2000.0 mg/dl.

Valor de referencia

Adultos 6.6-8.7 g/dlPrematuros 3.6-6.0 g/dlNeonatos 4.6-7.0 g/dlNiños 6.0-8.0 g/dl



u Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (TGP, GGT, TP, colinesterasa, electro-foresis de proteína, parámetros de hepatitis A, B, C).

u Confrontar con funcionalidad del riñón (creatinina, urea, potasio, densidad urinaria).u Confrontar con parámetros del equilibrio electrolítico (sodio, potasio, cloro).u Controlar posible estado de embarazo.u Controlar parámetros de funcionalidad muscular y cardíaca (CPK, aldolasa).u Controlar parámetros inflamatorios (VSG, PCR, biometría hemática completa).


Las proteínas totales se escriben con una cifra decimal.

4.28 TRANSAMINASA (TGO-AST)

Generalidad

La transaminasa glutámica oxalacética (TGO) o aspartato aminotransferasa pertenece al grupode las transaminasas, las cuales catalizan la transformación de los aminoácidos a losrespectivos alfaceto-ácidos, a través de la transferencia del grupo amino y viceversa. La ASTestá presente en cantidad elevada en muchos tejidos con localización celular en lasmitocondrias y en el citoplasma. Los tejidos más ricos de AST son: corazón, hígado, músculo,riñón, cerebro, páncreas, eritrocitos, leucocitos, pulmón y bazo.

Indicaciones

La determinación de la AST en el suero está indicada para seguir los fenómenos lesivos delas células. Si la concentración de la enzima en el suero es moderada, ésta proviene delcitoplasma y, en menor medida, de las mitocondrias; si la concentración de la enzima estáelevada en relación con fenómenos lesivos y necróticos de la célula, proviene en mayormedida de las mitocondrias.

Los valores más elevados de la AST se relacionan con los procesos necróticos del órgano:infarto del miocardio, hepatopatía, distrofia muscular. La determinación de la AST es útil enpresencia de un informe dudoso de electrocardiograma. La AST puede aumentar también enel infarto pulmonar, en la pancreatitis aguda, en las hepatitis, en el envenenamiento porhongos (Amanita falloide), o por la absorción de algunos fármacos (isoniazide, rifampicina,algunos antibióticos).


En emergencia y rutina.


Ayuno en rutina.




Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día atemperatura ambiente de 20-25oC, 7 días a + 4oC, 1 año congelada.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación



La enzima aspartato aminotransferasa (AST) o glutámico-oxalacética (TGO) cataliza latransferencia del grupo amino del aspartato al cetoglutarato, formando oxalacetato yglutamato. La concentración catalítica se determina empleando la reacción acoplada de lamalato deshidrogenasa (MDH), a partir de la velocidad de desaparición del NADH.

Aspartato + ααααα cetoglutarato AST oxalacetato + Glutamato —>

Oxalacetato + NADH + H+ MDH Malato + NAD+

——>

Materiales

u Guantes descartables no estérilesu Tubos de ensayo 16 x 100 mmu Puntas de pipeta 10-50 ul


u Puntas de pipeta 50-200 ulu Puntas de pipeta 200-1000 ulu Puntas de pipeta 1000-5000 ul

Equipos


Procedimiento


Control de Calidad



u Si el valor de la AST es ≥ 300.0 U/L, repetir la medida.u Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.u Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando

un control patológico.u Con valores de AST ≥ de 800 U/L, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2 con

solución fisiológica y con un control patológico.u Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control

está dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.u Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:4,


Notas sobre la metódica

Linealidad

La metódica de AST es lineal hasta 800.0 U/L.

Sensibilidad



Especificidad

La metódica es específica para la AST.

Interferencias



Muchos fármacos (cefalosporina, cloranfenicol, rifampicina, isoniazide, alfametildopa) puedendar valores elevados.

Valor de referencia

Hombres Hasta 40.0 U/LMujeres Hasta 30.0 U/L


u Controlar el valor de otras enzimas de los parámetros cardíacos (CPK, mioglobina,CK-MB, CK–MB masa, troponina).

u Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (ALT, GGT, TP, colinesterasa,electroforesis de proteína, parámetros de hepatitis A, B, C).

u Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia, colinesterasa).u Confrontar con pruebas de funcionalidad musculares (CPK, aldolasa).


La AST se escribe sin cifra decimal.


Se tiene que comunicar inmediatamente con valores superior a 300.0 U/L.

4.29 TRANSAMINASA (TGP-ALT)

Generalidad

La transaminasa glutámica pirúvica o alanina aminotransferasa pertenece al grupo de aquellastransaminasas que catalizan la transformación de los aminoácidos a los respectivosalfacetoácidos, a través de la transferencia de un grupo amino y viceversa.

La ALT está presente en cantidad elevada en el hígado, y en pequeña cantidad en el músculo,en el corazón y en el riñón. La localización es en el citoplasma.

En el daño celular leve, los valores de la ALT son más elevados que la AST y viceversa. LaALT permanece mayor tiempo aumentada con respecto a la AST.


Indicaciones

La determinación de la ALT está relacionada con las enfermedades del hígado. La ALT seencuentra muy elevada en las diferentes hepatitis virales (A, B, C, delta, E) con valores20-50 veces más elevados con respecto a los valores de referencia. La ALT aumenta tambiénen la mononucleosis infecciosa y citomegalovirus. Se puede verificar leve aumento de ALTen las miopatías, colagenopatía, hemopatía y pancreopatía.

Es útil el reporte de AST/ALT:

u En la obstrucción extrahepática, el aumento principal es el de la ALT.u En la cirrosis, neoplasia del hígado, ictero hemolítico; en la hepatitis alcohólica, el

aumento de la ALT es inferior a la AST.


En emergencia y rutina.


Ayuno en rutina.



Transporte


Conservación

Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día atemperatura ambiente de 20-25oC, 7 días a + 4oC y 1 año congelada.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación

Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos ycentrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, hemólisis,


lipemia, presencia de coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en elresultado la no idoneidad de la muestra.


La enzima alanina aminotransferasa (ALT) o transaminasa glutámica pirúvica (TGP) catalizala transferencia del grupo amino de la alanina al cetoglutarato, formando piruvato yglutamato. La concentración catalítica se determina empleando la reacción acoplada de lalactato deshidrogenasa (LDH), a partir de la velocidad de desaparición del NADH.

Alanina + ααααα cetoglutarato ALT piruvato + Glutamato —>

piruvato + NADH + H+ LDH Lactato + NAD+

—>

Materiales


Equipos


Procedimiento


Control de Calidad



u Si el valor de la ALT es ≥ 300.0 U/L, repetir la medida.u Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.


u Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra, utilizandoun control patológico.

u Con valores de ALT ≥ de 600 U/L, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2 consolución fisiológica y con un control patológico.

u Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el controlestá dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.

u Si el suero diluido no esta en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:4,1:8 con solución fisiológica, siempre usando el control patológico.


Linealidad

La metódica de ALT es lineal hasta 600.0 U/L.

Sensibilidad


Especificidad

La metódica es específica para la ALT.

Interferencias



Muchos fármacos (cefalosporina, cloranfenicol, rifampicina, isoniazide, alfametildopa) puedendar valor elevado.

Valor de referencia

Hombres Hasta 40.0 U/L

Mujeres Hasta 36.0 U/L


u Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (AST, GGT, TP, colinesterasa,electroforesis de proteína, parámetros de hepatitis A, B, C).

u Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia, colinesterasa).u Confrontar con pruebas de funcionalidad musculares (CPK, aldolasa).u Controlar parámetros serológicos para la mononucleosis infecciosa y para citomegalovirus.u Controlar parámetros de las enzimas cardíacas (CPK, mioglobina, CK-MB, CK–MB masa,

troponina).



La ALT se escribe sin cifra decimal.


Se tiene que comunicar inmediatamente con valores superiores a 300.0 U/L.

4.30 TRIGLICÉRIDOS

Generalidad

Los triglicéridos están compuestos de un alcohol trivalente (glicerol) y de tres cadenas largasde ácidos grasos. Son absorbidos, una parte, con la alimentación y, la otra parte, essintetizada desde el hígado. Los triglicéridos alimenticios son transportados por losquilomicrones, mientras el transporte de la cantidad endógena a los tejidos se hace con lasVLDL. Los triglicéridos son utilizados en los tejidos con la intervención de la lipasalipoproteica. El 95.0% del tejido adiposo está constituido por triglicéridos.

Indicaciones

La determinación de los triglicéridos se emplea en los distintos dismetabolismos: alteradometabolismo lipídico, diabetes mellitus, síndrome nefrótico y muchas enfermedadesendógenas.

Se puede encontrar hipertrigliceridemia por:

u Falta de lipasa proteica.u Exógena (introducción excesiva de alcohol, glúcidos y lípidos).u Endógena (congénita).


En rutina.


Es necesario el ayuno, al menos de 6-8 horas. No consumir alcohol, al menos 72 horas antesde la toma de muestra.



Transporte



Conservación

Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día atemperatura ambiente de 20-25oC, 5 días a + 4oC y 3 meses congelada.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra


C) Centrifugación



Método enzimático UV

Los triglicéridos son hidrolizados a glicerol y ácidos grasos por medio de una lipasa. Elglicerol, por acción de la glicerol Kinasa (GK), es fosforilado en presencia de ATP. El ADPproducido es reconvertido en ATP a través de la piruvatokinasa (pk), y el piruvato formadoes reducido a lactato en presencia del NADH, el cual se oxida a NAD. La cantidad del NADHoxidado se mide en absorbancia a 340 nm.

Método enzimático colorimétrico

Los triglicéridos son hidrolizados a glicerol y ácidos grasos por medio de una lipasa. Elglicerol por acción de la glicerol kinasa (GK) es fosforilado en presencia de ATP. El glicerolfosforilado es oxidado con producción de H2O2. Este, en presencia de la peroxidasa (POD),forma con la antipirina un complejo coloreado estable, el color del cual es proporcional ala concentración de los triglicéridos.

Método enzimático colorimétrico y procedimiento analiticoLos triglicéridos son hidrolizados a glicerol y ácidos grasos por medio de una esterasa. Elglicerol es fosforilado por medio de la glicerol kinasa (GK) y, posteriormente, oxidado porla glicerol fosfato oxidasa (GPO), produciendo peróxido de hidrógeno. El peróxido reaccionacon un compuesto fenolado y la 4-aminofenazona, en presencia de peroxidasa (POD), paraproducir un complejo coloreado cuya intensidad de color es proporcional a la concentraciónde triglicéridos en la muestra.


Triglicéridos + 3 H2O esterasa glicerol + 3 RCOOH ———>Glicerol + ATP GK glicerol –3 – fosfato + ADP ———>Glicerol –3 – fosfato +O2 GPO H2O2 + dihidroxiacetona fosfato —>H2O2 POD indicador ——>

Materiales


Equipos


Procedimiento


Control de Calidad



LinealidadLa metódica de los triglicéridos es lineal hasta 1000.0 mg/dl.

Sensibilidad



Especificidad

La metódica es específica para los triglicéridos: si desea tener en cuenta el glicerol libre, setiene que restar 10.0 mg/dl al valor encontrado de los triglicéridos.

Interferencias


Hemólisis: con Hb ≥ 6.0 g/l.Ictericia: con bilirrubina ≥ 27.0 mg/dl.El acido ascórbico puede interferir con valores falsamente bajos.

Valor de referencia

Hasta 170.0 mg/dl.


u Observar el aspecto del suero (aspecto lipémico, cuando los triglicéridos están mayor de400.0 mg/dl).

u Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (colesterol, HDL, LDL, apolipoproteína).u Controlar los parámetros del metabolismo glucídico.u Controlar los parámetros de la funcionalidad del riñón (urea, potasio, proteínas, densidad

urinaria).u Controlar la funcionalidad hepática (particularmente la GGT, por toxicidad alcohólica).u Controlar la funcionalidad tiroidea (en el hipotiroidismo > triglicéridos y colesterol).


Los triglicéridos se escriben sin cifra decimal.

4.31 UREA

Generalidad

Las sustancias nitrogenadas de la sangre se dividen en dos fracciones: nitrógeno proteico ynitrógeno no proteico. El nitrógeno no proteico comprende diferentes sustancias: urea,aminoácidos, ácido úrico, creatinina, amonio, polipéptidos, purinas, nucleótidos, fenol eindol.

La urea representa la fracción principal, y sus valores se identifican con los del nitrógenono proteico. La urea es producida desde el hígado, después de la desaminación oxidativade los aminoácidos. En condiciones normales, la intensidad del catabolismo se adapta a lacontribución exógena y, por tanto, la cantidad de nitrógeno excretada es la misma a la deorigen catabólico, la cual corresponde a la cantidad exógena.

La urea contenida en el plasma es filtrada desde los glomérulos del riñón, y es reabsorbidapor los túbulos en el 40.0%. El grado de absorción varía con la cantidad de agua reabsorbida.


La urea es muy soluble, el 90.0% se excreta a través de la vía urinaria, y el restante 10.0%por vía extrarenal (sudor, heces).

Indicaciones

La determinación de la urea representa el diagnóstico más común para la valoración de lafuncionalidad renal.

En el diagnóstico diferencial se emplea (con la determinación de la creatinina) en:

u Hiperuremia prerenal: deshidratación (disminuida absorción o excesiva pérdida de agua),insuficiencia cardíaca, excesivo catabolismo proteico.

u Hiperuremia renal: alteraciones de la filtración glomerular y/o de la absorción tubular(glomérulo nefritis, riñón policístico, necrosis tubular, nefrosclerosis), alteración del flujosanguíneo renal por enfermedad intrínseca del riñón.

u Hiperuremia post-renal: obstrucción de las vías urinarias (cálculos, hipertrofia prostática,neoplasia).


En rutina y emergencia.


Ninguna.



Transporte


Conservación

Centrifugar y separar el suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día atemperatura ambiente, de 20-25oC 7 días a + 4oC y 1 año congelada.



A) Registro

Escrito claramente.

B) Muestra



Centrifugación



Método de diacetilmonosina

La urea reacciona a temperaturas altas en presencia de ácido fosfórico con ladiacetilmonosina, con formación de un producto coloreado en amarillo. La reacción escatalizada por iones férricos.

Método de Berthelot

La enzima ureasa reacciona sobre la urea, transformándola en iones de amonio. Después,el amonio se hace reaccionar en medio alcalino con fenol y hipoclorito, formándose azul deindofenol, cuya intensidad de color es proporcional a la concentración de urea.

Urea + H2O ureasa 2 NH4 + CO2

———>

NH4 + salicilato + NaClO nitroprusiato indofenol ——————>

Materiales


Equipos



Procedimiento


Control de Calidad



u Si el valor de la urea ≥ 150.0 mg/dl, repetir la medida.u Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.u Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando

un control patológico.u Con valores de urea ≥ de 400 mg/dl, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2

con solución fisiológica y con un control patológico.u Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control

está dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.u Si el suero diluido no esta en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:3



Linealidad

La metódica de urea es lineal hasta 400.0 mg/dl.

Sensibilidad


Especificidad

La metódica es específica para la urea.

Interferencias


Hemólisis: con Hb ≥ 10.0 g/lIctericia: con bilirrubina ≥ 60.0 mg/dlLipemia: con triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl

Valor de referencia

Adultos Hasta 50.0 mg/dlNeonatos, hasta 6 meses Hasta 42.0 mg/dlNiños Hasta 48.0 mg/dl



u Confrontar los parámetros de la funcionalidad del riñón (creatinina, aclaramiento de lacreatinina, proteínas urinarias, densidad urinaria).

u Confrontar parámetros del equilibrio electrolítico (sodio, potasio, cloro).u Confrontar parámetros de funcionalidad hepática (AST, ALT, GGT).u Controlar parámetros metabólicos (glucosa, acido úrico).u Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (colesterol, HDL, LDL, apolipoproteína).u Controlar eventual estado de embarazo.u Confrontar con funcionalidad sobrerenal.


La urea se escribe sin cifra decimal.


Se tiene que comunicar inmediatamente con valores superiores a 100.0 mg/dl.


QUINTA PARTE

ANEXOS

5.1 BIBLIOGRAFÍA

1.- Allain C.C., Poon L.DS, Clin. Chem. 20 470 (1974).

2.- Arce J. Herramientas del Control de Calidad. CEFOF. Costa Rica. 1999.

3.- Besozzi M. Bolelli G. Borsotti M. Leone L. Messeri G. Motta R. Principe L. Tocchini M.Il controllo di qualità in chimica clinica: le basi, gli obiettivi, il disegno. Biochim. Clin.1996.

4.- Bucolo G. David H., Clin. Chem. 19 476 (1973).

5.- Bonvicini P., Cerotti G., Giorn. It. Chim. 3 245 (1978).

6.- Boquet E. Castillo.M. et al., Mejoría continua de la calidad. Editorial MédicaPanamericana. 1998.

7.- Cali J.P., G.N. Bowers e D.S. Young, Clin. Chem. 19 1208 (1973).

8.- Campos E. Cunningham L. et al., Programas de Aseguramiento de la Calidad para laRed de Laboratorios Públicos en Costa Rica. 2002.

9.- Caraway W.T., am. J. Clin. Path. 25 840 (1955).

10.- Ceriotti G. L. Spandrio, Chim. Clin. Acta 11 519 (1965).

11.- Cerotti G. e A. De Nadai, Clin. Chem. Acta 24 311 (1969).

12.- Chaney A.L. e E.R. Marbach , Anal. Chem. 8 131 (1962).

13.- D.G.K.C. società tedesca di chimica clinica.

14.- Dybkaer R. Internal quality control in the clinical laboratori. Biochim. Clin. 1991.

15.- Eggstein M. Klin. Wsch., 44 262 (1966).

16.- Fawcett J.K. e J.E. Scott, Clin. Path. 13 156 (1960).

17.- Folin O. e H. Wu, J. Biol. Chem. 38 81 (1919).

18.- Fraser CG. Hyltoft Petersen P. The importance of imprecision. Ann. Clin . Biocem. 1991.

19.- Franzini C. Requisiti qualitativi auspicabili per le prestazioni rese dal laboratorio dibiochimica clinica. Biocim. Clin. 1998.

20.- Goldenberg H. e Fernandez A., Clin. Chem. 12 871 (1966).


21.- Gornal A.G., C.J. Balwell e David , J. Biol. Chem. 177 651 (1949).

22.- Gruppo di lavoro sull armonizzazione dei sistemi di qualità e accreditamento dellaConfederazione di chimica clinica delle Comunità Europee. Criteri essenziali edaggiuntivi per i sistemi qualità dei laboratori medici. Biochim. Clin. 1998.

23.- Hivarinen A. e E.A. Nikkila , Clin. Chim. Acta 7 !40 (1962).

24.- Hyltoft Petersen P. Ricos C. Stockl D. Libere JC. Baadenhuijsen H. Fraser CG. ThienpontL. Proposed guidelines for the internal quality control of analytical results in the medicallaboratory. Eur J. Clin: Chem. Clin . Biochem. 1996.

25.- Hultman E., Nature 183 108 (1959).

26.- I.F.C.C Comitato di esperti per il controllo di qualità in chimica clinica. Controllo diqualità in chimica clinica. Biochim. Clin. 1992.

27.- I.F.C.C. Federazione internazionale di chimica clinica.

28.- Ishikawa K. Guía de Control de Calidad. 1985.

29.- Jaffè M., Z. Phisiol. Chem. 10 391 (1886).

30.- Jenni RW. Jackson-Tarentino KY Causes of unsatisfactory performance in proficiencytesting. Clin. Chem. 2000.

31.- Kalckar H.M., J. Biol. Chem. 167 429 (1947).

32.- Métodicas de trabajo Wiener. Reactivos para laboratorios clínicos. 1995.

33.- Metódicas de trabajo 2MM. Diagnostics. Intramedica.

34.- Metódicas de trabajo Reactivos para Laboratorio de Química Clínica RepresentantesMédicas, S.A.

35.- Metódicas de trabajo Química Clínica. SPINREACT, S.A. 1998.

36.- Metódicas operatorias BioSystems.

37.- Método manual COBAS INTEGRA 400. II parte. Diagnostics. Roche. 1999.

38.- Niño H., Barrera L. Garantía de Calidad en el Laboratorio Clínico. PAHO. 1993.

39.- Pascual C. M. Tórrez W. Control de Calidad en Bioquímica clínica. Editorial CienciasMédicas. Cuba. 1989.

40.- Prandini B.D. Spandrio L., Atti 2 Congr. Sibioc 576 (1972).


41.- Pretorius E. J. Clin. Lab. Invest. 3 273 (1953).

42.- Rodkey F.L., Clin. Chem. 11 478 (1965).

43.- Savoldi R. Prandini B.D., Quad. Sclavo 12 238 (1976).

44.- Schosinsky K. Chaves A. et al, Manual de Técnicas de Laboratorio en Química Clínica.Universidad de Costa Rica. X edición. 1997.

45.- S.C.E. società scandinava di chimica clinica.

46.- Stockl D. Baadenhuijsen H. Fraser CG. Libere JC. Hyltoft Petersen P. Ricos C.Desiderable routine analitycal goals for quantities assayed in serum. Eur. J. Clin. Chem.Clin. Biochem. 1995.

47.- Trinder P., Clin. Path. 22 158 (1969).

48.- Trinder P., Ann. Clin. Biochem. 6 24 (1969).

49.- USLL 7 Siena Manuale della qualitá. Biochim. Clin 2002.

50.- Walters M. I. e H.W. Gerade, Microchem. J. ,15 231 (1970).

51.- Weichslbaum T.E. , Am. J. Clin. Path. 7 40 (1946).

52.- Werner M., Clin. Chem. 27 268 (1981).

53.- Westgard JO. Barry PL. Hunt MR. Groth T. Proposed selected method. A multiruleShewart chart for quality control in clinical chemistry. Ciln. Chem. 1981.


5.2 LÉXICO

Alejamiento El alejamiento medio % o Bias o índice de exactitud expresa la diferenciamedio entre el promedio en porcentaje de los valores encontrados y el valor

esperado puesto igual a 100.

Arrastramiento Efecto de una muestra sobre aquélla sucesiva.(Carry over)

Bias Ver alejamiento medio.

Coeficiente de Medida de precisión-imprecisión; valor en porcentaje de la desviaciónVariación C.V. estándar referido al valor medio.

Desviación Parámetro estadístico de la dispersión de los datos en una serie analíticaEstándar (DS). Expresa cuán grande es el error casual o la imprecisión de la medida.

Estándar Solución usada como Estándar, en la cual la sustancia ha estadoSecundario determinada con método analítico de segura confianza.

Error Diferencia entre el valor “verdadero” y el valor encontrado.

Error casual Error, normalmente de pequeña entidad, debido a causas no evidentes,ligado a la espera experimental de la determinación. Los valores denorma se distribuyen alrededor de un valor medio. Son inevitables.

Error de Error que influye siempre del mismo modo sobre cada determinación; essistema decir, provoca la desviación unívoca del valor medio encontrado con

respecto al valor esperado. Son errores por eliminar.

Exactitud Concordancia entre el valor “verdadero” y el valor encontrado. Se cuanti-tifica por el porcentaje de error (%E).

Estándar Material o solución con la cual se confronta la muestra para determinar laconcentración u otra calidad.

Estándar Sustancia de composición química conocida, con elevado grado de pureza.Primario

Linearidad Habilidad de un procedimiento de medición para proporcionar un resultadode medición proporcional al valor real de una cantidad mensurable sobreun intervalo de medición determinado.

Interferencia Error sistemático de medición ocasionado por un obstructor analítico.analítica

Imprecisión Dispersión de los datos en una serie analítica de determinaciones; se expresadesde la varianza, la desviación estándar y desde el coeficiente de variación.


Índice de Ver alejamiento medio.exactitud

Inexactitud Alejamiento entre el promedio de una serie analítica de determinaciones yel valor “verdadero” o de referencia.

Obstructor Componente de muestra que también es el componente de una cantidadanalítico de influencia, la cual no produce por sí misma una señal en el sistema de

medición, pero que ocasiona un aumento o una depresión del valor indicado.

Promedio o Valor obtenido al dividir la suma de los valores por el número de los valores.Media(Valor medio)

Precisión Concordancia entre los valores alcanzados con determinaciones repetidassobre la misma muestra.

Sensibilidad La más pequeña cantidad de sustancia determinable significativamentediversa desde el blanco.

Tendencia Cambio lento de una característica metrológica de un instrumento de medicióno sistema de medición.

Valor Valor en una muestra de valores que se aleja importantemente delaberrante remanente como para sugerir que puede provenir de una población

diferente.

Valor de Valor asignado a una cantidad mensurable, como resultado del proceso deconsenso consenso.

Varianza Parámetro estadístico de la dispersión de los datos.

Valor Valor desconocido, del cual, cada valor experimental es una evaluaciónverdadero aproximada.

Veracidad Concepto complejo de un método analítico: encierra en sí todas lascaracterísticas de precisión, exactitud, sensibilidad, especificidad y eficienciainstrumental.

.../... LÉXICO


Este libro se terminó de imprimiren los talleres de Litografía Nicaragüense.

Tiraje: 100 ejemplares en papel bondEnero 2005.

Manual de Laboratorio en Bioquimica Clinica y Control de Calidad

Documents

Transcript of Manual de Laboratorio en Bioquimica Clinica y Control de Calidad