Validacin de tcnicas de determinacin de lpidos realizadas con el autoanalizador ELIMAT

INHA

Laboratorio de Metabolismo de Lpidos Departamento de Bioqumica y Fisiologa

CONTEXTO

Ante la instalacin en el laboratorio de Metabolismo de Lpidos de un nuevo equipo (autoanalizador ELIMAT) que permite la reduccin del volumen de reactivo y de muestra por reaccin, se hizo necesario evaluar la calidad de los resultados con l obtenidos a travs de un procedimiento completo de control de la calidad que incluyera la evaluacin interna y la externa (o interlaboratorio).

LAS DETERMINACIONES EVALUADAS FUERON:Determinaciones:

Glucosa Colesterol Total Triglicridos Colesterol-HDL Colesterol-LDL

(a 19 muestras de suero humano)

En el control interno de la calidad se evaluaron mediante mtodos enzimticos, colorimtricos, y de punto final convencionales usando los reactivos Helfa-Diagnsticos (Empresa Finlay, Cuba). El colesterol-HDL, se determin mediante el mismo mtodo utilizado para el colesterol total luego de la precipitacin del resto de las protenas con Fosfotungstato de sodio y cloruro de magnesio. El colesterol-LDL se calcul a partir de los valores de los dems lpidos a travs de la frmula de Friedewald.

Otros aspectos del diseo del control interno de la calidad incluyeron La utilizacin de los sueros controles Elitrol I (rango normal) y Elitrol II (rango patolgico)[ELITECH-SEPPIM,Francia], para la estimacin de la exactitud, precisin y reproducibilidad de las mediciones. La realizacin de determinaciones en paralelo mediante el mtodo empleado hasta el momento (utilizando el fotocolormetro Corning) y comparacin de los resultados con los obtenidos en el ELIMAT. La evaluacin de las muestras por duplicado.

LOS RESULTADOS MOSTRARON ADECUADAS REPRODUCIBILIDAD, EXACTITUD Y PRECISIN.6 5,5 5 4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0

1

2 Controles32,5 2 1,5 1 0,5 0

3Triglicridos (m m ol/L)

C o le s te ro l (m m o l/L )

ELITROL I

4 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0

Glucosa (m m ol/L)

1

2

3

4

Controles

Las abscisas representan evaluaciones realizadas en das diferentes.

1

2

3

4

Controles

ELITROLII16 15 14 13 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 1 2 3

6 5,5 5 4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 1 2 3 4

C olesterol (m m ol/L)

G lu co sa (mmo l/L )

Triglicridos (mmol/L)

Controles 43,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 1 2 3

Controles

4

Controles

SE DEMOSTR UNA ADECUADA CORRESPONDENCIA ENTRE LOS RESULTADOS OBTENIDOS CON AMBOS EQUIPOSGlucosa (mmol/L)Colesterol (mmol/L)

8 6 4 2 0 1 2 3 4 ELIMAT CORNING

8 6 4 2 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 ELIMAT CORNING

Muestras

Muestras

Wilcoxon P=0.25Triglicridos (mmol/L)Colesterol-HDL (mmol/L)

Wilcoxon P=0.128

2,5 2 1,5 1 0,5 0 1 2 3 4

2 1,5 1 0,5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Muestras ELIMAT CORNING

ELIMAT CORNING

Muestras

Wilcoxon P=0.625

Wilcoxon P=0.0742

A partir de los resultados obtenidos, se realiz el control externo de la calidad donde se realizaron las determinaciones a la par con el laboratorio clnico del hospital Hermanos Ameijeiras, y se compararon los resultados.Diseo general empleado:Laboratorio evaluado Laboratorio de referencia

Mtodos Mtodo para HDL-C

Enzimticos, colorimtricos, punto final Indirecto (Precipitacin de lipoprotenas.) HELFA ELIMAT Elitrol I 8

Enzimticos, colorimtricos, punto final Directo

Reactivos Autoanalizador Suero control Total de evaluaciones del suero control

HELFA y Roche (HDL-C) Hitachi Modular-P800 Elitrol I 8

Total de muestras de sueros de pacientes

62

62

EL ANLISIS DE LOS RESULTADOS SE LLEV A CABO USANDO LOS SIGUIENTES INDICADORES:Indicadores Intra-laboratorioMedia Desviacin Estndar Coeficiente de Variacin

Indicadores Inter-laboratorioPorcentaje de Variacin entre valores de ambos laboratorios (%V) ndice de Varianza (IV)= (%V/CVS) x 100 Promedio de ndice de Varianza (PIV) Coeficiente de correlacin (R) y R2

CVS: coeficiente de variacin predeterminado, = 5 (Glucosa), = 10 (Colesterol total y de HDL, y triglicridos), de acuerdo a OMS. Se us el PIV como principal indicador de calidad, de acuerdo a la siguiente escala (segn datos histricos nacionales y criterios de Whitehead): 0-50 Excelente, 51-150 Bien, 151-200 Aceptable, 201-300 Regular, >300 Deficiente.

LOS RESULTADOS MOSTRARON ADECUADAS REPRODUCIBILIDAD Y PRECISIN5 4,9 4,8 4,7 4,6 4,5 4,4 4,3 4,2 1 2 3 4 5 6

Evaluacin del suero controlLaboratorio INHA Laboratorio H. Ameijeiras 4,53 0,03 0,73

G lucosa (mmol/L)

INHA Hosp. HAMedia (mmol/L) Desviacin estndar Coeficiente de variacin (%) 4,71 0,09 1,99

7

8

Evaluaciones en das independientes

Colesterol (mmol/L)

2,7 2,6 2,5 2,4 2,3 2,2 2,1 1 2 3 4 5 6 7 8Evaluaciones en das independientesLaboratorio INHA Media (mmol/L) Desviacin estndar Coeficiente de variacin (%) 2,54 0,03 1,10 Laboratorio H. Ameijeiras 2,38 0,09 3,88

INHA Hosp. HA

Triglicridos (mmol/L)

1,75 1,5 1,25 1 0,75 0,5 0,25 0 1 2 3 4 5 6 7 8Evaluaciones en das independientes

Laboratorio INHA

Laboratorio H. Ameijeiras 1,39 0,15 10,73

INHA Hosp. HA

Media (mmol/L) Desviacin estndar Coeficiente de variacin (%)

1,52 0,03 2,14

Colesterol HDL (mmol/L)

1,75 1,5 1,25 1 0,75 0,5 0,25 0 1 2 3 4 5Evaluaciones en das independientes

Laboratorio INHA

Laboratorio H. Ameijeiras 1,06 0,22 20,59

INHA Hosp. HA

Media (mmol/L) Desviacin estndar Coeficiente de variacin (%)

1,02 0,05 5,01

EL ANLISIS DE LOS RESULTADOS INTERLABORATORIO MOSTR UNA BUENA COMPARABILIDADDeterminacionesGlucosa Colesterol total

Valores de PIV80 88

CalificacinBIEN BIEN

Triglicridos

120

BIEN

Colesterol-HDL

84

BIEN

LOS RESULTADOS DE LAS MUESTRAS DE PACIENTES MOSTRARON UNA ADECUADA CORRELACIN ENTRE AMBOS LABORATORIOS PARA LA GLUCOSA, EL COLESTEROL TOTAL Y LOS TRIGLICRIDOS10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 01 62

Glucosa (mmol/L)

INHA HHA

7

Muestras

Triglicridos (mmol/L)

6 5 4 3 2 1 01 62

R2 = 0,96710 9 8 7 6 5 4 3 2 1 01 62

INHA HHA

Colesterol (mmol/L)

INHA HHA

Muestras

R2 = 0, 908

Muestras

R2 = 0, 988.

LA REDUCCIN DE LA CONCENTRACIN DE LA SOLUCIN PATRN USADA, PERMITI ELEVAR A VALORES ACEPTABLES, LA CORRELACIN DE LOS VALORES DE COLESTEROL-HDL CON LOS OBTENIDOS POR LA ENTIDAD CONTROLADORA

Mayor concentracin del patrnColesterol HDL (mmol/L) HHAColesterol HDL (mmol/L) HHA

Menor concentracin del patrn2,5 2 1,5 1 0,5 0

2 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 0 0,5 1 1,5 2 2,5 Colesterol HDL (mmol/L) INHA

0

0,5

1

1,5

2

2,5

Colesterol HDL (mmol/L) INHA

R = 0,809

R = 0,936

Impacto A travs de un anlisis completo de la calidadque incluy los controles interno y externo, se demostr la confiabilidad de los resultados de las principales determinaciones que realiza el laboratorio de Metabolismo de Lpidos del INHA, obtenidos mediante una nueva tecnologa que permite modernizar las tcnicas de medicin para las investigaciones y servicios que desarrolla dicha unidad.