Jose Vicente Marcos Jose Vicente Marcos TomásTomás

Análisis ClínicosAnálisis Clínicos

DEFINICIÓN de ANA

Anticuerpos dirigidos contra el núcleo y, también, contra elementos no nucleares (membrana nuclear, aparato mitótico y citoplasma), por ello se ha propuesto la denominación de anticuerpos anti-celulares.

ENFERMEDADES ANA +

1.Enfermedades autoinmunes sistémicas:a. Lupus Eritematoso Sistémico (LES) y otros

Lupus.b. Esclerosis Sistémica (ES). c. Síndrome de Sjögren (SS).c. Polimiositis/Dermatomiositis (PM/DM).d. Enfermedad Mixta del Tejido Conectivo

(EMTC).e. Artritis Crónica Juvenil (ACJ) y Reumatoide

(AR).

2.Enfermedades hepáticas autoinmunitarias:a. Cirrosis Biliar Primaria (CBP).b. Hepatitis Autoinmunitarias (HAI).c. Colangitis Esclerosante Primaria (CEP).

3.Otras enfermedades (infecciones víricas, hepatopatías, cáncer, síndromes neurológicos paraneoplásicos, principalmente)

4. Sin patología aparente (aumentan con la edad y género ♀)

SINTOMATOLOGÍA en la que PROCEDE VALORAR la SOLICITUD de ANA

METODOLOGÍA

ELISA vs IFI

Sustrato Extractos + Proteínas Tejido HEp-2 ó antigénico recombinantes HEp-2000

Sensibilidad / Falsos + (fondo proteico) Técnica referenciaEspecificidad Falsos - (faltan antígenos)

Lectura de Cuantitativa y Semi-cuantitativa yResultados automatizada ¡ automatizada !

Tipo de 1 (numérico) 2 (título + patrón)Resultados Objetivo Subjetivo

GPC No Si

RESULTADOS en ANA (IFI)

TITULACIÓN ≤ 1/40 (NEGATIVO)(puntos de corte) 1/80 -1/160 (POSITIVO BAJO)

≥ 1/320 (POSITIVO ALTO)Discrimina sanos de enfermos

PATRÓN de 40 / 20 / 10 (ver tabla posterior)

FLUORESCENCIA Orientación sobre patologíaDiscrimina mejor que el título

FALSOS NEGATIVOS Células HEp-2000Células HEp-2Tejido de rata o ratón

FALSOS POSITIVOS ANA + en sanos, no suele ser significativo- Sanos: 10-20% (1/80); 5% (1/160)- Edad/Sexo: 38% de >65ã 1/80, sobre todo ♀

Viriasis, cáncer, hepatopatías…

( : 1/40) ( : 1/160)

(SUSTRATOS) Sensibilidad

MÁS y MÁS… HABITUALESMÁS y MÁS… HABITUALES

PATRONES ANTÍGENOS PATOLOGÍASHOMOGÉNEO dsDNA, Histonas, Nucleosomas… LES, LES-ID, AIJ…

MOTEADO y Ro Sm, Sm/RNP, U1RNP, Ro (SS-A), La (SS-B), Mi-2 …

LES, EMTC, SS, Lupus-Nn, Lupus-CS, DM, ES, Raynaud …

NUCLEOLAR Pm/Scl, U3RNP, Scl-70, Ku, ARNp … ES, Raynaud, PM, DM …

CENTROMÉRICO CENP-(B, A, C, F) ES-L (CREST), Raynaud, CBP …

CITOPLASMÁTICO DIFUSO tRNAsint (Jo-1, PL7, PL12), SRP, RibP … DM, PM, LES…

MITOCONDRIAL AMA-M2 … CBP…

MÁS y POCO… HABITUALES

PATRONES ANTÍGENOS PATOLOGÍASMEMBRANA NUCLEAR gp210, Laminina, Nucleoporina… CBP, HAI, LES, PM, DM, AR …

PUNTOS NUCLEARES MÚLTIPLES Sp100, Coilina… CBP, HAI, SS …

PLEOMÓRFICO (ciclo dependiente) PCNA LES

FIBRAS CITOPLASMÁTICAS f-Actina (ASMA), Vimetina, Tropomiosina, Citoqueratinas… HAI, DM, EII …

PATOLOGÍAS ANTÍGENOS (principales) PATRONES (principales)

LES dsDNA, Ro (SS-A), La (SS-B),Sm, U1RNP, RibP, PCNA

HOMOGÉNEO, MOTEADO, CITOPLASMÁTICO, PLEOMÓRFICO

LES-ID Histonas HOMOGÉNEO

Lupus-Nn Lupus-CS Ro (SS-A) Ro

SS Ro (SS-A), La (SS-B) Ro, MOTEADO

ES Pm/Scl, U3RNP, Scl-70, Ku, RNAp NUCLEOLAR, MOTEADO

ES-L (CREST) CENP-B CENTROMÉRICO

EMTC U1RNP MOTEADO

PM DM Jo-1, PL7, PL12, Mi-2, Pm/Scl, Ku, SRP CITOPLASMÁTICO DIFUSO, MOTEADO

Raynaud U1RNP, CENP-B, Jo-1, PL7, PL12MOTEADO, NUCLEOLAR, CENTROMÉRICO,

CITOPLASMÁTICO DIFUSO

CBP AMA-M2, gp210, sp100MITOCONDRIAL, Membrana Nuclear,

Puntos Nucleares Múltiples

HAI f-Actina (ASMA), LKM, SLA, LC1

FIBRAS CITOPLASMÁTICAS, Membrana Nuclear

DESARROLLO en la SOLICITUD ANALÍTICA de

ANA:

NO PROCEDE si…: - Anterior + - Anterior Ø en <6 mesesEXCEPCIONES: - Pediatría - Anterior Dudoso - Anterior +, con auto-IgG específicos por hacer, y con indicación clínica expresa

ANA a 1/80(1/40 si son pediátricos):

NEGATIVO:

No realizan mas auto-IgG aunque

se soliciten

POSITIVO BAJO(1/80-1/160):

Solo se realizan mas auto-IgG si solicitaban

(acorde al patrón)

POSITIVO ALTO(≥1/320):

Se realizan los auto-IgG que el patrón oriente, aunque no se soliciten

PATRÓN IFI ANTÍGENOS DESENCADENADOS (27)Homogéneo dsDNA (cuantificar si procede), Histonas, NucleosomasMitocondrial, Membrana Nuclear, AMA-M2, sp100, gp210, LKM1, LC1, SLA, Puntos Nucleares, Fibras Citoplasmáticas F-actina (ASMA)Citoplasmático densotRNAsintetasas (Jo1, PL7, PL12), SRP, RibPResto (Moteado, centrómero, nucleolar…) Ro, La, PCNA, Sm, RNP, Mi-2, Scl70, PMScl, Ku, CENP

COMENTARIOS ACERCA DE LOS AUTO-IgG POSITIVOS

INFORME del LABORATORIO

INFORME del LABORATORIO

RECOMENDACIONES respecto a los ANA (I)

1.DIAGNÓSTICO• Criterios clínicos (GPC) Imprescindible valorarlos para mejorar la utilidad diagnóstica de los ANA. Resultados ANA +, aisladamente, son insuficientes para establecer un diagnóstico.

• Criterios diagnósticos (GPC) ANA solo forman parte del LES (dsDNA, Sm, AAF), Lupus inducido por fármacos (histonas) y EMTC (RNP). Determinar otros anticuerpos frente a antígenos extraíbles del núcleo (ENA), no deberá realizarse fuera de su contexto clínico específico.

• EAS Los ANA son una prueba con un elevado valor predictivo negativo.• LES Existe <3% de enfermos ANA Ø (menos con Hep-2000).

• LES y ES La mayor capacidad diagnóstica de los ANA en las principales EAS (debido a su mayor sensibilidad).

• ES Con sospecha clínica, un resultado negativo de los ANA puede indicar otro tipo de enfermedad fibrosante no autoinmune.

• AR Los ANA no son de utilidad diagnóstica.

RECOMENDACIONES respecto a los ANA (II)2.PRONÓSTICO

• LES dsDNA.

• LES-embarazo Ro y La (riesgo LES neonatal y bloqueo cardíaco congénito).

• ES ScL-70.

• Síndrome CREST CENP.

• PM/DM Jo-1 (implicación pulmonar).

• SS Ro y La (riesgo de LES neonatal y bloqueo cardíaco congénito).

Ro y La (manifestaciones sistémicas extraglandulares).

• ACJ ANA (riesgo de uveítis).

• Fenómeno de Raynaud ANA (su presencia incrementa el riesgo de desarrollar una EAS asociada, mientras que su negatividad reduce dicho riesgo).

3.MONITORIZACIÓN

• LES dsDNA (junto a C3, C4, PTo) cada 1-3 meses ó 6-12 meses según la actividad del LES. También, PCNA (aunque solo en <5% es +).