INTERACCIN NEURONA ASTROCITO: MEJORAR GABARGICAS SINPTICA TRANSMISIN DE UNA MANERA DEPENDIENTE SOBRE LAS ENZIMAS METABLICAS

INTERACCIN NEURONA ASTROCITO: MEJORAR GABARGICAS SINPTICA TRANSMISIN DE UNA MANERA DEPENDIENTE SOBRE LAS ENZIMAS METABLICASGABA Acido Gama Aminobutirico (GABA ) es el principal neurotransmisor inhibidor en el cerebro adulto del mamfero y se deriva del cido glutmico por glutamato descarboxilasa (GAD) que es ampliamente expresado en dos isoformas, GAD65 y GAD67 , el primero en neuronas y el segundo uno tanto en neuronas y astrocitosCultivo De Clulas

Los cultivos celulares se preparan a partir de cras de ratas Brevemente, hipocampos eraneliminado rpidamente de cerebros en medio de disociacin de hielo fro. A continuacin, el tejido del hipocampo eradisociado mecnicamente pulidas al fuego con pipetas de vidrio. A continuacin, la suspensin se transfiri a 10 ml OPTI-MEM yse centrifuga a 163 g. Despus de 48 h, para evitarcrecimiento astroctica, Arac se aadi a una concentracin finalde 25 mM. Para eliminar los fibroblastos restante, medio de crecimiento de astrocitosfue suplementado con D- valina y , para eliminar neuronalla contaminacin del cultivo de astrocitos , dos pasajes eranrealizado , una vez a la semana antes de la utilizacin en los co-cultivos .

Grabaciones electrofisiolgicos

La composicin de la solucin externa erael siguiente (en mM): 137 NaCl, 5 KCl, 2 CaCl2, MgCl2 1,24 glucosa y 10 HEPES, pH 7,2 con NaOH. mIPSCs erangrabada en presencia de 1 mM tetrodotoxina (TTX) para suprimircido quinurnico esta en la excitabilidad neuronal y 10 mMla solucin salina externo para bloquear las corrientes glutamatrgicos

ResultadosLos astrocitos Aumentar GABArgica Actividad enNeuronas del hipocampo cultivadasmIPSCs se midieron en el modo de clulas enteras a -70 mVy en el cultivo celular neuronal , la corriente promediada frecuencia fue de 0,13 0,02 Hz (n = 15) y la media mIPSCamplitud fue 50,72 2,43 pA (n = 15). Tomando en conjunto, nos informan de que los astrocitos regulan fuertementeLa transmisin GABArgica por que afecta principalmente a la frecuenciade mIPSCs. Nuestros datos farmacolgicos sugieren fuertemente queeste impacto de los astrocitos en la transmisin GABArgica implicaregulacin de las enzimas clave implicadas en el metabolismo celular.