INMUNOFLUORESCENCIAINMUNOFLUORESCENCIAImportancia como Importancia como

herramienta diagnóstica en herramienta diagnóstica en DermatologíaDermatología

Expositor: Gabriel Fernando Matamoros B.Expositor: Gabriel Fernando Matamoros B.Tutoras: Tutoras: Dra. Nieves González Dra. Nieves González

Dra. Marian UlrichDra. Marian Ulrich

OBJETIVOSOBJETIVOS

Conocer los principios y la tConocer los principios y la téécnica en los cuales cnica en los cuales se basa esta prueba diagnse basa esta prueba diagnóóstica.stica.

Reconocer la importancia de la Reconocer la importancia de la

inmunofluorescencia como herramienta inmunofluorescencia como herramienta

diagndiagnóóstica en patologstica en patologíías dermatolas dermatolóógicas.gicas.

Interpretar de manera adecuada los Interpretar de manera adecuada los resultados de esta pruebaresultados de esta prueba..

InmunofluorescenciaInmunofluorescencia

CONCEPTOCONCEPTO

Técnica diagnóstica basada en la Técnica diagnóstica basada en la detección y localización de complejos detección y localización de complejos antígeno-anticuerpo depositados en tejido, antígeno-anticuerpo depositados en tejido, mediante el uso de un segundo anticuerpo mediante el uso de un segundo anticuerpo (anti-inmunoglobulina humana) conjugado (anti-inmunoglobulina humana) conjugado con fluorescencia. con fluorescencia.

Immunofluorescence in dermatologyDiya F. Mutasim, MD, and Brian B. Adams, MD Cincinnati, Ohio

(J Am Acad Dermatol 2001;45:803-22.)

REVISANDO LA HISTORIAREVISANDO LA HISTORIA

Stokes denominStokes denominóó a lo a lo observado:observado:““fluorescenciafluorescencia””

En la mitad del siglo XIX, En la mitad del siglo XIX, Stokes observStokes observóó que el que el mineral Fluospar, mineral Fluospar, fluorescefluoresceíía cuando la luz a cuando la luz ultravioleta incidia ultravioleta incidia directamente sobre directamente sobre éél.l.

Stokes denominStokes denominóó a lo a lo observado:observado:““fluorescenciafluorescencia””

En la mitad del siglo XIX, En la mitad del siglo XIX, Stokes observStokes observóó que el que el mineral Fluospar, mineral Fluospar, fluorescefluoresceíía cuando la luz a cuando la luz ultravioleta incidia ultravioleta incidia directamente sobre directamente sobre éél.l.

Stanley JR. Pemphigus and pemphigoid as paradigms oforgan-specific, autoantibody-mediated diseases. J Clin Invest

1989;83:1443-8.

REVISANDO LA HISTORIAREVISANDO LA HISTORIA

En 1930 Haitinger desarrollEn 1930 Haitinger desarrollóó la la ttéécnica de fluorescencia secundaria cnica de fluorescencia secundaria empleando un fluorocromo. empleando un fluorocromo.

En 1950 Coons y Kaplan utilizaron En 1950 Coons y Kaplan utilizaron los anticuerpos marcados con los anticuerpos marcados con fluorescefluoresceíína para localizar na para localizar antantíígenos en los tejidos genos en los tejidos (inmunofluorescencia)(inmunofluorescencia)

Stanley JR. Pemphigus and pemphigoid as paradigms oforgan-specific, autoantibody-mediated diseases. J Clin Invest

1989;83:1443-8.

EN LA ACTUALIDADEN LA ACTUALIDAD

La inmunofluorescencia es usada para:La inmunofluorescencia es usada para:

SerotipificaciSerotipificacióón e identificacin e identificacióón de virus.n de virus.DetecciDeteccióón de auto-anticuerpos y otros n de auto-anticuerpos y otros componentes patolcomponentes patolóógicos gicos in situ.in situ.IdentificaciIdentificacióón de agentes infecciosos.n de agentes infecciosos.CuantificaciCuantificacióón de niveles de anticuerposn de niveles de anticuerpos

Raza K, Breese M, Nightingale P, Kumar K, Potter T,Carruthers DM, Situnayake D, Gordon C, Buckley CD,Salmon M, Kitas GD. Predictive value of antibodies tocyclic citrullinated peptide in patients with very early

inflammatory arthritis. J Rheumatol 2005;32:231-238.

Serologic Testing in Connective Tissue DiseasesDana E. Habash-Bseiso, MD; Steven H. Yale, MD; Ingrid Glurich, PhD; and Jerry W. Goldberg,

MD.2004

CLASIFICACIÓNCLASIFICACIÓN Inmunofluorescencia Directa: Inmunofluorescencia Directa:

Aplicada fundamentalmente a la detecciAplicada fundamentalmente a la deteccióón de n de inmunoglobulinas y factores del complemento inmunoglobulinas y factores del complemento presentes en una muestra clpresentes en una muestra clíínica.nica.

Inmunofluorescencia Indirecta:Inmunofluorescencia Indirecta: Aplicada a la detecciAplicada a la deteccióón de anticuerpos especn de anticuerpos especííficos ficos

en el suero del paciente frente a un determinado en el suero del paciente frente a un determinado antantíígeno mediante el uso de un segundo anticuerpo, geno mediante el uso de un segundo anticuerpo, o a la deteccio a la deteccióón de un antn de un antíígeno en una muestra geno en una muestra clclíínica. nica.

Immunofluorescence in dermatologyDiya F. Mutasim, MD, and Brian B. Adams, MD Cincinnati, Ohio

(J Am Acad Dermatol 2001;45:803-22.)

TÉCNICA DE IFDTÉCNICA DE IFD

Inmunofluorescencia Inmunofluorescencia directa directa

InmunofluorescenciaInmunofluorescencia Indirecta (IFI)Indirecta (IFI)

TÉCNICA DE IFITÉCNICA DE IFI

Antígeno tisularAntígeno tisular

INMUNOFLUORESCENCIA INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTAINDIRECTA

Suero del paciente (IgG)Suero del paciente (IgG)

+ anti-IgG humana + anti-IgG humana (de conejo por (de conejo por ejm.) conjugado ejm.) conjugado con fluoresceínacon fluoresceína

INMUNOFLUORESCENCIA INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTAINDIRECTA

MicroscopioMicroscopio de luz UVde luz UV

INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTAINMUNOFLUORESCENCIA DIRECTAEN ENFERMEDADES CUTÁNEASEN ENFERMEDADES CUTÁNEAS

TÉCNICA PARA BIOPSIA DE PIEL EN AMPOLLAS(INCLUIR PIEL PERILESIONAL)

ALGORITMOALGORITMO

PatrPatróón (Granular, lineal contn (Granular, lineal contíínuo, intercelular)nuo, intercelular)

Immunofluorescence in dermatologyDiya F. Mutasim, MD, and Brian B. Adams, MD Cincinnati, Ohio

(J Am Acad Dermatol 2001;45:803-22.)

Localización de la IF. (epitelio, membrana basal, vascular)Localización de la IF. (epitelio, membrana basal, vascular)

Inmunoreactante Dominante (IgA, IgG, IgM, C3, fibrinógeno)Inmunoreactante Dominante (IgA, IgG, IgM, C3, fibrinógeno)

PATRONES DE PATRONES DE INMUNOFLUORESCENCIAINMUNOFLUORESCENCIA

EN PIELEN PIEL

epidermis

Estrato córneo

Estrato espinoso

Capa basal

Estrato granulosoEpidermis

PATRÓN DE DEPÓSITO PATRÓN DE DEPÓSITO INTERCELULARINTERCELULARPATRÓN LINEAL, MEMBRANA BASALPATRÓN LINEAL, MEMBRANA BASAL

PATRÓN GRANULAR, PAPILA DÉRMICAPATRÓN GRANULAR, PAPILA DÉRMICAUniUnión dermoepidérmicaón dermoepidérmica

epidermis

Conducto sudoríparo

Glándula sudorípara

Vaso sanguíneo

Tejido adiposo

Dermis

Hipodermis

Patrón de IF alrededor de las Patrón de IF alrededor de las paredes de los vasosparedes de los vasos

DESMOSOMADESMOSOMA

UNIUNIÓÓN DERMOEPIDN DERMOEPIDÉÉRMICARMICA

PATRONESPATRONES

DepDepóósitos en el espacio intercelular.sitos en el espacio intercelular.DepDepóósitos de la membrana basal y paredes de sitos de la membrana basal y paredes de los vasos.los vasos.DepDepóósitos en la papila dsitos en la papila déérmica.rmica.DepDepóósitos en el EIC y MB.sitos en el EIC y MB.DepDepóósitos unisitos unióón dermoepidn dermoepidéérmica (granular, rmica (granular, lineal).lineal).Perivascular.Perivascular.

Immunofluorescence in dermatologyDiya F. Mutasim, MD, and Brian B. Adams, MD Cincinnati, Ohio

J Am Acad Dermatol 2001;45:803-22.)

SPLIT SKIN- SEPARACISPLIT SKIN- SEPARACIÓÓN EN LA UNIN EN LA UNIÓÓN N DERMO-EPIDDERMO-EPIDÉÉRMICA CON SOLUCIRMICA CON SOLUCIÓÓN SALINA.N SALINA.

EpidermisEpidermis

DermisDermis

EBAEBA

INMUNOFLUORESCENCIA EN INMUNOFLUORESCENCIA EN ENFERMEDADES AMPOLLARESENFERMEDADES AMPOLLARES

INMUNOFLUORESCENCIA EN ENFERMEDADES INMUNOFLUORESCENCIA EN ENFERMEDADES AMPOLLARESAMPOLLARES

Enfermedades ampollares autoinmunesEnfermedades ampollares autoinmunes

Clasificación:Clasificación:

Ampollas intraepidérmicas Pénfigo Ampollas intraepidérmicas Pénfigo

Penfigoide ampollosoPenfigoide ampolloso Penfigoide cicatricialPenfigoide cicatricial Dermatosis IgA linealDermatosis IgA linealAmpollas subepidérmicasAmpollas subepidérmicas Penfigoide gestacional Penfigoide gestacional Epidermolisis ampollosaEpidermolisis ampollosa Erupción ampollosa asociada al lupusErupción ampollosa asociada al lupus Dermatitis herpetiforme (no autoinmune)Dermatitis herpetiforme (no autoinmune)

1.-Bolognia, J; Jorizzo J. Dermatología España 2004. 2.-Zeina, B. Pemphigus vulgaris. eMedicine. April 2003. 3.-Schwartz, R. Pemphigus foliaceus. eMedicine. Feb 2005. 4.-Chan, L. Pemphigus IgA. eMedicine. Feb 2005. 6.-Scott, D. Pemphigus drug-induced. eMedicine .march 2005

PÉNFIGO VULGAR

HP: acantolHP: acantolíísis suprabasalsis suprabasal

Ampolla fláccidaAmpolla fláccida

IFD:IgG y C3 intraepidermicoIFD:IgG y C3 intraepidermicoIFI:IgG antidesmosomasIFI:IgG antidesmosomasPatron:¨panal de abejas¨Patron:¨panal de abejas¨

Ag:Desmogleina 3Ag:Desmogleina 3

IFD: 100%IFD: 100%IFI: 75%IFI: 75%

PPÉÉNFIGO FOLINFIGO FOLIÁÁCEOCEO

Ampolla fláccida,erosiones y Ampolla fláccida,erosiones y costrascostras

Acantolisis subcórneaAcantolisis subcórnea

IFD:IgG y C3 intraepidérmicoIFD:IgG y C3 intraepidérmicoIFI:IgG antidesmosomasIFI:IgG antidesmosomasPatrón:¨panal de abejas¨Patrón:¨panal de abejas¨

Ag: Desmogleina 1Ag: Desmogleina 1

IFD: 100%IFD: 100%IFI: 75%IFI: 75%

PPÉÉNFIGO ERITEMATOSONFIGO ERITEMATOSO (SENEAR-USHER) (SENEAR-USHER)

.

Semejante al Pénfigo foliáceo.Semejante al Pénfigo foliáceo. Localizado en áreas seborréicas.Localizado en áreas seborréicas. ANA positivo y Depósito IgG en ZMB.ANA positivo y Depósito IgG en ZMB. Fotosensibilidad.Fotosensibilidad.

PÉNFIGO PARANEOPLÁSICOPÉNFIGO PARANEOPLÁSICO

Existen Ac contra gran Existen Ac contra gran cantidad de Ags: cantidad de Ags: Dg1,Dg3,Dc1,Dc2,230kD,DDg1,Dg3,Dc1,Dc2,230kD,DP,PP. P,PP. Los Acs en el PPN Los Acs en el PPN reaccionan contra distintos reaccionan contra distintos tejidos: 25% falsos tejidos: 25% falsos negativos.negativos.Sensibilidad: 75%.Sensibilidad: 75%.Especificidad: 83%.Especificidad: 83%.

IFIIFI ESÓFAGO DE ESÓFAGO DE MONOMONO

VEJIGA DE VEJIGA DE RATARATA

PPNPPN positivopositivo positivopositivo

PVPV positivopositivo negativonegativo

PÉNFIGO PARANEOPLÁSICO IFD: en panal de abejas mas lineal en ZMBIFD: en panal de abejas mas lineal en ZMBIFI: panal de abejas mas lineal en ZMBIFI: panal de abejas mas lineal en ZMB

IFD IgGIFD IgG IFD C3IFD C3

IFD: IgG y C3 en ZMB(90%) IFD: IgG y C3 en ZMB(90%) IFI: IgG antihemidesmosomas(70%)IFI: IgG antihemidesmosomas(70%)PatrPatróón: Linealn: Lineal

PENFIGOIDE AMPOLLARPENFIGOIDE AMPOLLAR

BP230 (BPAg1), BP180 (BPAg2, colBP230 (BPAg1), BP180 (BPAg2, coláágeno tipo XVIIgeno tipo XVII

Ampolla tensaAmpolla tensa

HP ampolla subepidérmicaHP ampolla subepidérmica

PENFIGOIDE CICATRICIALPENFIGOIDE CICATRICIAL —BP180, BP230, laminina 5, colágeno tipo VII

Erosiones, ampollas, cicatrización Erosiones, ampollas, cicatrización residual en mucosasresidual en mucosas

IFD:IgG o C3 en ZMBIFD:IgG o C3 en ZMBIFI:Ac circulantes bajosIFI:Ac circulantes bajos

Patrón:LinealPatrón:Lineal

EPIDERMOLISIS AMPOLLAR ADQUIRIDAEPIDERMOLISIS AMPOLLAR ADQUIRIDA ColColáágeno tipo VIIgeno tipo VII

IFD: IgG en IFD: IgG en BMZBMZ

IFI: IgG CVII IFI: IgG CVII Patrón linealPatrón lineal

Técnica Split: tinción de la base de Técnica Split: tinción de la base de la ampolla la ampolla

Ampollas tensas,erosiones,cicatrices Ampollas tensas,erosiones,cicatrices Y quistes de milliumY quistes de millium

IFD IgA BMZIFD IgA BMZIFI pos o NegIFI pos o NegPatrón linealPatrón lineal

DERMATOSIS CON IGA LINEAL DERMATOSIS CON IGA LINEAL Proteínas 97kDa, 120 kDa IF, banda lineal en la UDE con anti-IgA,

Típica imagen en rosetasTípica imagen en rosetas

DERMATITIS HERPETIFORMEDERMATITIS HERPETIFORMEGliadina (gluten) y otros antGliadina (gluten) y otros antíígenosgenos

IFD: IgA granular papilaIFD: IgA granular papilaIFI:negativaIFI:negativa

Vesicoampollas agrupadas en Vesicoampollas agrupadas en ramillateramillate

INMUNOFLUORESCENCIA EN INMUNOFLUORESCENCIA EN ENFERMEDADES DEL TEJIDO ENFERMEDADES DEL TEJIDO

CONECTIVOCONECTIVO

INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA PARA INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA PARA DETECTAR ANTICUERPOS ANTINUCLEARES (AAN)DETECTAR ANTICUERPOS ANTINUCLEARES (AAN)

1.1. Tejido normal (cortes o impresiones): hígado de ratón, Tejido normal (cortes o impresiones): hígado de ratón, bazo, etc.bazo, etc.

2. Suero del paciente2. Suero del paciente

3. Anticuerpo contra inmunoglobulinas humanas IgA, IgM, 3. Anticuerpo contra inmunoglobulinas humanas IgA, IgM, IgG, C3, C4, conjugado con fluoresceína.IgG, C3, C4, conjugado con fluoresceína.

PATRONES PRINCIPALES, AANPATRONES PRINCIPALES, AAN

1. LES activo:1. LES activo: periférico, fuerteperiférico, fuerte LES en remisión:LES en remisión: homogéneo, moderado a fuerte homogéneo, moderado a fuerte

2.2. LECC, LECSA:LECC, LECSA: homogéneo, negativo a moderadohomogéneo, negativo a moderado

1.1. Esclerodermia, ESP, CREST:Esclerodermia, ESP, CREST: moteado, negativo a fuertemoteado, negativo a fuerte

4.4. EMTC, AR:EMTC, AR: homogéneo, negativo a moderadohomogéneo, negativo a moderado

PATRONES DE ANAPATRONES DE ANA

periféricoperiférico

centrómerocentrómero

homogéneohomogéneo moteadomoteado

nucleolarnucleolar

ANTI DNAANTI DNA

Crithidiae Luciliae. Kinetoplasto rico en DNA.Crithidiae Luciliae. Kinetoplasto rico en DNA.LES: valor diagnóstico-actividad enfermedad LES: valor diagnóstico-actividad enfermedad

LUPUS ERITEMATOSO SISTLUPUS ERITEMATOSO SISTÉÉMICOMICOIFD positiva en ZMB(granular,lineal)IFD positiva en ZMB(granular,lineal)Piel lesionada 90% Piel sana fotoexpuesta 80%Piel lesionada 90% Piel sana fotoexpuesta 80%Piel sana no fotoexpuesta 50%Piel sana no fotoexpuesta 50%Anti DNA 50-70% positivo(renal)Anti DNA 50-70% positivo(renal)AntiSm 15 25% positivo (renal y SNC)AntiSm 15 25% positivo (renal y SNC)

LECCLECCIFD: banda granular en la ZMB (banda lúpica)IFD: banda granular en la ZMB (banda lúpica)Piel lesionada : positiva 90%Piel lesionada : positiva 90%piel sana : Negativa piel sana : Negativa

IFD en ZMB(granular,lineal)IFD en ZMB(granular,lineal)Piel lesionada 50%Piel lesionada 50%Piel sana 30%Piel sana 30%Anti Ro 70%Anti Ro 70%Anti LA 30%Anti LA 30%

LUPUS ERITEMATOSO CUTÁNEO SUBAGUDOLUPUS ERITEMATOSO CUTÁNEO SUBAGUDO

LUPUS ERITEMATOSOLUPUS ERITEMATOSO

IFD C3 lineal BMZIFD C3 lineal BMZ

IFD C3 granular BMZIFD C3 granular BMZ IFD IgG BMZIFD IgG BMZ

DERMATOMIOSITISDERMATOMIOSITIS

Serología:Serología:Anti Jo-1: 25%Anti Jo-1: 25%

Anti Mi: 8%Anti Mi: 8%

ESCLERODERMIAESCLERODERMIA

Serología: Serología: Anti SCL 70 15%Anti SCL 70 15%

Anti centromero 40%Anti centromero 40%

HP: Engrosamiento del colágenoHP: Engrosamiento del colágeno

ENFERMEDAD MIXTA DEL ENFERMEDAD MIXTA DEL TEJIDO CONECTIVOTEJIDO CONECTIVO

IFD IgG dentro del núcleo del IFD IgG dentro del núcleo del queratinocitoqueratinocito

Serología:Serología:Anti RNP positivo 100%Anti RNP positivo 100%

VASCULITISVASCULITISIFI: neutrófilos fijados en alcohol que al microscopio IFI: neutrófilos fijados en alcohol que al microscopio producen dos patrones de tinción: ANCA citoplasmático producen dos patrones de tinción: ANCA citoplasmático (cANCA) y ANCA perinuclear (pANCA). (cANCA) y ANCA perinuclear (pANCA). ANCA positivo: útil en Dx inicial vasculitis, limitada , ANCA positivo: útil en Dx inicial vasculitis, limitada , siempre muy influenciada por el cuadro clínico del siempre muy influenciada por el cuadro clínico del paciente.paciente.

Avances en el diagnostico de las vasculitis sistémicas.Avances en el diagnostico de las vasculitis sistémicas.Rev. méd. Chile v.127 n.10 Oct. 1999Rev. méd. Chile v.127 n.10 Oct. 1999

InmunofluorescenciaInmunofluorescencia

Vasculitis leucocitoclasticaVasculitis leucocitoclasticaIFD C3 vasosIFD C3 vasos

PPÚÚRPURA DE HENOCH-SCHRPURA DE HENOCH-SCHÖÖNLEINNLEINIF- IgA en los vasos de la dermisIF- IgA en los vasos de la dermis

LIQUEN PLANOLIQUEN PLANOAbundantes cuerpos citoides (Civatte) fluorescentes en la Abundantes cuerpos citoides (Civatte) fluorescentes en la zona de la membranazona de la membrana basal, frecuentemente en racimosbasal, frecuentemente en racimos..

IFD IgM dentro del cuerpo citoide en IFD IgM dentro del cuerpo citoide en dermis papilardermis papilar

J Am Acad Dermatol 2001;45:803-22.)

Immunofluorescence in dermatologyDiya F. Mutasim, MD, and Brian B. Adams, MD Cincinnati, Ohio

APLICACIONES DE LAS APLICACIONES DE LAS TÉCNICAS DE IF EN LA TÉCNICAS DE IF EN LA

ACTUALIDADACTUALIDAD

LA IFD ES DE VALOR EN ALOPECIA LA IFD ES DE VALOR EN ALOPECIA CICATRICIAL, ESPECIALMENTE EN PACIENTES CICATRICIAL, ESPECIALMENTE EN PACIENTES

CON LUPUS ERITEMATOSOCON LUPUS ERITEMATOSO.Value of direct immunofluorescence for differential diagnosis of cicatricial alopecia.Value of direct immunofluorescence for differential diagnosis of cicatricial alopecia.

Dermatology. 2005;211(2):98-102.Dermatology. 2005;211(2):98-102.

Los hallazgos de IF en el granuloma facial han sido rara vez descriptos. Los hallazgos de IF en el granuloma facial han sido rara vez descriptos. Los reportes muestran Los reportes muestran depositos depositos ggranulares de IgA, IgG, IgM y C3 en ranulares de IgA, IgG, IgM y C3 en ZMB, pared de vasos sanguineos y tejido conectivo, IgG en ZMB e IgG en ZMB, pared de vasos sanguineos y tejido conectivo, IgG en ZMB e IgG en vasos sanguineos.vasos sanguineos.

Immunofluorescence findings in granuloma faciale: report of two Immunofluorescence findings in granuloma faciale: report of two cases.cases.

J Cutan Pathol. 2003 May;30(5):314-7J Cutan Pathol. 2003 May;30(5):314-7..

Inmunofluorescencia

HIBRIDACIÓN IN SITU CON HIBRIDACIÓN IN SITU CON FLUORESCEÍNA (FISH)FLUORESCEÍNA (FISH)

FISH (hibridación fluorescente in situ) utiliza FISH (hibridación fluorescente in situ) utiliza moléculas fluorescentes para localizar genes o moléculas fluorescentes para localizar genes o fragmentos de DNA.fragmentos de DNA.

Técnica especialmente útil para mapear genes Técnica especialmente útil para mapear genes

o localizar anormalidades cromosómicaso localizar anormalidades cromosómicas..

FISH – APLICACIÓN EN FISH – APLICACIÓN EN DERMATOLOGÍADERMATOLOGÍA

Control de los márgenes de resección de neoplasias: Control de los márgenes de resección de neoplasias: valorando el número de copias de ciertos cromosomas valorando el número de copias de ciertos cromosomas en células epiteliales descamadas mediante cepillado, en células epiteliales descamadas mediante cepillado, pueden detectarse células tumorales en márgenes pueden detectarse células tumorales en márgenes aparentemente libres de tumor en el carcinoma aparentemente libres de tumor en el carcinoma epidermoide de cavidad oral.epidermoide de cavidad oral.

Detección de la presencia de trisomía 7 en algunos Detección de la presencia de trisomía 7 en algunos estudios de queratoacantomas, alteración también estudios de queratoacantomas, alteración también descrita en el carcinoma epidermoide de piel.descrita en el carcinoma epidermoide de piel.

Detección de inserción cromosómica de genomas Detección de inserción cromosómica de genomas virales, especialmente HPV.virales, especialmente HPV.

Diagnóstico molecular del virus del papiloma humano por hibridación in situ por fluorescencia (FISH).Diagnóstico molecular del virus del papiloma humano por hibridación in situ por fluorescencia (FISH).Dra Perez Robalino y col., - Instituto del Cancer – Ecuador.Dra Perez Robalino y col., - Instituto del Cancer – Ecuador.

Junio 5, del 2006Junio 5, del 2006

Bx cervical, FISH positiva para HPV Bx cervical, FISH positiva para HPV

16-1816-18

DiagnósticoDiagnóstico molecular del virus del papiloma humano por hibridación in situ por fluorescencia (FISH).molecular del virus del papiloma humano por hibridación in situ por fluorescencia (FISH).

Dra Perez Robalino y col., - Instituto del Cancer – Ecuador.Dra Perez Robalino y col., - Instituto del Cancer – Ecuador.Junio 5, del 2006Junio 5, del 2006

Bx cervical, FISH negativo para Bx cervical, FISH negativo para HPV 16-18 HPV 16-18

Inmunofluorescencia

CONCLUSIONESCONCLUSIONES

Las técnicas de inmunofluorescencia, a pesar del gran Las técnicas de inmunofluorescencia, a pesar del gran avance que han experimentado en los últimos años, avance que han experimentado en los últimos años, adolecen de problemas de variabilidad, sensibilidad y/o adolecen de problemas de variabilidad, sensibilidad y/o especificidad, en mayor o menor grado, dependiendo del especificidad, en mayor o menor grado, dependiendo del anticuerpo utilizado, de las características de los tejidos, anticuerpo utilizado, de las características de los tejidos, del procedimiento y de la pericia del personal encargado del procedimiento y de la pericia del personal encargado de realizarlas. de realizarlas.

La interpretación de los resultados de la IF debe ser La interpretación de los resultados de la IF debe ser siempre correlacionada con la clínica, la histopatología y siempre correlacionada con la clínica, la histopatología y otros hallazgos de laboratorio para la confirmación otros hallazgos de laboratorio para la confirmación diagnostica en cada paciente en particular.diagnostica en cada paciente en particular.