PARTE EXPERIMENTAL

MATERIALES Y EQUIPOS

Espectrofotmetro Pera de bromo Soporte metlico Matraces Tubos de prueba Pipetas 1mL, 5mL, 10mL Probeta graduada

PROCEDIMIENTO

Se consideran dos etapas en la determinacin de plomo en sangre:

a) Destruccin de la materia orgnica ( esta etapa fue realizado previamente antes de la prctica)

b) Cuantificacin del plomo por el mtodo espectrofotomtrico de Bacdady y Buckey.

CUANTIFICACIN DEL PLOMO POR EL MTODO ESPECTROFOTOMTRICO DE BACDADY Y BUCKEY

Sensibilidad: 0.04g/dL de plomo en solucin neutra y 1g/dL de plomo en solucin bsica.

Fundamento: Este mtodo se basa en la reaccin del Pb (II) con la ditizona (difeniltiocarbazona) para formar un complejo coloreado llamado ditizonato de plomo o plmbico, dando diferentes tonalidades, desde verde hasta rojo, el cual se extrae con cloroformo, en un medio cido (pH 3-4), cuya intensidad se puede cuantificar colorimtricamente por espectrofotometra a una longitud de onda de 520 nm.

MECANSIMO DE REACCION

REACCION (ECUACION) QUIMICA BALANCEADA

TCNICA OPERATORIA:

Primero.- Destruccin de la materia orgnica

Segundo.-

10 mL de muestra problema 15 mL de citrato de amonio 40%, III gotas de rojo de fenol

El citrato de amonio se adiciona para evita que el metal precipite con carbonatos o fosfatos

Tercero

Solucin anterior Agregar gota a gota el NH4OH

Hasta coloracin rosado tenue

El Ph alcalino dado por el NH4OH extrae todos los metales de la muestra

Cuarto

Solucin anterior Agregar 5 mL de KCN al 10% agitar

El cianuro de potasio reacciona con iones metlicos para dar complejos cianuradosReaccin qumica:KCN + Pb= [PbCN] + K+.4Pb + 4KCN (slido) PbCN4+ 4K+.

El KCN facilita la formacin del complejo de metal con el quelante

Quinto Despus de agitar: Agregar 1 ml de Hidroxilamina Clorhidrato 20% 5mL de ditizona extractora (16mg DTZ/100ml CHCL3 ) (quelante) Agitar por 3 minutos

Fase acuosa

Metales ditizonados Fase clorofrmica

La Hidroxilamina Clorhidrato facilita formacin del complejo de plomo con el quelante

Separar la fase acuosa y la clorofrmica

Despus de separar: Agregar 50ml de solucion Buffer pH 3.4 Agitar por 3 minutos

Plomo con ditizona en buffer

Coloracin verde azulado

El buffer separa el plomo de los dems metales

Separar la fase acuosa y la clorofrmica

Fase acuosa

Fase clorofrmica

Despus de separar: Agregar 15 ml de Ditizona Estndar (8 mg DTZ/ 100ml CHCL3 ) 7 ml de amonio cianurado Agitar por 3 minutos

Separar la fase acuosa y la clorofrmica leer al espectrofotmetro a 520nm